细菌运动性的观察
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细菌的运动性判定
说一个大家可能有兴趣的话题,在微生物怎么去判断细菌是否有运动性,判断细菌的运动性又有什么作用
首先我们可以直接观察细菌的运动,拿一个载玻片,上面滴一滴菌悬液,盖上盖玻片,光学显微镜直接观察,区分开分子运动和细菌运动,细菌可以从一个地方游到其它地方,分子运动只是左右摆动,分子运动并不是可以“看见分子在运动”,而是分子在推动着微小的可见颗粒在左右摆动;在检测标准中,采用半固体动力试验,就是在半固体培养基中用接种针刺一下,没有鞭毛的细菌,不会走太远,只在穿刺的地方生长,有鞭毛的细菌,向四周扩散生长,培养基会显得混浊。
当我们去检测一株菌的时候,已经知道这株菌的很多特性,比如这株菌是否有鞭毛,如果有鞭毛存在,细菌就可以运动,还有很多,比如产酸,产气,革兰氏阳性还是阴性,对胆盐是否敏感,可以利用什么糖类等等,其实生化试验就是来判断这些方面,通过细菌特性来卡,判断这株菌是否存在。
细菌的运动性观察(一)实验原理细菌是否具有鞭毛是细菌分类鉴定的重要特征之一。
采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目,但此法既费时又麻烦。
如果仅须了解某菌是否有鞭毛,可采用悬滴法或水封片法(即压滴法)直接在光学显微镜下检查活细菌是否具有运动能力,以此来判断细菌是否有鞭毛。
此法较快速、简便。
悬滴法就是将菌液滴加在洁净的盖玻片中央,在其周边涂上凡士林,然后将它倒盖在有凹槽的载玻片中央,即可放置在普通光学显微镜下观察。
水封片法是将菌液滴在普通的载玻片上,然后盖上盖玻片,置显微镜下观察。
大多数球菌不生鞭毛,杆菌中有的有鞭毛有的无鞭毛,弧菌和螺菌几乎都有鞭毛。
有鞭毛的细菌在幼龄时具有较强的运动力,衰老的细胞鞭毛易脱落,故观察时宜选用幼龄菌体。
1.制备菌液:在幼龄菌斜面上,滴加3-4mL无菌水,制成轻度混浊的菌悬液。
2.涂凡士林:取洁净无油的盖玻片1块,在其四周涂少量的凡士林。
3.滴加菌液:加1滴菌液于盖玻片的中央,并用记号笔在菌液的边缘做一记号,以便在显微镜观察时,易于寻找菌液的位置。
4.盖凹玻片将凹玻片的凹槽对准盖玻片中央的菌液,并轻轻地盖在盖玻片上,使两者粘在一起,然后翻转凹玻片,使菌液正好悬在凹槽的中央,再用铅笔或火柴棒轻压盖玻片,使玻片四周边缘闭合,以防菌液干燥。
若制水封片,在载玻片上滴加一滴菌液,盖上盖玻片后即可置显微镜下观察。
5.镜检先用低倍镜找到标记,再稍微移动凹玻片即可找到菌滴的边缘,然后将菌液移到视野中央换高倍镜观察。
由于菌体是透明的,镜检时可适当缩小光圈或降低聚光器以增大反差,便于观察。
镜检时要仔细辨别是细菌的运动还是分子运动(即布朗运动),前者在视野下可见细菌自一处游动至他处,而后者仅在原处左右摆动。
细菌的运动速度依菌种不同而异,应仔细观察。
结果:有鞭毛的枯草杆菌和假单胞菌可看到活跃的运动,而无鞭毛的金黄色葡萄球菌不运动。
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实验六细菌特殊构造的染色法及活细菌运动性的观察一、基础知识荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。
由于荚膜与染料的亲和力弱、不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。
所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色,在菌体周围形成一透明圈。
由于荚膜含水量高,制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。
实验中介绍3种荚膜染色法,其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。
芽孢又叫内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体,通常呈圆形或椭圆形。
细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。
由于芽孢壁厚、透性低、不易着色,当用石炭酸复红、结晶紫等进行单染色时,菌体和芽孢囊着色,而芽孢囊内的芽孢不着色或仅显很淡的颜色,游离的芽孢呈淡红或淡蓝紫色的圆或椭圆形的圈。
为了使芽孢着色便于观察,可用芽孢染色法。
芽孢染色法的基本原理是:用着色力强的染色剂孔雀绿或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内,进人菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱,当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。
鞭毛是细菌的运动“器官”细菌是否具有鞭毛,以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。
细菌的鞭毛很纤细,其直径通常为0.01—0.021xm,所以,除了很少数能形成鞭毛束(由许多根鞭毛构成)的细菌可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外,一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到,而只能用电子显微镜观察。
要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛,必须用鞭毛染色法。
鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理,使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。
鞭毛染色方法很多,本实验介绍硝酸银染色法和改良的Leifson氏染色法,前一种方法更容易掌握,但染色剂配制后保存期较短。
细菌的鞭毛染色及活细菌的运动性观察摘要采用硝酸银染色法对苏云金芽孢杆菌与铜绿假单胞菌进行鞭毛染色,在光学显微镜下观察其菌体形态和鞭毛的长短、数量、着生位置,得到清晰的染色结果。
并采用压滴法观察细菌的运动性。
关键词细菌;鞭毛;硝酸银染色法;压滴法1 前言鞭毛是某些细菌表面细长弯曲的丝状物,是细菌的运动器官和特殊构造。
细菌鞭毛的长短、数量和生长位置是鉴别菌种的一个重要的形态学指标,也是细菌重要的抗原物质与致病因素。
根据鞭毛的特征,可将有动力细菌分为单端极鞭毛菌、单端丛鞭毛菌、周鞭毛菌、侧鞭毛菌。
细菌的鞭毛非常纤细,直径一般在20nm左右,用电镜才能观察。
但是,如采用特殊的染色法,则在普通光学显微镜下也能看到它。
鞭毛染色法的基本原理是在染色前先经媒染剂处理,媒染剂吸附在鞭毛上,使鞭毛加粗,然后再进行染色,便可达到普通光学显微镜的辨析范围以内。
常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。
鞭毛染色一直被提倡作为革兰阴性非发菌的鉴别手段之一,先后出现了Leifsen法、镀银法、Ryu 氏法等多种鞭毛染色的方法。
鞭毛细长透明,其宽度在普通光学显微镜波长检验范围之外,所以不易观察。
采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目,但此法既费时又麻烦。
如果仅须了解某菌是否有鞭毛,可采用压滴法直接在光学显微镜下检查活细菌是否具有运动能力,以此来判断细菌是否有鞭毛。
此法较快速、简便。
2 材料与方法2.1材料2.1.1菌种苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)铜绿假单细胞菌(P.Aeruginosa)2.1.2染色液和试剂硝酸银染色液、香柏油、二甲苯、0.01%美兰水溶液。
2.1.3仪器及其他载玻片、擦镜纸、吸水纸、记号笔、镊子、接种环,显微镜。
2.2方法2.2.1硝酸银染色法1)清洗玻片选择光滑无裂痕的玻片,置洗衣粉过滤液中(洗衣粉煮沸后用滤纸过滤,以除去粗颗粒),煮沸20min。
取出用清水冲洗,沥干水后,置95%乙醇中浸泡,用时取出在火焰上烧去酒精。
一、实验目的1. 了解细菌的基本形态和运动特性。
2. 掌握观察细菌动力的实验方法。
3. 学会使用半固体培养基和显微镜观察细菌的动态行为。
二、实验原理细菌动力是指细菌在生长过程中,通过细胞表面结构(如鞭毛、纤毛等)进行运动的能力。
细菌的动力对细菌的生存、传播和致病具有重要意义。
本实验通过观察细菌在半固体培养基中的生长情况,判断细菌是否具有动力,并进一步了解其运动方式。
三、实验材料1. 细菌菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 半固体培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
3. 实验器材:接种针、酒精灯、无菌试管、无菌培养皿、显微镜等。
四、实验方法1. 接种:将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于无菌试管中,37℃培养24小时。
2. 制备半固体培养基:将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基加热溶解,冷却至45℃左右,加入适量的无菌水,使其成为半固体状态。
3. 分装:将制备好的半固体培养基分装于无菌培养皿中,每皿约1ml。
4. 接种:用接种针分别挑取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌的菌液,在半固体培养基上划线。
5. 观察:将培养皿置于37℃恒温培养箱中培养24小时,观察细菌在半固体培养基中的生长情况。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌:在半固体培养基中呈云雾状生长,穿刺线不明显,说明该菌具有动力。
2. 大肠杆菌:在半固体培养基中呈云雾状生长,穿刺线不明显,说明该菌具有动力。
3. 肺炎克雷伯菌:在半固体培养基中穿刺线清晰,无云雾状生长,说明该菌不具有动力。
六、实验讨论1. 细菌动力是细菌生存和致病的重要特征。
金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有动力,有利于它们在环境中传播和侵入宿主细胞。
2. 肺炎克雷伯菌不具有动力,可能与其在自然界中的生存环境有关。
该菌可能通过其他方式在环境中传播和生存。
3. 本实验通过观察细菌在半固体培养基中的生长情况,判断细菌是否具有动力。
该方法简单易行,适合用于实验室教学和科研。
实验四细菌的鞭⽑染⾊及运动性观察实验四细菌的鞭⽑染⾊及运动性观察⽣命科学学院林剑锋(200900140065)摘要为了在光学显微镜下观察到细菌的鞭⽑,我们⾸先采⽤媒染剂染细菌,使沉积在鞭⽑上,导致细菌鞭⽑直径加粗,再⽤染⾊剂染⾊。
媒染剂与染⾊剂反应,我们就能够在光学显微镜下看见细菌的“放⼤”的鞭⽑了。
然后,可以⽤压滴法观察细菌运动,简易地判断细菌是否被有鞭⽑。
关键词鞭⽑染⾊法(Flagella stain)周⽣鞭⽑端⽣鞭⽑压滴法细菌的鞭⽑极细,直径⼀般为10—20nm,只有⽤电⼦显微镜才能观察。
但是由于设备限制,我们希望能够在普通的光学显微镜下就能够看见细菌鞭⽑。
于是,便产⽣了鞭⽑染⾊法。
1958年Rhodes根据Fontana的螺旋体改良镀银染⾊法,建⽴了⼀种细菌鞭⽑镀银染⾊法。
试剂分为媒染剂和银染剂。
但是试剂的稳定性低,容易变质。
2002年⾕海瀛发明了⼀种新的细菌鞭⽑镀银染⾊法。
该法将媒染剂分为A、B两种。
A液为酸化FeCl3溶液,B液为15%单宁酸,含甲醛1 ml,⽤时A、B液等量混合,轻微加热,染⽚40s,再⽤银染液涂⽚加热⾄微冒蒸汽,染⾊10 s。
这种⽅法不仅染⾊效果好,⽽且解决了试剂稳定性差的问题,此种试剂常温下⾄少可保存1年。
通过鞭⽑染⾊,可以观察到鞭⽑形态、数量和鞭⽑在菌体分布的位置,鞭⽑数量和在菌体上的分布位置是鉴定细菌的重要依据之⼀,根据鞭⽑的这些特征,可将有动⼒细菌分为单端极鞭⽑菌、单端丛鞭⽑菌、周鞭⽑菌、侧鞭⽑菌。
有了这种简易的鞭⽑染⾊⽅法,对于我们的细菌研究来说就更加⽅便容易了。
1实验原理1.1染⾊原理鞭⽑染⾊⽅法很多,但其基本原理相同,即采⽤不稳定的胶体溶液做媒染剂,并使其沉淀于鞭⽑上⽽使“鞭⽑肿胀(tar and feather)”,鞭⽑直径加粗,进⼀步染⾊后即可在油镜下观察。
常⽤的媒染剂由丹宁酸和氯化⾼铁或钾明矾等配制⽽成。
1.2运动机理鞭⽑的功能相当于船的螺浆,在⽔中可以⾼速旋转从⽽推动菌体前⾏,因此⽔体环境才是鞭⽑细菌⾃由驰骋的天地。
细菌的运动性实验原理
细菌的运动性实验原理基于微生物学的原理和观察。
细菌的运动性是指细菌能够通过自身的运动机制改变位置的能力。
细菌的运动性主要通过鞭毛、鞭毛轴和纤毛等结构实现。
鞭毛是细菌上的一种长而薄的纤维结构,位于细菌表面,具有蠕动能力,可用于游动。
纤毛是一种比鞭毛更短更细的纤维结构,数量较多,呈刷状排列,也可用于运动。
实验中,可以通过显微镜观察细菌的运动情况。
细菌在液体培养基中可以自由游动,并呈现出旋转、盘旋、直线游动等不同的模式。
通过观察细菌在培养基中的运动情况,可以判断细菌的运动性质和形态特征。
除了直接观察细菌的运动,实验中还可以利用运动性差异来分离细菌。
例如,通过利用负性细菌的游动性差异,可以使用运动性较好的细菌从静止的细菌中分离出来。
这种方法被称为软琼脂鞘菌筛选法。
总结起来,细菌的运动性实验原理主要基于观察细菌在培养基中的运动情况,并利用运动性差异来做进一步的分离和鉴定工作。
鉴定细菌是否有动力的最简单方法鉴定细菌是否有动力是微生物学领域的重要课题之一,其结果将对环境保护、医学和食品安全等方面产生重要影响。
鉴定细菌是否有动力的最简单方法是通过观察其在特定条件下的运动行为,包括游动、游走和奔跑。
以下将介绍关于该问题的方法与步骤。
一、观察细菌的游动1. 准备工作:准备所需的培养基、显微镜、玻片和盖玻片等实验器材。
2. 培养细菌:将待观察的细菌接种于适宜的培养基中,培养到适当的浓度。
3. 取样观察:取适量培养好的细菌样品,放置在玻片上,覆盖盖玻片,然后通过显微镜进行观察。
4. 观察方法:调整显微镜的放大倍数,观察细菌在显微镜下的运动情况,特别是观察细菌的游动状态。
二、观察细菌的游走1. 准备工作:同上,准备所需的实验器材。
2. 培养细菌:同上,将待观察的细菌接种于适宜的培养基中,培养到适当的浓度。
3. 取样观察:同上,将培养好的细菌样品放置在玻片上,通过显微镜进行观察。
4. 观察方法:观察细菌在显微镜下的运动状况,特别是观察细菌的游走状态,并记录下观察到的情况。
三、观察细菌的奔跑1. 准备工作:同上。
2. 培养细菌:同上,将待观察的细菌接种于适宜的培养基中,培养到适当的浓度。
3. 取样观察:同上,将培养好的细菌样品放置在玻片上,通过显微镜进行观察。
4. 观察方法:观察细菌在显微镜下的运动状况,特别是观察细菌的奔跑状态,并记录下观察到的情况。
四、数据分析与鉴定通过以上观察,结合实验室记录,可以对细菌的运动行为进行分析和鉴定。
游动、游走和奔跑是细菌在不同生长条件下的运动状态,通过观察和记录细菌的运动行为,可快速鉴定细菌是否具有动力。
通过观察细菌的游动、游走和奔跑状态,结合实验室记录,可以得出细菌是否具有动力的初步鉴定结果。
这些方法简单直观,是最简单的细菌动力鉴定方法之一,对于初学者或者在实验条件有限的情况下具有一定的可操作性和实用性。
实验四细菌运动性的观察
姓名:贾晓霖
学号:201000140032
班级:生科10.1
同组成员:李江湲程子修洪钧烨
一、实验目的
1、学习压滴法观察细菌运动性。
2、学习鞭毛染色法,观察鞭毛的形态特征。
二、实验原理
鞭毛是细菌的纤细丝状“运动”器官。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm,只有用电镜才能直接观察到。
但是,如采用特殊的染色法,则在普通光学显微镜下也能看到它。
鞭毛染色方法很多,但其基本原理相同,即在染色前先用媒染剂处理,让它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。
鞭毛的着生方式多样,有一端单生,如铜绿假单胞菌;两端单生;一端丛生,如荧光假单胞菌;两端丛生,如蔓延螺菌以及周生,如大肠杆菌等。
三、实验器材
1、所需菌种
枯草芽孢杆菌(周生)
铜绿假单胞菌(端生)
2、溶液和试剂
0.01%美蓝染液,95%乙醇溶液,鞭毛染色液A,鞭毛染色液B。
3、仪器和其他用品
酒精灯,载玻片,盖玻片,显微镜,双层瓶(内装香柏油和二甲苯),擦镜纸,接种环,烧杯,试管架,镊子等。
四、实验内容
a)压滴法(说明一下我做的是铜绿假单胞菌)
1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净,自然晾干。
2、涂片在载玻片中央滴一小滴蒸馏水,点燃酒精灯,在火焰旁边从菌种斜面挑取少
量菌体与水滴充分混匀。
3、染色、镜检加0.01%美蓝染液染色,之后加盖玻片放于油镜下观察。
附:实验照片
b)鞭毛染色(说明一下我做的是铜绿假单胞菌)
1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净,自然晾干。
2、浸泡将适量95%乙醇倒入烧杯,将洗净晾干的载玻片放入有乙醇的烧杯中,浸泡
5min。
3、干燥将载玻片用镊子夹出,点燃酒精灯,将载玻片在酒精灯上小心过火干燥。
4、涂片将一小滴蒸馏水滴在载玻片一端,点燃酒精灯,在火焰旁边从菌种斜面挑取
少量菌体与水滴充分混匀,将载玻片有水滴的一端微微竖起,使有菌种的水滴自然从载玻片一端流到另一端,在载玻片上形成一条菌带。
5、干燥自然干燥。
6、染色、镜检先滴加A液,覆盖5min,用水流在载玻片反面冲洗掉,之后加B液冲
洗覆盖1min,然后在缓水流下按同样方法冲洗掉。
加热干燥后,镜检。
附:实验图片
视野中央偏上方可见一带有鞭毛的细菌,可是手机像素太低,所以可能看不清^o^
五、思考题
1、除鞭毛染色法外,还有什么方法能观察到鞭毛?
答:可直接在电子显微镜下观察,电子显微镜放大倍数高,可以观察到鞭毛。
2、如果你发现鞭毛已与菌体脱离,请解释原因。
答:(1)可能是菌龄过大,自然脱落;
(2)操作时玻片受到较强烈的震荡;
(3)接种时接种环在玻片上反复涂抹时使之脱落;
(4)染色过久使之脱落。