芽孢显微镜检查标准操作规程 SOP09-501-00

显微镜操作规程引言概述：显微镜是一种重要的实验工具，广泛应用于生物学、医学、材料科学等领域。

正确的操作显微镜对于获得准确的观察结果至关重要。

本文将介绍显微镜的操作规程，以匡助读者正确使用显微镜并获得高质量的观察结果。

一、准备工作1.1 清洁显微镜- 使用柔软的棉纱或者镜头纸轻轻擦拭显微镜的镜头和目镜，确保其表面干净无尘。

- 使用专用的清洁液或者酒精擦拭显微镜的外壳和底座，保持整个显微镜的清洁。

1.2 调整光源- 打开显微镜的光源，调节亮度合适的光线。

- 使用准直器或者准直镜，将光线调整为垂直于镜片的状态，确保光线均匀且稳定。

1.3 准备标本- 准备待观察的标本，并将其放置在显微镜的载物台上。

- 调整载物台的高度，使标本与目镜的焦平面相对应。

二、调整显微镜2.1 调整目镜- 调整目镜的焦距，使其与使用者的视力相匹配。

- 调整目镜的瞳孔间距，使双眼看到的图象合并成一个清晰的视野。

2.2 调整物镜- 选择合适的物镜倍数，根据需要进行切换。

- 使用物镜转盘或者旋转物镜头，将物镜对准标本，调整焦距，使标本清晰可见。

2.3 调整聚焦- 使用粗调节旋钮，将载物台挪移到与目镜焦平面相距较远的位置。

- 使用细调节旋钮，逐渐将载物台挪移到与目镜焦平面相距较近的位置，直到标本清晰可见。

三、观察标本3.1 调整照明- 根据标本的特性，调整光源的亮度和角度，以获得最佳的照明效果。

- 注意避免过度照明或者不足照明，以免影响观察结果。

3.2 调整对照度和聚焦- 使用调节孔径的光阑，调整对照度，使标本的细节更加清晰。

- 使用细调节旋钮，微调聚焦，以观察标本不同层次的细节结构。

3.3 记录观察结果- 使用合适的方法记录观察到的结果，如拍照、绘图或者书写观察报告。

- 注意记录标本的名称、倍数、观察条件等关键信息，以便日后参考和分析。

四、结束操作4.1 关闭光源- 在观察结束后，关闭显微镜的光源，以节省能源并延长灯泡的使用寿命。

4.2 清洁显微镜- 使用棉纱或者镜头纸擦拭显微镜的镜头和目镜，确保其表面干净无尘。

显微鉴别标准操作规程中药材、中药成品1 检验依据：《中华人民共和国药典》2010年版（一部）2 定义：通常是借助显微镜，应用植物细胞、组织学和矿物晶体光学等知识鉴别中药材或中成药的一种方法，3 检验操作方法(临时制片法)3.1 仪器和用具3.1.1 仪器生物光学显微镜、显微描绘器、滑走切片机或徒手圆筒生物切片器、镜台测微尺、离心机。

3.1.2 用具放大镜、刀片、解剖刀、镊子（包括粗镊及眼科弯镊与直镊）、剪（眼科剪与手术剪）、解剖针。

载玻片、盖玻片吸湿器（即玻璃干燥器改装蒸馏水加微量苯酚，潮气润湿药材样品用）培养皿或小烧杯（放切片用，切片后的处理均可在其中进行）、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒（粗与细）、乳钵、量筒毛笔（从刀上刷取切片用）铅笔（HB、4H、6H绘图用）带盖搪瓷盘（装切片标本用）纱布、吸水纸（滤纸）、火柴等。

3.2 试液3.2.1 水合氯醛试液：取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。

此液为透化剂，可使干缩的细胞壁膨胀而透明，并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质及挥发油等。

3.2.2 甘油醋酸试液（斯氏液）：取甘油、冰醋酸与水各等份，混合即得。

此液专用于观察淀粉形态，可使淀粉不膨胀变形，便于测量其大小。

3.2.3 甘油-乙醇溶液：取甘油1份，50%乙醇1份，混合即得。

此液为封藏液，用于保存植物材料及临时切片，有软化组织的作用。

3.2.4 苏丹Ⅲ试液取苏丹Ⅲ0.01g，加90%乙醇5ml溶解后，加甘油5ml，摇匀即得。

本液应置棕色玻璃瓶内保存，在2个月内应用。

此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。

3.2.5 钌红试液：取10%醋酸钠溶液1～2ml，加钌红适量使呈酒红色即得。

本液应临用新制。

此液可使粘液染成红色。

3.2.6 间苯三酚试液：取间苯三酚1g，加90%乙醇100ml使溶解，滤过即得。

应置棕色玻璃瓶内，在暗处保存。

生物显微镜操作规程1 目的规范生物显微镜的操作使用、保养和维护，以延长仪器设备寿命，使检验结果准确可靠。

2 适用范围本操作规程适用于本公司的生物显微镜。

3 职责3.1使用人员：应按使用说明书或操作规程正确使用，并作好记录。

3.2保管人员：进行日常管理与维护，监督仪器操作是否符合规程。

3.3计量检定员：负责生物显微镜的周期检定计划并实施。

3.4科室负责人：负责该仪器综合管理.4 仪器设备性能技术指标电源：220V/50HZ。

配有4×10×100×物镜，10×16×目镜。

5安全操作注意事项及特别提示5.1应保护好物镜，油镜用后要用二甲苯擦拭镜头，以保证清洁。

5.2本仪器必须设专人管理，实行专管共用，使用人员必须经专门培训。

5.2使用粗调时应注意镜头与载玻片的距离，以免压坏载玻片和镜头，使用微调时应轻而缓慢。

5.3如发生故障应立即报告，送专业单位检修，不得自行修理。

6 操作规程6.1设备运行步骤。

6.1.1将电源插头插入外接电源插座（插入前应检查外接电源电压是否相符）。

6.1.2先将亮度调节柄调节至最小位置，开启电源开关，滑动亮度调节柄至适合位置。

6.1.3转动物镜转化器，将10X物镜置入光路。

6.1.4转动聚光镜升降手轮，使聚光镜上升至定位位置6.1.5将标本置于载物台上，用片夹固定，并借助载物台纵横手轮，将观察物进入聚光镜的照明区域6.1.6拔动光栏拔杆，将孔径光栏开至中间位置。

6.1.7用眼观察，调焦使物像清晰6.1.8瞳距及视度调节左眼观察，并转动双目镜筒上的视度调节圈，使之成像清晰使用物镜时，应在物镜与标本、载玻片与聚光镜前片之间充满显微镜用油。

6.2．使用后的处理6.2.1关闭电源，擦拭镜头，降低载物台，盖上防尘罩6.2.2做好室内清洁，填写记录表格7支持文件：普通生物显微镜的使用说明书。

8记录表格8.1 《仪器设备使用记录》（DXC-64）8.2 《仪器设备维修记录》（DXC-67）8.3 《仪器设备日常点检表》（DXC-68）仪器设备领用申请仪器设备故障记录表仪器设备日常点检表编号：日期：年。

一、目的：建立XSD-1型生物显微镜使用与维护保养标准操作规程，规操作行为,确保仪器使用性能。

二、适用围：适用于XSD-1型生物显微镜的操作。

三、责任者：质检员负责实施，质检科负责人负责监督检查。

四、容：1、注意事项：1.1使用显微镜应避免粗暴的操作或碰击。

1.2不在直射，灰尘多和有振动的地方使用。

1.3拿镜时必须右手握紧镜臂。

左手托住镜座，不可一手提取。

1.4显微镜的机械部分，若发现转动不灵或滑丝时，不能强行扭动，必须查其原因，消除故障。

2、使用：2.1通电源，打开开关。

2.2光源调节2.2.1调节聚光器光圈手柄。

2.2.2调节亮度调节器。

2.3加滤光片。

2.4转物镜转换器，使低倍镜与镜筒成一直线，调节聚光器光圈手柄，使镜视野明暗一致。

2.5观片时，临时制片必须加盖玻片，盖片周围过多封藏液须用小纸吸拭干净。

将欲观察的制片从前方置入载物台上，使欲观察的部分置于透光孔的中心。

2.6从侧面观察物镜与载玻片的距离，慢慢转动大调节轮，使镜筒与载玻片相距5mm以上为止，切勿使其接触而损坏镜头及载片。

2.7自目镜观看（单目显微镜用左眼自目镜观看），并慢慢转动大调节器，直到模糊物象为止。

若观看部分不在视野中心，则慢慢移动载片，使之适中。

2.8看到物像后，再转动小调节器，直到看到最清楚的物像为止。

2.9高倍镜使用法：观片时，应先用低倍观察，看清物像后再换高倍镜观察。

2.9.1在低倍镜找到物像后，移至视野中央。

2.9.2从侧面注视，小心转过高倍物镜。

2.9.3调节小调节器直到看清物像为止，不能盲目使用大调节器，以防碰坏玻片，损坏物镜镜头。

2.9.4若视野转暗，可调节聚光器光圈手柄以增加亮度。

2.10使用完毕，取下观察物品，把物镜转离透光孔，将载物台降至最低，调节亮度至最暗，关闭开关，切断电源。

3、保存注意事项：3.1如需清洁显微镜，则光学部分只能用专用擦镜纸擦拭，机械部分可用绸布擦拭。

3.2切勿将载玻片上封存液体污染镜头。

微生物显微镜（Leica DM500型）1、目的规范操作程序，正确使用仪器，保证检测工作顺利进行，更好地维护保养仪器。

2、适用范围适用于微生物显微镜（Leica DM500型）的使用操作。

3、程序3.1接通电源，按下位于镜座右手侧的开关，调节位于镜座左手侧的光调节钮以调节进光强度，直到视野内的光线均匀明亮为止。

3.2放置玻片标本：取一玻片标本固定于载物台上，使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。

3.3调节焦距：先选择物镜的低倍镜头，左手按逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿上升过多，以免造成镜头或标本玻片损坏。

然后，双眼同时睁开在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗准焦螺旋，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。

一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。

3.4转动转换器，调换上高倍镜头，双眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细准焦螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象（切勿用粗调节器）。

3.5使用油镜：转动转换器，调换上油镜。

在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油，用粗准焦螺旋将载物台缓缓地上升，使油镜头浸入香柏油中，使镜头几乎与标本接触，用粗准焦螺旋将载物台徐徐下降，当出现物像一闪后改用细准焦螺旋调至最清晰为止。

3.6观察完毕后，下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦镜纸蘸少许乙醚酒精混合液（乙醚2份，纯酒精3份）或二甲苯，擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭2-3下即可。

3.7取下玻片标本，将各部分还原，先调节左手侧光调节钮将强度调至最暗，再关掉右手侧开关，拔掉电源，盖上镜罩。

最后填写仪器使用记录表。

注意事项：1.持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，以免零件脱落或碰撞到其它地方。

镜检操作规程材料用具:显微镜，擦镜纸，纱布革兰氏染液香柏油,自来水,95%酒精;载玻片,插镜纸,接种环,镊子,酒精灯;金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,未知菌12小时的液体培养液大肠杆菌和酵母菌平板1.涂片;左手持菌液试管,右手持接种环在火焰中灼烧,冷却后从试管中去菌液一滴,在洁净载玻片上做一涂膜;从固体斜面或平板上取菌时,用无菌接种环取少量菌体,涂抹均匀于玻片上预先滴有的一滴自来水中;2.干燥在空气中自然干燥或在火焰快速通过干燥(与热固定同步进行).3.热固定用镊子夹住涂片一端, 在火焰上连续通过几次;以载玻片在手背上试感觉不烫为宜.4.染色在固定的标本上加结晶紫染液1-2滴,染色1min,轻轻滴加水洗; 吸干, 加半滴水, 盖上盖玻片, 滴上半滴镜油油镜检。

(到此实际上即为细菌普通染色)5.注意标本中细菌的形态,大小,排列显微镜操作规程1、安放:右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立。

桌面要清洁、平稳，要选择临窗或光线充足的地方。

单筒的一般放在左侧，距离桌边3～4厘米处。

2、清洁：检查显微镜是否有毛病，是否清洁，镜身机械部分可用干净软布擦拭。

透镜要用擦镜纸擦拭，如有胶或粘污，可用少量二甲苯清洁之。

3、对光：镜筒升至距载物台1～2厘米处，低倍镜对准通光孔。

调节光圈和反光镜，光线强时用平面镜，光线弱时用凹面镜，反光镜要用双手转动。

若使用的为带有光源的显微镜，可省去次步骤，但需要调节光亮度的旋钮。

4、安装标本：将玻片放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上。

用弹簧夹将玻片固定，转动平台移动器的旋钮，使要观察的材料对准通光孔中央。

5、调焦：调焦时，先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒，并从侧面仔细观察，直到物镜贴近玻片标本，然后左眼自目镜观察，左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本物像时停止，再用细调焦旋钮回调清晰。

操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时，应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值。

检验科显微镜使用标准操作规程SOP文件
检验科显微镜使用操作规程 SOP文件一、使用步骤
1．观察时，应先用低倍镜开始，把镜筒粗调一定高度。

2．将标本安放在载物台上。

3．再将低倍镜下端降至快接触到标本上。

4．眼睛放在目镜上方的眼点处，先用粗调慢慢升起镜筒。

5．换高倍镜时，不须重新调焦，即可看到物象，观察时随时调节微调。

6．用油镜时，需滴高级镜油一滴在标本上，将镜筒粗调至油滴上，再调微调可看到物象。

7．使用后应将擦拭干净，把两个物镜偏到两旁，最后放入柜中。

二、注意事项
1．取放方法要正确，防止目镜，反光镜下滑损坏。

2．注意镜头的保护。

镜头脏了只能蘸一点二甲苯顺着一个方向擦，防止镜头开胶镜片脱落。

3．粗、细螺旋的使用要正确。

防止镜筒下降时砸坏物镜和玻片。

4．转换器使用时，不要手指扳着物镜，防止镜头松动，改变焦距。

影响观察的清晰度。

SOP_11-6 显微镜检项目标准操作程序一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。

二、适用范围：显微镜常见有形成份、微生物、细胞等的检测三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤常见血液学细胞粒系空泡粒细胞中毒颗粒核右移杜尔(Dohle)氏体或RNA包涵体嗜碱性粒细胞Dohle氏体：是一种出现于成熟粒细胞浆中的淡蓝色小体，常分布在细胞边缘、圆形或不规则，有时不止一个。

染色较模糊，稍有不注意或涂片染色不佳即不易发现。

目前认为它不过是红色胞浆中残留下来的一小块淡蓝色胞浆（含RNA），经常与严重感染时出现的其它粒细胞“中毒性”改变并存。

但偶尔可在某些孕妇或用细胞毒剂治疗的患者血片中找到。

嗜中性杆状粒细胞红斑狼疮细胞嗜酸性粒细胞嗜中性粒细胞红系（异形红细胞）刺毛红细胞Cabot环亦称锯凿细胞。

包括刺细胞、钻细胞及距细胞。

往往见于微血管病性溶血性贫血、丙酮酸激酶缺乏症、PNH，距细胞多见于肝脏疾病，钻细胞也见于尿毒症。

在红细胞内染成紫红色的纤细的大环形或8字形物质，常出现于嗜多色性、点彩和含H-J小体的红细胞内，其确切来源尚不清楚，有人认为是人工形成的变性蛋白，也有人认为是残留的纺锤丝或融合的微管。

一般很少见到，偶见于铅中毒或恶性贫血患者血片中，但多数人认为无显著临床意义。

H-J小体靶形红细胞球形红细胞是核的残留物，表现为在成熟或晚幼红细胞胞浆内有一至数个染成深紫红色的小圆点，大小不一。

多见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、脾切除后以及缺铁性贫血等的骨髓及血片红细胞中央色深，外周以苍白圈，在近红细胞边缘处又较深。

形同射击之靶，在正常情况下靶形细胞极少见。

但在黄疸、肝病、脾切除后，缺铁性贫血，尤其是在地中海贫血的血涂片上颇为常见此种红细胞直径缩短，厚度增加，细胞中心区的血红蛋白比周围多，呈小球形状。

常见于遗传形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、异常血红蛋白病（如Hb-S等）Bite Cell 红细胞双淡染区红细胞固缩红细胞由于细胞内血红蛋白变性或沉淀成块，使细胞呈半圆形，提示可能有红细胞膜的缺乏，如G-6-PD缺乏症红细胞中有一侧清晰区，而血红蛋白浓缩偏向另一侧，临床上常见于婴儿固缩红细胞增多症血红蛋白C 结晶裂红细胞口形红细胞HbC溶解度较低，高浓度时则析出棍棒状或六角形结晶，一般用较厚的血片、缓慢干燥后作罗氏染色，或在玻片上加3g/LNaCl液2滴，再加新鲜血1滴，复以盖片，四周涂凡士林，在37℃放置一小时后用油镜观察,即可见到.指红细胞碎片，包括盔形红细胞等，多见于弥散性血管内尿液、微血管病性溶血性贫血和心源性溶血性贫血等红细胞破碎综合症；其它常见于化学中毒、肾功能衰竭、血栓性血小板减少性紫癜口形红细胞的中心淡染区呈条状，这种细胞正常小于4%，增高见于口细胞增多症，急性酒精性中毒时可大于5%点彩红细胞晚幼红细胞缺铁性红细胞又名嗜碱性点彩红细胞，血片中有时可见在染色正常的或胞浆嗜多色性红细胞内出现大小不等、多少不一的深兰色颗粒者称为点彩红细胞体:直径7-10μ胞核:圆形，稍偏或居中，占细胞的1/2以下，粗糙虽不规则致密团块。

细菌室SOP文件—显微镜检查法显微镜检查是细菌鉴定工作中的一重要手段，有助于细菌的初步鉴别，同时对下一步鉴定工作起着重要的指导作用。

有时通过形态学检查可得到初步诊断，如痰中的抗酸杆菌和泌尿生殖道分泌物中的淋病奈瑟菌等。

显微镜检查有不染色标本检查法和染色标本检查法两种。

1. 不染色标本的检查：不染色标本主要用于检查细菌的动力及运动状况。

1.1压滴法：用接种环取细菌悬液2环，置于清洁载玻片中央，覆上盖玻片，于高倍镜下观察。

制片时菌液要适量，不可有气泡，不可外溢。

1.2 悬滴法：取洁净的凹窝载玻片及盖玻片各1块，将凹孔四周的平面上涂上一层凡士林，取一环菌液置盖玻片中央，将凹窝载玻片的凹面向下，对准于盖玻片的液滴上，然后迅速翻转玻片，用小镊子轻压盖玻片使之与凹孔边缘粘紧。

镜下观察时先低倍后高倍，不可压碎盖玻片。

有动力的细菌可见细菌从一处移到另一处，无动力的细菌呈布朗运动而无位置的改变。

螺旋体由于菌体纤细、透明，需用暗视野显微镜观察其形态、活动。

2. 染色标本检查法：通过对标本的制片及染色，能观察细菌的形态、大小、排列、染色特性以及荚膜、芽胞、异染颗粒等结构，有助于细菌的初步鉴定。

2.1快速革兰染色法2.1.1操作见试剂说明书2.1.2结果：革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。

2.1.3 注意事项：染色关健在于涂片和脱色，涂片不宜过厚，固定不宜过热，脱色不宜过度，菌龄为18～24小时为佳。

2.2抗酸染色法2.2.1操作见试剂说明书2.2.2结果：抗酸杆菌呈红色。

2.2.3注意事项：每一张玻片只能涂一份标本且不能在染色缸中染色，以免造成不同标本间的交互污染从而导致阴阳性结果混淆，脱色时间宁长勿短，至无红色液体流下为止。

2.3阿尔培异染颗粒染色法：2.3.1初染：涂片上滴加第一液染剂（甲苯胺蓝和孔雀绿的乙醇溶液），染3-5分钟，水洗。

2.3.2复染：第二液染剂（碘化钾溶液）染1分钟，水洗。

自然干燥后镜检。

1．8．2芽孢总数测定的标准操作规程1．8．2．1检验目的和范围对无菌操作条件下获得的样品原液，配制的样品稀释液进行芽孢总数的测定。

1．8．2．2操作程序一、样品准备1、在无菌操作条件，将10ML室温状态下的待测样品加入一个灭菌试管中，盖好棉塞。

2、在同直径的试管中加入10ML同样室温状态下的水，并插入温度计。

3、将两支试管同时放入80℃水浴中保温，当水中的温度计达到80℃时开始计时。

计时达10分钟后迅速将样品管取出，编号后记录，置于4-10℃冷水中迅速降温到室温。

无菌操作条件对降温后样品进行稀释，编号后记录于“微生物操作表”中。

原料选择10-2-10-4三个稀释度的样品稀释。

中间产品选择10-1至10-2两个稀释度的样品稀释液。

问题产品检验选取10-1至10-2两个稀释度的样品稀释液。

二、培养基准备1、检查预先经过灭菌处理的营养琼脂培养基是否处于正常。

2、将灭菌培养基用微波炉加热2分钟，或用水浴融化后，在40-45℃水浴中保温待用。

三、接种培养在无菌操作条件下，在一个灭菌平皿内倾入15ML营养琼脂培养基，并暴露至接种过程结束，标记后以做为环境对照品。

2、按照样品编号在灭菌平皿底部作相应标记，并记录在“微生物检验操作表”中。

3、在无菌操作条件下，用1ML的灭菌吸管移取1ML选定的样品稀释液或样品原样至灭菌平皿中。

4、同上对同一样品重复操作，即每个选定的样品稀释度做两个平皿。

5、按以上步骤，以1ML无菌生理盐水作为空白操作对照。

6、在无菌操作条件下，将约15ML的营养琼脂培养基倾入样品平皿中，将平皿置于操作台面上轻轻转动。

使样品和培养基混合均匀。

7、待琼脂凝固后，将平皿翻转，即保持有标记和培养基的一面朝上。

8、将所有平皿（包括空白和环境对照）置于32±1℃的恒温培养箱内，保持培养72小时。

9、在“微生物检验操作表”中记录保温时间。

四、菌落计数1、选择菌落数在30至300之间的平皿为标准，在菌落计数器上计数每个平皿上的菌落总数，记录在“微生物检验操作表中”。