亲和载体的制备
1.先于载体粒子上嫁接间隔臂后, 再共价结合亲和配基;
2.间隔臂与亲和配基共价结合后, 与载体粒子相连。
3.3分离过程
(1)亲和载体与蛋白质→复合体 这一技术是生物化学、化学工程和生物工程等多门学科的前沿交叉点,它将亲和层析和膜过滤特别是超滤技术有机地结合起来,兼有
3.1 原理
3 亲和-膜过滤
亲和-膜过滤又称亲和过滤或亲和错流过滤 (Affinity Cross-Flow Filtration),是一种新型大 规模分离纯化技术。这一技术是生物化学、化学工程和 生物工程等多门学科的前沿交叉点,它将亲和层析和膜 过滤特别是超滤技术有机地结合起来,兼有亲和层析和 膜过滤的优点,从而成为目前研究的热点。
2 亲和膜分离技术
2.1 原理
亲和膜分离是利用亲和配基 修饰的微滤膜为亲和吸附介 质亲和纯化目标蛋白质,是 亲和层析的变型,又叫膜亲 和层析。
2.2 特点
传质阻力小、压力小、配基 利用率高、流速快
亲和膜分离原理
2.3 亲和膜分离过程
(1) 分离膜的改性-一个间隔臂(Spacer), ≥3C (2 )亲和膜制备-一个适合的亲和配基(Ligand) (3 )亲和络合 -配基和配位物(Ligate)为一体的复 合物(Complex) (4 )洗脱-改变条件,如洗脱液的组成、pH值、离 子强度、温度等,使复合物产生解离,并将解离物收 集起来,进一步处理。 (5 )亲和膜再生-将解离后的亲和膜进行洗涤、再 生、平衡,以备下次分离操作时再用。
第章膜亲和过滤
1.生物亲和作用
1.1亲和作用的本质
具有亲和作用的分子对具有“钥匙”和“锁孔”的关 系,在结构互补的部位通过静电作用、氢键、疏水相 互作用、配位键、弱共价键相互结合。