菌落总数不确定度

关于编号为2011-QW504米粉中菌落总数不确定度评估报告1 目的评估编号为2011-QW504米粉中菌落总数的不确定度。

2 依据GB 4789.2-2010 食品微生物学检验菌落总数的测定3 适用范围食品中菌落总数的测定4 方法概要4.1样品制备在无菌环境下称取25g样品，加入225mL生理盐水（0.85%）无菌稀释液，8000r/min均质1~2min，制成1：10样品匀液。

4.2 样品稀释用无菌移液管吸取1mL上述稀释液于事先加有9mL无菌生理盐水的无菌试管中，摇匀，制成1：100的样品匀液。

按同样的方法制成1：1000的样品匀液，每个稀释度各取1mL稀释液加入无菌空培养皿中，并作两个平行。

4.3 培养及时将15~20 mL46℃琼脂倒入培养皿中，旋转摇匀。

琼脂凝固后放于36±1℃培养箱中培养48±2h。

4.4 菌落计数手工计数培养所得菌落数或菌落计数器记录菌落数量。

5 数学模型Y=x6 不确定度识别及计算6.1 不确定度来源分析按照上述数学模型及方法概要，其不确定度主要来源有以下3方面：①稀释过程引入的标准不确定度u1；②加样体积的标准不确定度u2；③测量结果重复性的标准不确定度u3。

6.2 稀释过程引入的标准不确定度u11 mL移液管（A级）最大允许误差MPE=±0.008 mL，按矩形分布，k=31/2，其标准不确定度u1v=0.008/31/2=0.0046mL；无菌室温度控制在20±5℃，查相关手册得知水的体积膨胀系数为2.1×10-4/℃，按矩形分布，k＝31/2，则温度对移液管的不确定度分量u1t＝1×5×2.1×10－4/31/2＝0.00061mL。

一次稀释过程引入的不确定度u1＝（u1v2＋u1t2）1/2＝0.0046mL，本实验最多有3次稀释过程，则u1rel＝31/2×u 1/1=0.0080。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中的微生物污染是影响食品安全的重要因素之一。

为了保障食品的质量和安全，需要对食品进行微生物指标的测定。

食品中菌落总数的测定是最常见的指标之一。

本文将介绍食品中菌落总数的测定和不确定度分析。

二、方法1. 实验材料和仪器（1）实验材料：待测食品样品、平板计数培养基、无菌培养皿、无菌移液器、无菌培养基平板。

（2）实验仪器：恒温培养箱、计数板。

2. 测定步骤（1）将待测食品样品进行消毒处理，常用的消毒方法有热处理、酸碱处理等。

（2）准备培养基：将平板计数培养基加热至溶解，然后冷却至约45℃。

（3）将样品取约1g加入到无菌培养皿中。

（4）将培养基翻匀到无菌培养皿中，使其覆盖整个培养皿。

（5）将培养皿倒置放入恒温培养箱中，以适当的温度和时间进行培养。

（6）取出培养皿，使用计数板进行菌落计数。

三、结果与讨论1. 结果分析通过菌落计数，可以得到食品中菌落总数的数值。

通常情况下，食品中菌落总数应该符合国家标准或行业标准的规定。

2. 不确定度分析（1）实验误差：实验操作中的误差包括称量误差、计数误差等。

（2）装载量误差：由于不同的操作人员在装载培养皿过程中的个体差异，导致结果的误差。

（3）样品取样误差：由于样品取样的位置不同，导致结果的误差。

（4）环境误差：实验环境的温度、湿度等因素对结果会产生一定影响。

根据以上误差来源，可以进行不确定度的计算和分析。

常用的不确定度计算方法有合成不确定度法和扩展不确定度法。

四、结论通过菌落计数技术，可以对食品中的菌落总数进行测定。

在测定过程中，需要注意控制实验误差，并分析不确定度以评估结果的可靠性。

五、参考文献。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析菌落总数是指在特定培养条件下，一定量的样品中培养出的所有菌落的总数。

它可以反映食品样品的微生物污染程度，是食品安全检测中常用的指标之一。

食品中菌落总数的测定方法一般采用平板计数法，但在测定过程中会受到不确定度的影响。

一、菌落总数测定方法1.取样：取适量食品样品，根据国家标准要求在不同的质量级别下取样不同的量。

2. 制备培养基和平板：按照相应的食品行业标准的要求制备好培养基，并按照制备方法制备好平板。

3. 滴接法：将样品滴于平板上，在平板上均匀涂布后置于恒温箱中培养一定时间，然后计算出每个平板上所培养出的菌落数量。

测量结果不可避免地存在误差，因此测量结果带有一定的不确定度。

菌落总数的不确定度主要涉及到两个方面：1.实验误差：包括人为误差、器材误差、操作方法等影响因素。

在实验过程中要尽可能地减少这些误差。

2.样品变异性：同一批食品样品中，不同样品可能存在微生物数量的差异，导致菌落总数的测量结果具有不确定性。

三、不确定度的分析和评估不确定度的分析和评估是检验结果可靠性的重要指标。

按照ISO/IEC 17025标准要求，制定有效的不确定度评估方案，定期进行实验验证，以确保菌落总数测定结果的可靠性。

1.不确定度的计算：应按照GB/T 16161等国家标准制定的方法进行测量误差和样品变异性的计算，并进行不确定度组成的分析和评估。

2.评估结果的有效性：对于不确定度的评估结果应进行合理的统计分析，确定合适的置信度，以提高菌落总数测定结果的可靠度和准确性。

3.改进措施：对于不确定度评估结果存在较大误差的情况，应采取相应的改进措施，以提高测量结果的准确度和可靠性。

四、总结。

分析检测食品中菌落总数检测的不确定度评定刘　黎，徐清溪，肖常国，郑　惠（青岛市黄岛区市场监督管理局，山东青岛 266500）摘　要：本文对标准方法《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》（GB/T 4789.2—2022）的测量不确定度进行了分析与评定。

根据方法的原理和操作步骤建立了相应的数学模型，找出了不确定度的主要来源，计算了每个测量不确定度分量，并对总的不确定度进行了合成。

评价结果表明，培养基、培养温度和时间等是影响测试结果的主要因素，因此相关操作人员需要在试验中注意对各种因素的控制，提高检测结果的准确性。

关键词：不确定度评定；菌落总数；食品Evaluation of Uncertainty in the Detection of Aerobic BacterialCount in FoodLIU Li, XU Qingxi, XIAO Changguo, ZHENG Hui(Qingdao Huangdao District Market Supervision and Administration Bureau, Qingdao 266500, China)Abstract: In this paper, the uncertainty of the determination of the total bacterial count in food by the method of GB/T 4789.2—2022 was analyzed and evaluated. According to the principle and operation steps of the method, a corresponding mathematical model was established to identify the main sources of uncertainty, calculate each measurement uncertainty component, and synthesize the total uncertainty. The evaluation results indicate that culture medium, culture temperature, and time are the main factors that affect the test results. Therefore, relevant operators need to pay attention to controlling various factors in the experiment to improve the accuracy of the test results.Keywords: uncertainty; aerobic plate count; food测量不确定度是评定实验室检测水平的重要指标，常用来表征实验室数据的可靠性，以及评定不同实验室数据间的可比性[1]。

水质检测中菌落总数测定的不确定度评定摘要：目的：为了减少实验误差，提高检测的精确度，评定水质检测中菌落总数的不确定度，确定水样的置信区间。

方法：对于某一水样，根据GB/T 5750.12—2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》和CCBLAC/AG05附录规定的方法进行检测，采用对数的平均值评定菌落总数的不确定度。

结果：该水样本次检测结果的置信区间为（1400—1700）CFU/ml。

结论：根据本次检测结果的置信区间说明，当菌落总数的离散程度高时，应该采用对数平均值评定菌落总数的不确定度。

关键词：菌落总数；不确定度由于测量值不可避免地会偏离准确值，因此研究不确定度变得有意义，通过不确定度表示被测量真值所处的量程范围。

在近些年来，不确定度在理化检测相对比较成熟，集中。

然而在微生物检测方面对于不确定度的评定相对较少。

因此针对在水质检测中关于微生物检测以生活饮用水为例评定菌落总数的不确定度，同时采用平均值和对数平均值的方法评定菌落总数的不确定度，比较得出结论。

1、原理与方法1.1、测试原理：不确定度定义为表征合理地赋予被测量值的分散性，与测量结果相联系的参数。

不确定度包括合并标准不确定度和扩展不确定度，通常情况下，不确定度采用扩展不确定度表示。

根据CCBLAC/AG05附录规定进行菌落总数测试要求：每个样品都包含可计算得出数目的微生物；在实验室由不同人员按照规定的测试方法进行一段时间的测试[1]，测试样品是均匀的，每个样品均做平行样，必须由同一测试人员进行操作。

根据GB/T 5750.12—2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》定义，菌落总数是指水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48小时，所得1ml水样所含菌落的总数[2]。

1.2、测试方法：根据中华人民共和国国家标准GB/T 5750.12—2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》进行测试。

对于生活饮用水，菌落总数在适宜计数的范围内，应该以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋转平皿，使水样和培养基充分混匀，每次检测做一个平行样对照，同时一个平皿倾注营养琼脂培养基作为空白对照。

食品菌落总数检验中的不确定度评定
随着社会的发展，食品卫生安全越来越受到人们的重视，菌落总数检验是食品卫生安全检测中的重点部分，长期以来，检验结果的不确定度一直是有关领域关注的焦点问题[1]。

笔者通过时间研究证明，食品菌落总数检验的不确定度来源主要有培养条件、检验重复性、取样标准等，在食品菌落总数检验的结果发散性较大时，可以采用合并样本标准差的方法来计算不确定度，现将相关研究成果报告如下。

1.、原理与方法
1.1 检验原理
随机选取肉松样本20份，依据《JJF1059―1999测量不确定度评定与表示》以及《GB4789.2―2010食品卫生微生物学检验菌落总数测定》，检验样品全部质量均匀，每份检验样品中均含有一定量的微生物，检验样本中微生物含量可以计算得出[2]。

此外，所有检验样品均做平行样，并且全部由同一名操作人员来完成。

1.2 研究方法
整个检验过程保证无菌操作，取25g检验样本，加入无菌生理盐水225ml，之后将溶液放入三角瓶振摇均匀，以该溶液作为稀释剂，每个稀释度均做2个平皿，共选取3个稀释度，在稀释液中加入45℃的营养琼脂15ml，摇动均匀后做空白对照，在营
养琼脂凝结后，将平皿翻转放置与恒温箱，温度36℃，持续放置48h后检验平皿中的菌落数量，每个稀释度均计算2个平皿中菌落的平均数量，检验结果取对数，采用合并样本标准差的方法来计算检验结果的不确定度，并分析不确定度的来源。

1.3 数学模型
设检验结果为X，样本中的菌落总数为A，最佳值计算公式如下：。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析食品中细菌总数的测定和不确定度分析是食品科学与技术领域中的重要研究内容之一。

细菌总数的测定可以帮助我们了解食品的卫生状况，评估食品质量，保障公众的食品安全。

不确定度分析则是用来评估测定结果的可靠性和准确性，帮助我们判断测定结果的可信度。

食品中的细菌是以菌落的形式存在的，所以细菌总数的测定方法一般采用菌落计数的方法。

具体的步骤如下：1. 取样：从食品样品中取出适量的物质，一般是取适量食品，加入适量的生理盐水，通过均匀悬浮。

2. 稀释：将取样得到的悬浮液进行适当的稀释，以保证每个培养皿上的菌落数在可计数的范围内。

一般采用十倍的稀释系列进行稀释。

3. 接种：将稀释好的样品取适量，在无菌条件下倒入培养皿中，均匀涂布在培养基上。

4. 培养：将培养皿放入恒温箱温育，通常为30°C，培养时间一般为24-48小时。

5. 计数：培养完成后，通过裸眼或显微镜观察，根据菌落的形态、大小、颜色等特征进行计数，并将计数结果记录下来。

细菌总数的测定结果一般以CFU/g（菌落形成单位/克）为单位表示。

不确定度分析是对测定结果的评估，主要从随机误差和系统误差两方面进行分析。

随机误差是由于测定过程中的种种因素引起的结果的波动性。

在细菌总数的测定中，随机误差可能包括取样不均匀、稀释误差、接种误差等。

通过重复测定可以减小随机误差，并通过统计方法计算出标准偏差来表示测量结果的稳定性。

系统误差是由于测定方法的固有缺陷引起的结果的偏差。

在细菌总数的测定中，系统误差可能包括培养基的选择和准备、温度和湿度的控制、观察的主观判断等。

通过合理选择和优化测定条件，可以减小系统误差。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中的微生物污染是导致食品质量问题的重要原因之一。

食品中菌落总数是评价食品卫生状况的指标之一，它可以反映食品中的微生物污染程度。

准确测定食品中的菌落总数并分析其不确定度，对于保证食品安全和卫生具有重要意义。

二、理论基础菌落总数是指在一定条件下生长发育的微生物形成的菌落的总数。

通常使用平皿计数法来测定食品中的菌落总数，该方法主要包括以下几个步骤：1、样品制备：将食品样品精确称重，并加入合适的培养基中。

2、培养：将加入样品的培养基倒入培养皿中，倒平并让其凝固。

3、孵育：将培养皿放入恒温箱中，在适宜的温度条件下孵育一定时间。

4、计数：取出培养皿，使用显微镜观察并计数菌落的数量。

不确定度是测量结果与所测量实际值之间的偏差的度量，通常用标准偏差表示。

计算不确定度需要考虑到样品制备、培养、孵育过程中的误差以及人为误差等因素。

三、实验方法2、制备菌落计数平皿：将无菌琼脂糖培养基熔化，并冷却到45-50℃左右，加入适量的样品，充分混合后倒入培养皿中。

3、培养和孵育：将培养皿倒平，并在无菌条件下放置一段时间，直到琼脂糖凝固。

4、计数：将培养好的平皿放置在显微镜下，使用透明计数器或格子计数器对菌落进行计数，并记录结果。

四、结果分析根据平皿计数法所测得的菌落总数结果，计算菌落总数的平均值、标准偏差和不确定度。

标准偏差的计算公式为：s = \sqrt{\frac{\Sigma(x_i-\overline{x})^2}{n-1}}x_i为单次测量结果，\overline{x}为平均值，n为测量次数，\Sigma表示求和。

不确定度的计算公式为：U = k \times sU为不确定度，k为覆盖因子，可以参考标准不确定度表格进行选择。

五、结论通过实验测定了食品中的菌落总数，并对测量结果进行了不确定度分析。

根据实验结果，可以评估食品中的微生物污染程度，为食品安全和卫生提供科学依据。

测定结果的不确定度分析可以评价测量结果的可靠性，并为后续食品质量控制提供参考。

乳粉中菌落总数的测量不确定度评定摘要：目的菌落总数是重要的卫生质量指标之一, 建立乳粉中菌落总数的测量不确定度评定方法具有非常重要的意义,可以有效客观判定产品卫生质量指标是否真正符合标准。

根据RB/T 151-2016 《食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南》、GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》作为依据，对乳粉中菌落总数的不确定度来源进行分析, 保证测试样品均匀，每个样品都含可计数的微生物。

[1]每个样品均做平行样，由同一操作员进行操作，测试完成后得到的测试结果取对数。

结果乳粉中菌落总数的扩展不确定度为 0.040(以对数计)。

关键词：乳粉；菌落总数；测量不确定度实验部分1.实验原理[2]食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g检样中形成的微生物菌落总数。

2.样品市售奶粉3.仪器设备恒温培养箱SPX-250，YXQ-LS-70A型高温蒸汽灭菌锅，生物安全柜BSC-1000IIA2，无菌均质器SCIENT-11L，电子天平YP120N4.培养基PCA，北京陆桥，2002245.方法与结果分析5.1菌落总数检验过程图，见图1。

图1 菌落总数检验过程图5.2不确定度来源分析不确定度的来源包括重复性(测试环境、培养时间、培养温度、修约、样品的均匀性、取样的重复性、人员的计数)、培养条件(培养时间允差、培养适度的允差)、取样(稀释体积、取样体积)等，根据RB/T 151-2016 《食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南》不考虑偏倚，采用统计学的方法评定测量不确定度。

5.3重复测量结果将10个样品的平行检验结果取对数后进行分析，结果见表1。

表1 检验结果及分析[3]5.4再现性标准差为：5.5扩展不确定度5.6报告结果当检测结果的扩展不确定度为 0.040，其样品菌落总数测试结果报告见表2。

分析与检测月饼中菌落总数测定结果不确定度的评估□林景兰广东省湛江市质量计量监督检测所摘要：本文旨在建立月饼中菌落总数检测结果的不确定度的评定方法。

方法：依据GB4789.2-2016《食品安全国 家标准食品微生物菌落总数测定》进行测定和结果判断，再根据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示的规定》以及参考其他相关文献，对本实验室菌落测定过程引入的不确定度进行分量评定。

结果：依据所采用的方法，得出两份样品 结果分别为（1.6〜1.8) X l〇3CFU/g(k=2)和（2.6~2.8) X l〇3CFU/g(k=2)。

结论：本文所采用的评定方法，是对月 饼中菌落总数加测结果不确定度的评定方法，也可以应用于日常工作中其他产品的菌落总数不确定度评定。

关键词：月饼；菌落总数；不确定度；评估月饼是使用面粉等谷物粉、油、糖或不加糖调制成饼皮，包裹各种馅 料，经加工而成，在中秋节食用为主 的传统节日食品。

其微生物污染指标 深受广大民众关注，菌落总数主要作 为判定样品被污染程度的标志，所以 对菌落总数的测定及不确定度的评估 极其必要。

一切测量结果都不可避免 的具有不确定度，菌落总数测定也具 不确定度[1]。

本文依据JJF1059.1- 2012《测量不确定度评定与表示的规 定》GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物菌落总数测定》对月 饼菌落总数不确定度进行评估。

1材料与方法1.1材料本次实验两份样品为市售购买，分别设为&和^。

平板计数琼脂（北京陆桥技术股 份有限公司）、立式压力蒸汽灭菌器（立 德泰勅科学仪器有限公司，型号LT-CPS80C)、全自动隔水恒温培养箱（上 海智城分析仪器制造有限公司，型号 ZGP-2080)、电热鼓风式恒温干燥箱（重 庆试验设备厂，型号CS101-1EB)、电 子天平（1/100)(上海恒平科学仪器 有限公司，型号MP500B)、显微镜（菜 卡，型号DM750)。