胰蛋白酶酶解文蛤的工艺条件

文蛤在不同条件下营养成分的测定、蛋白提取及酶解研究
的开题报告
一、选题背景
文蛤是一种广泛分布于中国沿海地区的重要经济贝类资源，具有营养丰富、味美味鲜、适口性好等特点，被广泛用于食品加工和药物开发等领域。

营养成分是衡量一种食品品质的重要指标，而蛋白质作为其中重要的营养成分之一，具有很高的营养价值和功能性，成为近年来研究的热点之一。

因此，对文蛤的营养成分和蛋白质特性研究已成为当前的研究重点。

二、研究目的
本研究主要旨在探究不同条件下文蛤的营养成分变化规律及蛋白质的提取和酶解特性，为文蛤的食用和药物开发提供参考。

三、研究内容
1. 不同条件下文蛤营养成分测定：采用常规化学测定方法，测定文蛤在盐度、温度、养殖时间等条件下的蛋白质、氨基酸、脂肪、矿物质、维生素等营养成分的含量变化，探究其变化规律和影响因素。

2. 文蛤蛋白质提取和纯化：采用离子交换色谱、凝胶过滤等方法，对文蛤蛋白进行提取、分离和纯化，并采用SDS-PAGE电泳分析方法，分析提取蛋白质的分子量和组成。

3. 文蛤蛋白质酶解：采用不同酶处理文蛤蛋白质，观察不同酶的酶解效果和其产物的理化性质。

同时采用液相色谱法（HPLC）和质谱分析法（MS）等方法，分析酶解产物的氨基酸组成和结构。

四、研究意义
本次研究将进一步探究文蛤的营养成分和蛋白特性，为其进一步的开发利用提供了理论和实践基础。

同时，研究结果可为海产品食品工程领域人员提供指导思路和参考依据。

文蛤年龄的研究
张建中;李复雪
【期刊名称】《水产学报》
【年(卷),期】1988(012)003
【摘要】本文采用透光法鉴定文蛤的年龄．当贝壳在光透射下，条纹清晰显出。

贝壳的亮带形成是在5月至10月，暗带则在10月至翌年的5月间形成。

不同年龄组的亮带和暗带形成的时间没有差别。

通过贝壳的亮、暗分界线，可以判断文蛤的年龄。

【总页数】8页(P251-258)
【作者】张建中;李复雪
【作者单位】山东海洋学院水产系;厦门大学海洋系
【正文语种】中文
【中图分类】S968
【相关文献】
1.胰蛋白酶酶解文蛤制备文蛤多肽的研究 [J], 冷波;陈芸芸;郑艺梅;卢燕;黄妇仔
2.文蛤的养殖技术之一潮间带文蛤网围养殖技术的研究 [J], 李金明;陈胜林;王立群;蔺和平;王涛
3.文蛤（Meretrix Meretrix）凝集素（MML）的初步研究：I.MML在文蛤体... [J], 赵景东;苏拔贤
4.中国刑事责任年龄制度和英美法系刑事责任年龄制度“恶意补足年龄”的对比研究 [J], 孙承程
5.文蛤增养殖技术讲座第七讲文蛤弗尼斯弧菌病的研究与防治技术 [J], 于志华
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文蛤化学成分与药理作用研究进展作者：杜正彩等来源：《安徽农业科学》2014年第02期摘要文蛤是一种传统的海洋中药，文蛤壳入药已有2 000多年的历史。

通过查阅国内外近20年的相关文献，对文蛤化学成分及药理作用的研究进展进行了综述，旨在为其进一步开发利用提供科学依据。

关键词文蛤；化学成分；药理作用中图分类号S966.1文献标识码A文章编号0517-6611（2014）02-00439-03文蛤（Meretrix meretrix Linnaeus）又称为花蛤、海蛤、黄蛤、蛤蛎，为软体动物帘蛤科（Veneridae）文蛤属的海产经济贝类。

文蛤素有“天下第一鲜”的美称，不仅营养丰富，而且药用价值也较高。

文蛤的药用部位包括外层贝壳与壳内肉质2个部分，古代以贝壳入药为主，现代对肉质部分的研究较多。

文蛤作为一种海洋传统中药，其药用历史已有2 000多年，早在《神农本草经》中就有关于文蛤壳的记载，称其“主恶疮饰，五痔”。

《本草经疏》记载：“文蛤能消散上下结气，故主咳逆胸痹腰痛胁急也”。

《长沙解药》记载：“文蛤，清金利水解渴除烦，化痰止咳，软坚消痞”。

清代汪昂的《本草备要》中也有文蛤除瘤的记载，在民间流传有“海蛤治癌”的秘方。

《广西海洋药物》中归纳文蛤壳具有“软件散结、清热化痰、止咳、利湿之功效，主治口渴烦热、咳嗽气喘、咳逆、胸痹、瘰疬、痰核、咯血、崩漏带下、痔瘘等病症”[1]。

文蛤在我国北至辽宁、南至广西、广东、海南等沿海地区均有分布，是我国沿海传统养殖的主要经济贝类之一[2]。

基于此，笔者对近年来对文蛤化学成分及药理作用研究进展进行了综述。

1化学成分文蛤中含有多种活性天然产物和许多重要化合物，如蛋白质、多肽、多糖、核酸、甾醇、牛磺酸类化合物等[3]。

另外，文蛤还富含EPA和DHA等多烯不饱和脂肪酸以及人体易吸收的各种氨基酸和维生素及丰富的矿物质（Na、K、Ca、Mg）和微量元素（Fe、Zn、Cu、Cr）等[4]。

测序级胰蛋白酶生产工艺测序级胰蛋白酶是一种重要的酶制剂，广泛应用于生物医药、食品工业、环境保护等领域。

本文将从生产工艺的角度介绍测序级胰蛋白酶的制备过程。

一、胰蛋白酶的来源与提取胰蛋白酶主要来源于动物胰腺组织，常用的动物包括猪、牛等。

提取胰蛋白酶的方法通常包括以下几个步骤：1. 动物胰腺的收集：选择健康的动物，将其胰腺收集起来。

在收集过程中，要保证胰腺组织的新鲜度，避免组织受到损伤。

2. 组织的粉碎：将收集到的胰腺组织进行粉碎，可以采用机械研磨或者酶解的方法。

粉碎的目的是使胰蛋白酶能够更好地释放出来。

3. 蛋白质的溶解：将粉碎后的胰腺组织加入适量的缓冲液，进行蛋白质的溶解。

常用的缓冲液包括磷酸盐缓冲液、氯化钠溶液等。

4. 蛋白质的分离：通过离心等方法，将溶解后的蛋白质与残渣分离开来。

分离后的蛋白质溶液即为胰蛋白酶的提取液。

二、测序级胰蛋白酶的纯化与精制提取液中的胰蛋白酶通常还存在着其他的蛋白质、杂质等物质，需要进行纯化和精制。

常用的纯化方法包括以下几种：1. 盐析法：利用胰蛋白酶与其他蛋白质在盐浓度不同的条件下溶解性的差异，通过逐渐增加盐浓度来分离纯化胰蛋白酶。

2. 层析法：利用胰蛋白酶与其他蛋白质在固定相上的相互作用差异，通过选择性地吸附、洗脱等步骤，使胰蛋白酶得以纯化。

3. 电泳法：利用胰蛋白酶与其他蛋白质在电场中的迁移速度差异，通过电泳分离来纯化胰蛋白酶。

纯化后的胰蛋白酶还需要进行精制，以获得测序级的制剂。

精制的过程中通常包括以下几个步骤：1. 去除胰蛋白酶中的核酸：利用核酸酶将胰蛋白酶中的核酸降解，从而减少核酸对测序的影响。

2. 去除胰蛋白酶中的蛋白酶抑制剂：胰蛋白酶抑制剂会降低胰蛋白酶的活性，因此需要通过抗蛋白酶抑制剂的方法将其去除。

3. 调节pH值和温度：胰蛋白酶的活性受到pH值和温度的影响，因此需要将其调节到适宜的范围内。

三、测序级胰蛋白酶的质量控制生产测序级胰蛋白酶的过程中需要进行严格的质量控制，以确保最终产品的质量符合要求。

细胞因子原液肽图分析（胰蛋白酶裂解法）标准操作规程依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。

范围：适用于细胞因子原液的检定。

目的：对细胞因子原液进行肽图分析。

原理：因胰蛋白酶能选择地水解蛋白质中由赖氨酸Lys或精氨酸Arg的羧基所构成的肽链，所以用胰蛋白酶将目的蛋白水解成各特异肽段，用反相柱在乙腈的梯度洗脱条件下将各肽段加以分离鉴定。

内容：1 材料1．1样品：经二人核对批号后测定。

1．2试剂TRCK处理的胰蛋白酶（sigma）；碳酸氢铵 NH4HCO3分析纯三氟乙酸 CF3COOH 分析纯乙腈 CH3CH2CN 色谱纯冰乙酸 CH3COOH 分析纯1．3对照品: 由中国药品生物制品检定所提供。

1．4注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。

1．5其它材料0.2ml进样器、硫酸纸、吸球。

1．6仪器、设备反向HPLC：C8或C18色谱柱Waten™486紫外-可见检测器680梯度控制器Waters 510型高压液相色谱泵电脑打印机扭力天平，TN100B型1．7器皿量筒1000ml、500ml、200ml；玻璃瓶500ml、1000ml；胶栓；三角瓶1000ml；以上均由本室洗刷组处理干净。

2 方法2．1准备工作2．1．1工作环境：控制区确认场地清场合格，摘下“清场合格”标志牌,挂上“使用中”标志牌。

2．1．2调试仪器设备反向HPLC：C8或C18色谱柱，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。

Waten™486紫外-可见光检测器，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。

680梯度控制器，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。

Waters 510型高压液相色谱泵，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。

电脑打印机，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。

2．1．3配液2．1．3．1 1%碳酸氢铵，1000ml用扭力天平准确称取10克NH4HCO3，加注射用水至1000ml，注入1000ml三角瓶中，套上牛皮纸帽，二人复核，贴签，标明溶液的名称、浓度、体积、批号、配制日期，室温放置。

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酶法水解文蛤肉的研究
黄筱萍;刘兰
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】1996(017)009
【摘要】以海产文蛤肉为原料，用酶水解获得复合氨基酸水解液。

水解液中含有
１８种氨基酸，牛磺酸，多种维生素及微量元素，酶水解的最适条件为：水解时间４－６ｈ、温度５０－５５℃，初始ｐＨ７．０，酶添加量１．５－２．０％。

酶解后，游离氨基酸含量可达５４．６２ｍｇ／ｇ鲜文蛤肉，其中必需氨基酸占５０％以上，牛磺酸为２６６ｍｇ／ｇ鲜文蛤肉，蛋白质的水解率为５６．７８％。

【总页数】4页(P21-24)
【作者】黄筱萍;刘兰
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】TS254.1
【相关文献】
1.文蛤闭壳肌酶法水解工艺研究 [J], 姚宏亮;颜玉华;杨勇胜;李宏丽;陈娟
2.酶法水解猪血红蛋白制备肉味香精的研究 [J], 陈能飞;丁霄霖
3.酶法水解牡蛎肉及其制品的研究 [J], 闫亚梅;卢长润
4.酶法水解牡蛎肉及其制品的研究 [J], 闫亚梅;卢长润
5.文蛤肉酶法水解条件的优化及最适蛋白酶的选择 [J], 林娈;陈丽娇;董乐
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中性蛋白酶酶解红岛蛤蜊工艺研究作者：冯金晓,袁昊来源：《现代食品》 2019年第22期冯金晓，袁?昊（青岛工学院食品工程学院，山东?青岛?266300）Feng Jinxiao, Yuan Hao(College of Food Engineering, Qingdao University of Technology, Qingdao?266300, China)摘?要：以红岛蛤蜊为研究对象，以酶解液中氨基态氮含量为指标，比较了3种蛋白酶的酶解效果，结果表明中性蛋白酶的酶解效果最佳。

在此基础上，研究了中性蛋白酶添加量、酶解温度、酶解时间3因素对红岛蛤蜊酶解程度的影响。

通过单因素试验及正交试验确定了中性蛋白酶酶解红岛蛤蜊的最优条件为：加酶量1.25%，酶解温度为55 ℃，酶解时间为3 h。

在此条件下，酶解液中氨基态氮含量为1.094 g/100 g。

感官评定结果表明：此酶解液透明度高，腥味较小，风味良好。

关键词：红岛蛤蜊；中性蛋白酶；酶解Abstract：Taking red island clam as raw material and amino nitrogen content in enzymolysis solution as index, the enzymolysis effect of three kinds of protease on raw material was compared. The results showed that neutral protease had the best enzymolysis effect. On this basis, the effects of neutral protease addition, temperature and time on the degree of enzymatic hydrolysis were studied. The optimum conditions of enzymatic hydrolysis of red island clam with neutral protease were determined by single factor test and orthogonal test: enzyme addition was1.25%, temperature was 55 ℃ and the enzymolysis time was 3 hours. Under these conditions, the content of amino nitrogen in the hydrolysate was 1.094 g/100 g. The sensory evaluation results showed that the hydrolysate had high transparency, less fishy smell and good flavor.Key words：Hongdao clam; Protease; Enzymatic hydrolysis中图分类号：TS254红岛蛤蜊皮薄、肉嫩、味道鲜美，具有高蛋白、高微量元素、高铁、高钙以及少脂肪的营养特点[1-2]。

pH和温度对毛蚶蛋白酶和淀粉酶影响的初步研究作者：王英光，周海龙来源：《河北渔业》 2013年第3期王英光，周海龙（滦南县水产技术推广站，河北滦南 063500）1材料与方法1.1样品采集在农贸市场购买新鲜的活毛蚶10只，选取体型较大的毛蚶：每只体长5～6 cm以上，整重40 g以上。

1.2 粗酶提取液制备1.2.1蛋白酶粗酶提取液制备取成年健康样品毛蚶5只，测定其形态特征（体长、体宽、体高、重量），如表1所示。

（5组平行实验，每组1只）。

将表1中的5只实验毛蚶在冰块上解剖，用解剖针打开毛蚶，切断其闭合肌，由于肝胰脏包裹着胃部，遂剖开肝胰脏后找到胃部，再剖开胃部，用解剖针刮出其胃部内容物，再取肝胰脏混合物。

取2支小试管，编号1，2，称重1号：18.82 g，2号：16.87 g，将从肝胰脏中取出的内容物放入1号试管中，将从胃部中取出的内容物放入2号试管中，加入样本后的重量是1号：19.83 g，2号：17.54 g，所以，所得的肝胰脏样本质量为1.01 g，胃部内容物质量为0.67 g，所得样品分别在冰水浴中捣碎，匀浆，匀浆完成后转移回原试管，在0～4 ℃下抽提20～24 h。

冷冻离心20 min(10 000 r/min) 获得组织匀浆上清液即为粗酶提取液，置于4 ℃条件下保存，并于24 h内分析完毕。

1.2.2淀粉酶粗酶提取液制备取剩余的成年健康样品毛蚶5只，测定其形态特征（体长、体宽、体高、重量），如表2所示。

（5组平行实验，每组1只）。

将表2中的5只实验毛蚶在冰块上解剖，用解剖针打开毛蚶，切断其闭合肌，由于肝胰脏包裹着胃部，遂剖开肝胰脏后找到胃部，再剖开胃部，用解剖针刮出其胃部内容物，再取肝胰脏混合物。

取2支小试管，编号1，2，称重1号：16.92 g，2号：17.03 g，将从肝胰脏中取出的内容物放入1号试管中，将从胃部中取出的内容物放入2号试管中，加入样本后的重量是1号：17.92 g，2号：18.35 g，所以，所得的肝胰脏样本质量为1.00 g，胃部内容物质量为1.32 g，所得样品分别在冰水浴中捣碎，匀浆，匀浆完成后转移回原试管，在0～4 ℃下抽提20～24 h。

木瓜蛋白酶酶解制备红岛蛤蜊肉多肽工艺的优化孙晓东;谭书明【摘要】为获得具有海鲜风味的小分子肽用于功能性食品或调味料中,以红岛蛤蜊肉为原料,综合氨基态氮含量和腥味等指标,筛选出适宜的酶解工艺,并制备出风味鲜美,营养卫生的酶解液.结果表明:经成分测定,蛤蜊肉中脂肪含量为20.01 g/100g,蛋白质为30.36 g/100g,属于高蛋白低脂肪水产品;利用木瓜蛋白酶对红岛蛤蜊肉进行酶解的最佳工艺为酶解时间4h、木瓜蛋白酶加酶量8 000U/g、酶解温度65℃、初始pH 7.0,该条件下红岛蛤蜊肉酶解液中氨基态氮含量为0.430 g/100mL,得到的酶解液颜色淡黄、腥味较小、酶解液澄清、无细小颗粒物质,可作为风味调料的原料应用.%The enzymatic hydrolysate with a delicious flavor,nutrition and health from clam meat was obtained by the selected appropriate papain enzymolysis process according to the indexes of amino nitrogen content and fishy smell comprehensively to acquire small molecule peptide with a seafood flavor for functional foods and spices.Results:The fat and protein content in clam meat is 20.01 g/100g and 30.36 g/100g respectively,which indicates clam meat is an aquatic product with higher protein and low fat content.The optimum technological conditions for enzymolysis of clam meat include 4 h enzymolysis,8 000 U/g papain,initial pH 7.0 and 65℃.The amino nitrogen content in enzymatic hydrolysate of clam meat can reach 0.430 g/100mL under the optimum technological conditions.The clear enzymatic hydrolysate with yellowish color and less fishy smell and without fine granular matters can be used as a raw material for flavor spices.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2017(045)002【总页数】4页(P146-149)【关键词】词]蛤蜊;木瓜蛋白酶;酶解;氨基态氮【作者】孙晓东;谭书明【作者单位】贵州农畜产品贮藏加工重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】S986.1;TS254.4蛤蜊又名蛤，有花蛤、文蛤、毛蛤等品种，属于软体动物门(Mollusca)。

文蛤养殖实用技术
骆文宗
【期刊名称】《渔业致富指南》
【年(卷),期】2003(000)002
【摘要】文蛤是一种经济价值较高的海产贝类,其肉嫩味鲜,营养丰富,为蛤中上品,享有“天下第一鲜”的盛誉,是我国大宗出口的鲜活水产品之一。

广西合浦县地处北部湾畔,所辖海区水质清新,无污染,海水盐度适中,生物饵料丰富,出产的文蛤肉质肥嫩,深受国内外客商的青睐。

作为我国文蛤主产区之一。

【总页数】2页(P40-41)
【作者】骆文宗
【作者单位】广西壮族自治区舍浦县水产畜牧局，536100
【正文语种】中文
【中图分类】S968.317
【相关文献】
1.胰蛋白酶酶解文蛤制备文蛤多肽的研究 [J], 冷波;陈芸芸;郑艺梅;卢燕;黄妇仔
2.短文蛤和斧文蛤肉的营养成分分析与比较 [J], 余海;张炯明;张问;杨文鸽
3.文蛤30个微卫星标记的开发及在斧文蛤和帘文蛤中的通用性检测 [J], 齐晓艳;董迎辉;姚韩韩;周小龙;林志华
4.文蛤属2种贝类多变量形态分析及日本文蛤的物种有效性 [J], 吴杨平;姚国兴;陈爱华;张志伟
5.文蛤养殖实用技术 [J], 骆文宗
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。