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微生物检验(完整版)微生物检验是一种用于检测和鉴定微生物的方法，它在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。
微生物检验可以帮助人们了解微生物的种类、数量、分布以及对人类和环境的影响，从而采取相应的控制和预防措施。
本文将从微生物检验的基本原理、常见方法和应用领域等方面进行介绍。
一、微生物检验的基本原理。
微生物检验的基本原理是通过对样品中的微生物进行分离、培养、鉴定和计数，从而得到微生物的种类和数量。
其主要包括以下几个步骤：1. 取样，首先需要从待检样品中取得适当的样品，如食品、水、空气、土壤等。
取样的方法和条件需根据具体的检验要求和标准来确定。
2. 分离，将样品中的微生物分离出来，通常采用的方法有稀释涂布法、滤膜法、过滤法等。
分离出的微生物可以进行后续的培养和鉴定。
3. 培养，将分离出的微生物进行培养，提供适当的营养物质和环境条件，促使微生物的生长和繁殖。
培养的时间和温度等条件需根据不同的微生物种类来确定。
4. 鉴定，对培养出的微生物进行形态学、生理学和生物化学特性等方面的鉴定，确定其种属和数量。
常用的鉴定方法有显微镜观察、生化试验、分子生物学方法等。
5. 计数，对培养出的微生物进行计数，得到微生物的数量。
常用的计数方法有平板计数法、膜过滤法、涂片计数法等。
二、微生物检验的常见方法。
微生物检验的常见方法主要包括传统方法和现代方法两大类。
1. 传统方法，传统方法主要包括涂布法、滤膜法、过滤法、薄层法等。
这些方法简单易行，成本低廉，适用于一般的微生物检验需求。
但传统方法通常需要较长的培养周期，且对微生物的种类和数量有一定的限制。
2. 现代方法，现代方法主要包括PCR法、蛋白质质谱法、流式细胞术等。
这些方法具有高灵敏度、高特异性和高通量的特点，能够快速准确地检测和鉴定微生物。
但现代方法的设备和技术要求较高，成本较高，适用于对微生物检验有较高要求的领域。
三、微生物检验的应用领域。
微生物检验在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。
基础知识1.致腹泻病毒有轮状病毒是儿童胃肠炎的首要病原体；杯状病毒是引起成人和大龄儿童非细菌性胃肠炎暴发流行的主要病原体；肠道腺病毒主要感染2岁以下儿童；可用大肠癌细胞分离培养星状病毒2.急性出血性结膜炎的病原为肠道病毒70型或柯萨奇A组24型3.某小学3年级同一个班级3天内陆续有5名学生患有临床症状相似的疾病，他们的主要症状和体征是发热、食欲减退、一侧或双侧腮腺肿胀伴疼痛追问病史，5名学生均未接种过麻腮风3联疫苗他们可能患有流行性腮腺炎4.致癌物的最终确定应该依据流行病学调查，剂量反应关系，哺乳动物终生实验5.针对耶尔森菌的分离方法有使用冷增菌方法6.无芽胞厌氧菌可导致腹腔脓肿7.抗酸染色后细菌呈细长略带弯曲红色杆菌是结核分枝杆菌邮局一名工作人员发现一个信封内有白色粉末物质，怀疑是有毒物质，派你参与采样和检测。
8.采样时的生物防护级别是一级生物防护9.为了迅速和正确地分析信封内白色粉末物质的来源和性质，你要采取的检测方法为动物接种、检测抗原和核酸10.开展检测的实验室条件应该具备BSL-2实验室11.运送信封内有白色粉末的标本，应该符合两个人乘坐单位车运送12.与细菌运动有关的结构是鞭毛13.可使细菌染色体畸变的原因是转座因子转移位置14.伤寒与副伤寒为乙类传染病，其传播方式为通过污染的食物、水经口传播15.人乳头瘤病毒感染实验室诊断最常用的方法是聚合酶链反应16.可通过垂直传播感染胎儿的病毒是风疹病毒，水痘一带状疱疹病毒，巨细胞病毒，人类免疫缺陷病毒17.可侵犯人体神经系统的病毒有肠道病毒70型，肠道病毒71型，脊髓灰质炎病毒，柯萨奇A组16型18.森林脑炎病毒在自然界存在的条件是森林、动物宿主和蜱19.培养分离流行性腮腺炎病毒，采样标本可来源于唾液、小便和脑脊液20.临床上常用下列哪种细胞分离腮腺炎病毒Vero21.当今人类中流行最广的虫媒病毒病是登革热22.病毒复制：只在活细胞内进行，从宿主细胞获得能量，病毒蛋白抑制宿主的DNA合成，利用宿主细胞的合成场所合成病毒蛋白质23.控制病毒遗传变异的主要成分是核酸24.对病毒干扰现象叙述是可使感染自然终止、与干扰素产生有关、与病毒竞争细胞受体有关、与缺陷性干扰颗粒有关25.决定病毒遗传、变异和复制的物质是核酸26.细胞融合有利于病毒的扩散27.迟发感染的特点是症状多为亚急性28.感染病毒的细胞在细胞核或胞浆内存在可着色的斑块状结构称为包涵体29.病毒中最易发生变异的病毒是流感病毒30.孕妇感染病毒后可引起胎儿先天性畸形的病毒是风疹病毒31.脊髓灰质炎病毒主要侵犯元脊髓前角运动神经32.对病毒衣壳的叙述是由多肽构成的壳粒组成，可增加病毒的感染性呈对称形式排列，可抵抗核酸酶和脂溶剂33.病毒免疫因素中中和抗体能阻止病毒吸附，分泌型IgA能阻止病毒从黏膜侵入，细胞免疫起主要作用，迟发型变态反应有局限病毒感染的作用34.生物安全柜的作用是保护操作者、环境和样品35.适合于登革病毒的分离和培养的细胞是C6/3636.狂犬病毒属于弹状病毒科37.荚膜是细菌的特殊结构，它具有很多功能，其中最重要的功能是抗吞噬38.检测沙眼病人标本时，一般采用做预处理的抗生素是链霉素39.分离军团病人的病原培养基是BCYE琼脂培养基40.在人工培养集中，能生长的最小的微生物是支原体41.缺乏细胞壁的原核细胞型微生物是螺旋体42.破伤风梭菌可导致毒血症43.慢性毒性试验的目的是确定长期接触毒物造成生物体损害的阈剂量、观察慢性毒性的毒作用靶器官、观察慢性毒性效应谱、观察慢性毒性作用特点44.根据流感病毒核蛋白与基质蛋白抗原性的不同，流感病毒又可分为3型45.常用的麻疹的诊断实验是ELISA检测急性期血清中特异性IgM抗体46.HIV抗体检测包括HIV抗体筛查试验和HIV抗体确认试验，国内常用的确认试验方法是免疫印迹试验47.人类可以从胃肠道的正常菌群获得的营养物质是B族维生素48.人类利用微生物资源开发的产品有米酒、酸奶、豆豉49.水痘-带状疱疹病毒的叙述是属疱疹病毒科、是DNA病毒、人类是唯一宿主、可长期潜伏于脊神经后根神经节内，再激活后引起带状疱疹50.细菌缺乏细胞壁结构在一定条件下仍可存活51.对L型细菌描述是L型细菌主要致病物质为毒素52.热原质的描述是G菌的热原质就是细胞壁中的脂多糖、液体中的热原质可用吸附剂或过滤等方法除去、是许多G-菌、少数G菌的一种合成性代谢产物、注入机体可致发热反应53.对病毒杀灭无效的因素是青霉素54.采取了患者的血液培养脑膜炎球菌时，符合标本采集和运送的原则是注意无菌操作采集标本、标本要立即送检并保温、保湿、在使用抗菌药物之前采集血液、采集的标本无菌操作接种到增菌肉汤中55.属于肠道正常菌群的是双歧杆菌56.为调整菌群严重失调，应使用益生素57.对于正常菌群的描述手足口病的主要病原是柯萨奇A组16型或肠道病毒71型58.手足口病的实验室诊断可采集的临床标本是粪便，咽拭子，疱疹液，血液59.手足口病的常用实验室诊断实验是RT-PCR60.2008年7月，3岁男孩，头痛、高热伴寒战2天就诊，2天后出现昏睡、颈项强直患儿居住地靠近水塘，家里养有生猪临床初步诊断是流行性乙型脑炎传播乙脑病毒的最重要的中间宿主是猪；乙脑主要传播媒介是三带喙库蚊61.用于乙脑病毒的分离和培养的细胞是C6／3662.携带和传播肾综合征出血热病病原的动物是鼠63.外来化合物经消化道吸收的主要方式是简单扩散64.伤寒病人发病第1周内，分离病原菌应采取的标本血液65.慢性寄生虫感染时，人体内Ig升高显著的是IgE66.进行肠道菌生化鉴定，除了IMViC试验，还要进行的试验是糖发酵试验67.拟态弧菌与霍乱弧菌生化特性上最重要的区别是拟态弧菌不发酵蔗糖68.流行性斑疹伤寒的病原体是普氏立克次体69.目前检测的鼠疫抗体主要是Fl抗体70.杀灭物体表面病原微生物的方法称为消毒71.患者3岁，突然高热，头痛，喷射状呕吐，皮肤出血点，颈项强直，脑脊液较混浊为确诊此病是流脑，脑脊液接种到巧克力琼脂上培养脑膜炎球菌时需要传染性非典型肺炎冠状病毒抗体中和试验检测的是总抗体72.人禽流感患者发病初期尚未产生抗体，用于确诊的方法是病毒核酸检测73.生殖器疱疹的主要病原是II型单纯疱疹病毒(HSV-2)74.传播途径包含性传播途径的病毒是人类免疫缺陷病毒，丙型肝炎病毒，II型单纯疱疹病毒，人乳头瘤病毒75.II型单纯疱疹病毒的分离主要采集小便76.按照《突发公共卫生事件应急条例》把突发公共卫生事件分为四级，其中把烈性病菌株或毒株等丢失事件划归为T级突发公共卫生事件77.产品质量检验机构在考核人员的工作成绩时，首先应考核检验质景78.检测大肠菌群一般使用超净工作台79.属于真核细胞微生物的是真菌80.判断灭菌是否彻底的指标是杀菌芽胞81.具有黏附作用以增强细菌侵袭力的结构是普通菌毛82.在人工培养集中，能生长的最小的微生物是支原体83.可以称为病毒体的是核衣壳84.卫生标准是指“为保护人的健康，对食品、医药及其他方面的卫生要求制定的标准”85.我国产品质量检验机构用于检验的仪器设备实行标志管理，可贴合格证的仪器设备是仪器设备经计量部门检定合格者86.《病原微生物实验室生物安全管理条例》规定我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物属于第一类病原微生物87.药敏试验中，MIC的含义是最低抑菌浓度88.不含有核酸的微生物是朊粒89.突变使细菌遗传物质发生溶原性转换基因重组质粒丢失核苷酸序列改变90.腹泻呈脓血便，有里急后重症状，曾称志贺样大肠埃希菌的是肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)91.某男性青年午餐后数小时出现头晕、恶心、腹痛、呕吐等症状呕吐物接种到血液琼脂平血培养出现完全溶血环，金黄色菌落培养滤液给幼猫腹腔注射4小时后出现呕吐，此病可初步诊断为金黄色葡萄球菌引起的食物中毒92.构体病的主要传染源是黑线姬鼠93.大肠菌群计数国家标准是GB4789.3-201094.我国法定计量单位中，属于国际单位制的辅助单位是平面角，弧度95.法定计量单位中，属于国际单位制中具有专门名称的导出单位是压力，帕96.苯扎溴铵用于皮肤表面消毒的常用浓度是0.05%～0.10%97.实验室常用干烤法灭菌的器材是玻璃器吼98.煮沸消毒法，煮沸100℃5分钟可杀死细菌繁殖体,可用于一般外科手术器械、注射器、针头的消毒,水中加入126～2%碳酸氢钠，可提高沸点到105℃,常用于食具消毒99.用于测量病毒大小的单位是纳米(nm)100.感染人的禽流感病毒Ⅱ型主要为HsNi、HgNZ和HTN7101.传染性非典型肺炎血清学诊断的金标准是传染性非典型肺炎冠状病毒抗体中和试验102.我国法定计量单位中，属于国家选定的非国际单位制单位是体积，升103.染色体畸变的描述是DNA断裂的结果、染色体结构异常、染色体数目异常、光镜下可见104.霍乱弧菌分离的说法是O1群与O139群霍乱弧菌营养要求简单、可采取直接分离和增菌后分离的方法、对于水样便可直接接种TCBS选择性平板、对于含菌量少的样品宜用碱性蛋白冻水增菌105.荚膜是细菌的特殊结构，它具有很多功能，其中最重要的功能是抗吞噬106.霍乱弧菌依据0抗原的不同有200多血清群，其中致病的有0i群霍乱弧菌107.可以通过气溶胶方式传播的立克次体是Q热立克次体108.在生物学上的位置介于细菌与原虫之间螺旋体109.缺乏细胞壁的原核细胞型微生物是支原体110.通过性菌毛相互连接沟通进行DNA转移的是接合111.细菌直接摄取外源DNA的是转化112.引起人类痢疾的病原菌是志贺菌113.人类肠道的正常菌群是粪链球菌114.我国法定计量单位中，属于国际单位制的基本单位是质量，千克115.对L型细菌描述正确的是L型细菌主要致病物质为毒素116.大肠菌素属于细菌素117.破伤风梭菌可导致毒血症118.嗜冷菌最适温为10～20℃，嗜温菌为20～40℃，嗜热菌为50～60℃119.细菌代谢所需能量主要以生物氧化作用而来120.饮用水中1ml菌落总数不超过100个，1000ml水中大肠杆菌群不超过3个121.流感病毒主要传播途径是空气飞沫122.有芽胞破伤风菌需沸水煮3h才杀死水中加入2%碳酸钠能将沸点提到105℃又能防止金属生锈123.滤菌器用于除菌的孔径是0.22µm，另外以石棉板为滤板的金属滤器称Seitz滤器（蔡氏滤器）按滤孔大小124.影响基因表达的因素有调控部位，调节蛋白，效应分子125.质粒不依赖染色体而复制，不相容性，转移性，指令性主要有耐药质粒，Col质粒（编码肠毒素）Vi质粒（编码细菌与致病性有关的蛋白）126.细菌主要的繁殖方式为二分裂方式繁殖127.溶原性转换是指噬菌体的基因与细菌染色体DNA的重组128.属于逆转录病毒的是人类免疫缺陷病毒129.在检测工作公正性的措施中,包括明确对所有险测提供相同质量的服务，检测结果不受行政的、经济的和其他方面利益的干预，为用户保守技术秘密，检验人员不从事所检产品的技术开发工作130.在选择使用检测检验方法时，应优先选择的方法是具有GB或GB/T号的标准方法131.检验方法是卫生标准的重要部分要确保卫生标准的量值准确，检测检验方法要规范化和标准化132.我国第一部实验室生物安全国家标准是《实验室生物安全通用要求》133.与动物细胞比较，细菌所特有的一种重要结构是具有核糖体134.与细菌黏附于黏膜的能力有关的结构是菌毛135.细菌所具有的细胞器是核糖体136.细菌对糖的吸收是基团移位137.细菌形态、染色、生物活性很典型的时期是对数生长期138.荚膜是具有免疫原性，可用于鉴别细菌，可增强细菌对热的抵抗力，具有抗吞噬作用，化学成分可是多糖，也可是多肽等139.去除热原质最好的方法是蒸馏法140.B SL-3以上实验室应该使用全排生物安全柜141.超净工作台的作用是保护环境和样品142.检测致病菌一般使用生物安全柜143.转位因子为存在于细菌染色体或质粒上的一特异的核苷酸序列可在DNA中移动，主要有三类：插入顺序（最小的转位因子），转座子，转座噬菌体144.我国最早实验室生物安全卫生行业标准是《微生物实验室生物安全通用准则》145.沙门菌检验国家标准是GB／T4789.4-2010146.决定病毒具有感染性的是核酸147.病毒单纯疱疹病毒1型可引起人类口唇疱疹148.属于病毒界的微生物是噬菌体149.引起人类克一雅病,库鲁病的病原是朊病毒（朊粒）150.通过消化道传播的病毒是HEV151.在乙型肝炎患者血清中可查出病毒颗粒的形态是小球形颗粒、管形颗粒和Dane颗粒rE，颗粒152.乙型肝炎病毒最重要的传播途径是输血及血源性传播153.肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒，肠道病毒71型(EV71)，甲型肝炎病毒(HAV)，ECHO病毒154.孕妇感染风疹病毒早期诊断常用的诊断方法有孕妇血清中特异性IgM抗体155.登革热病毒的传播途径是虫媒传播156.培养基的制备和质量控制规定标准是GB／T4789.28157.食品微生物检验的生物安全标准应该符合GB19489 158.属于非细胞型微生物的是衣原体159.原生质体与原生质球都是细胞壁缺陷的细菌160.肽聚糖的结构由聚糖骨架，四肽侧链和五肽交联桥（G－无交联桥）磷壁酸为G＋特有，分壁和膜两种161.外膜层由脂多糖，脂质双层，脂蛋白组成细胞质内有核蛋白体（蛋白合成地），核质（主要遗传物质）质粒，162.R NA主要存在于细胞质中占细菌干重的10%，DNA存在于染色体和质粒中163.细菌营养转运的方式有离子，透性酶，磷酸酶164.营养摄取的机制是被动扩散，主动吸收基团转位165.人乳头瘤病毒可引起尖锐湿疣166.与细菌的运动有关的结构是鞭毛167.革兰染色阴性，弧形或逗点状的细菌是霍乱弧菌168.菌体细长弯曲，革兰染色阳性，亚甲蓝染色可见菌体内有异染颗粒的细菌是白喉杆菌169.革兰染色阳性呈竹节状排列的大肠杆菌是炭疽芽胞杆菌170.代谢第三阶段通过三羧酸循环将第二阶段产物分解成C02171.为防止肠道传染病发生，蔬菜、瓜果可选用的最佳消毒剂是84消毒液172.血清学检测时，电解质浓度通常是0.9%173.对肝炎患者用过的餐具进行消毒最好选用过氧乙酸174.最快的细菌计数方法是显微镜直接计数法175.人类皮肤上的正常菌群是铜绿假单胞菌176.源性疾病的病原菌是单核增生李斯特菌177.名儿童忠低热、阵发性痉挛性咳嗽，偶有特殊的”鸡呜”样吼声患者鼻咽分泌物涂片镜检可见革兰阴性短小杆菌，咳痰涂片荧光抗体染色镜检亦可见病原菌此病原菌可初步判断为百日咳杆菌感染178.莱姆病主要病原体是伯氏道疏螺旋体179.腹泻旱脓血便，有里急后重症状，曾称志贺样大肠埃希菌的是肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)180.结核病近年来重新抬头的原因主要是耐药性的出现专业知识3.红细胞在Alsever液中的保存期限4℃保存1个月4.一般的细菌生长最适宜的PH值是PH7.0-7.65.含有糖的培养基，高压时避免糖的破坏，在压15分钟时压力应为0.56kg/cm26.在病毒的提纯过程中，将大部分细胞碎块和其他杂质去除的最有效最常用的方法是低速离心7.离子交换层析主要用于分离和纯化蛋白，常用介质是纤维素8.凝胶过滤法主要用于蛋白或核酸分离，此法又称分子筛层析法，常用介质是葡聚糖9.噬菌体用于细菌鉴定的原理正确的是噬菌体可以根据细菌某些受体来裂解目标菌10.紫外透射仪的用途是紫外光下看DNA条带11.鉴定肠杆菌科的基本条件是发酵葡萄糖，氧化酶阴性，还原硝酸盐12.PAGE原理是凝胶介质形成立体多孔网状结构，分离条带上边是大分子13.过硫酸铵在PAGE制备中起的作用是催化聚合14.SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，十二烷基硫酸钠作用是解离蛋白15.聚丙烯酰胺凝胶电泳中，凝胶不仅有分子筛效应，还具有浓缩效应，两性电解质是制备该电泳凝胶不同pH重要物质，用聚丙烯酰胺制备等电聚焦凝胶，主要用于蛋白质分离16.琼脂糖凝胶电泳用于核酸分离与纯化，分离DNA片段最佳范围为200bp～50kb17.人喉癌上皮细胞Hep-218.传代保存菌种的方式很容易造成菌种突变而失去原来的性质，因而现代微生物实验室中，除了少数不耐冷的细菌，或者只作为短期使用的工作菌株时，已经不再使用传代保存的方式了分离培养螺旋体时需用Korthof培养基其中含有10%的兔血清19.破碎细菌细胞作用常用的方法是酶处理法、SDS处理等，较少用冻融法20.含有万古霉素和多粘菌素B的巧克力琼脂培养基常用于分离脑膜炎球菌21.试管凝集法检测军团菌时，抗体的阳性标准为≥1：32022.结核菌素试验时，72小时后结果判断为弱阳性反应，其局部肿大直径范围为≥20mm23.三糖铁培养基与双糖铁培养基的区别在于加与不加蔗糖24.细菌染色标本制作基本步骤涂片—干燥—固定—染色25.钩端螺旋体适宜的生长温度是28℃26.用显微镜检验已染色的标本最合适的亮度是很强27.病毒实验中用于浸泡和清洁玻璃器材的清洁浸泡液含有硫酸和重酪酸钾28.观察细菌内部的超微结构需要采用电子显微镜29.病毒分离培养常用的细胞类型可分为原代细胞、二倍体细胞和传代细胞三大类传代细胞与原代细胞的根本区别是能否在体外无限传代30.组织培养细胞接种必须首选敏感细胞的关键原冈是病毒对细胞的感染性具有严格的选择性和特异性31.病毒蚀斑技术是指病毒在已长成的单层细胞上形成的局限性病灶改变32.既可用于病毒的纯化又可用于病毒悬液中感染病毒含量的测定的实验技术是病毒空斑技术33.组织培养是分离和培养病毒以及进行病毒学实验研究的简便而有效的丁具和手段在组织培养系统中判定病毒增殖的最直接方法是观察细胞病变34.CPE可以表现为严重的细胞破坏、肿大、颗粒增多、细胞融合成合胞体或无明显细胞变化35.病毒的分子生物学鉴定包括病毒核酸和蛋白质测定，蛋白质测定可使用免疫测定技术、电泳技术和质谱技术等36.欲对血清培养基进行灭菌，宜选用间歇灭菌法37.血清、抗毒素等可用滤菌器过滤方法除菌38.在病人死后，用于分离病毒的尸体标本的采集时限是6小时内39.用组织制作分离病毒的标本时，通常将组织制成10%的悬液保存40.细胞培养技术全过程的关键是防止污染41.高压蒸汽灭菌器杀灭所有细菌芽胞和繁殖体要求103.4kpa的压力121.3℃15~25min42.对粪便标本增菌培养沙门氏菌合适的培养基是亚硒酸盐胱氨酸增菌液43.美兰在细菌学中也是常用染料之一,它是指碱性染料44.细菌生长繁殖中所需营养物质，其中葡萄糖、淀粉、甘露醇等属于碳源45.对患者进行传染病诊断时，常常采用CFT，在CFT反应必不可少的成份是补体，在一般的CFT反应中所用的补体是来源于豚鼠Power by YOZOSOFT相关专业知识1.在细菌里能发现蛋白质合成开始的位置的是rRNA和mRNA之间一段互补序列2.生物基因组分子量巨大3.-次精确的测定生物基因组的方法称为高通量检测技术4.就模板DNA而言，影响PCR的主要因素是模板的数量，模板的纯度5.-般DNA的物理图谱表示的方式为以直线图式6.多重PCR需要的引物对为多对引物7.PCR产物的分析方法有酶切分析，分子杂交，序列分析，电泳分析8.可以用鼠疫杆菌多重PCR电泳产生的条带判断弱毒株的方法为产生一条目标条带和一条对照条带9.多重PCR电泳产生的一条对照条带或多数不规则的条带判断结果为阴性结果10.多重PCR电泳没有产生条带判断结果为无效结果11.在真核生物核糖体的五种主要的组蛋白中，在进化中最不保守的是Hl蛋白12.质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行构建的，构建方法为人工构建13.DNA标本的保存方法为冷冻14.生物芯片的最大特点为生物芯片的主要特征是高通量、微型化和自动化15.在DNA凝胶电泳过程中，不同构象的DJ\TA的泳动率通常为超螺旋>线性>切口环状16.在PCR反应中，经过n次循环，理论上DNA链的数目扩增了2n倍17.提高质粒的收获量，可以在细菌生长到足够量时加入抑制蛋白合成的抗生素18.生物芯片的描述是常用的生物芯片分为三大类，即基因芯片、蛋白质芯片和芯片实验室，生物芯片的主要特点是高通最、微型化和自动化，生物芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，基因芯片可分为主动式芯片和被动式芯片19.基因芯片的应用领域包括疾病诊断，环境监测，食品卫生，药物筛选20.体内DNA复制时必须具备的引物是NA和RNA21.属于酶切技术的是DNA物理图谱22.肺炎病人痰标本为翠绿色脓痰，应考虑绿脓杆菌感染23.采用抗原体反应对传染病进行诊断，抗原与抗体的比例为3：224.急性、亚慢性、慢性毒性试验分别选择动物年龄为初成年，性刚成熟，初断乳25.急性经口染毒，为了准确地将受试物染人消化道中，多采用灌胃26.距慢性毒性试验对动物的要求是大鼠100g左右，小鼠15g左右27.在核酸分子杂交技术基础之上又发展了一系列检测DNA和RNA的技术，其中包括Southernblotting，菌落杂交，Northernblotting，dotblotting28.医生怀疑某患者可能有链球菌和肺炎链球菌感染，拟进行环状沉淀试验鉴定其微量抗原，以助于疾病的诊断。
微生物检测服务
近期，出现的三全水饺“病菌门”和蒙牛雪糕微生物超标现象，引起了社会的广泛关注。
微生物检测实属食品检测的重要项目，餐饮业、加工食品的微生物指标都需要达到标准，否则将危害人类健康。
SAG中检联检测是新版《中华人民共和国食品安全法》颁布后广东省首家得CMAF食品检验资质的权威第三方检测机构。
在微生物检测领域拥有丰富的经验，专业也得到了国内、国际知名企业的认可。
可以对菌落总数、致病菌、有益菌等进行检测，保证产品质量安全。
微生物检验（完整版）名解微生物：是一群个体微小结构简单肉眼不能看见的微小生物的总称种：亲缘关系较近的微生物群体在进化发育阶段上有一定的共同形态和生理特征微生物学：生物学的一个分支是研究微生物在一定条件下的形态结构生理生化遗传变异特性及微生物的进化分类生态等生命活动规律以及微生物之间与人类动植物自然界互相关系的一门科学抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的微量生物活性物质细菌素：是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质条件致病菌：正常菌群在宿主体内具有相对稳定性一般不致病消毒：指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法灭菌：指杀灭物体上所有的微生物的方法防腐：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法无菌：指没有货的微生物的存在质粒：是细菌染色体外的遗传物质也是环状闭合的双联DNA分子比染色体小存在于细胞质中可自主复制突变：是指细菌遗传物质的机构发生突然而稳定的改变所致的变异现象可遗传给后代基因转移：外源性物质由供体菌转入受体细胞内的过程基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞并在其中自行复制与表达或矛受体菌DNA整合在一起的过程病毒：是一类个体微小结构简单只含一种核酸只能在活的易感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物复制周期：病毒的增殖被人为分成吸附穿入脱壳生物合成装配成熟与释放七个步骤的完整过程缺陷病毒：是指因病毒基因组不完整或因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒顿挫感染：病毒进入宿主细胞若细胞缺乏病毒复制所需的酶能量和必要成分等则病毒无法合成自身成分不能够装配和释放子代病毒的现象干扰现象：两种病毒感染同一种细胞时可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象人工自动免疫：是将疫苗等免疫原接种于人体刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答使机体获得特异性免疫力人工被动免疫：是指注射含某种病毒特异性中和抗体的免疫血清等一系列细胞因子是机体立即获得特异性免疫干扰素：是由病毒或干扰素诱生剂作用于中性粒细胞成纤维细胞或免疫细胞产生的一种糖蛋白致病性：一定种类的病原微生物在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力半数致死量：在规定时间内通过一定途径能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小病原体数量或毒素量急性感染：发作突然病程较短一般是数天或数周局部感染：病原体侵入机体后局限就在一定部位生长繁殖引起病变的一种感染类型毒血症：致病菌侵入宿主体后只在机体局部生长繁殖病菌不进入血液循环但其产生的外毒素入血引起特殊的毒性症状败血症：致病菌侵入血流后在其中大量繁殖并产生毒性产物引起全身性毒性症状内毒素血症：革兰阴性菌侵入血流并在其中大量繁殖崩解后释放出大量毒素也可有病灶内大量革兰阴性菌死亡释放的内毒素入血所致培养基：是指人工方法配制的适合细菌生长繁殖的营养基质CFU：菌落形成单位细胞病变效应（CPE）：是指某些病毒感染组织细胞后正常生长的梭形细胞变圆变性坏死溶解及从培养瓶壁脱落细胞堆积形成葡萄状包涵体：某些病毒感染细胞后可在细胞核或细胞质中形成包涵体医院感染：是指住院患者在医院内获得的感染包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染但不包括在入院前已开始或住院时已存在的感染填空●根据微生物的大小、结构和组成不同可分为三大类型：非细胞型微生物原核细胞型微生物真核细胞型微生物●微生物的分类等级与其他生物相同依次为：界、门、纲、目、科、种、属其中种是最基本的分类●细菌的基本机构是由各种细菌共有的节后由外向内依次为：细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等●细菌L型的只要生物学特性：多形性普通培养不声张可返祖可致病●细菌的繁殖方式：二分裂繁殖以2的N次方数量增长●细菌的生长曲线：迟缓期对数期稳定期衰亡期●细菌产生的色素有两类：水溶性色素脂溶性色素进行水的卫生微生物学检验时一般以大肠埃希菌作为水被粪便污染的重要指标通过测定大肠菌群数来判定水源被污染的程度目前我国规定生活饮用水的的标准是：1ml水肿的细菌总数不超过100cfu●空气中的细菌一般以甲链作为指示菌●热力灭菌法又分为：干热灭菌法（包括焚烧烧灼干烤法）和湿热灭菌法（主要高压蒸汽灭菌法间歇灭菌法巴士消毒法煮沸法）●热力灭菌法的原理是：高温加热●影响消毒剂的因素：消毒剂微生物的种类和数量温度与酸碱度环境中化学拮抗物质的存在●噬菌体的结构：由头部尾部两部分组成头部外壳为蛋白质内含核酸；尾部由尾领尾鞘尾髓尾板尾词和尾丝组成●真菌的变异三种表现形式：真菌形态、机构变异真菌菌落变异真菌抗药性变异●外毒素：具有菌种特异性毒性作用较强具有组织选择性良好的免疫原性不耐热易被酸和蛋白水解酶灭活●细菌全身感染在临床上常见的有下列情况几种情况：毒血症菌血症败血症脓毒血症内毒素血症●按培养基的物理性状可分为3类：液体培养基半固体培养基固体培养基●培养基的制备程序：调配溶化矫正PH 过滤澄清分装●细菌在液体培养基的生长现象：浑浊沉淀菌膜●细菌菌落一般分为下列3种类型：光滑型粗糙型黏液型●HCV的生物学特性：具有包膜的单正链RNA病毒球形对氯仿、甲醛、乙醚等有机溶剂敏感问答1.微生物的特点A，个体微小，结构简单B，比表面积大，吸收多，转化快，C，繁殖快，代谢强D，适应强，易变异，易人工培养E，种类多，分布广，观察和研究手段特殊2.微生物命名国际上多采用拉丁文林奈双命名法，又属名和种名组成，a，属名在前，名词，首字母大写；b，种名在后，形容词，均用小写；两者用斜体表示。
微生物检测报告一、引言微生物检测是食品安全和质量控制中不可或缺的一部分。
通过对食品、环境、设备等样本进行微生物检测，可以有效地评估和监控其在生产、加工、储存和使用过程中的卫生状况和潜在风险。
本报告旨在介绍微生物检测的基本概念、方法和应用，并强调其对于保障食品安全和公共卫生的重要性。
二、微生物检测概述微生物检测主要针对细菌、病毒、真菌等微生物进行检测。
这些微生物可能对人类健康产生负面影响，引起食物中毒、感染和疾病。
微生物检测方法包括培养法、免疫学方法、分子生物学方法等。
其中，培养法是最经典的方法，通过培养样本中的微生物，观察其生长和繁殖情况来判断是否存在目标微生物。
免疫学方法则利用抗体与抗原的特异性结合原理，快速、灵敏地检测样本中的目标微生物。
分子生物学方法则通过对微生物的基因序列进行分析，进行快速、准确的检测。
三、微生物检测应用1、食品工业：在食品工业中，微生物检测主要用于监控食品中的微生物污染程度，以确保食品安全。
通过对食品原料、生产过程和成品的检测，可以及时发现和控制潜在的微生物污染源，保障食品质量和安全。
2、临床医学：在临床医学领域，微生物检测主要用于诊断和治疗感染性疾病。
通过对患者样本进行检测，可以快速准确地确定病原微生物，为医生提供准确的诊断依据和治疗方案。
3、环境监测：在环境监测中，微生物检测可用于评估环境污染程度和预测生态风险。
通过对水体、土壤、空气等环境样本进行检测，可以了解环境中存在的微生物种类和数量，为环境保护和风险管理提供依据。
四、微生物检测注意事项1、样本采集：采集样本时应选择具有代表性的部位，避免受到污染和变质。
同时，采集过程应遵循无菌操作原则，确保样本的原始性。
2、实验室安全：在实验室进行微生物检测时，应采取必要的防护措施，如穿戴实验服、戴手套、戴口罩等，确保实验操作的安全性。
实验室应定期进行消毒和清洁，确保实验环境的卫生。
3、数据分析：数据分析是微生物检测的重要环节。
微生物检验（完整版）名解微生物：是一群个体微小结构简单肉眼不能看见的微小生物的总称种：亲缘关系较近的微生物群体在进化发育阶段上有一定的共同形态和生理特征微生物学：生物学的一个分支是研究微生物在一定条件下的形态结构生理生化遗传变异特性及微生物的进化分类生态等生命活动规律以及微生物之间与人类动植物自然界互相关系的一门科学抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的微量生物活性物质细菌素：是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质条件致病菌：正常菌群在宿主体内具有相对稳定性一般不致病消毒：指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法灭菌：指杀灭物体上所有的微生物的方法防腐：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法无菌：指没有货的微生物的存在质粒：是细菌染色体外的遗传物质也是环状闭合的双联DNA分子比染色体小存在于细胞质中可自主复制突变：是指细菌遗传物质的机构发生突然而稳定的改变所致的变异现象可遗传给后代基因转移：外源性物质由供体菌转入受体细胞内的过程基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞并在其中自行复制与表达或矛受体菌DNA整合在一起的过程病毒：是一类个体微小结构简单只含一种核酸只能在活的易感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物复制周期：病毒的增殖被人为分成吸附穿入脱壳生物合成装配成熟与释放七个步骤的完整过程缺陷病毒：是指因病毒基因组不完整或因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒顿挫感染：病毒进入宿主细胞若细胞缺乏病毒复制所需的酶能量和必要成分等则病毒无法合成自身成分不能够装配和释放子代病毒的现象干扰现象：两种病毒感染同一种细胞时可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象人工自动免疫：是将疫苗等免疫原接种于人体刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答使机体获得特异性免疫力人工被动免疫：是指注射含某种病毒特异性中和抗体的免疫血清等一系列细胞因子是机体立即获得特异性免疫干扰素：是由病毒或干扰素诱生剂作用于中性粒细胞成纤维细胞或免疫细胞产生的一种糖蛋白致病性：一定种类的病原微生物在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力半数致死量：在规定时间内通过一定途径能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小病原体数量或毒素量急性感染：发作突然病程较短一般是数天或数周局部感染：病原体侵入机体后局限就在一定部位生长繁殖引起病变的一种感染类型毒血症：致病菌侵入宿主体后只在机体局部生长繁殖病菌不进入血液循环但其产生的外毒素入血引起特殊的毒性症状败血症：致病菌侵入血流后在其中大量繁殖并产生毒性产物引起全身性毒性症状内毒素血症：革兰阴性菌侵入血流并在其中大量繁殖崩解后释放出大量毒素也可有病灶内大量革兰阴性菌死亡释放的内毒素入血所致培养基：是指人工方法配制的适合细菌生长繁殖的营养基质CFU：菌落形成单位细胞病变效应（CPE）：是指某些病毒感染组织细胞后正常生长的梭形细胞变圆变性坏死溶解及从培养瓶壁脱落细胞堆积形成葡萄状包涵体：某些病毒感染细胞后可在细胞核或细胞质中形成包涵体医院感染：是指住院患者在医院内获得的感染包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染但不包括在入院前已开始或住院时已存在的感染填空根据微生物的大小、结构和组成不同可分为三大类型：非细胞型微生物原核细胞型微生物真核细胞型微生物微生物的分类等级与其他生物相同依次为：界、门、纲、目、科、种、属其中种是最基本的分类细菌的基本机构是由各种细菌共有的节后由外向内依次为：细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等细菌L型的只要生物学特性：多形性普通培养不声张可返祖可致病细菌的繁殖方式：二分裂繁殖以2的N次方数量增长细菌的生长曲线：迟缓期对数期稳定期衰亡期细菌产生的色素有两类：水溶性色素脂溶性色素进行水的卫生微生物学检验时一般以大肠埃希菌作为水被粪便污染的重要指标通过测定大肠菌群数来判定水源被污染的程度目前我国规定生活饮用水的的标准是：1ml水肿的细菌总数不超过100cfu空气中的细菌一般以甲链作为指示菌热力灭菌法又分为：干热灭菌法（包括焚烧烧灼干烤法）和湿热灭菌法（主要高压蒸汽灭菌法间歇灭菌法巴士消毒法煮沸法）热力灭菌法的原理是：高温加热影响消毒剂的因素：消毒剂微生物的种类和数量温度与酸碱度环境中化学拮抗物质的存在噬菌体的结构：由头部尾部两部分组成头部外壳为蛋白质内含核酸；尾部由尾领尾鞘尾髓尾板尾词和尾丝组成真菌的变异三种表现形式：真菌形态、机构变异真菌菌落变异真菌抗药性变异外毒素：具有菌种特异性毒性作用较强具有组织选择性良好的免疫原性不耐热易被酸和蛋白水解酶灭活细菌全身感染在临床上常见的有下列情况几种情况：毒血症菌血症败血症脓毒血症内毒素血症按培养基的物理性状可分为3类：液体培养基半固体培养基固体培养基培养基的制备程序：调配溶化矫正PH过滤澄清分装细菌在液体培养基的生长现象：浑浊沉淀菌膜细菌菌落一般分为下列3种类型：光滑型粗糙型黏液型HCV的生物学特性：具有包膜的单正链RNA病毒球形对氯仿、甲醛、乙醚等有机溶剂敏感问答1.微生物的特点A，个体微小，结构简单B，比表面积大，吸收多，转化快，C，繁殖快，代谢强D，适应强，易变异，易人工培养E，种类多，分布广，观察和研究手段特殊2.微生物命名国际上多采用拉丁文林奈双命名法，又属名和种名组成，a，属名在前，名词，首字母大写；b，种名在后，形容词，均用小写；两者用斜体表示。
微生物检验技术介绍微生物检验技术是医学、生物学、化学等多个学科领域交叉融合的前沿技术，其主要目的是通过对微生物的形态、结构、生理生化特性等进行观察、测定和分析，为疾病诊断、病原体鉴定、流行病学调查等方面提供重要依据。
以下是微生物检验技术的主要内容：一、传统微生物学检验技术传统微生物学检验技术是建立在经典微生物学的基础上，通过形态学、生理生化等特征对微生物进行鉴定和分类。
该方法具有简单、直观、快速等优点，但易受主观因素和经验限制，且无法对某些微生物进行准确鉴定。
1、显微镜检查显微镜检查是微生物检验的基本方法之一，通过观察微生物的形态、大小、结构等特征，对微生物进行初步鉴定。
该方法主要用于细菌、真菌等微生物的观察。
2、培养基培养培养基培养是一种常用的微生物分离培养方法，通过在培养基中接种微生物，观察其生长情况，进行分离、鉴定和计数。
该方法可用于细菌、真菌等微生物的培养。
3、生化鉴定生化鉴定是通过测定微生物对各种生化试剂的反应，了解其生理生化特性，从而对微生物进行鉴定和分类。
该方法可用于细菌、酵母菌等微生物的鉴定。
二、现代微生物学检验技术随着科技的发展，现代微生物学检验技术越来越趋向于自动化、快速化和高精度化。
以下是一些常见的现代微生物学检验技术：1、免疫学检测技术免疫学检测技术是一种基于抗原-抗体反应的检测方法，通过制备特异性抗体，对样本中的抗原进行检测。
该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，已被广泛应用于医学、食品等领域。
2、分子生物学检测技术分子生物学检测技术是一种基于DNA或RNA等核酸分子的检测方法，通过分析核酸分子的序列、结构等特征，对微生物进行鉴定和分类。
该方法具有高精度、高特异性等优点，但需要一定的技术和设备支持。
3、色谱-质谱联用技术色谱-质谱联用技术是一种将色谱分离与质谱鉴定相结合的检测方法，通过将样本中的化合物进行分离和鉴定，了解其化学性质和结构特征。
该方法可用于细菌、真菌等微生物产生的代谢产物的鉴定。
实验三环境微生物的检测一、实验目的1.了解周围环境中微生物的分布情况;2.懂得无菌操作在微生物实验中的重要性;3.了解四大类微生物的菌落特征;二、实验原理在我们周围的环境中存在着种类繁多的、数量庞大的微生物;土壤、江河湖海、尘埃、空气、各种物体的表面以及人和动物体的口腔、呼吸道、消化道等都存在着各种微生物;由于它们体积微小,人们用肉眼无法观察到它们个体的存在;但是只要稍加留意,我们就可以在发霉的面包、朽木上看到某些微生物群体;这些现象表明,自然界只要有微生物可以利用的物质和环境条件,微生物就可以在其上生长繁殖;据此,我们在实验室里就可以用培养基来培养微生物;培养基是用人工配制的、适合微生物生长繁殖和产生代谢产物用的混合养料;其中含有微生物所需要的六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、生长因子、气体和水分;此外,根据不同的微生物的要求,在配制培养基时还需用酸液或碱液调节至适宜的pH;配制好的培养基必须进行灭菌;所谓灭菌是指采用各类的物理或化学因素,使物体内外的所有微生物丧失其生长繁殖能力的措施;经过灭菌后的物体是无菌的;消毒是与灭菌完全不同的概念,它是指用较温和的物理因素杀死物体表面和内部病原微生物的一种常用的卫生措施;灭菌的方法较多,广泛使用的是高温灭菌,其中最常用的是高压蒸汽灭菌法;此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的;在cm2的蒸汽压力下,温度可达121℃;一般只要维持15~20min,就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子;微生物的接种技术是生物科学研究中的一项最基本操作技术;为了确保纯种不被杂菌污染,在整个接种过程中,必须进行严格的无菌操作;在实验过程中必须牢固树立无菌概念,经常保持实验台及周围环境的清洁,严格无菌操作,避免杂菌的污染,这是保证实验成功的必要条件;如将微生物接种到适合其生长的固体培养基表面,在适宜的温度下一般细菌37℃：霉菌等28℃,培养一段时间一般24~48h后,少量分散的菌体或孢子就可生长繁殖成肉眼可见的细胞群体,此即菌落;如平板上的菌落是由单个细胞或单个孢子生长繁殖而成的,就是一个纯种细胞群或克隆；若培养后大量菌落聚集在一起形成的为菌苔;不同种的微生物可形成大小、形态各异的菌落,根据微生物菌落形态的不同,可初步鉴别出四大类微生物：细菌、放线菌、酵母菌和霉菌;细菌的菌落呈圆形、较小而薄、透明或不透明、质地“细腻”,有的具有色泽,有的边缘不整齐,有的表面湿润、光滑,有的表面干燥有褶皱;此外,细菌常因分解含氮化合物而产生臭味;酵母菌的菌落通常比细菌菌落大,圆形、厚、不透明、色素单一,多为乳白,少数为橙或红色;酵母菌因普遍能发酵含碳有机物产醇,故菌落多伴有酒香味;防线菌菌落小而致密,或坚硬、或呈粉状;不少放线菌还产生特殊的土腥味;霉菌菌落大而疏松、或大而紧密;气生菌丝会发育形成一定形状、构造和色泽的子实器官,所以菌落表面往往有肉眼可见的构造和颜色;三、实验材料人体表和空气中的微生物;四、实验器材与试剂1.器材恒温培养箱、无菌平皿、电炉、酒精灯、火柴、无菌棉签和记号笔;2.试剂牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、酵母膏葡萄糖培养基简称YPD、高氏一号培养基和查氏培养基;五、实验操作I.融化培养基将装有无菌培养基的三角瓶置水浴中煮沸,待培养基融化后取出,当冷至50~60℃左右时,进行下一步;II、倒平板有持皿法和叠皿法,操作要点如下：1.持皿法1将无菌培养皿叠放在酒精灯左侧,以便拿取;2点燃酒精灯;3酒精灯旁,左手握三角瓶底部,倾斜三角瓶,右手旋松棉塞,用右手小指与小尾鱼际即小指边缘夹住棉塞并将其拔出切勿将棉塞放在桌上,随之将瓶口在火焰上过一下不可灼烧,以防爆裂,以杀死可能沾在瓶口的杂菌;然后将三角瓶从左手换至右手用拇指、食指和中指拿住三角瓶的底部;操作中瓶口应保持在火焰2~3cm,瓶口始终向着火焰,以防空气中微生物的污染;左手拿起一套平皿,用无名指和小指托住皿底,用中指和拇指夹住皿盖,食指于皿盖上为支点,在火焰旁,打开皿盖,让三角瓶伸入,随后倒入培养基;一般倒入15ml左右培养基即可铺满整个皿底;盖上皿盖,置水平位置待凝;然后将三角瓶移至左手,瓶口在次过火并塞紧瓶盖;2. 叠皿法此法适于在超干净台上操作,基本步骤同持皿法;不同之处是左手不必持皿,而是将瓶皿叠放在酒精灯的左侧并靠近火焰;按上述方法用右手拿三角瓶,左手打开最上面的皿盖,倒入培养基,盖上皿盖后即移至水平位置待凝;再依次倒下面的平皿;操作中瓶口始终向着火焰,以防空气中微生物的污染;III、贴标签待培养基完全凝固后,在皿底帖上标签,注明检测类型,组别及日期也可用记号笔书写在皿底IV、检测方法环境中微生物种类多样,检测方法也各异,先选几种列举如下：1.空气检测实验室空气中的微生物时,只要打开无菌平板的皿盖,让其暴露在空气中一段时间5~10min然后将皿盖盖上即可;2.桌面检测实验台桌面微生物是,可用一根无菌棉签,先在无菌平板的图4-1 含菌棉签平板划线示意图左：开启皿盖法右：划线示意图一个区域内湿润和试划几下,然后用其擦抹桌面等物体表面,在以此棉签在平板的另一区域作来回划线接种如图4-1;本操作应以无菌操作要求进行,即在火焰旁用左手拿起平板,用中指无名指和小指托住皿底部,用食指和大拇指夹住皿盖并开成一缝,右手持棉签在培养基表面划线接种,无菌棉签湿润和试剂区可作为无菌对照;3.头发移去放在桌面上的无菌平板的皿盖,是头发部位位于平板的上方,并用手指拨动头发数次,在盖上皿盖即可;4.手指可用未洗的手指先在无菌平板的培养基一侧约一半的面积作划线接种,并在皿底作好标记;然后用肥皂、流水洗手,用洗净的手指于平板培养基的另一侧作同样的划线接种,盖好皿盖;待培养后比较两杂菌生长的情况;5.口腔打开无菌平板培养基的皿盖,使口对着平板培养基的表面,以咳嗽或打喷嚏的方式接种,然后盖上皿盖;V、培养将以上各种检测平板倒置于28℃培养箱中培养,至下周实验时观察并计数各平板上的菌落数;VI、观察注意观察不同类型菌落的大小、外形和颜色等特征,将观察结果记录在实验报告上;VII、清洗观察记录完毕后,将含菌平板放在沸水中煮30min以上,杀死培养基表面生长的各种微生物,然后清洗并晾干培养皿;六、思考题1.通过本实验后,谈谈你对微生物的分布以及数量的认识;2.本实验中那些步骤属无菌操作为什么3.如何描述菌落的形态特征。
微生物检测基础知识大全微生物检测涉及多行业和领域，在实验室检测中有着重要的地位，今天和大家一起对微生物检测中的一些基础操作进行汇总和梳理！接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
接种和分离工具1.接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种：1、划线接种这是最常用的接种方法。
即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。
常用的接种工具有接种环，接种针等。
在斜面接种和平板划线中就常用此法。
２、三点接种在研究霉菌形态时常用此法。
此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。
除三点外，也有一点或多点进行接种的。
３、穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。
做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。
用的培养基一般是半固体培养基。
它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
４、浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45℃左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。
待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。
５、涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。
６、液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。
７、注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。
８、活体接种活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。
柯赫法则：1、在每一相同病例中都出现这种微生物；2 、要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来；3、用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生；4 、从试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物金黄色葡萄球菌引起急性肠胃炎；沙门氏菌引起伤寒、霍乱；溶血性链球菌引起猩红热；志贺氏菌引起菌痢。
肉毒梭菌致死率可达30%—60%，产生的毒素是自然界毒性最强的蛋白质，也可用来治疗障碍性疾病微生物检测：就是应用微生物学的理论、方法和技术，对食品或药品在研制、生产、保藏过程中进行质量检测和安全性评价的专业技术学科。
主要研究外界环境和食品或药品中微生物的种类、数量、性质、活动规律及其对人和动物健康的影响。
微生物检验意义是衡量食品和药品卫生质量的重要指标之一，是判定被检食品或药品能否食用或药用的科学依据之一。
是判断食品和药品加工原料、生产环境卫生情况及对成品被污染的程度作出正确的评价，为卫生管理工作提供科学依据。
微生物检验贯彻“预防为主”的卫生方针，有效的防止或减少食物中、药品毒害、人兽共患病的发生。
保障人民身体健康。
提高产品质量，避免经济损失。
微生物检测对象(1)食品(2)化妆品(3)药品(4)一次性用品及其他生活用品(5)应施检疫的出口动物产品(6)环境(7)有关国际条约或其他法律、法规规定的强制性卫生检验的进出口商品二、微生物检测技术的发展迫切需求灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的微生物检测技术和方法，建立和完善适应国际贸易的各类产品微生物检测技术和体系迫在眉睫。
传统检验技术显微技术，实验室中常用的有普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。
利用血细胞计数器在显微镜下直接计数是一种常见的微生物计总数的方法。
革兰氏染色技术：是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。
培养计数法：平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂在平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
现代微生物检测技术现状趋势：都致力于快速、简便、特异、敏感、低耗且实用的检测技术和方法的研究研究的技术手段产生了很大的变革：已由培养水平逐步向分子水平迈进；近年来兴起的基因芯片技术及自动微生物检测系统，将从根本上改变微生物的检测方法；气相色谱法、气质联用等现代仪器分析法也应用于微生物检测中。
微生物检验的质量控制措施：(1)应严格按照国家规定对试验仪器、设设备、器具进行定期的检定、维护和保养。
(2)严格控制培养基、试剂、染色及诊断血清的质量(3)确保菌株的良好保存，标准菌株和从样品中分离出的菌株，其保存方法有多种，最理想的为真空冷冻干燥法，但这种方法的操作技术难度大，花费高，需特殊设备，一般单位不易做到。
常规琼脂斜面保存法常因传代次数多，易污染，易变异。
近年来卵黄液普通安瓿熔封法超低温保存菌种（4）检验方法的选择，检验方法是微生物实验室质量保证的重要步骤,必须统一、准确可靠。
优先采用国家规定的标准检验方法或国际标准、行业标准、地方标准规定的检验方法,无上述标准时，经协商也可采用企业标准。
确定试验和实验室标准，用阴性、阳性标准菌株做确证试验，特别在做微生物生化试验和免疫试验时一定要设立阴性、阳性对照组。
（5）建立实验室工作失败报告、内审制度，记录整个试验过程中的错误信息，通过管理评审，制定整改措施，及时整改；定期参加质控评比，不断提高试验技术水平；及时更新程序性文件，完善实验室质量保证体系。
(6)检验报告和原始记录的质量控制检验报告书是检测的最终产品，经单位技术负责人签发即产生法律效力。
检验报告、检验原始记录都应规范填写，认真审核。
收样人、检测人、复核、审查、签发人应人人把关，各负其责，保证质量体系的有效运行。
第二章微生物检验的基本程序一、检验前准备1. 准备好所需的各种仪器2. 准备好所需的各种玻璃器皿3. 准备好所需的各种试剂、药品、培养基4. 无菌室灭菌5. 检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用二、样品的采集●在产品的检验中，样品的采集和处理是任何检验工作中最重要的组成部分。
●关系到结果的准确性和检验机关决策的正确性。
●采集的样品必须具有代表性，即所取的样品能够代表产品的所有成分。
样品的种类：大样：一整批样品，中样：从样品各部分取得的混合样小样（检样）:分析用的样品。
微生物限度检验对象的特性：不确定性；分布的不均匀性；活体特征抽样量：指从全批产品（或全过程）抽取的单位包装。
检验量：是指检验用量，是抽样量各包装的混合样品的一部分。
检验量与抽样量是两种不同的范畴的量，抽样量大于检验量。
国际食品卫生规范委员会 ICMSF二级抽样（病原体）：由n、c和m组成●n是从一批被检查食品中抽取样品的数量，取样数；c是样品检测值超过指标值m的最大可接受抽样单位数，如果超过该值，则拒绝接受该批产品；m是每克样品中相关细菌的合格菌数限量，即指标值三级抽样（指示菌）有一个额外的参数，附加指标值M，用于区分可接受的临界值和不可接受的值在任何一个样品中，大于或等于M的值都是不可接受的根据被检测到的微生物的浓度，三级抽样方案将食品分成三级若计数小于m，则可接受；若计数大于m，小于M ，则处于可接受的临界处若计数大于M ，则不可接受三、样品的送检（1）采集好的样品送检要及时，一般不应超过3h，否则应保持在1-5℃的环境中。
（2）不得加入防腐剂（3）对于易死亡病原菌的样品，可采用运送培养基，如：小肠结肠炎耶氏菌、空肠弯曲菌可用Cary-Blair运送培养基（4）送检时，必须认真填写申请单，注明特殊要求以供检验人员参考。
四、样品的处理1、基本要求（1）需将供试品制备成供试溶液或悬浮液。
供试液的制备不得改变污染微生物的数量和种类。
（2）做多项检验（微生物、化学、药理）时：首先取出规定量的供试品供微生物学检验，其余部分做其他检验。
（3）供试品收检后，应及时检验，否则，应存放在规定的储存条件下。
（4）在检验之前，应保持原包装状态，严禁开启。
（5）供试品的取样必须在净化条件下，无菌操作。
（6）含有抑菌成分的供试品，消除抑菌成分的干扰。
供试液制备的一般方法---液体样品：直接用吸管吸取准确用量，制成1：10的稀释液。
含CO2的液体，覆盖灭菌纱布轻轻摇荡，待全部逸出后检验酸性液体用灭菌的碳酸钠调至中性后再检验有抑菌成分的样品的处理离心沉淀集菌法、树脂吸附法、加入灭活剂、薄膜过滤法第三章各类微生物检样的制备各种蛋制品沙门氏菌增菌培养：无菌操作称取检样，接种于亚硒酸盐煌绿或煌绿肉汤增菌培养基中（有玻璃珠），摇匀后，在37℃温箱中培养20h。
水产品采样：现场采取水产样品时，按检验目的和水产品的种类确定采样量。
别大型鱼类和海兽只能割取其局部作为样品，一般都采完整的个体，待检验时再按要求在一定部位采取检样。
当对一批水产品作质量判断时，仍须采取多个个体作多件检样以反映全面质量；抑菌性供试品抑菌性药物的判定处理原则（1）对具有抑菌作用但在试验条件下不影响待检菌检出的药物，不需特殊处理（2）对具有强抗菌作用的抗生素类药品，暂不做微生物限度检查（3）对一般性抑菌性供试品，在检查条件下对待检菌的检出或菌数计数产生干扰者，要消除抑菌作用。
如何判定待检药物具有抑菌性？判定：国外药典一般以加有供试液和不含供试液的检样中加入定量的已知菌（50-200个/mL），经培养检查后，加入的对照菌能正常检出，加有供试液的菌落数和未加供试液的菌落数比较，后者不应超过前者的5倍及10倍，否则表明该供试品具有抑菌作用。
抑菌性药物供试液的制备方法：（1）稀释法：增加稀释倍数（2）沉降法：当抑菌性成分溶解度小时（3）离心沉淀法：差速离心法（4）薄膜过滤法：5）中和法：（6）吸附法:第四章卫生细菌学检验一、菌落总数(Total colony count) 是指1mL或1g样品中所含的细菌数，主要是作为判定样品被污染程度的标志，为被检样品的卫生学评价提供依据。
我国规定：在营养琼脂培养基上，经35-37℃恒温培养24小时所测得的菌落个数。
(colony formingunits, CFU)菌落总数的多少直接反映着食品、药品和水的卫生质量。
如果食品中的菌落总数多于10万个，就足以引起细菌性食物中毒；如果人的感官能察觉食品发生变质时，细菌数已达到106-107个/g（mL或cm2）。
注意事项：无菌操作、培养基的温度、梯度稀释要换管、混合均匀、计数准确（从卫生观点来看，菌落总数越多，产品质量越差，病原菌污染的可能性越大；但对于发酵制品，不能单凭菌落总数一个指标来评定产品的卫生质量。
）嗜热菌计数：(引起罐装食品变质。
)将检样25g加入225mL无菌水的三角瓶中，溶液或悬浮液迅速煮沸5min，将烧瓶浸于冷水内冷却。
乳酸菌、乳链球菌、双歧杆菌：(酸奶及保健制品，评价产品质量)吸取检样液体稀释液1mL于培养皿中，注入已熔化并冷却至45℃的溴甲酚（BCP）培养基、或改良的LAB培养基、豆芽汁培养基、改良MRS琼脂、心脑培养基等，轻轻摇匀，静置，冷凝后，35-37℃倒置培养72h，计数。
BCP用于乳酸菌、乳链球菌， MRS琼脂用于乳酸菌，豆芽汁用于链球菌，心脑培养基用于双歧杆菌，LAB用于三种菌二、大肠菌群 (coliform group)在37度生长，能发酵乳糖，在24小时内产酸产气的需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群作为水质粪便污染的指示菌已有90多年的历史了。
适用于各种类型水的分析,当肠道病原体存在的同时大肠菌群也存在,大肠菌群比最难对付的肠道病原体存活时间更长，对外环境的抵抗力大于等于致病菌,进入水中不再繁殖。
检验方法具有很强的特异性和高度敏感性。
简便，易于操作、检出和计数。
对人类无害，指示菌的水平与被粪便污染程度有某些直接的联系，国际上如瑞士、瑞典等国以大肠菌群作为药品、食品、饮水等的卫生指示菌。
以100mL水检样内允许含有的大肠菌群的实际数值，以最大机率数MPN来表示。
1、薄膜集菌法+再做乳糖发酵试验2、多管发酵法3、COLI ID检测法含有两种显色物质，可以直接识别大肠菌（coliforms）群和鉴定大肠杆菌（Escherichia coli）,而不需附加任何试剂。
抑制了革兰氏阳性菌和酵母菌，菌落颜色变化的敏感性完全适合食品微生物检验。
红色菌落为大肠杆菌。
蓝色菌落为其它大肠菌群菌落颜色玫瑰红蓝色透明●β-葡萄糖苷酶+- -●β-半乳糖苷酶 ++ -●大肠杆菌其它大肠菌群其它革兰氏阴性菌如果大肠菌群和耐热大肠菌群均高，多为近期污染；如果大肠菌群数高，而耐热大肠菌群低，则多为远期污染。
