丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求sainuopu

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（丙氨酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。

1.1 规格试剂1:3×60 mL，试剂2:1×45 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×20 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×12 mL；试剂1:4×60 mL，试剂2:4×15 mL；试剂1:2×40 mL，试剂2:2×10 mL；试剂1:3×28 mL，试剂2:3×7 mL；试剂1: 1×4L，试剂2: 1×1L；试剂1: 2×4L，试剂2: 1×2L。

1.2 主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液。

外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度应不小于1.0（波长340nm，光径1cm）。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.004。

2.4 分析灵敏度测试100U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0025。

2.5 准确度用参考物质(GBW09177)定值的血清测定，实测值与标示值的偏差不超过±12.0％。

2.6 重复性批内变异系数（CV）应不大于5%。

2.7 线性2.7.1在[0.5，800]U/L区间内，线性相关系数r应不低于0.9900；2.7.2[0.5，96）U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±11.52U/L；[96，800]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±12%。

2.8 批间差批间差应不大于10％。

2.9 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，检测结果应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)简介：Leagene 丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是丙氨酸氨基转移酶催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，丙酮酸与NADH 经LDH 催化生成NAD +，上述方法实际为ALT 速率法，其反应公式如下：L-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+L-谷氨酸。

丙酮酸+NADH+H +→L-乳酸+NAD +。

在上述偶联反应中，NADPH 的氧化速率与样本中酶活性呈正比。

对于单试剂速率法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT 催化反应立即启动，通过分光光度计或自动分析仪检测在340nm 处吸光度下降速率(-ΔA /min)，下降速率(-ΔA /min)与ALT 活性呈正比，比色杯光径1.0cm ，进而计算酶的活性单位。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：①_x0001_ 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保存1个月有效，用于ALT/GPT 的检测。

②_x0001_ 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个月有效，用于ALT/GPT 的检测。

③_x0001_ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的ALT/GPT 含量。

编号 名称TE0125 100TTE0125 200TStorageALT 检测液(R)成分 终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃ 避光Tris 缓冲液 100mM L-丙氨酸 500mM 酮戊二酸 15mM NADH 0.18mM LDH 1700U/L 防腐剂 15mM使用说明书1份分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。

丙氨酸氨基转移酶试剂盒（丙氨酸底物法）标准化操作规程1 目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。

2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。

3 适用范围：本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活力。

4 检验方法本试剂反应原理采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐的方法。

5 检验原理在丙氨酸氨基转移酶的作用下，L-丙氨酸与α-酮戊二酸反应，生成丙酮酸和L-谷氨酸。

丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸，同时NADH 被氧化为NAD＋，使340nm处的光吸收值下降，通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可以测定丙氨酸氨基转移酶活力。

样品中内源性丙酮酸的干扰可由试剂中LDH在反应延迟时间内消除，不会干扰测定。

ALTL-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸LDH丙酮酸+NADH L-乳酸+NAD+6 检验标本要求6.1 样本为血清。

6.2 不得使用溶血或被污染的样本。

6.3 样本在2℃~8℃条件下可保存7天、室温条件下可保存1天。

7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司丙氨酸氨基转移酶试剂盒7.2试剂组成7.3试剂的稳定性与贮存：7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为18个月。

7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天，试剂不可冷冻。

7.3.3 反应液在2℃~8℃可稳定30天。

7.4试剂的变质指示：若试剂混浊，或在340 nm处试剂空白吸光度值低于1.000A 时，不能使用。

8 实验仪器及性能指标8.1实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 空白吸光度：A≥1.000。

8.2.2 空白吸光度变化率：︱△A︱/min≤0.002/min。

8.2.3 分析灵敏度：测试1U/L被测物时，吸光度变化率（△A/min）＜-0.0001。

8.2.4 线性范围：4U/L～1000U/L；线性相关系数r≥0.9900；[4，200]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±40U/L；（200，1000]范围内，线性相对偏差不超过±15％。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(丙氨酸底物法)适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的含量。

1.1规格试剂1（R1）:4×80mL，试剂2（R2）：4×16mL；试剂1（R1）:5×60mL，试剂2（R2）：5×12mL；试剂1（R1）:3×40mL，试剂2（R2）：3×8mL；试剂1（R1）:2×80mL ，试剂2（R2）：2×16mL；试剂1（R1）:2×400mL，试剂2（R2）：2×80mL；试剂1（R1）:5×45mL，试剂2（R2）：5×15mL；试剂1（R1）:2×70mL，试剂2（R2）：1×70mL；试剂1（R1）:1×20mL，试剂2（R2）：1×6mL。

1.2 试剂组成见表1：试剂1（R1）（以下简称R1）,试剂2（R2）（以下简称R2）。

表1 试剂组成2.1 外观液体双试剂：R1（缓冲液）：无色液体，R2（启动液）：无色液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白2.3.1空白吸光度在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，用去离子水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度应＞1.0 ABS。

2.3.2空白吸光度变化率在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，用去离子水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应<0.004ABS/min。

2.4 分析灵敏度浓度为50U/L时，吸光度变化率绝对值≥0.014。

2.5 线性范围在[1-600]U/L线性范围内，线性相关系数r ≥0.990。

在（100-600]U/L,范围内的相对偏差不大于±10%；测定结果[1-100]时绝对偏差不大于±10 U/L。

2.6 精密度试剂盒测试项目精密度CV< 5 %。

人丙氨酸氨基转移酶（ALT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中丙氨酸氨基转移酶（ALT)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人丙氨酸氨基转移酶（ALT)水平。

用纯化的人丙氨酸氨基转移酶（ALT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入丙氨酸氨基转移酶（ALT)，再与HRP标记的丙氨酸氨基转移酶（ALT)体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的丙氨酸氨基转移酶（ALT)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人丙氨酸氨基转移酶（ALT)浓度。

试剂盒组成：样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（速率法）说明书[产品名称] 通用名称: 丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（速率法）英文名称:L-Alanine Aminotransferase Assay Kit（ALT）[包装规格]2×200Tests；2×400Tests；R1:4×60ml、R2:4×15ml；R1:4×80ml、R2:4×20 ml；R1:4×120ml、R2:2×60ml；R1:8×40ml、R2:2×40ml；R1:4×50ml、R2:2×25 ml；R1:2×40ml、R2:2×10ml；R1:4×50ml、R2:4×25ml。

[预期用途] 用于体外定量检测人血清中的丙氨酸氨基转移酶的活力。

[检验原理]ALTL-丙氨酸 +α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸LDH丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O[主要组成成份]由试剂R1和试剂R2组成。

试剂R1：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、乳酸脱氢酶（LDH）、L-丙氨酸、α-酮戊二酸；试剂R2：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、还原型辅酶（NADH）。

[储存条件及有效期] 试剂在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期。

有效期12个月。

开瓶后2℃～8℃可稳定30天。

备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。

[适用仪器]日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。

[样本要求]使用新鲜的无溶血血清，血清不宜反复冻融，以免影响酶活性。

[检验方法]（1）双试剂无需配制，直接使用。

（2）试验条件：样本（S）：15 µl试剂1(R1) ：200 µl 试剂2（R2）：50 µl温度：37 ℃测定类型：速率法主波长：340 nm 副波长：405 nm 反应方向：下降方法：先将样本与R1混合，37 ℃5分钟后加入R2试剂，然后测定加入R2后2分钟至4分钟之△A/min 。

丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)测定试剂盒（丙氨酸底物-丙酮酸氧化酶法）
适用范围：该试剂用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。

1.1 包装规格：
试剂1（R1）：50ml×2 试剂2（R2）：2.5ml×2 (500测试)；
试剂1（R1）：50ml×1 试剂2（R2）：2.5ml×1 (250测试)。

1．试剂空白：用蒸馏水调零，试剂空白吸光度值≤0.15。

2．线性区间：
a)测量范围[10,200]U/L,相关系数r≥0.990；
b)[10,30）U/L,测量浓度值绝对线性偏差不超过±5U/L；[30,200]U/L,测量浓度值相对线性偏差不超过12%。

3．准确度：型式检验：回收率90%～110%
4．分析灵敏度：丙氨酸氨基转移酶47U／L时，10-13min 之间,每分钟吸光度（△A/min）≥0.03。

5. 精密度：
a)重复性：ＣＶ≤10%。

b)批间差：连续三批试剂盒测定同份血清样本，其测定值的批间差≤12%。

丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（IFCC法）【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。

【检验原理】在ALT催化下，从丙氨酸转移到2个氨基到α-酮戊二酸上，生成产物谷氨酸和丙酮酸。

后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸，在340nm波长条件下检测到NADH吸光度下降速率，与ALT的活力成比例。

L-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O【主要组成成份】R1：Tris缓冲液150mmol/LL-丙氨酸750 mmol/L乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/LNADH 0.4mmol/LR2：α-酮戊二酸90mmol/LNADH 0.9mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。

【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定28天。

试剂不可冰冻。

【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。

若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。

建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。

【样本要求】新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。

【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向下降反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。

校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。

丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（丙氨酸底物法）
2、性能指标
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。

表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以蒸馏水为空白时，波长 340nm，光径 1.0 cm，温度 37℃，吸光度≥
1.0。

2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以蒸馏水为空白时，波长 340nm，光径 1.0 cm，温度 37℃，吸光度变化率≤0.004。

2.3分析灵敏度
试剂盒测试130 U/L被测物时，吸光度变化率≥0.015。

2.4线性范围
2.4.1试剂盒在10 ~1000 U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。

2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表 3 要求。

表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒批内精密度 CV 值应≤4.0%。

2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤5.0%。

2.6准确度
1
相对偏差（Bias%）应在参考物质靶值±10%以内。

2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。

2。

丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）说明书【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）英文名称：ALT Test Strip（Dry Chemistry Method）【包装规格】50人份/筒【预期用途】ALT是一种与氨基酸代谢有关的酶，广泛存在于正常人体组织、器官内，其主要来源是肝脏，并且主要和肝脏疾病密切相关。

ALT的升高往往指示心肌梗塞、肝病、肌营养失调和其它内脏损伤。

血液中ALT的升高对于肝病是一种非常灵敏的指标，并且与其它的疾病相关。

自从1955年以来有许多方法用于检测ALT，最主要的为：紫外法和比色法。

丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）是一种无需分光光度计和比色仪的快速检测试剂条，使用非常简单，而准确度达到临床可接受的准确性要求。

用于定性检测人全血/血浆/血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、或称为谷丙转氨酶（SGPT或者GPT）。

【检验原理】丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）包含固定在塑料片上用于分离全血的膜和一个特别的ALT多层复合反应膜。

当检测含有ALT的全血品时，血浆就会被从全血中分离出来并渗透到反应膜上；对于血浆和血清样本则也可以直接加样到反应孔上。

依据样本中的不同ALT浓度，反应孔就会很快变成浅蓝至深蓝色。

本试剂条被设计成通过将试剂条上最终颜色与比色卡对比，能半定量地检测出所测样品中转氨酶之含量，从而确定结果阴阳性。

【主要组成成份】蛋白质稳定剂、过氧化物酶、缓冲溶解、指示剂、表面活性剂、ALT氧化酶、其它活性物质。

【储存条件及有效期】l应置于2-8℃、避光干燥处密闭冷藏保存；l不得冷冻或置于25℃以上保存；l有效期：18个月；l过期的试剂条不可再使用。

【样本要求】本试剂条最适宜的检测样本为采自指尖或耳垂等末梢的新鲜全血作为检测样本。

采用静脉血时，应用新鲜的全血，可使用枸橼酸盐、肝素和乙二胺四乙酸盐等抗凝剂。

不得使用含氟防腐剂。

室温保存的样本应在8小时内进行检测；于2-8℃保存之样品，应在48小时内进行检测。

食品药品监管总局关于发布丙氨酸氨基转移酶测定试剂等5项注册技术审查指导原则的通告【法规类别】药品管理【发文字号】食品药品监管总局通告2018年第8号【发布部门】国家食品药品监督管理总局【发布日期】2018.01.08【实施日期】2018.01.08【时效性】现行有效【效力级别】XE0303食品药品监管总局关于发布丙氨酸氨基转移酶测定试剂等5项注册技术审查指导原则的通告（食品药品监管总局通告2018年第8号）为加强医疗器械产品注册工作的监督和指导，进一步提高注册审查质量，国家食品药品监督管理总局组织制定了《丙氨酸氨基转移酶测定试剂注册技术审查指导原则》《尿液分析试纸条注册技术审查指导原则》《同型半胱氨酸测定试剂注册技术审查指导原则》《胰岛素测定试剂注册技术审查指导原则》《C-肽测定试剂注册技术审查指导原则》，现予发布。

特此通告。

附件：1.丙氨酸氨基转移酶测定试剂注册技术审查指导原则2.尿液分析试纸条注册技术审查指导原则3.同型半胱氨酸测定试剂注册技术审查指导原则4.胰岛素测定试剂注册技术审查指导原则5. C-肽测定试剂注册技术审查指导原则食品药品监管总局2018年1月8日附件1丙氨酸氨基转移酶测定试剂注册技术审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase，ALT）测定试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。

本指导原则是对丙氨酸氨基转移酶测定试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中的具体内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特征对注册申报资料的内容进行充实和细化。

本指导原则是供申请人和审查人员适用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。

应在遵循相关法规、国家标准、行业标准的前提下使用本指导原则。

丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（IFCC法）【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。

【检验原理】在ALT催化下，从丙氨酸转移到2个氨基到α-酮戊二酸上，生成产物谷氨酸和丙酮酸。

后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸，在340nm波长条件下检测到NADH吸光度下降速率，与ALT的活力成比例。

L-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O【主要组成成份】R1：Tris缓冲液150mmol/LL-丙氨酸750 mmol/L乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/LNADH 0.4mmol/LR2：α-酮戊二酸90mmol/LNADH 0.9mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。

【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定28天。

试剂不可冰冻。

【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。

若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。

建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。

【样本要求】新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。

【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向下降反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。

校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。

医疗器械产品企业标准（建议稿）丙氨酸氨基转移酶试剂盒（谷丙转氨酶试剂盒）ALT/GPT REAGENT KIT2005-08-17发布2005-08-27实施深圳市恩普电子技术有限公司发布前言丙氨酸氨基转移酶试剂盒目前无国家标准和行业标准，本公司制定本标准作为组织生产、质量检定和营销活动的依据。

本标准的编写格式按照GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》、GB/T1.2-2002《标准化工作导则第2部分：标准中规范性技术要素内容的确定方法》。

本标准自2005年8月27日起实施本标准由深圳市恩普电子技术有限公司质量部提出并起草。

本标准起草单位：深圳市恩普电子技术有限公司。

本标准主要起草人：丙氨酸氨基转移酶试剂盒1、范围本标准规定了丙氨酸氨基转移酶试剂盒的要求、试验方法、检验规则、标志、标签、使用说明书、包装、运输及贮存等要求。

本标准适用于体外定量检测人血清中丙氨酸氨基转移酶的活力。

本产品适用于各种类型的半自动、全自动临床生化分析仪。

2、规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB 191-2000 包装储运图示标志GB 9969.1-1998 工业产品使用说明书总则3、试剂组成4、方法原理本试剂测定原理以国际临床化血联合会（IFCC）推荐的方法为基础。

样本中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化丙氨酸氨基转换至♋-氧代戊二酸，生成丙酮酸和L-谷氨酸。

丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸，同时NADH被氧化为NAD，从而使340nm处的光吸收值下降，通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可以测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）活力。

样本中内源性丙酮酸的干扰可由试剂中LDH在反应延迟时间内快速、完全地消除，不会干扰测定：L-丙氨酸＋♋-氧代戊二酸−−ALT丙酮酸＋L-谷氨酸−→丙酮酸＋NADH −−LDH L-乳酸＋NAD＋−→5、技术要求5.1、外观试剂1为澄清无色液体，试剂2为无色或微黄色澄清液体。

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒原理一、引言丙氨酸氨基转移酶（Aspartate Aminotransferase，简称AST）是一种存在于多种组织和细胞内的酶。

AST的测定对于诊断和评估多种疾病具有重要意义，特别是与心肌梗死、肝疾病和肝细胞损伤相关的疾病。

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒是用于测定血清或血浆中AST水平的一种常用试剂盒。

本文将详细讨论丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒的原理及其应用。

二、试剂盒原理试剂盒主要包括两个试剂：底物和辅酶。

底物一般为丙氨酸和α-酮戊二酸。

辅酶则为重要的催化底物转化过程的参与者。

1. 底物的使用丙氨酸和α-酮戊二酸是常用的AST底物。

丙氨酸是AST的氨基供体，而α-酮戊二酸是AST的接受者。

2. 丙氨酸氨基转移酶的反应过程丙氨酸氨基转移酶催化的反应是丙氨酸和α-酮戊二酸之间的转氨基反应。

该反应的化学方程式如下：丙氨酸+ α-酮戊二酸⇌ L-谷氨酰基丙酮酸 + L-天冬氨酸该反应是可逆的，AST能够在体液中进行反应转化。

通过测定该反应中生成的L-谷氨酰基丙酮酸或L-天冬氨酸的含量，就可以间接反映出AST的活性。

3. 辅酶的作用辅酶在丙氨酸氨基转移酶的催化反应中起到重要的作用，可以促进底物的转化并催化产生特定的化合物。

辅酶的种类有很多，其中比较常见的有辅酶A、辅酶B6等。

三、测定原理丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒的原理是基于酶促反应和光度法测定酶的活性。

其测定步骤如下：1. 取样和预处理取待测样品（血清或血浆），并根据试剂盒的要求进行预处理。

预处理过程可能包括稀释、离心等步骤，以确保样品符合试剂盒的操作要求。

2. 添加试剂将试剂盒提供的底物和辅酶加入到样品中。

底物和辅酶的浓度在试剂盒中已经根据实验要求进行了优化。

3. 酶促反应在试剂的催化下，丙氨酸和α-酮戊二酸发生酶促反应。

该反应生成的产物L-谷氨酰基丙酮酸或L-天冬氨酸的浓度与AST的活性相关。

4. 光度法测定使用光度计测定反应产物浓度的变化。

医疗器械产品技术要求编号：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂（盒）（丙氨酸底物法）2.性能指标2.1外观试剂应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2装量试剂装量的装量应按表1，液体装量的最大允许负偏差应为5%。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度试剂（盒）以空白样本为空白，在37 ℃±0.1 ℃ 、340 nm 波长、1 cm 光径条件下，试剂空白吸光度应≥1.300 Abs。

2.3.2试剂空白吸光度变化率用试剂（盒）测试空白样本，在37℃ 0.1℃，340 nm 波长、1 cm 光径条件下，试剂空白吸光度变化率≤0.004 Abs/min。

2.4分析灵敏度试剂（盒）测试39 U/L 的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）绝对值应≥0.013Abs/min。

2.5线性区间试剂（盒）线性在(0.00，700.00] U/L 区间内，应符合如下要求：a) 线性相关系数r≥0.990；b) (0.00，50.00] U/L 区间内，线性绝对偏差在±5.00 U/L 范围内；(50.00，700.00] U/L 区间内，线性相对偏差在±10%范围内。

2.6精密度2.6.1重复性试剂（盒）测试活性在（36±7）U/L 和（139±28）U/L 范围内的样本时，变异系数CV≤4.0%。

2.6.2批间差试剂（盒）测试活性在（36±7）U/L 和（139±28）U/L 范围内的样本时，相对极差R≤6.0%。

2.7准确度测可溯源至有证参考物质的校准品，相对偏差 B 在±10%范围内。

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒 (丙氨酸底物法)组成：试剂1：Tris缓冲液≥100mmol/LLDH ≥1800U/LNADH ≥0.26mmol/L试剂2：Tris缓冲液≥100mmol/LL-丙氨酸≥1020mmol/Lα-酮戊二酸≥26mmol/L预期用途：本产品用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。

2.1外观2.1.1外包装完整无破损；2.1.2试剂1：无色或淡黄色澄清透明液体；2.1.3试剂2：无色澄清透明液体。

2.2净含量净含量不低于标示值。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下，试剂空白吸光度不小于1.0。

2.3.2试剂空白吸光度变化率在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下，试剂空白吸光度变化率不大于0.004。

2.4线性2.4.1线性范围[25，500]U/L，相关系数r≥0.990。

2.4.2线性偏差(60，500]U/L线性范围内，相对偏差不超过±10%；[25，60]U/L线性范围内，绝对偏差不超过±6U/L。

2.5分析灵敏度检测浓度为128U/L的样本时，吸光度变化率应不小于0.012。

2.6 重复性测试高、低值质控品，重复测试至少20次，CV≤5%。

2.7 批间差用三个不同批号的试剂测试同一样本，重复测试3次，相对极差R≤10%。

2.8 准确度测定GBW09177标准物质，测定结果应不超过标示值的±15%。

2.9 稳定性原包装试剂2～8℃避光储存,有效期12个月。

取到效期后两个月内产品进行检测, 检测结果应符合2.1 、2.3、2.4、2.5、2.6和2.8的要求。

丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）测定试剂盒（丙氨酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。

1. 产品规格及其划分说明1.1包装规格试剂的包装规格见表1的规定表1包装规格1.2主要组成成分1.2.1试剂盒组成试剂盒由液体试剂A和B组成，各组分见表2。

表2 试剂盒组成性外沉淀及絮状悬浮物，外包装完整无破损。

2.2净含量：试剂的净含量应不小于标示值。

2.3试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度：用蒸馏水作为样品，按照试剂说明书的规定在340nm 的波长、1cm光径条件下测试时，测定吸光度值不小于1.0。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率：用蒸馏水作为样品，按照试剂说明书的规定在340nm的波长测试时,引起的吸光度变化率不大于0.004/min。

2.4 分析灵敏度：测试一定浓度的丙氨酸氨基转移酶，10U/L的丙氨酸氨基转移酶引起的吸光度变化值应≥0.002。

2.5 线性范围：本产品的线性范围是[10，500]U/L，线性相关系数r≥0.990，在[10，≤50]U/L范围内的绝对偏差≤±5.0U/L,在（50，500]U/L范围内的相对偏差应≤±10%。

2.6精密度2.6.1批内精密度：用高、低两个水平浓度的血清样本重复测试所得结果的精密度（变异系数）不大于5.0%。

2.6.2批间差：用质控血清分别测试3个不同批号的试剂盒，其相对偏差≤8%。

2.7准确度: 测试国家标准物质GBW（E）090283，偏差不大于±10%。

2.8 稳定性：试剂盒贮存在2～8℃条件下，有效期为18个月。

产品在有效期末一个月内测试2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7，结果符合各项要求。

丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)测定试剂盒（丙氨酸底物-丙酮酸氧化酶比色法）适用范围：该试剂用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。

1.1型号试剂1（R1）：50ml×1，试剂2（R2）： 2.5ml×1，试剂3（R3）：50ml×1 (500测试)；试剂1（R1）：25ml×1，试剂2（R2）：1.25ml×1，试剂3（R3）：25ml×1 (250测试)。

1. 产品型号/规格及其划分说明1.1试剂1（R1）：50ml×1，试剂2（R2）：2.5ml×1，试剂3（R3）：50ml ×1 (500测试)；试剂1（R1）：25ml×1，试剂2（R2）：1.25ml×1，试剂3（R3）：25ml×1 (250测试)。

2. 性能指标【产品性能指标】1、试剂空白：用蒸馏水调零，试剂空白吸光度值≤0.15。

2、线性区间a)测量范围[10,100]KarU,相关系数r≥0.99；b)[10,20）KarU,测量浓度值绝对线性偏差不超过±5KarU；3、准确度：回收率90%～110%4、分析灵敏度：丙氨酸氨基转移酶25KarU时测定吸光度差值（△A）≥0.200。

5、精密度a）重复性：变异系数≤10%。

b）批间差1. 产品型号/ 规格及其划分说明1.1 试剂 1（R1）：50ml×1，试剂 2（R2）：2.5ml×1，试剂 3（R3）：50ml ×1 (500 测试)；试剂 1（R1）：25ml×1，试剂 2（R2）：1.25ml×1，试剂 3（R3）：25ml ×1 (250 测试)。

校准品：1ml×1（选配）；质控品：1ml×1（选配）1.2 组成成份：试剂 1（R1）：缓冲液 0.1mol/L 磷酸盐、色原剂 10 mmol/L试剂 2（R2）：酶试剂(丙酮酸氧化酶 10KU、过氧化物酶 5.0KU)、稳定剂 100 mmol/L试剂 3（R3）：硫柳汞钠 0.6g/L校准品：血清基质，丙氨酸氨基转移酶浓度为 25 KarU（目标浓度）。

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（丙氨酸底物法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性。

1.1包装规格1.2主要组成成分本试剂由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成试剂1(R1)：Tris 100mmol/L L-丙氨酸500mmol/L乳酸脱氢酶1150U/L试剂2(R2)：α-酮戊二酸15mmol/LNADH 0.2mmol/L2.1 外观试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；R1为无色透明液体，R2为无色透明液体。

液体试剂不得有沉淀和絮状物。

2.2 装量试剂瓶内液体装量应不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度以生理盐水为样品，在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，吸光度≥1.0。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率以生理盐水为样品，在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，吸光度变化率（△A/min）≤0.004。

2.4 分析灵敏度浓度为40U/L的样本，吸光度变化△A/min＞0.005。

2.5 准确性相对偏差应不大于15%。

2.6 重复性用不同浓度的两个样本进行检测，各重复检测10次，其批内变异系数（CV）应不超过5％。

2.7 线性2.7.1在(5，500)U/L范围内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2 在(5，50]U/L范围内绝对偏差不超过±5U/L；(50，500)U/L范围内相对偏差不超过±10%。

2.8 批间差用三个批号的试剂盒测定同一份样本，试剂盒批间相对极差应不超过10%。

2.9 稳定性试剂盒在2～8℃避光保存，可稳定18个月。

取到效期后的样品检测试剂空白吸光度、空白吸光度变化率、分析灵敏度、准确度、重复性、线性范围应分别符合2.3.1、2.3.2、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。