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脊髓损伤后星型胶质细胞活化与线粒体融合蛋白2表达变化李长丽;郑莉;蒋猛;易成腊;白祥军【摘要】Objective To explore the relationship between expression changes of Mfn2 and astrocyte acti-vation after spinal cord injury( SCI) and analyze its significance,so as to provide a basis for the next research about overexpression of Mfn2 suppressing the astrocytes activation afterSCI.Methods The rat models of SCI were built and the expression of Mfn2 and glial fibrillary acidic protein ( GFAP) was detected using the methods of immunoflu-orescence-staining and Western Blotting. Forty-eight adult male SD rats were randomly divided into two groups:sham group(n=24) and SCI group(n=24).Thoracic spinal cord injured model was built in animals of the SCI group according to the Allen’ s method,but the animals of the sham group only received laminectomy.Animals were anesthetized and thoracic spinal cord tissues were taken at the days of 1,3,7 and 14 separately.Then histologic-im-munofluorescence-staining was made to observe the morphology of the spinal cord and Western Blotting was made to detect the expression changes of GFAP and Mfn2 at various time points.Results The immunofluorescence staining result showed that after SCI,the thoracic segment between dorsal horns of spinal cord grey matter was damaged and the structure was disordered and the boundary was not clear;the result of Western Blotting showed that after SCI,the expression of Mfn2 in the thoracic spinal cord was decreased from the first day,compared with the sham group;the Mfn2 expression of group ofthoracic SCI was decreased entirely and obviously from the third day after operation,with significantly statistical difference(P<0.05);the expression of GFAP increased gradually with the development of inju-ry,and the difference was statistically significant from the third day after the operation(P<0.05).Conclusion After SCI,the expression of GFAP which is the specific marker of astrocytes is increased.At the same time,the products of Mfn2 which is proved to be a hyperplasia suppressor gene is decreased.So there is an inversed relationship between the expression of Mfn2 and the activation and proliferation of astrocytes after SCI.%目的：探索脊髓损伤后星型胶质细胞（AS）活化与线粒体融合蛋白2（Mfn2）的表达规律及其意义，为脊髓损伤修复寻求合适的干预靶点及时机。
水温改变对斑马鱼脊髓损伤修复的影响李强;郑苏林;冯瑜菲;杨振国;张晶晶【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2017(25)1【摘要】Objective Using zebrafish to analyze the effect of water temperature on the recovery of spinal cord in-jury. To detect the cell proliferation and changes of gene expression at the injury site during the process of recovery. Meth-ods Surgical operation was performed to induce spinal cord injury ( SCI) on adult fish. Water at a series of temperature was applied to culture the fish. Swimming ability was adopted to observe the recovery of spinal cord injury following surger?y. Vibration sections and immunohistochemistry were performed to observe the cell number post SCI at different stages. The changes of gdnf and nos gene expression were determined by real?time PCR. Results The water temperature changes from 28℃ to 32℃ did not affect the swimming ability of non?injured and sham?injured fish ( P>0. 05 ) . The swimming ability recovered mostly in 8 weeks post spinal cord injury. At 32℃, the swimming ability recovered faster than at 28℃or at 30℃(P<0. 05). The cell proliferation increased obviously following spinal cord injury (P<0. 05). The proliferation of cells surrounding the spinal cord in jury was more extensive in SCI fishes incubated in 32℃ water than in 28℃ or 30℃ water ( P<0. 05). Real?time PCR assay showed that gdnf was up?regulated in all groups post SCI at 24h, and 7 and 14 days (P<0. 05). The nos expression was up?regulated in all groups following SCI in 24 h (P<0. 05) and 7 days. There was nosig?nificant difference between the SCI group and sham?injury group (P<0.05), while after 14 days, the expression of nos was reduced in the SCI group compared with the sham?injury group (P<0. 05). Conclusions A slight increase of incu?bating water temperature can accelerate the recovery of spinal cord injury in zebrafish.%目的利用斑马鱼脊髓损伤模型,研究水温改变对脊髓损伤修复的影响,并检测在脊髓修复过程中,损伤处细胞数目以及脑内相关基因表达的变化情况.方法利用手术构建斑马鱼脊髓损伤模型;通过改变斑马鱼生活的水温来观察其脊髓损伤后游动能力的变化情况;用振动切片技术及免疫组织化学观察脊髓损伤处不同时间点细胞数目的改变情况;实时荧光定量PCR法分析脑内相关基因gdnf、nos的表达差异.结果28℃、30℃、32℃水温均不会导致未手术组与假手术组斑马鱼游动能力的改变(P>0.05);32℃水温环境能够使脊髓损伤组斑马鱼比28℃、30℃水温环境的斑马鱼恢复游动的能力明显增强(P<0.05).脊髓切片染色实验结果显示,脊髓损伤后损伤处细胞数目明显增多(P<0.05).相同时间点,水温为32℃比28℃、30℃细胞数目增多更加明显(P<0.05).实时荧光定量实验,gdnf基因在脊髓损伤术后与对照组相比在24 h、7 d、14 d均明显升高(P<0.05);nos基因在脊髓损伤术后24 h明显升高(P<0.05),7 d时与相同时间点假手术组相比无明显差异(P>0.05),而14 d时与相同时间点假手术组相比明显降低(P<0.05).结论适当提高水环境温度可促进斑马鱼脊髓损伤后恢复.【总页数】7页(P1-7)【作者】李强;郑苏林;冯瑜菲;杨振国;张晶晶【作者单位】广东医科大学附属医院,广东湛江 524001;广东医科大学附属医院,广东湛江 524001;广东医科大学附属医院,广东湛江 524001;广东医科大学附属医院,广东湛江 524001;广东医科大学附属医院,广东湛江 524001【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.斑马鱼作为模式生物在脊髓损伤修复研究中的应用 [J], 李萌;张慧;黄玉琴;陈银海2.成年斑马鱼脊髓损伤修复中BDNF/TrkB的表达研究 [J], 赵厚德;崔春;刘春杰;胡程铭;申延琴3.成年斑马鱼脊髓损伤修复中脑gdnf 和nos 基因的表达 [J], 谢琳;房萍;林金飞;潘洪超;张帆;申延琴4.水温、pH值和光照对斑马鱼受精卵孵化率的影响 [J], 陈楠;高雯;张磊;董罗涛;沈泽恩;魏文志;付立霞5.miR-301a-3p通过靶向调节SNX27影响脊髓神经损伤修复 [J], 史纪元;姬乐;易智;刘时璋;刘慧通;王雄勋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
利用稳定表达神经营养因子的神经干细胞治疗脊髓损伤的实验研究王莉;衣玲;陈亮;李胜【期刊名称】《临床医学工程》【年(卷),期】2012(019)008【摘要】目的利用转基因技术将大鼠NT-3基因转入神经干细胞,获得稳定表达NT-3的细胞株,注入脊髓损伤大鼠模型的损伤部位进行治疗,观察外源细胞对脊髓的修复情况.本研究为脊髓损伤的干细胞治疗提供新的实验依据,为采用转基因技术提高脊髓损伤治疗效果奠定理论基础.方法①取孕14天大鼠胚胎皮层细胞,磁珠分选Nestin阳性(神经干细胞特异性标记)细胞群进行体外细胞培养至形成细胞克隆.将大鼠NT-3高表达载体转入神经干细胞,G418筛选出稳定表达NT-3的细胞继续培养.Western Blot检测证实得到的细胞可以稳定表达NT-3.②40只成年雌性Wistar大鼠麻醉后撞击锤损伤脊髓成脊髓损伤后九天,实验组大鼠每只注入5 μL 细胞(稳定表达NT-3)悬液(10000 个/μL),对照1组动物每只注入5μL细胞培养基,对照2组动物每只注入5μL未经转染处理的细胞悬液(10 000个/μL),皮肤缝合后放回动物房常规饲养.③移植后一周起,采用斜板试验和BBB (Basso-Beattie-Bresnahan)评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况.结果①神经干细胞可以稳定高表达(NT-3);②高表达NT-3的神经干细胞移植后可以改善实验性脊髓损伤大鼠模型各项检测指标,对脊髓损伤具有潜在的治疗价值.结论 NT-3转染神经干细胞后对于实验动物的脊髓损伤治疗效果显著提高,是提高临床脊髓损伤疗效的潜在可行途径.【总页数】3页(P1245-1247)【作者】王莉;衣玲;陈亮;李胜【作者单位】山东中医药大学,山东济南250355;山东省眼科研究所,山东青岛266071;山东省立医院,山东济南250021;山东省肿瘤防治研究院,山东济南250117【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.神经干细胞移植促进脊髓损伤后脑源性神经营养因子的表达 [J], 王岩峰;吕刚;赵宇;金哲;黄涛;于德水;董宝铁2.神经营养因子修饰胚胎脊髓神经干细胞移植后脊髓损伤大鼠的功能恢复和损伤局部基因表达 [J], 解锦鼎;王龙;杨印东;俞春雷;栗昭生;安宁3.神经营养因子3基因修饰神经干细胞移植脊髓损伤的相关蛋白表达 [J], 邓兴力;梁袁昕;杨智勇;宋晓斌;李玉;杨述华4.嗅鞘细胞联合神经干细胞对大鼠急性脊髓损伤及脑源性神经营养因子表达的影响[J], 陈大伟;刘燕青;张朝5.神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后胶质细胞源性神经营养因子与生长相关蛋白43基因表达的影响 [J], 王岩峰;吕刚;李雷;韩壮;杨茂伟;黄涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
斑马鱼中snrpc基因的发育时序表达分析王红莹【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2016(022)008【摘要】为了深入研究鱼类snrpc基因的作用机制，通过分析斑马鱼snrpc的发育时序表达，来探讨snrpc基因在斑马鱼中的功能机理。
从斑马鱼的胚胎中提取RNA，进行反转录、PCR、克隆等，得到snrpc基因在胚胎发育不同时期的表达水平。
结果表明，在斑马鱼胚胎发育初期，snrpc表达量较高，随着胚胎的不断发育，snrpc的mRNA表达量有所下降，到后期表达量又上升。
因此，snrpc表达量的变化可能预示着snrpc发挥功能的关键时期，对snrpc的克隆和表达分析，为后续进一步研究其相关功能奠定了基础。
【总页数】2页(P14-15)【作者】王红莹【作者单位】中南民族大学生命科学学院，武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室，湖北武汉 430074【正文语种】中文【中图分类】S965.299【相关文献】1.白桦中一花发育相关基因BplAGL的克隆及时序表达分析 [J], 魏继承;任如意;国会艳;宗宪春;郝爱平;杨传平2.Vasa基因在斑马鱼不同发育时期的mRNA表达分析 [J], 孙冬捷;王晨;严继舟3.bach1和bach2在斑马鱼早期发育中的表达分析 [J], 张淑青;吴竞瑶;王晗4.斑马鱼内皮脂肪酶(EL)、丝氨酸磷脂酶(PLA1A)和H型脂肪酶(LH)基因的组织分布与胚胎发育表达分析 [J], 冯东;黄巧艳;刘凯;刘振辉5.Legumain基因在斑马鱼胚胎发育中的表达分析 [J], 贾小娥;朱伟;樊燕;谢伟;姜树原;石蕊;刘晓蕾;许文强;邵国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脊髓损伤胶质瘢痕形成相关基因脊髓损伤（SCI）是一种严重的神经系统损伤，其常见的并发症之一是胶质瘢痕形成。
胶质瘢痕是指在脊髓损伤后，损伤部位周围胶质细胞增生、排列紧密形成的瘢痕组织。
胶质瘢痕的形成与一系列相关基因的表达调控密切相关。
本文将探讨与脊髓损伤胶质瘢痕形成相关的基因及其作用机制。
1. ECM基因家族：胶质细胞合成和分泌的胶原蛋白是胶质瘢痕形成的重要组成部分。
胶原蛋白主要由ECM（细胞外基质）基因家族编码，包括COL1A1、COL1A2、COL3A1等。
这些基因的表达增加会导致胶原蛋白的合成增加，从而加剧胶质瘢痕形成。
2. 炎症相关基因：炎症反应在脊髓损伤后的胶质瘢痕形成中起着重要作用。
炎症相关基因包括IL-1β、TNF-α、IL-6等。
这些基因的高表达会引起炎症反应的持续性活化，促进胶质细胞的增生和胶质瘢痕形成。
3. 纤维化相关基因：纤维化是胶质瘢痕形成的主要特征之一。
纤维化相关基因包括TGF-β1、CTGF、α-SMA等。
这些基因的过度表达会导致胶质细胞的转分化为成纤维细胞，增加胶质瘢痕的形成。
4. 细胞粘附分子基因：细胞粘附分子在胶质瘢痕形成中发挥重要作用。
其中，NCAM、VCAM-1、ICAM-1等基因的表达增加会导致胶质细胞之间的黏附力增强，促进胶质瘢痕的形成。
5. 神经再生相关基因：脊髓损伤后，神经再生是恢复功能的关键步骤。
神经再生相关基因包括BDNF、NT-3、GDNF等。
这些基因的表达降低会影响神经细胞的再生能力，从而加重胶质瘢痕的形成。
胶质瘢痕形成的机制主要包括胶质细胞的增生和转分化、炎症反应和胶原蛋白的合成。
脊髓损伤后，炎症反应的持续活化会导致胶质细胞的增生和胶原蛋白的合成增加。
同时，纤维化过程中，胶质细胞会发生转分化为成纤维细胞，进一步促进胶质瘢痕的形成。
此外，细胞粘附分子的表达增加也会加强胶质细胞之间的黏附力，进一步促进胶质瘢痕的形成。
针对脊髓损伤胶质瘢痕形成相关的基因，一些研究已经展开。
Hes1在成年神经再生修复海马损伤中作用的研究的开题报告题目：Hes1在成年神经再生修复海马损伤中作用的研究一、研究背景海马是大脑中与学习和记忆有关的区域，其损伤常常导致认知和行为的障碍。
虽然成年神经系统对损伤的修复能力受到限制，但近年来研究表明，成年神经干细胞具有巨大的修复潜能并能导向海马神经元和神经胶质细胞的再生。
因此，研究成年神经干细胞在海马损伤修复中的作用机制具有重要意义。
Hes1是一种调控干细胞增殖、分化和自我更新的重要转录因子。
以往研究发现，Hes1在成年神经系统的发生和发育中扮演着重要角色。
但其在成年神经干细胞向神经元和神经胶质细胞分化过程中的作用仍然不清楚。
因此，本研究将针对Hes1在海马损伤修复中的作用进行深入研究。
二、研究目的本研究旨在探究Hes1在成年神经干细胞向神经元和神经胶质细胞分化过程中的作用，进一步阐明其在海马损伤修复中的作用机制，并为海马神经干细胞治疗提供理论依据。
三、研究内容与方法（1）搭建海马损伤模型：借助慢病毒介导的Vgat-CreER T2、Ai9基因突变技术来得到WG垂体前叶基因（nestin）启动子驱动的tdTomato标记基因的小鼠模型。
在小鼠的海马神经元中进行基因突变和荧光标记，模拟海马神经元的损伤。
（2）成年神经干细胞分离、培养和定向诱导分化：从小鼠的成年海马中分离出神经干细胞，通过体外培养和定向诱导分化成神经元和神经胶质细胞。
针对不同时间点的神经干细胞进行RNA-Seq。
（3）统计学分析：基于RNA-Seq数据，采用差异表达基因分析技术来筛选出不同分化时间点下的Hes1关键基因；采用GO、KEGG通路分析等来挖掘Hes1的生物学功能和作用机制。
四、研究预期成果通过本研究，预期可以深入了解Hes1在成年神经干细胞向神经元和神经胶质细胞分化和海马损伤修复中的作用机制，从而为开发海马神经干细胞治疗提供新的理论和实践基础。
胶质细胞源性神经营养因子修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的效果吴朗;黄成;冯新民;毕松超;陈涛;王鹏;杨建东【摘要】Objective To observe the effectiveness of transplantation of neuron-like cells induced by GDNF from BMSCs on treatment of spinal cord injury in rats.Methods Transfected BMSCs by recombinant adenovirus containing the gene of rGDNF and GFP.36 SD rats with spinal cord injury were randomly divided into three groups.All the 36 SD rats with spinal cord injury were scored by the Basso,Beattle,Bresnahan locomotoRrating scale at different time points (1、2、3、4 weeks afteRoperation).In the 4th week afteRoperation,tissue from the injury section was prepared to observe repaiRof spinal cord injury.Results BMSCs was able to secrete GDNF continuously afteRtransfected by recombinant adenovirus containing the gene of rGDNF and GFP.AfteRoperation,BBB scores in intralesional treatment group significantly increased when compared with that of intravenous treatment group and injury control group.In the 4th week afteRoperation,HEmatoxylin-eosin staing results showed that cavitation in intravenous treatment group was largeRthan that in intralesional treatment group with the one of injury control group being the biggest.Immunohistochemical method showed that there were more NF200+cells and GFAP+cells in intralesional treatment group than in the otheRtwo groups,and injury control group had the least NF200+cells and GFAP+ cells.Conclusion AfteRinduced into nuron-like cells,BMSCs can treatspinal cord injury effectively.%目的观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为神经元样细胞对大鼠脊髓损伤的修复作用.方法以载GDNF基因的重组腺病毒转染BMSCs以诱导其分化.选取36只SD大鼠制成脊髓损伤模型,随机分成3组.对36只大鼠于造模后1、2、3、4周行BBB 评分,并于造模后第4周取材行HE染色及免疫组化染色,观察脊髓损伤修复情况.结果载GDNF基因重组腺病毒转染后,BMSCs可持续、稳定表达较高水平的GDNF,并能成功诱导BMSCs向神经元样细胞分化.术后1～4周,C组BBB评分均明显高于其他2组,A组最低且无明显变化;术后4周HE染色结果显示,A组脊髓空洞面积最大,C组空洞面积最小;术后4周,A组脊髓损伤部位出现少量NF200、GFAP阳性细胞,C组较B组和A组则明显增多.结论 GDNF基因修饰的BMSCs能成功分化为神经元样细胞,移植后对大鼠脊髓损伤具有一定的修复作用.【期刊名称】《实用临床医药杂志》【年(卷),期】2017(021)009【总页数】6页(P94-98,102)【关键词】脊髓损伤;骨髓间充质干细胞;胶质细胞源性神经营养因子【作者】吴朗;黄成;冯新民;毕松超;陈涛;王鹏;杨建东【作者单位】扬州大学临床医学院, 江苏扬州, 225000;扬州大学临床医学院, 江苏扬州, 225000;扬州大学临床医学院, 江苏扬州, 225000;扬州大学临床医学院, 江苏扬州, 225000;扬州大学临床医学院, 江苏扬州, 225000;扬州大学临床医学院, 江苏扬州, 225000;扬州大学临床医学院, 江苏扬州, 225000【正文语种】中文【中图分类】R744脊髓损伤是一种严重的神经系统疾病，可引起轴突损伤以及大量的神经细胞死亡[1], 造成患者感觉和运动功能的丧失[2]。
hAECs的生物学特性和对中枢神经系统疾病的治疗机制-神经病学论文-临床医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——中枢神经系统疾病包括中枢神经系统感染、早发性的神经功能障碍、晚发性的神经退行性疾病、自身免疫和炎症疾病等。
目前这些疾病没有有效的治疗药物和方法,尤其是对于神经退行性疾病,例如阿尔兹海默病( Alzheimers disease,AD) 、帕金森氏病( Parkinsons disease,PD) 等,引起脑组织重量减轻、脑体积减少,特定脑区功能下降,中神经元,神经元数量明显减少,严重影响患者的生活质量。
中枢神经系统疾病中的神经元不会再生,因此脑功能恢复缓慢。
对于这种疾病,临功能康复治疗仅是防止肌肉组织萎缩,缓解运动功能障碍,药物治疗仅是对症的姑息治疗,没有对疾病的病理改变进行改善修复,因此仅能缓解症状,没有起到根本的治疗作用。
目前基于干细胞的自身生物学特性,干细胞可分化为特异性的细胞类型,并维持细胞间在生理、病理条件下的体内平衡。
在神经系统疾病治疗方面得到了广泛的关注,为治疗神经系统疾病提供新的途径。
羊膜位于胚胎绒毛膜内侧,是一层无血管、神经、淋巴、肌肉的透明薄膜,与发育中的胎儿联系紧密。
人羊膜来源的细胞主要由两类细胞构成: 人羊膜上皮细胞( human amnion epithelial cells,hAECs)和人羊膜间充质细胞( human amnion mesenchymecells,hAMCs) 。
hAECs 具有多向分化潜能,并具有低免疫源性及免疫协同抑制作用,同时可避免胎盘干细胞实验及临床应用中的伦理问题,在干细胞领域中具有广阔应用前景。
1910 年Davis 等研究报道将胎膜应用到皮肤移植的经验,20 世纪90 年代初,羊膜也已广泛应用到临床治疗中,包括烧伤、慢性溃疡、腹腔内粘连、髋关节置换术、角膜修复、神经修复等疾病。
可见hAECs 成为再生医学中有明显治疗效果的一种细胞资源。
