(优质医学)临床常见病原微生物

常见病原微生物的病原学和实验诊断几个相关的基本概念（一）两类传染病1．新发现传染病（EID，emergine disease）：1975年起至今，人或畜间由新种、新型的病原微生物侵入机体后，或现有病原微生物感染范围扩大或变异引发的一类疾病，并造成一定的公共卫生问题。

（全球200种，中国120种人兽共患病）全球共有42种新发的传染病，病毒病22种，细菌性12种，寄生虫7种，朊毒体1种。

2．再出现传染病（REID）:近20来年，过去曾经猖獗一时的传染病，由于采取措施，得到了控制，可又回升的一类传染病。

世界上共20余种，肺结核为其中典型的疾病，此外还有疟疾、血吸虫。

1981年准备宣布肺结核消灭，可5年后发现抬头，改为脊髓灰质炎。

目前有1/3的，现患2000万，死300多万，中国5乙人口感染，600－1000万感染，每年新发100万，死25－30万。

美国CDC装备强；SARS是坏事，也是好事。

（二）微生物与病原微生物及其分类1．微生物特点：小、结构简单、肉眼看不见、低等生物。

分类：a.非细胞型微生物：没有细胞结构及没有独立的酶代谢系统，寄生在宿主的细胞或组织中。

如病毒。

b.原核细胞型微生物：有基本的细胞结构、不完整、有原始核、无核膜无核仁、不能进行有丝分裂、无完整的细胞器、一般有核糖体。

如鼠疫菌、布氏等细菌、立克体、衣原体、支原体、埃立克体等。

c.真核细胞型微生物：完整细胞结构、有核仁、核膜、能进行有丝分裂、有完整的细胞器等。

如真菌等。

2．病原微生物能引起人和脊椎动物病理改变的、引起病理损伤或出现临床表现的微生物。

（人体在出生后4－6小时内是无菌的）种类：a病毒：人类认识的晚，种群多，还在不断出现新的，现出现亚病毒（比病毒还小的物体）。

病毒结构简单。

遗传物质为核算（DNA/RNA）、单一核酸、有伴随蛋白（衣壳）、包膜（为宿主的细胞内物质与病毒相结合所形成的）。

比病毒小的物质：以前叫亚病毒，现认识为三类：卫星病毒（如丁肝病毒：只有核酸与衣壳，包膜与乙肝病毒公用）、类病毒（植物病毒：无包膜）、朊病毒（或称朊毒体：无核酸、只是一个感染蛋白颗粒，29－30KD 澳大利亚以前的一个族fice族库鲁病、柯雅氏病、疯牛病、羊瘙痒病、雪雕脑病、猫脑病等是人和动物的一种正常蛋白质，正常情况下为33－35KD，由正常体细胞产生，立体结构后改变成感染性的，类似二分列方式繁殖）b细菌：是原核细胞型微生物、无完整核膜核仁、无完整细胞器。

病原微生物的分类及检测方法病原微生物是指能够引起疾病的微生物，常见的病原微生物包括有细菌、真菌、病毒、寄生虫等等，这些病原微生物均能够通过接触、饮食、空气等途径进行传播，往往会直接威胁到人们的身体健康。

而在目前，伴随着人们对自身健康的关注的深化，关于病原微生物的检测方法也越来越受到关注。

为能够帮助大家更好地了解病原微生物的分类及其检测方法，本文为大家对其进行讲解，以便为大家提供一定参考。

病原微生物的分类在众多的病原微生物分类中，细菌是最常见的病原微生物之一，是单细胞的微生物，就有简单的细胞结构和基因组。

这类微生物可以通过草丛、土壤、水体和动物等生物体内的皮肤和黏膜进行传播。

而目前，常见的病原细菌有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。

而除却细菌之外，病毒也是病原微生物的一种，它是一种非细胞的微生物，只能在宿主细胞内复制和生长。

而他们的传播渠道也很丰富，可以通过呼吸道、血液、唾液和粪便等渠道进行传播。

病毒的种类非常广泛，包括有流感病毒、艾滋病病毒和乙肝病毒等等。

真菌区别于细菌和病毒，是一种多细胞微生物，他们通常具有许多细胞结构和功能，常见的病原真菌有白色念珠菌、曲霉菌等。

而真菌可以通过皮肤、黏膜、血液和呼吸道等途径进行传播。

最后，寄生虫则是一种生活在宿主身上的微生物，他们可以生存于身体的内外，常见的病原寄生虫包括有疟原虫、丝虫等等。

而寄生虫的传播渠道比较特别，可以通过食物、水、昆虫叮咬等途径完成传播。

病原微生物的检测方法细菌类病原微生物的检测方法针对细菌的检测方法有很多种，而在目前主要的检测方法有两种，分别为细菌培养法、分子生物学方法等等。

其中，前者是指将样本接种在富含营养物质的培养基上，让其在合适的环境下进行生长并扩增，再通过观察培养物以及相关性质进行分析后，再进行病原细菌的检测和鉴定。

这一方法的操作较为简单，具有着较高的可靠性，但是缺点也很大，所需要的培养时间较长，费用也比较高。

而后者则是指通过PCR、实时荧光PCR等方法来对样本的DNA进行提取、PCR 扩增及检测，往往可以快速、敏感地检测出病原细菌。

《医学微生物学》临床常见病原菌的培养与鉴定病原菌的鉴定是将一个未知菌株按其生物学特征，经过与所有已知菌种进行比较后到一个已知菌种的分析过程。

根据感染特性选择合适的培养基，首先要明确被鉴定菌种已获得纯培养。

然后确定革兰氏染色性、形态，再按科、属、种逐步鉴定下来。

应该利用已具备的条件，尽可能地缩小鉴定范围，这是在作实验设计时必须想到的，要用最小数量的试验方法作出鉴定。

基于鉴定菌的特点，选用合适的鉴定体系，力求方法学简单，反应判断明确，价廉的方法。

血清学鉴定由于操作简便、快速、特异性高，给细菌学鉴定提供了快速诊断方法。

对培养困难的病原菌，可考虑应用基因水平的鉴定技术。

最后还要提示，对检测人员应把知识和经验运用到每一鉴定步骤。

【球菌】球菌主要引起化脓性炎症，故又称化脓性球菌。

包括葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌及淋病奈瑟菌等，根据革兰氏染色可将其分为两类，均无鞭毛和芽孢，少数可形成荚膜。

本实验要求了解化脓性球菌的形态特征及染色性、链球菌溶血素“O”试验；葡萄球菌、链球菌及奈瑟球菌的检验程序和主要的鉴定方法；肺炎链球菌Op—tochin敏感试验。

一、葡萄球菌属葡萄球菌属(Staphylococcus)的细菌常堆聚成葡萄串状。

能引起皮肤粘膜、多种组织器官的化脓性炎症，是最常见的化脓性球菌。

有的菌株还可引起食物中毒、烫伤样皮肤综合征、毒性休克综合征等，又是医院内交叉感染的重要传染源。

近年来，耐药性菌株逐年增多。

临床上首先要与其他革兰氏阳性球菌鉴别，然后再作属内种的鉴定及致病性的检测。

[材料]1．菌种：葡萄球菌培养物。

2．培养基：血琼脂平板，普通琼脂平板，甘露醇发酵管，氧化、发酵(OF)管，甲苯胺蓝核酸琼脂。

3．试剂：兔血浆、3％H2O2、致敏胶乳／红细胞制剂。

4．其他：革兰氏染液、玻片、一次性卡片。

[方法]1．形态学观察：取普通琼脂平板上葡萄球菌培养物少许，涂片，革兰氏染色，镜检。

可见到葡萄状排列的革兰氏阳性球菌。

临床医学病原生物学-微生物的特点⏹体积小：以微米(μm)或纳米(nm)来衡量⏹形态简：由单细胞、简单多细胞或非细胞生命物质所构成⏹繁殖快：一般细菌每20分钟繁殖一代⏹易变异⏹分布广⏹种类多：生物分为原核生物界(细菌)原生生物界(藻类, 原生动物)、真菌界(酵母、霉菌)植物界、动物界和病毒界微生物的概念：微生物是一群体积微小,结构简单,肉眼看不见,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍,乃至数万倍后才能观察到的微小生物微生物的分类⏹非细胞型微生物病毒⏹原核细胞型微生物细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌⏹真核细胞型微生物真菌细菌分类：界、部、纲、目、科、属、种、型微生物与人类关系有利⏹参与物质循环⏹在工、农、医药等方面的作用⏹在人体内的意义有害⏹病原微生物——致病微生物学的开山鼻祖——列文虎克微生物学的奠基人——巴斯德医学微生物学的奠基人——科赫免疫学奠基人——琴纳Koch氏确定病原体四要点⏹在每一例患病的病人中，都应找到此种微生物⏹该微生物能被分离，且能在纯培养基中生长⏹培养出的微生物接种于易感动物，一定能导致动物产生该病⏹在实验性发病动物中，一定能观察并重新获得此种微生物细菌的形态与结构细菌的大小与形态1、观察工具——光学显微镜2、测量单位——一般以μm为测量单位球菌3、据形态不同分三大类杆菌球杆菌；链杆菌；梭杆菌；棒状杆菌；分枝杆菌；双歧杆菌螺形菌1、弧菌2、螺菌3、螺杆菌4、弯曲菌弧菌——只有一个弯曲弯曲菌——有数个弯曲螺菌——有若干个弯曲螺旋体——有数个螺旋细菌的结构1、基本结构——细胞壁、细胞膜、细胞质、核质（各种细菌都具有的结构）一、细菌的结构壁1、为细菌特有成分，是细菌最外层包绕在细胞膜周围坚韧而有弹性的膜状结构，主要成分为肽聚糖。

2、按照革兰染色法：细菌分为两种，（肽聚糖——共有成分）见书122即革兰阳性菌（G+）1、含量多：50%~80%2、组成肽聚糖：聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥磷壁酸：壁磷壁酸、膜磷壁酸3、结构三维立体网状结构4、意义持结构与功能完整药物作用*膜磷壁酸（脂磷壁酸）1、是G+菌重要的菌体表面抗原——与血清学分型有关2、具有黏附宿主细胞的功能——与G+菌致病性有关革兰阴性菌（G-）1、含量少：5%~20%2、组成肽聚糖：聚糖骨架、四肽侧链外膜：LPS、脂质双层、脂蛋白3、结构二维平面结构*脂多糖特异性多糖——O抗原：种特异性核心多糖：属特异性类脂A——毒性中心3、两种细菌细胞壁结构、化学组成不同4、细胞壁的功能一、维持细菌的固有形态、保护细菌抵抗低滲环境二、特异性抗原与细菌的血清分型有关三、某些成分与致病性有关二、细胞膜三、中介体：某些G+菌部分的细胞膜反复折叠并内陷于细胞质内所形成的囊状物功能：1、扩大细胞膜面积，相应增加了酶的含量和能量的产生，拟线粒体作用2、与细菌分裂有关，类纺锤丝作用四、细胞质：细胞膜包裹的半透明溶胶状物质，有水、蛋白质、脂类、核酸（RNA）及无机盐等组成1、核糖体（70S）：与真核细胞不同，——与抗生素的关系30S——链霉素作用点50S——红霉素作用点2、质粒：染色体外遗传物质，与遗传变异有关——染色体外的遗传物质1、本质为闭合环状双股DNA，含基因数少2、具有自我复制和转移的能力3、控制某些特定的遗传性状4、质粒可以丢失，不影响其生命医学上重要的质粒有1、R质粒——耐药质粒——耐药性2、F质粒——致育质粒——性菌毛3、Col质粒——产毒质粒3、胞质颗粒：异染颗粒等，可鉴别细菌——细菌储藏能量和营养的场所，非细菌生命所必需异染颗粒——鉴定白喉杆菌4、核质，即细菌的染色体——双股DNA——决定细菌的生命活动特殊结构——荚膜、菌毛、鞭毛、芽胞1、荚膜概念：细菌合成并分泌至细胞壁外的一层黏液性物质化学组成：多糖或多肽形成条件：体内或营养丰富的环境染色：折光性强，不易着色功能：——与细菌致病性有关抗吞噬作用抗有害物质损伤作用——粘附作用——耐干燥：含水90%——与细菌分型有关具有抗原性2、鞭毛概念：绝大多数G-细菌细胞膜伸出的细长弯曲的丝状物化学组成：鞭毛蛋白（鞭毛素）功能：1、根据鞭毛的位置、数量可鉴别细菌单毛菌——霍乱弧菌双毛菌——空肠弯曲菌丛毛菌——绿脓杆菌周毛菌——伤寒杆菌2、细菌的运动器官——动力试验鉴别3、与细菌的致病性有关——黏附细菌4、细菌鉴定分型——鞭毛抗原（H-Ag）3、菌毛概念：许多G -菌和少数G+ 菌菌体周围具有的比鞭毛更细且短而刚直的丝状物,必需借助电子显微镜观察化学组成：菌毛蛋白（菌毛素）形成条件：体内或营养丰富的环境分类：1、普通菌毛：定植因子是细菌的粘附结构，可与宿主细胞表面受体结合，是细菌感染的第一步，所以与菌毛结合的特异性决定了宿主感染的易感部位。

葡萄球菌属(Staphylococcus)一生物学特性G+，无鞭毛，无芽孢。

体外培养一般不形成荚膜。

宿主体内的大多数金葡菌表面存在荚膜，有利于细菌黏附。

普通培养基上生长良好；需氧或兼性厌氧；最适生长温度37℃；最适pH为7.4。

过氧化氢酶阳性，多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸，不产气。

致病菌株能分解甘露醇。

已发现的葡萄球菌抗原有30多种，其中较重要的有：葡萄球菌A蛋白（SPA）、荚膜、多糖抗原。

葡萄球菌的抵抗力强于其他无芽孢细菌。

对干旱、热、光照、消毒剂的抗性都较强。

葡萄球菌的耐盐性强。

耐药性强，已成为医院内感染最常见的致病菌。

二致病性致病物质酶：凝固酶、纤维蛋白溶酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等。

毒素：细胞毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等。

其他：粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖等。

所致疾病1、侵袭性疾病局部感染：疖、痈、甲沟炎、麦粒肿、蜂窝织炎、伤口化脓等。

内脏器官感染：肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等。

全身感染：败血症、脓毒血症等。

2、毒素性疾病（1）食物中毒（2）假膜性肠炎（3）烫伤样皮肤综合症（4）毒性休克综合症链球菌属(Streptococcus)一生物学特性G+，无鞭毛，无芽孢。

培养早期形成透明质酸的荚膜。

细胞壁外有菌毛样结构，含型特异性的M蛋白。

营养要求较高,普通培养基上生长不良。

大多兼性厌氧，少数菌株专性厌氧。

T O=37℃，最适pH为7.4-7.6。

在血平板上形成灰白色、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落。

不同菌株溶血不一。

过氧化氢酶阴性，分解葡萄糖，产酸，不产气。

链球菌一般不分解菊糖，不被胆汁溶解。

链球菌的抗原结构较复杂，主要有三种：（1）蛋白质抗原：。

具有型特异性，位于C抗原外层。

A群链球菌有M、T、R、S不同性质的蛋白质抗原，与致病性有关的是M抗原。

（2）多糖抗原：或称C抗原。

系群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分。

（3）核蛋白抗原：或称P 抗原。