血液学血细胞化学染色
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血细胞化学染色简单记1.过氧化酶染色:检测过氧化酶。
胞质中无颗粒为阴性,出现细小颗粒分布稀疏为弱阳,出现密集粗大颗粒为强阳性。
强阳性(嗜酸性粒细胞)、弱阳或阴(单核粒细胞)、阴性(淋、红、巨、浆、嗜碱);临床意义:辅助诊断急淋非急淋、鉴别急淋急粒。
注意:(1)过氧化物酶染色急性粒细胞白血病为阳性,急性淋巴细胞白血病是阴性。
(2)粒细胞中原始粒细胞是阴性,嗜碱性粒细胞是阴性。
2.过碘酸-雪夫反应:检测糖类物质。
胞质中出现紫红色颗粒、块状或弥漫状红色为阳性反应。
阳性(淋、粒、单、巨、血小板)(嗜酸特异颗粒间胞质为阳性、嗜碱粒细胞特异颗粒为阳性)阴性(分化差的原粒、幼红和红)。
临床意义:红白血病和骨髓异常增生综合征时幼红可呈阳性反应,良性贫血幼细胞多数为阴性。
戈谢细胞为强阳性,尼曼-匹克细胞呈阴性。
注意:(1)急性粒细胞白血病为阴性,急性淋巴细胞白血病是阳性。
(2)戈谢细胞为阳性,尼曼-匹克细胞为阴性。
3.碱性磷酸酶染色:只有中性粒细胞为阳性,临床意义碱性磷酸酶(NAP)的生理及病理增多减少。
注意:(1)慢性粒细胞白血病积分降低,类白血病积分升高。
4.氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色:阴性或弱阳(原粒、嗜酸);阳性或强阳(早幼粒至成熟中幼粒、嗜碱)。
临床作用:急粒为阳性、急单和急淋为阴性。
注意:(1)该染色是粒细胞特异性染色。
5.α-醋酸萘酚酯酶染色:阴性或弱阳(粒系、淋巴系、红系);阳性(单核系、巨核、血小板)注意:(1)所有抑制试验中只有单核细胞会受抑制,所有可以用来鉴别粒细胞白血病和单核细胞白血病。
6.醋酸AS-D萘酚酯酶染色:基本同与α-醋酸萘酚酯酶染色。
注意:(1)同α-醋酸萘酚酯酶染色。
细胞化学染色细胞化学染色2011年03月02日老三届极品居认真做事,低调做人。
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一、概述细胞化学是组织学的一个分支,是在细胞形态学的基础上研究细胞的生物化学成分,及其定位、定量及代谢功能状态的学科。
在细胞形态学的基础上,运用化学反应的原理对血细胞内的各种生化组成及其代谢产物(酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。
细胞化学染色临床上主要用于:①辅助判断白血病的细胞类型。
白血病的诊断以形态学为基础,但有时仅采用瑞式染色是难以判断白血病细胞的类型的。
不同的细胞系列,其所含的化学物质成分、含量及分布各不相同,随着细胞的分化阶段及病理生理状态变化,这些物质的含量也会发生相应改变。
因此根据细胞化学染色结果的不同,可推断细胞的所属系列。
因此临床上细胞化学染色成为辅助诊断白血病必要的、有力的手段。
②其他血液系统疾病的诊断和鉴别诊断。
在病理情况下,血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变,据此可以辅助疾病的鉴别诊断。
如中性粒细胞碱性磷酸酶染色、铁染色等。
③观察疾病的疗效和预后。
当病理状况纠正后,血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变。
④发病机制的研究。
细胞化学染色的基本步骤为固定、显示及复染。
1、固定为了保持细胞结构及化学成分的不变,需要对细胞进行固定。
根据染色的成分不同,选择合适的固定液,使细胞内的蛋白质、酶类、糖等变成不溶性物质。
固定的方法有物理法和化学法,临床常用化学法固定。
物理法包括干燥和火焰固定,化学法包括甲醛、乙醇、甲醇、丙酮等固定。
采用蒸气或液体固定。
(1)蒸气固定:甲醛是常用的固定剂,极易挥发、氧化,常用40%甲醛蒸气固定。
方法为在封闭的玻璃器皿中加入40%甲醛,将涂片血膜朝下,固定5~10分钟。
(2)液体固定:将涂片浸在甲醛、乙醇、甲醇、丙酮等固定液中,也可将两种或两种以上固定液混合,如10%甲醛甲醇液,甲醛丙酮液等。
临床医学检验技师初级(师)临床血液学(血细胞化学染色的临床应用)模拟试卷1(题后含答案及解析)题型有:1. A1型题 2. A3型题 3. B1型题 4. B1型题1.中性粒细胞碱性磷酸酶染色积分明显增加,临床上最常见于下列哪种疾病A.类白血病反应B.慢性粒细胞白血病C.病毒感染D.恶性淋巴瘤E.急性淋巴细胞白血病正确答案:A解析:碱性磷酸酶主要存在于成熟的中性粒细胞中,类白血病反应中性粒细胞碱性磷酸酶染色积分明显增加。
知识模块:血细胞化学染色的临床应用2.非特异性酯酶染色阳性,加氟化钠明显抑制,见于下列哪种疾病A.急性淋巴细胞白血病B.急性单核细胞白血病C.急性粒细胞白血病D.急性红白血病E.以上均不是正确答案:B解析:AS-DAE染色单核细胞系统:原单为阴性或弱阳性;幼单细胞和单核为阳性,可被氟化钠抑制。
粒细胞系统:各期均为阴性,少数可呈弱阳性,不被氟化钠抑制。
淋巴细胞:淋巴细胞阴性或弱阳性,此反应不被氟化钠抑制。
红细胞系统:早期幼红细胞可呈阳性,随着细胞的成熟阳性反应程度逐渐减弱,此反应不被氟化钠抑制。
巨核细胞系统:巨核细胞和血小板均呈阳性。
知识模块:血细胞化学染色的临床应用3.最适宜用于鉴别原粒和原淋的细胞化学染色是A.PAS染色B.ACP染色C.AS—DAE染色D.NAP染色E.POX染色正确答案:E解析:POX染色:急粒时,白血病性原粒细胞可呈阳性反应,颗粒粗大局灶分布;急淋时,原淋和幼淋细胞呈阴性;急单时,白血性原单细胞呈阴性反应,少数可呈弱阳性,颗粒少常弥散分布。
POX染色区分小型原粒和原淋细胞,前者阳性。
知识模块:血细胞化学染色的临床应用4.抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性的是A.慢性淋巴细胞白血病B.淋巴肉瘤C.多毛细胞白血病D.尼曼-匹克病E.B淋巴细胞正确答案:C解析:多毛细胞白血病时多毛细胞的酸性磷酸酶染色为阳性反应,此酶耐L 一酒石酸的抑制作用。
知识模块:血细胞化学染色的临床应用5.为了鉴别巨幼细胞贫血与红白血病,最好的染色方法是A.ACP染色B.PAS染色C.α-NAE染色D.NAP染色E.POX染色正确答案:B解析:PAS染色,红血病或红白血病时幼红细胞可呈阳性反应。
血细胞染色原理及过程
血细胞染色是通过染色剂的特殊作用将血液中的细胞染色,以便进行形态学和功能学
研究。
常用的染色方法有:吉姆萨染色、瑞曼染色、偏碱性嗜酸性染色等。
1、吉姆萨染色原理
吉姆萨染色法通常是先用苏木精染色,再用伊红染色的方法,又称为改良双染色法。
苏木精能染色核酸,伊红能染色蛋白质。
因此,吉姆萨染色主要用于染色形态较大的细胞,如红细胞、白细胞和血小板等。
红细胞染色后呈现粉色,核显微镜下不可见;白细胞核染
色呈现紫色,细胞浆和红血球呈现粉色。
2、瑞曼染色原理
瑞曼染色法是将染色剂直接使用于干涂片上进行染色。
这种方法使用的染料是甲基绿
与其他染料的混合物,它们的化学性质与吉姆萨染料不同,具有更强的染色能力。
瑞曼染
色适用于对白细胞进行形态学细胞学的鉴定。
淋巴细胞染色后呈现深蓝色或淡蓝色,核呈
圆形或卵形;单核细胞呈现深蓝色,核呈圆形或椭圆形;多形核白细胞呈现深蓝色,核呈
多个不规则分叶状。
3、偏碱性嗜酸性染色原理
偏碱性嗜酸性染色是一种特殊的染色方法,它是根据细胞内容物的某些化学特性进行
染色的。
嗜酸性染色剂能够染色嗜酸性细胞颗粒,如嗜酸性粒细胞的嗜酸性细胞颗粒;偏
碱性染色剂能染色嗜碱性细胞颗粒,如嗜碱性粒细胞的嗜碱性细胞颗粒。
总之,血细胞染色是现代医学中非常重要的一项技术手段,它通过染色剂的特殊作用
为医学研究提供了非常珍贵的研究材料和数据,对于临床诊断和治疗提供了非常重要的参
考价值。
医学检验学基础知识:血细胞化学染色小结医学检验血液学是医疗卫生事业单位招聘考试中出题率相对较高的内容,其中血细胞化学染色可以说是血液学中的难点及重点,考试中很容易出题,它的各个试验多且内容繁杂,不容易记忆,同学们也很容易混淆的地方,今天今天帮助大家梳理,以便大家更好地复习和记忆。
常用的血细胞化学染色有过氧化酶染色(POX),过碘酸-雪夫反应(PAS),碱性磷酸酶染色(NAP),氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D-NCE),-醋酸萘酚酯酶染色( -NAE),碱性-丁酸萘酚酯酶染色( -NBE),铁染色。
结果判断:结果阳性:1.POX:棕黑色颗粒2.PAS:红色颗粒块状呈弥漫状红色3.NAP:灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀4.AS-D-NCE:红色沉淀5. -NAE:棕黑色颗粒沉淀6. -NBE:蓝色颗粒7.铁染色:弥散蓝色,颗粒状,小珠状或块状正常血细胞的染色反应:1.POX:粒细胞系统:绝大部分(+)单核细胞系统:可(-)/(+)淋巴细胞系统:(-)2.NAP:粒细胞系统:绝大部分(+)单核细胞系统:绝大部分(+)淋巴细胞系统:绝大部分(-)3.NAP:除了巨噬细胞(+),其他都(-)4.AS-D-NCE:粒细胞系统:原始粒细胞绝可(-)/(+),大部分(+) 单核细胞系统:绝大部分(+)淋巴细胞系统:(-)5. -NAE:粒细胞系统:绝大部分(+)单核细胞系统:原始单细胞绝可(-)/弱(+),其他(+)淋巴细胞系统:绝大部分(-)6. -NBE:粒细胞系统:(-)单核细胞系统:绝大部分(+)淋巴细胞系统:B淋巴(-),其他(+)7.铁染色:细胞外铁:大多(++)临床意义:1.POX:鉴别急性白血病2.PAS:白血病分型3.NAP:主要慢性粒细胞白血病与类白血病的鉴别:慢性粒细胞白血病:NAP积分值常为0类白血病:NAP积分值明显增高4.AS-D-NCE:急性粒细胞白血病(+),急单急淋(-)5. -NAE:急粒大部分(-)不能被NAF抑制;急单大部分(+)能被NAF抑制;急淋大部分(-)6. -NBE:与-NBE染色的临床意义相同7.铁染色:诊断缺铁性性贫血。
常用血细胞化学染色原理及应用(1)过氧化物酶染色的原理和临床意义[原理] 粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶(peroxidase,POX)能将底物过氧化氢分解,产生新生态氧,它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。
联苯胺蓝自我脱氢氧化,显棕色四甲基苯醌二胺,再加入亚硝基铁氰化钠与联苯胺蓝结合,可形成稳定的蓝色颗粒,定位于细胞浆内酶所在的部位。
[临床意义]临床上主要用于急性白血病类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应;急性粒细胞白血病原粒细胞POX 染色呈局灶分布的阳性反应;急性早幼粒细胞白血病颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。
(2)过碘酸-雪夫染色的原理和临床意义[原理] 过碘酸-雪夫(Pexiodic acid-schiff,PAS)染色又称糖原染色。
胞浆内存在的糖原或多糖类物质(如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(Periodic acid)氧化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合,形成紫红色化合物而沉积于胞浆中糖原类物质所存在的部位。
该反应称为过碘酸-雪夫(PAS)阳性反应。
[临床意义]1)急性白血病类型的鉴别红白血病的幼红细胞PAS染色多呈阳性反应,阳性率高,反应强;成熟红细胞有时亦可为阳性;急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应;急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应;急性早幼粒细胞白血病异常早幼粒细胞的PAS染色为阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒,巨核细胞白血病原巨核细胞PAS染色呈阳性或强阳性反应,表现为红色颗粒或块状。
2)各类贫血的鉴别 MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血(曾称地中海贫血)的幼红细胞PAS染色多为阴性反应,有时可出现阳性反应;巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。