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第4期（总第526期）2021年4月农产品加工Farm Products Processing No.4Apr.文章编号：1671-9646 (2021) 04b-0067-03磷脂酰乙醇胺的制备及应用研究进展金昱龙l ，2,童观珍l ，2,梁丽敏I ，2(.翁源广业清怡食品科技有限公司，广东韶关511442, 2.广东广业清怡食品科技有限公司，广东广州510000)摘要：磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine , PE )又称脑磷脂，作为一种磷脂，其组成部分有脂肪酸、乙醇胺、 磷酸和甘油。
PE 以脑为主要分布范围，也有的存在于大豆、不同种磷虾中。
研究了磷脂酰乙醇胺的不同制取方法， 主要以溶剂提取法为目的，通过不同形式来制备，同时介绍化学合成法为结构特点的生产方式、以酶作为优良催化 剂的方法，并对磷脂酰乙醇胺的不同种类的应用进行了简要介绍。
关键词：磷脂酰乙醇胺；制备；应用；研究进展中图分类号：0621.3 文献标志码：A doi ： 10.16693/ki.1671 -9646(X ).2021.04.050The Research Progress on Preparations and Application ofPhosphatidylethanolamineJIN Yulong 1-2, TONG Guanzhen 1-2, HANG Uinin 1-2(1. Wengyuan L&P Food Ingredient Co.， Ltd.， Shaoguan ， Guangdong 511442， China ；2. Guangye L&P Food Ingredient Co.， Ltd.， Guangzhou ， Guangdong 510000， China)Abstract: Phosphatidylethanolamine (PE )， also known as cephalin ， was a phospholipid composed of glycerol ， fatty acid ， phosphoric acid and ethanolamine. It was found in the brain ， soybeans ， krill etc. The preparation methods of phos phatidylethanolamine include chemical synthesis ， solvent extraction and enzymatic modification. At the same time ， the differ ent applications of phosphatidylethanolamine are introduced.Key words : phosphatidylethanolamine ； preparation ； application ； research progress0引言磷脂酰乙醇胺（Phosphatidylethanolamine ， PE ） 又称脑磷脂，作为一种磷脂，其组成部分有脂肪酸、乙醇胺、磷酸和甘油。
文章编号:100421656(2001)022*******N2酰基氨基酸系列表面活性剂的合成和应用陈燕妮,卢 云,吴 昊,肖慎修(四川大学金钟科技实业公司,四川成都 610064)摘要:本文综合评述和介绍了N2酰基氨基酸系列表面活性剂的合成及应用(特别在农业、生物化学和药物制造领域的应用)的一些近年来的研究新进展,指出了进一步的研究方向,并报道了我公司开发此类产品的情况。
关键词:氨基酸系表面活性剂;N2酰基氨基酸;肌氨酸;月桂酸;进展中图分类号:O6291711 文献标识码:A 1 引言随着科学技术的迅猛发展,被称为“工业味精”的表面活性剂的研究、生产和应用在不断深入和扩大,新的表面活性剂也在不断问世[1～3]。
氨基酸类表面活性剂(S AA)是由氨基酸与脂肪酸合成的N2酰基氨基酸系列表面活性剂,由于原料易得,合成方法相对容易,加之反应物又都是生物体的构成组分,易于生物降解和安全性好而获得了很大的发展。
其中尤以N2月桂酸氨基酸及其钠盐[4～9](特别是N2月桂酰肌氨酸及其钠盐)由于其表面张力,润湿性和渗透性与J FC(脂肪醇聚氧乙烯醚)相当,它的丰富而细腻的泡沫和与其它配料(特别是阳离子表面活性剂)的广泛配合性大大优于其它表面活性剂,加之它的低刺激性,低毒性、柔和性、强的抗菌性和去污能力及优良的缓蚀性,生物降解性,因而在国内外已广泛用于化妆品(洗面奶、洁手浆、沐浴露、香波、面膜等)、牙膏、食品、金属清洗加工、矿石浮选、石油二次开采、丝绸染整、皮革处理等行业。
氨基酸表面活性剂已有产品,如商品名为Crolasin LS-30(CRODA公司), H AMPOSY L L-30,H AMPOSY L C-30,H AMPOSY L M-30等(DOW公司),其剂型分别为水剂(30%、40%)和粉剂(含量95%),美国P&G、G RI NECE和STEPAN C O.也有此类产品,日本味之素公司实现了N2长链酰基谷氨酸(AG A)的工业化生产,已有产品出售;但国内在氨基酸表面活性剂研究、开发、应用方面与发达国家相比有相当差距。
甘油磷脂(phosphoglyceride)的代谢磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂，由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂(phosphoglyceride)；由神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂(sphingolipid)。
其结构特点是：具有由磷酸相连的取代基团(含氨碱或醇类)构成的亲水头(hydrophilic head)和由脂肪酸链构成的疏水尾(hydrophobic tail)。
在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面，而疏水尾位于膜内侧（如下图）。
（一）分类及生理功能甘油磷脂是机体含量最多的一类磷脂，它除了构成生物膜外，还是胆汁和膜表面活性物质等的成分之一，并参与细胞膜对蛋白质的识别和信号传导。
甘油磷脂基本结构是磷脂酸和与磷酸相连的取代基团(X)；如下图所示：甘油磷脂由于取代基团不同又可以分为许多类，其中重要的有：胆碱(choline) + 磷脂酸――→ 磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine)又称卵磷脂乙醇胺(ethanolamine) + 磷脂酸――→磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine)又称脑磷脂丝氨酸(serine) + 磷脂酸――→ 磷脂酰丝氨酸甘油(glycerol) + 磷脂酸――→ 磷脂酰甘油――→ 磷脂酰肌醇肌醇(inositol) + 磷脂酸心磷脂(cardiolipin)是由甘油的C1和C3与两分子磷脂酸结合而成。
心磷脂是线粒体内膜和细菌膜的重要成分，而且是唯一具有抗原性的磷脂分子。
除以上6种以外，在甘油磷脂分子中甘油第1位的脂酰基被长链醇取代形成醚，如缩醛磷脂(plasmalogen)及血小板活化因子(plateletactivating factor,PAF)，它们都属于甘油磷脂。
结构式如下：（二）甘油磷脂的合成合成全过程可分为三个阶段，即原料来源、活化和甘油磷脂生成。
甘油磷脂的合成在细胞质滑面内质网上进行，通过高尔基体加工，最后可被组织生物膜利用或成为脂蛋白分泌出细胞。
线粒体磷脂代谢
线粒体磷脂代谢是涉及线粒体内部磷脂合成、分解和转化的一系列生化过程。
这些过程对于维持线粒体的正常结构和功能至关重要。
首先，线粒体内的磷脂合成主要发生在线粒体内膜上。
磷脂的合成主要依赖于甘油磷脂的基本结构，即磷脂酸和与磷酸相连的取代基团。
这些取代基团可以是胆碱、乙醇胺、丝氨酸、甘油或肌醇等，它们与磷脂酸结合形成各种甘油磷脂，如磷脂酰胆碱（卵磷脂）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂）、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇等。
其次，线粒体内的磷脂分解和转化过程也十分重要。
磷脂酶等酶类可以水解磷脂分子，释放出游离的脂肪酸和甘油磷酸等产物，这些产物可以进一步参与其他代谢过程。
此外，磷脂还可以通过酰基转移、磷脂交换等反应进行相互转化，以满足线粒体对不同磷脂的需求。
在线粒体磷脂代谢中，心磷脂是一种特殊的磷脂分子，由甘油的C1和C3与两分子磷脂酸结合而成。
它是线粒体内膜和细菌膜的重要成分，而且是唯一具有抗原性的磷脂分子。
心磷脂的合成和分解对于维持线粒体内膜的结构和功能具有重要意义。
总之，线粒体磷脂代谢是一个复杂的生化过程，涉及磷脂的合成、分解和转化等多个环节。
这些过程对于维持线粒体的正常
结构和功能至关重要，对于理解线粒体生物学和疾病发生机制具有重要意义。
N-酰基磷脂酰乙醇胺（NAPE）/N-酰基乙醇胺（NAE）代谢特点及其生理作用1陈素梅，郭维明，张云南京农业大学园艺学院（210095）E-mail: guowm@摘要：NAPE、NAE是植物脂质中的微量组分，本文综述了NAPE及NAE的代谢途径及非生物与生物胁迫对NAPE/NAE代谢的调节特点，分别阐述了NAPE及NAE的生理功能。
并提出了今后工作的方向。
关键词：N-酰基磷脂酰乙醇胺（NAPE），N-酰基乙醇胺（NAE），细胞保护，信号转导1.引言19世纪60年代NAPE首次被报道为小麦面粉中脂质的微量组分[1]，NAPE很快被与高等植物种子联系在一起[2]，但20世纪70年代初，在种子发育过程一系列标记研究中将磷脂酰甲醇误作为NAPE，使得许多脂质生化学家认为植物组织中不存在NAPE[3,4]。
直到90年代，哺乳动物中关于NAPE代谢的许多研究使得植物中NAPE的存在及其代谢重新获得证实[5,6]。
本文将对植物中NAPE/NAE代谢特点及其在生命活动中作用作一综述。
2.NAPE/NAE代谢特点2.1 NAPE代谢特点及其调控2.1.1 NAPE的生物合成及其酶类图1表明了NAPE/NAE的代谢途径[7]。
Chapman在研究发生吸涨作用后的棉籽提取物时发现，NAPE是由未酯化的游离脂肪酸（FFAs）直接N-酰基化磷脂酰乙醇胺（PE）而来，该过程由酰基转移酶催化，且多以棕榈酸、亚油酸为酰基供体，由核甘酸途径或由交换途径生成的PE作为酰基受体[6]。
催化NAPE合成的酰基转移酶简称为NAPE合成酶，是膜结合的酶类，定位于内质网、高尔基体及质膜上[8]。
NAPE合成酶是不依赖于ATP、Ca2+及辅酶A(CoA)的酰基转移酶[9]，最适反应温度45℃，pH8.0，以游离的FFA为酰基供体，并以PE为酰基受体[10]，其可能借助于酶活性部位的一个丝氨酸残基与FFAs结合而成一个“酰基——酶”中间物[9]。
西药执业药师药学专业知识(二)模拟题223药剂学部分一、最佳选择题1. 关于药物制剂稳定性的说法，错误的是A.运用化学动力学原理可以研究制剂中药物的降解速度B.药物稳定性的影响因素试验包括高温试验、高湿试验和强光照射试验C.药物制剂稳定性主要研究药物制剂的物理稳定性D.加速试验是在(40±2)℃、相对湿度(75±5)%的条件下进行的E.长期试验是在(25±2)℃、相对湿度(60±10)%的条件下进行的答案：C[解答] 本题考查药物制剂稳定性的相关知识。
药物制剂的稳定性主要包括化学和物理2个方面，药物制剂的稳定性主要研究化学稳定性，而不是物理稳定性。
故选项C错误。
2. 下列辅料中，可生物降解的合成高分子囊材是A.CMC-NaB.HPMCC.ECD.PLAE.CAP答案：D[解答] 本题考查囊材分类。
常用囊材有以下几种：(1)天然高分子囊材：明胶、阿拉伯胶、海藻酸盐、聚糖、蛋白质类；(2)半合成高分子囊材：羧甲基纤维素钠(CMC)、醋酸纤维素酞酸酯(CAP)、乙基纤维素(EC)、甲基纤维素(MC)等；(3)合成高分子材料：非生物降解如聚酰胺、硅橡胶等；生物降解如聚碳酯、聚氨基酸、聚乳酸(PLA)等。
故本题选D。
3. 下列方法中，不属于包合物验证方法的是A.相溶解度法B.X射线衍射法C.热分析法D.气体吸附法E.红外光谱法答案：D[解答] 本题考查包合物的验证方法。
包合物的验证方法有：(1)相溶解度法；(2)X 射线衍射法；(3)热分析法；(4)红外光谱法；(5)磁共振谱法；(6)荧光光谱法。
选项D不是包合物的验证方法。
4. 下列方法中，不属于固体分散体制备方法的是A.熔融法B.溶剂-喷雾干燥法C.单凝聚法D.溶剂法E.研磨法答案：C[解答] 本题考查固体分散体的制备方法。
固体分散体的制备方法有：(1)熔融法；(2)溶剂法；(3)溶剂-熔融法；(4)溶剂-喷雾(冷冻)干燥法；(5)研磨法。
N-酰基磷脂酰乙醇胺（NAPE）/N-酰基乙醇胺（NAE）代谢特点及其生理作用1陈素梅，郭维明，张云南京农业大学园艺学院（210095）E-mail: guowm@摘要：NAPE、NAE是植物脂质中的微量组分，本文综述了NAPE及NAE的代谢途径及非生物与生物胁迫对NAPE/NAE代谢的调节特点，分别阐述了NAPE及NAE的生理功能。
并提出了今后工作的方向。
关键词：N-酰基磷脂酰乙醇胺（NAPE），N-酰基乙醇胺（NAE），细胞保护，信号转导1.引言19世纪60年代NAPE首次被报道为小麦面粉中脂质的微量组分[1]，NAPE很快被与高等植物种子联系在一起[2]，但20世纪70年代初，在种子发育过程一系列标记研究中将磷脂酰甲醇误作为NAPE，使得许多脂质生化学家认为植物组织中不存在NAPE[3,4]。
直到90年代，哺乳动物中关于NAPE代谢的许多研究使得植物中NAPE的存在及其代谢重新获得证实[5,6]。
本文将对植物中NAPE/NAE代谢特点及其在生命活动中作用作一综述。
2.NAPE/NAE代谢特点2.1 NAPE代谢特点及其调控2.1.1 NAPE的生物合成及其酶类图1表明了NAPE/NAE的代谢途径[7]。
Chapman在研究发生吸涨作用后的棉籽提取物时发现，NAPE是由未酯化的游离脂肪酸（FFAs）直接N-酰基化磷脂酰乙醇胺（PE）而来，该过程由酰基转移酶催化，且多以棕榈酸、亚油酸为酰基供体，由核甘酸途径或由交换途径生成的PE作为酰基受体[6]。
催化NAPE合成的酰基转移酶简称为NAPE合成酶，是膜结合的酶类，定位于内质网、高尔基体及质膜上[8]。
NAPE合成酶是不依赖于ATP、Ca2+及辅酶A(CoA)的酰基转移酶[9]，最适反应温度45℃，pH8.0，以游离的FFA为酰基供体，并以PE为酰基受体[10]，其可能借助于酶活性部位的一个丝氨酸残基与FFAs结合而成一个“酰基——酶”中间物[9]。
Chapman 及Moore利用等电聚焦分析认为NAPE合成酶具有三个同工酶[11]，在棉籽微粒体上该酶对棕榈酸表现出双相饱和的动力学特征，因该酶对FFA出表现不同的高低亲和特点，推断该酶具有两个不同的同工酶，利用人工固膜（IAM）技术及电泳技术分离的活性酶类具有明显的同1本文得到了教育部博士点基金资助项目(20020307038)及南开大学元素有机所第15期国家重点实验室开放基金资助。
- 1 -源性，即均具有64KD的亚基组成[9]。
这表明NAPE的合成是一个精细调节的过程，但关于NAPE合成酶同工酶有待展开进一步的研究。
图1 植物中NAPE/NAE 代谢途径（Chapman et al., 2004）2.1.2 生物及非生物胁迫激活NAPE的合成植物中NAPE的合成似乎与非生物或生物的胁迫有关。
真菌诱导子（如木聚糖酶）及冷胁迫、ABA处理均可分别诱导烟草、棉籽及棉花幼苗NAPE的合成[12,13]。
缺氧胁迫及呼吸抑制剂可诱导土豆细胞合成新组分NAPE[14]。
Sandoval等发现NAPE的含量和（或）NAPE合成酶活性似乎与种子吸涨过程水分胁迫有关，推测在不同时期及不同组织中的不同组分的NAPE可能与组织的特定发育阶段和功能有关[6]。
2.2 NAE的代谢特点2.2.1 NAEs的生成Chapman等用木聚糖酶诱导处理烟草悬浮细胞，发现培养介质中NAE含量增加了6倍，而细胞内NAPE的含量则下降了约5倍，同样的诱导处理导致了烟草植株叶片NAE（14∶0）含量的增加，NAE酰基与NAPE酰基之间的组分及数量相当揭示了NAPE是NAE的前体[15]。
在烟草悬浮细胞培养体系研究中发现，磷脂酶D（PLD）可以催化NAPE生成NAE，PLD 的活性受Mastoparan激活上升20倍，表明G蛋白可能参与了这一过程[15]。
植物中已分离得到多种PLD同工酶，Pappan等研究了拟南芥离体表达的PLD在催化NAPE水解能力上的差异，发现不管PIP2存在与否，PLDα均可以水解PC、PE及PG，而PLDβ、γ需要PIP2存在时才能水解PE、PS，在PE及PIP2共同存在的情况下，PLDβ、γ水解PC、PG及NAPE，其中PE在于促进底物出现，而并不是作为PLD的辅因子[16]。
上述研究表明受Ca2+、GTP-γ-s激活的PLDβ、γ是植物中水解NAPE生成NAE的酶类，而PLDα并不参与NAPE的水解，可能只参与了膜的降解[17]。
- 2 - 2.2.2 NAE的降解在烟草悬浮细胞培养系中，发现胞内NAE酰基水解酶（FFAH 或AHase）水解NAE生成FFAs而维持胞内较低的NAE水平，使得NAE特别积累于胞外[5]。
Rhidaya等棉籽研究中发现以N-棕榈酸NAE为反应底物时，水解产物为FFAs，而当以N-linoleoylethanolamine（18∶2）为底物时，水解产物除FFAs外还有另一种脂质产物[18]。
经研究证实，这一未知脂质为脂氧合酶（13-LOX）的作用产物，发现13-LOX倾向于选择不饱和的NAEs使之发生hydroperoxy(氢过氧化)，而形成Oxylipins，FFAH也可水解这类不饱和NAEs，但以LOX的作用为主[19]。
表明植物体内NAE的降解具有FFAH及NAE-LOX竞争途径。
2.2.3 生物及非生物的胁迫对NAE 代谢的调节脱水干燥的种子中中等链长的、饱和的NAE（16C、18C）含量十分丰富，但在种子发生吸涨吸水后的数小时内含量迅速下降，表明生物的脱水/水合胁迫调节着NAE的代谢[20]。
此外，NAE的代谢还受到冷、缺氧、ABA及木聚糖酶的诱导[12,14]。
Ryu等[21]与Young等[22]发现植物感受病原物或受损伤后PLD被诱导，可能间接诱导了NAE的产生。
3.NAPE/NAE代谢在生命活动中的作用3.1 NAPE的作用3.1.1 保护细胞膜冷胁迫[23]、水分亏缺[24,25]、病原诱导子[26]、缺氧[14,27]等激活非专一性酰基水解酶（如磷酸二酯酶、酰胺水解酶）而释放具有细胞毒性的FFAs将导致细胞区隔化丧失甚至细胞死亡，PE在此状态下趋于形成六棱形的非双层膜的HⅡ形态而降低膜的稳定性。
FFAs、PE分别作为N-酰基供体与受体而合成NAPE，从而减少FFAs、PE的毒害及对膜不稳定的影响，且NAPE的N酰基部分可结合在膜双层上而稳定膜、维持细胞的区隔化及细胞正常的生命活动[10]。
Domingo[28]发现，提高PC脂质体中NAPE含量利于提高脂质体这一模式膜的稳定性并减少其物质渗漏[28]。
NADPH可促进NAPE合成酶的活性，推测NAPE的合成与电子传递有关，利于维持膜电势[10]。
3.1.2 参与植物对病原物的感受过程NAPE是参与植物对病原物感受的脂质信号分子 NAE的前体，NAPE合成用以补充生成NAE所消耗的NAPE[10]。
3.1.3 参与种子萌发等生命活动在种子吸涨吸水、萌发及萌发后早期生长等过程NAPE的代谢发生着相应的变化[13]。
- 3 -3.2 NAE的作用3.2.1 充当脂质介导物当抗性寄主植物遭受病原物侵染时会产生短期的（几分钟）或长时间的（几小时至几天）细胞响应，这些事件集积在一起利于植物形成对病原物（如木聚糖酶）侵染的免疫系统[29]。
病原物处理后，最先观察到质膜上快速的离子流（H+、Ca2+流入细胞，K+流出细胞）) [30]及胞外NAE的积累[15]。
外源添加若干微摩尔NAE(14∶0)可以减轻不同诱导子引起的介质碱化[14]，即诱导子处理后PLD介导的NAE积累可减轻细胞对病原物的感受。
NAE减轻介质碱化的作用被CB（cannabinoid receptor）受体拮抗物（AM281，SR144528）所抑制，表明积累于胞外的或外源的NAE是通过细胞表面受体（类似CB）而起作用[30,31]。
3.2.2 激活防卫基因表达一些内源可转导的信号，如SA、Systemin、JA、ETH等含量上升可诱导苯丙氨酸解氨酶（PAL）基因表达[32]。
PAL基因表达是植物细胞对病原诱导子以及一些非生物环境胁迫的长效反应之一[33]。
新近研究表明，PAL表达的激活包含一氧化氮（NO）介导的途径，该途径可以产生cGMP及cADP-Rid作为第二信使，该NO途径一旦与活性氧（ROS）产生结合在一起就可导致对病原高度敏感的细胞的死亡，从而限制病原的侵染与传播[34,35]。
外源NA E(14∶0)（低于微摩尔浓度）即可激活PAL基因表达，而微摩尔浓度的肉豆蔻酸并不能激活PAL基因表达[14]。
推测细胞内NO可能是NAE信号途径的下游靶分子。
3.2.3 抑制PLDα活性Sheal等研究发现，具不同酰基链长及不同饱和度的7 种NAEs对PLDα活性有潜在的抑制作用，抑制作用随着酰基碳链长度的缩短及不和度的下降而增强[36]。
缺乏PLDα的转基因植株，延迟了ABA诱导的气孔关闭而导致干旱胁迫下重大的生理影响，即PLDα部分参与了细胞对ABA的响应而起到信号转导作用[37]。
N-月桂酸NAE特异地抑制ABA诱导的烟草表层细胞气孔的关闭，表明体内积累的NAE具有新的脂质介导作用[36]。
膜的降解往往是由植物激素启动、PLD介导的过程，失调的PLDα可能导致膜损伤、细胞区隔化丧失、细胞功能的丧失以致细胞死亡[38]。
切花切离母体后与细胞瓦解有关的酶类（如PLDα）被激活，NAE可抑制该酶的活动，表现为NAEs处理后香石竹、月季及雏菊瓶插寿命的显著延长(专利号：CA2388001)。
NAE是PLDβ、γ催化产生的产物，可作为PLDα的内源抑制剂，表明真核生物中可能存在不同PLD同工酶间的信息交换（crosstalk）[36]。
3.2.4 NAE-LOX途径的意义LOX在植物的生长、发育、成熟衰老以及抵御机械伤害和病虫害侵染等逆境过程起着重要的调节作用，一般情况下，LOX以游离的脂肪酸为底物，难以以酯化的脂肪酸（如磷脂中的脂肪酸）为底物，但有些LOX，如动物中的网状红细胞LOX可以直接攻击磷脂，甚至生物膜[40]。
高等植物LOX参与JA、ABA、Oxilipins等信号分子合成途径[41,42]，NAE-LOX 途径产生的Oxylipins具有与JA类似的基团结构[19]，推测Oxylipins具有某种生理功能。
但关于- 4 -NAE-LOX途径的生理意义尚不太清楚。
4.问题及展望4.1 检测NAE的转化及转运过程与动物AHase具有同源性的植物FFAH的DNA序列存在于基因库中（如拟南芥酰基水解酶，基因号为Y10342），基因水平检测利于阐述FFAH在植物NAE转化、转运中的作用[43]。
NAE响应于病原物等胁迫而特别积累于胞外，但NAE的跨膜转运机制尚不清楚，而这恰恰是解释NAE在植物中的一些重要调节作用的关键。
