菠萝蛋白酶
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菠萝蛋白酶结构
【实用版】
目录
1.菠萝蛋白酶的概述
2.菠萝蛋白酶的结构
3.菠萝蛋白酶的应用领域
4.菠萝蛋白酶的使用方法
5.菠萝蛋白酶的安全性和注意事项
正文
菠萝蛋白酶是一种从菠萝植物中提取的蛋白质水解酶,其分子量为33000,等电点为 9.55。
这种酶广泛存在于菠萝果实、芽、叶、茎中,并最早在 1957 年作为一种治疗性成分被发现。
菠萝蛋白酶不仅具有蛋白水解酶系,还含有磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶及非蛋白物质。
菠萝蛋白酶的结构是由分子质量 33000 酪素、血红蛋白、baee 的最佳 ph 值为 68,而明胶则为 50。
重金属可以抑制酶的活性。
在水中稍溶,在乙醇,丙酮,氯仿和乙醚中不溶。
其在碱基或芳香族氨基酸的羧基侧优先水解肽链,选择性水解纤维蛋白,可分解肌纤维,但对纤维蛋白原不敏感。
菠萝蛋白酶的应用领域包括啤酒澄清、药效助消化、消炎消肿等。
在食品、医药及生物等行业都有广泛的应用。
使用方法为将菠萝蛋白酶添加到需要澄清的啤酒中,酶解蛋白质,使啤酒澄清。
对于助消化方面,菠萝蛋白酶可在胃里分解蛋白质,帮助人体对蛋白质食物的消化和吸收。
对于消炎消肿方面,菠萝蛋白酶可以抑制炎症反应,缓解肿胀。
使用菠萝蛋白酶时需要注意其安全性。
虽然菠萝蛋白酶是一种天然的、
无毒、无副作用的酶,但是在使用时仍需注意其用量,过量使用可能会引起不适。
菠萝蛋白酶最佳温度菠萝蛋白酶是一种存在于菠萝中的酶,它在菠萝成熟过程中发挥着重要的作用。
菠萝蛋白酶最佳温度是指在哪个温度下,菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。
菠萝蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶,其存在于菠萝的果肉和果汁中。
菠萝蛋白酶主要由两种蛋白质组成,分别是菠萝蛋白酶A和菠萝蛋白酶B。
这两种酶在酸性条件下最为活跃,而在碱性条件下则会失去活性。
菠萝蛋白酶的最佳温度一般在50-60摄氏度之间。
在这个温度范围内,菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。
当温度低于50摄氏度时,菠萝蛋白酶的活性会显著降低,酶的催化效率也会明显下降。
而当温度超过60摄氏度时,菠萝蛋白酶的蛋白结构会发生变性,使其失去催化活性。
菠萝蛋白酶的最佳温度与菠萝生长环境有关。
菠萝生长在热带和亚热带地区,这些地区的气温较高,因此菠萝蛋白酶的最佳温度也相对较高。
菠萝在生长过程中,果实会经历成熟的过程,而菠萝蛋白酶在果实成熟过程中发挥着重要的作用。
菠萝蛋白酶在果实成熟过程中的作用是将果肉中的蛋白质水解为小分子肽和氨基酸,使果肉变得更加软化和甜美。
这个过程中,菠萝蛋白酶的最佳温度能够保证酶的催化效率最高,使果肉的变软和甜味的形成达到最佳状态。
菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关。
菠萝蛋白酶的结构中含有许多氨基酸残基,这些氨基酸残基的空间构型和电荷状态对酶的活性起着关键作用。
在最佳温度下,菠萝蛋白酶的氨基酸残基的构型和电荷状态能够达到最佳状态,从而使酶的催化效率最高。
除了最佳温度外,菠萝蛋白酶的活性还受到其他因素的影响,比如pH值、金属离子和抑制剂等。
在不同的pH值下,菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所不同。
在不同的金属离子存在下,菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所变化。
而一些特定的抑制剂则可以抑制菠萝蛋白酶的活性。
总结起来,菠萝蛋白酶的最佳温度是在50-60摄氏度之间。
这个温度范围内,菠萝蛋白酶的活性能够达到最高,果肉变得更加软化和甜美。
菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关,同时也受到其他因素的影响。
菠萝蛋白酶提取一、实验目的:1、了解菠萝蛋白酶的提取和纯化工艺2、优化和加深熟悉菠萝蛋白酶提取技术二、实验原理:菠萝蛋白酶(Bromelain,简称菠萝酶,亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来,经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。
其外观为浅灰色粉末状,分子量为33000 ,等电点为9.55 。
品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。
产品已被广泛应用于食品、医药等行业。
结果表明。
提取菠萝中菠萝蛋白酶最佳提取工艺条件是添加单宁溶液的浓度为0.2%,提取时最适pH值为6.5~8.5左右,而最适提取温度为60℃。
菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化,啤酒澄清,还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。
在医药上它可以治疗水肿及多种炎症;它能迅速溶痂,对正常组织无害,不影响植皮,适用于中小面积深度烧伤的治疗。
三、实验步骤操作要点:菠萝蛋白酶的提取称取1 kg制备好的鲜果皮汁,加5%苯甲酸钠溶液10 ml搅匀,以4 000 r/min离心7 min,取上清液倒人干净烧杯中。
上清液分装在6个小烧杯中,每个装100 ml菠萝汁,分别缓缓加入空白、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.6%单宁溶液10 ml,边加边拌约1 5min,沉淀物析出,静止40 min。
虹吸除去上清废液,把酶复合沉淀物倒入离心杯中,以4 000 r/min。
离心5 min,倒掉上清废液,得到酶糊复合物。
分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中,加0.1%EDTA溶液100 ml搅匀,再将1.5%氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀,以4 000 r/min离心7 min,倒掉上清废液,得到洗涤剂I酶复合沉淀物。
把洗涤剂I酶复合沉淀物倒入烧杯中,加0.5%乙酸锌溶液20 min,搅拌均匀,静止5 min,加0.06%抗坏血酸溶液30 ml,搅匀,静止5 rain,加1.5%氯化钠溶液20 ml,搅匀,静止5 min,最后再加0.5%EDTA溶液20 ml,搅匀,静止5min,以4 000 r/min离心7 min,把上清废液倒掉,得到洗涤剂Ⅱ酶复合沉淀物。
菠萝中的菠萝蛋白酶菠萝中的菠萝蛋白酶1、抑制血小板聚集;2、溶解纤维蛋白;3、消炎;4、抗肿瘤;5、调节细胞因子和免疫;6、对皮肤清创的特性;7、促进其它药物的吸收;8、溶解粘液;9、助消化;1、0促进伤口愈合;11、改善心血管循环系统。
菠萝蛋白酶口服易于吸收,有可靠的证据表明大剂量给药可以提高治疗效果。
虽然所有的相关机理还没有完全搞清楚,但菠萝蛋白酶已被证明是一种安全有效的药物。
在大鼠试验中,服用一定剂量的菠萝蛋白酶会降低血清纤维蛋白原水平,高浓度的菠萝蛋白酶维可明显延长凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血酶时间(APTT)。
一定剂量下的菠萝蛋白酶通过刺激ADP、肾上腺素、前列腺素前体,可加强抑制血小板聚集的作用。
在体内和体外,菠萝蛋白酶都是一种有效的纤维蛋白溶解剂在消炎试验中,菠萝蛋白酶和强的松有相似的消炎作用。
具有免疫刺激作用曾有专利认为菠萝蛋白酶的某一组分可用于治疗免疫系统受抑制的病症或作为疫苗佐剂。
菠萝蛋白酶具有免疫刺激作用,血液中丙种球蛋白缺乏症病人的吞噬细胞表现出对这种刺激特别敏感。
体内外的研究表明,通过对辅助细胞的刺激作用和对T细胞的直接抑制反应,菠萝蛋白酶可以增强和抑制T细胞的免疫反应。
抑制毒素分泌实验证明菠萝蛋白酶能降低毒素结合活性并能抑制热不稳定毒素、霍乱毒素及热稳定毒素的分泌效应。
用于烧伤脱痂菠萝蛋白酶能选择性地除去死皮,使新皮移植得以尽早进行。
动物实验证明,菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。
局部使用抗生素不影响菠萝蛋白酶的效果。
用其制备的菠萝蛋白酶脱痂制剂治疗深2度和3度烧伤,可在3-4小时完成脱痂。
全过程无需麻醉,脱痂十分彻底,对于功能部位的烧伤治疗具有更重要的意义。
消炎作用菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤),能在体外激活鼠巨噬细胞和自然杀伤(NK)细胞。
因此,对于免疫缺失的个体,菠萝蛋白酶具有激活炎症反应的潜力。
菠萝里面有白点是怎么回事很多人在吃菠萝的时候吃着吃着会突然的发现菠萝上面有白色的点点,如果菠萝里面有白色点点的话很多人就会担心这个菠萝是坏掉了,所以说不敢吃,看到这个菠萝里面的白点就想将里面的白点及时的去掉,因为担心白点点对身体的伤害,菠萝上面的白点点其实是有原因的,那么下面让我们来看看菠萝里面有白点到底是怎么回事?菠萝中间有白点。
这个是菠萝蛋白酶。
菠萝蛋白酶(Bromelain,简称菠萝酶,亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来,经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。
其外观为浅灰色粉末状,分子量为33000,等电点为9.55。
品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。
产品已被广泛应用于食品、医药等行业。
可以食用。
菠萝蛋白酶是用于食品添加剂。
菠萝的作用菠萝全身药用价值丰富,菠萝皮中就富含一种菠萝酶,长期食用菠萝皮,可有效降低心脑血管疾病、糖尿病、高血压以及癌症等疾病的发病率。
菠萝味甘性温,具有解暑止渴、消食止泻的功效,可清热生津、利于小便,有着与西瓜一样的解渴功效,为夏季不可多得的时令水果之一。
菠萝富含丰富的维生素B,能有效促进肌肤亮丽滋润,有一定的美容功效,还可以减肥呢!除了上述功效,其还可以提高人体免疫力,抵抗病毒入侵。
菠萝具有消炎的作用,能促进血液循环及伤口愈合。
菠萝还能够减轻咳嗽的症状,对于因为感冒导致的喉咙疾病,有着明显的治疗效果。
菠萝里面如果有白点的话,那么首先不要担心,要考虑是这些正常的因素所引起的,菠萝里面有白点到底是为什么,上面我们已经给大家介绍得很详细了,如果发现菠萝里面有白点的话可以不将这个白点消除,白点也是可以吃的,很多菠萝过度成熟了都是会有白点的发生。
菠萝蛋白酶(菠萝酶)菠萝蛋白酶编辑词条B 添加义项 ?菠萝蛋白酶是从菠萝水果皮、茎、芯等部分经生物技术制得的一种纯天然植物蛋白酶,其分子量为33000,等电点为9.55,属于疏基蛋白酶,其活动中心为疏基(-SH),能进行蛋白质水解等各种生化反应,菠萝蛋白酶是一种天然的、无毒无害,卫生安全的蛋白酶,它可广泛应用食品、医药及生物等行业。
目录1基本介绍2组成结构3理化性质4制备方法5价值应用6注意事项折叠编辑本段基本介绍菠萝蛋白酶(Bromelain),简称菠萝酶,亦称为凤梨酶或凤111梨酵素。
是从菠萝果茎、叶、皮提取出来,经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。
其外观为浅灰色粉末状,分子量为33000,等电点为9.55。
品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。
产品已被广泛应用于食品、医药等行业。
折叠编辑本段组成结构菠萝蛋白酶是由多种不同分子量和分子结构的酶所组成的酶系,其中至少包含了5种蛋白水解酶。
除此之外,有的还含磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶及非蛋白物质。
菠萝蛋白酶是一种糖蛋白,分子结构中含有一个寡糖分子,由木糖(xylose,xy1)、岩藻糖(fucose,Fuc)、甘露糖(mannose,Man)和N—乙酰葡糖胺(N—aceltylglu2cosamine,GlcNAc)组成,共价连接在肽链上,Ishihara和Yasuda等人分别推测出了糖分子的结构。
折叠编辑本段理化性质菠萝蛋白酶的分子量为30000-33000,等电点为9155,酶液的最大吸收波长为280nm。
因其由多种酶分子构成,故在催化底物上具有多样性。
它能分解蛋白质、肽、脂和酰胺,其水解蛋白的活性较木瓜蛋白酶高10倍以上。
菠萝蛋白酶催化的必需基团不是糖分子,而是所含肽链中的巯基;另外,菠萝蛋白酶分子结构中的羧基和羟基亦与酶活性无关。
菠萝蛋白酶的催化活性易受到pH、温度、金属离子、EDT A 及还原剂等的影响。
菠萝蛋白酶的制备及活性测定背景菠萝蛋白酶(Bromelain),别名菠萝酶,是存在于菠萝(Anana COmOSl2S)植株中的蛋白质水解酶,为浅黄色无定形粉末,微有异臭。
菠萝的果、茎、柄和叶片中都含有菠萝蛋白酶。
一般从菠萝果中提取的称为果菠萝蛋白酶,从菠萝皮、茎中提取的为茎菠萝蛋白酶。
八成熟的菠萝果汁含有约0.4%的菠萝蛋白酶,成熟的菠萝果汁含有O.3%左右的菠萝蛋白酶,茎汁含8.7%的菠萝蛋白酶(Murachi,et a1.,1964)。
1981年,Marcano首先发现菠萝汁中含有蛋白水解酶,随后Willstatter,Bergmann和Martin相继指出,菠萝蛋白酶存在于果、皮和茎部中,存在于茎部的称为茎酶(Stembromelain E.C.3.4.22.4),存在于果汁中的酶称为果酶(Fruit bromelainE.C.3.4.22.5)。
Murachi和Neurath、E1.G harbawi和Whitaker采取层析法分离提取了菠萝蛋白酶并研究了它的活性成分。
结构特性研究表明,果菠萝蛋白酶是酸性酶,等电点为pH4.6,茎菠,约为33,000,等电点为pH9.5,其活性中心的氨基酸顺序和催化机理与木瓜蛋白酶相似,并确定茎菠萝蛋白酶为糖蛋白。
Ota S et aL研究指出,茎菠萝酶分子量为36000,末端氨基酸残基是丙氨酸,果酶分子量为30000,末端氨基酸残基也为丙氨酸,碳水化合物分析与Muraclli 的分析结果相似。
1988年,T.L.迈诺特等由十二烷基硫酸钠.聚丙烯胺凝胶电泳(SDS.PAGE)测定果菠萝蛋白酶分子量22200.25080,等电点3.8~4.8。
菠萝蛋白酶是各种酶的混合物,已知菠萝蛋白酶粗品中包含至少五种蛋白水解酶,也包含非蛋白水解酶,包括酸性磷酸酶和过氧化物酶,并含有淀粉酶和纤维素酶活性,还存在其他成分。
菠萝蛋白酶成分的复杂性,限制了其在生产中的应用,特别是医药领域对功能成分的要求上,因此对菠萝蛋白酶的成分和各成分的具体功能的分析研究具有重要意义。
菠萝蛋白酶的提取纯化及化学修饰对其活性的影响一、实验目的1、掌握菠萝蛋白酶的提取纯化方法2、了解菠萝蛋白酶的活力测定方法3、了解化学修饰的方法并探究对其活力的影响。
4、探究菠萝蛋白酶的稳定性二、实验原理菠萝蛋白酶是典型的巯基蛋白质, 广泛存在于菠萝果实、芽、叶、茎中, 分子量为33 000, 能分解蛋白质和酰胺等。
它的水解活性较木瓜酶高10 倍以上。
因此有广泛的用途。
它作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化、啤酒澄清. 还用于胶、水解蛋白的生产, 在医药上它可在生物体内溶解纤维蛋白及血凝块。
因此可以治疗水肿及多种炎症, 它能迅速溶痂。
对正常组织无害, 不影响植皮, 适用于中小面积深度烧伤的治疗。
•菠萝蛋白酶的理化条性质•最佳温度:53±1℃•失活温度:≥65℃•最佳PH值: 5.0~8.0•失活PH值:小于3.0和大与9.5•推荐用量:0.05~0.1%对蛋白质计•温度范围:50~60℃作用PH值: 6.0~9.0提取菠萝蛋白酶的传统工艺是高岭土吸附法和单宁沉淀法。
高岭土吸附法生产工艺和操作都比较复杂,原材料消耗多,所需设备也多,酶活总回收率低,但产品质量较好,纯度较高,单宁沉淀法工艺和操作比高岭土法简单,原材料消耗少,所需设备少,但酶活回收率低。
超滤法使菠萝蛋白酶产品更纯,而且酶粉得率比传统工艺高,但超滤法生产工艺和和操作比上述两种方法复杂,工人素质要求高,且设备一次性投资大。
本实验采用单宁沉淀法提取菠萝蛋白酶。
活性测定方法是以酪蛋白水解释放的氨基酸在275nm的吸收值为基础。
酶活单位定义为在37℃,pH7.0的条件下,每分钟水解酪蛋白所产生的酪氨酸的微克数为一个菠萝蛋白酶单位。
pH 值对酶活力有很大的影响,大多数的酶在酸性条件下活力最强,最适合菠萝蛋白酶的pH 为7. 4 ,在碱性条件下就会失活,在操作过程中应注意pH 值的变化。
实验材料1、材料:新鲜的成熟菠萝2、仪器:榨汁机、离心机、紫外分光光度计、恒温水浴锅、氯化钙的干燥器、CMSepharose FF 凝胶(1.1cm×30.0cm)、研钵、滴管(大、小)、烧杯(大、中、小)、试管、具塞试管、白瓷板、温度计、PH计、搅拌棒3、试剂:0.2%单宁、5 %苯甲酸钠溶液、0. 1 %/0.5%EDTA 溶液、1. 5%氯化钠溶液、0. 5%乙酸锌溶液、0.06 %抗坏血酸溶液、0. 5%硫代硫酸钠、1 %L - 半胱氨酸溶液、20mM pH4.0 的醋酸缓冲液、1MNaCl~20mM pH4.0 醋酸缓冲液(含0.01%EDTA)、双缩脲试剂、pH7.0 的干酪素溶液、酶液激活液(pH4.5 ,L-cys 和EDTA-2Na 配制)、三氯乙酸溶液、标准酪蛋白试剂、0.1M盐酸、0.1M氢氧化钠、50%乙二醇、50%甘露醇、50%葡萄糖、50%甘油、O.1mol/L柠檬酸盐缓冲液(pH 3.0)、NEM1、实验材料新鲜菠萝(下脚料)、0.1mg/ml牛血清蛋白2、实验试剂①柠檬酸钠②维生素C ③单宁④0.1%EDTA溶液⑤1.5%氯化钠溶液⑥1%酪蛋白溶液⑦1mol/L氢氧化钠溶液⑧0.05mol/L磷酸缓冲液(溶解磷酸二氢钾,加氢氧化钾调PH至7.0)⑨激活剂(PH7.0,0.05mol/L磷酸缓冲液,内含15mmol/L硫代硫酸钠和6mmol/LEDTA-2Na,现配现用)1、榨汁机;2、离心机;3、紫外可见分光光度计(1cm石英比色皿);4、恒温水浴锅(37℃);5、试管、试管架;6、烧杯、容量瓶;7、移液管;三、实验步骤1、菠萝蛋白酶的提取提取:菠萝洗净榨汁。