临床常见病原体检查优秀课件

55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
临床常见病原体检查
21、没有人陪你走一辈子，所以你要 适应孤 独，没 有人会 帮你一 辈子， 所以变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首，因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿． 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ，它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ，以便 让别一 只脚能 够再往 上登。

病原学检查要点
3.分离培养与鉴定 溶血 • Lancefield群特异性抗原鉴定A、B、C等 • 杆菌肽敏感试验：A群链球菌（+） • CAMP试验：B群链球菌（+） 非溶血 • 肺炎链球菌：Optochin试验：5g，>=14mm敏感
• 草绿色链球菌: API, Crystal， VITEK, MicroScan， Phoenix 等 20
腐生葡萄球菌 •女性尿路感染
病原学检查要点
1. 标本采集 ：根据感染部位,可采集脓液、创 伤分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、 脑脊液、粪便、感染组织，导管等 血培养至少2套（4瓶），多部位静脉采血 2.直接检查：无菌体液离心涂片后，革兰染色 镜检，初步报告“找到革兰阳性球菌，呈 葡萄状排列，疑为葡萄球菌” 。
23 Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1
2001-2007肺炎链球菌对常用抗生素 的敏感性变化%
抗生素名 称
青霉素
阿奇霉素/ 红霉素
2001-2002 2003-2004 2005-2006 2007
四、奈瑟菌属和卡他莫拉菌
1.奈瑟菌属(Neisseria): 淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae） 脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis） 乳屑奈瑟菌(ctamica) 微黄奈瑟菌(N.subflava) 粘膜奈瑟菌(N.mucosa) 浅黄奈瑟菌(N.flavescens) 多糖奈瑟菌(N.polysaccharea) 干燥奈瑟菌（N.sicca） 灰色奈瑟菌（N.cinerea） 2.莫拉菌属(Moraxella): 卡他莫拉菌（M.catarrhalis）

中和试验 ELISA
风湿热（抗O试验） 广泛用于病原体的诊断和流行病学调查
玻片凝集试验
试管凝集试验
酶联免疫吸附试验
④细菌的快速鉴定
API细菌数值鉴定系统
PCR技术
姬姆萨染色衣原体包涵体
HSV病毒
被支原体感染的精子
梅毒螺旋体
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检测程序
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病毒感染的微生物学检查法
Diagnosis Strategy for Viral Infection
②分离培养
大多数细菌的形态与染色并无显著特异性，因此需要分离培 养。如肠道杆菌均为G-杆菌，菌落形态亦相同。 培养特征：化脓性链球菌---小而透明、溶血环。
②分离培养
• 生化试验：如肠道杆菌进行乳 糖发酵试验。
• 血清学试验：已知抗体测抗原 或已知抗原测病人血清中相应 的抗体。如玻片凝集，鉴定菌 种和型。
体液
体液
体液
粪便
传播途径 粪-口
慢性感染 否 基因组类型 ssRNA
经皮肤/ 经粘膜
是
dsDNA
经皮肤/ 经粘膜
是
ssRNA
经皮肤/ 经粘膜
是
ssRNA
粪-口
否 ssRNA
Hepatitis B Virus
• 乙型肝炎的病原体 • 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人
口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感 染 • 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达 9.8%
HBV virion
The infectious virion is called the DANE particle.
HBV Viral Genome Organization
HBcAg HBeAg

（二）耐药机制
1．细菌水平和垂直传播耐药基因的整合子系统 2．产生灭活抗生素的水解酶和钝化酶等 3．细菌抗生素作用靶位的改变 4．细菌膜的改变和外排泵出系统 5．细菌生物膜的形成
二、检查项目、结果和临床应用
（一）药物敏感试验
K-B纸片琼脂扩散法、稀释法、浓度梯度纸条扩散法（E试验）、耐药筛选试验
（二）耐药菌监测试验
二、标本的实验室质量评估标准
标本送至病原体实验室后，工作人员应对标本信息、采集方式、采集部位、运送方式等 各方面进行质量评估，决定是否接收标本进行下一步检测或建议重新采集以确保检测结果的 准确性。质量不合格标本得出的结果会给医生提供错误的信息，导致误诊和治疗不当。因此 ，实验室必须遵循严格的标本接收和拒收准则。
（七）生殖道标本
采集尿道口分泌物、外阴糜烂面病灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物和前列腺液等
（八）创伤、组织和脓肿标本
1.开放性脓肿 用无菌拭子采集病灶边缘及深部分泌物，或采集组织标本 2.封闭性脓肿 则以无菌干燥注射器穿刺抽取脓肿边缘及底部的脓汁
（九）血清
用于检测病人产生特异性抗体的效价以辅助诊断感染性疾病
（二）临床类型
可导致人类感染性疾病的病原体约500种以上，包括病毒、细菌、真菌、支原体 、衣原体、立克次体、螺旋体和寄生虫等。
二、检查项目和临床应用
（四）病原体的分离培养和鉴定
1．细菌和真菌感染性疾病病原体的分离培养 根据菌落性状、细菌形态和染色性、 生化反应、血清学实验等对分离菌作出鉴定并做药敏试验 2．不能人工培养的病原体感染性疾病 标本接种易感动物、鸡胚或合适的细胞
（五）血清学试验
1.常用方法 凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、间接免疫荧光技术、放射免疫测 定、酶联免疫吸附试验等 2.用已知病原体的抗原检测病人血清中相应抗体

第六页，共181页。
（一）血液标本的采集
适应症：疑似菌血症、败血症或 脓毒血症的病人
酒精棉球消毒，防止污染。静脉 采血后，将血液注入培养瓶内 。
采集时间：一般在抗生素使用前，于 发热初期或高峰期采血。
采集频率：24小时内采血2~3次 可提高阳性率，且在不同部位。
采血量：血液与培养基的比例为1： 5-10，一般成人血量5~10ml， 婴儿1-5ml。
电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感染却有确诊的价值 第二十五页，共181页。
电子显微镜发现为 某种冠状病毒
电镜检查不常规用于临床第二，十六页对，共1某81页。些病毒感染却有确诊的价值
意义
1. 无菌体液的直接镜检对病原体诊断具有一定意义。
2. 对正常菌群寄居腔道的分泌物图片镜检可提示进一步检 查的步骤、采取的方法和确定分离鉴定病原体所需的培 养基。
将大量核酸片段(寡核苷酸、PNA、cDNA、基因组 DNA)以预先设计的方式固定在载玻片、尼龙膜和纤 维素膜等载体上组成密集分子阵列，与荧光素或其他 方式标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号的强弱 进而判断样品中靶分子的有无和数量。该技术具有高 通量、自动化程度高、快速、样品用量少、灵敏度高、 特异性强、污染少等特点。病原微生物的16S rDNA 及23S rDNA序列近几年被作为一个较理想的基因分 类靶序列，其在进化压力下保持了高度的保守性，同 时又具有一定的变异性，基因芯片技术通常利用病原 微生物的这一分子生物学特性，实现多样本多病原微 生物的同时检测。
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PCR的基本原理
引物2
DNA引物
PCR反应条件 PCR过程
9550℃
PCR的特点
引物1
第三十七页，共181页。

45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 的才能 。—— 罗伯斯 庇尔
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❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。—要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，法律受制于情 理。— —托·富 勒

END
常见病原菌的病原学检查
56、死去何所道，托体同山阿。 57、春秋多佳日，登高赋新诗。 58、种豆南山下，草盛豆苗稀。晨兴 理荒秽 ，带月 荷锄归 。道狭 草木长 ，夕露 沾我衣 。衣沾 不足惜 ，但使 愿无违ห้องสมุดไป่ตู้。 59、相见无杂言，但道桑麻长。 60、迢迢新秋夕，亭亭月将圆。
16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。——罗素·贝克 18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——马云 19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。——雷锋 20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而生。——布尔沃