果蔬汁饮料DNA提取方法的比较研究
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DNA提取方法1500字DNA(脱氧核糖核酸)提取是分子生物学研究和实验室诊断中一个重要的步骤。
DNA 提取对于基因组学研究、遗传学研究、犯罪学研究等领域都非常重要。
下面我们将介绍常见的DNA提取方法。
首先,我们先了解一下DNA的来源和性质。
DNA存在于所有的活细胞中,是细胞遗传物质的载体。
DNA提取的目的是从细胞和组织样本中分离出DNA。
DNA的提取方法根据样本的来源和特点可以有所差异,但是基本步骤是相似的。
一种常用的DNA提取方法是酚-氯仿提取法。
这个方法利用酚和氯仿的不同溶解度,将DNA从其他细胞组分中分离出来。
这个方法步骤简单,适用于常见的样本来源如血液、细胞培养物等。
首先,将样本收集到离心管中。
通常需要使用离心机将样本离心,分离出细胞。
然后将细胞裂解,使DNA释放到溶液中。
裂解可以通过物理方法如冻融或超声波处理,也可以通过化学方法如蛋白酶处理来实现。
接下来,加入酚-氯仿混合液。
酚可以溶解细胞膜和蛋白质,氯仿可以溶解酚和去除其他杂质。
混合液中的DNA会被酚-氯仿分成两个层,上层是水相含有DNA,下层是酚相含有蛋白和其他细胞组分。
然后,将上层水相转移到新的离心管中。
加入等体积的异丙醇,用于沉淀DNA。
异丙醇使DNA凝聚成细丝状。
离心沉淀,取出DNA沉淀。
最后,将DNA沉淀溶解在适量的缓冲液中,并进行浓度和纯度的检测。
通常使用紫外吸收光谱法或电泳法来检测DNA的浓度和纯度。
另一种常用的DNA提取方法是离子交换法。
这个方法利用DNA带有负电荷,可以和带有正电荷的离子交换树脂结合。
这个方法适用于特定的样本如植物组织、细菌等。
首先,将样本收集到离心管中,并进行细胞裂解。
细胞裂解可以使用物理方法如冻融或超声波处理,也可以使用化学方法如蛋白酶处理。
接下来,加入含有阳离子的缓冲液。
阳离子可以和DNA结合,并使DNA和其他细胞组分分离。
然后将溶液通过离子交换树脂柱。
DNA会和阳离子结合在树脂上,杂质被洗掉。
dna提取方法DNA提取方法。
DNA提取是分子生物学研究中的基础工作,它是从生物样本中分离出DNA分子的过程。
DNA提取的成功与否直接影响到后续的实验结果,因此选择合适的DNA提取方法显得尤为重要。
在本文中,我们将介绍几种常用的DNA提取方法,帮助您更好地进行实验工作。
首先,我们来介绍传统的DNA提取方法——酚/氯仿提取法。
这是一种经典的DNA提取方法,适用于各种类型的生物样本。
其基本原理是利用酚和氯仿这两种有机溶剂与水相中的DNA分子和蛋白质发生相分离,从而将DNA分离出来。
虽然这种方法操作简单,但是存在有机溶剂对环境和操作者的危害性,且提取效率较低,不适用于大规模提取。
其次,我们介绍磁珠法DNA提取方法。
磁珠法是近年来发展起来的一种高效、快速的DNA提取方法。
其原理是利用表面修饰的磁珠与DNA特异性结合,然后通过磁场的作用将DNA分离出来。
这种方法不需要有机溶剂,操作简便,且适用于大规模提取,因此在实验室中得到了广泛的应用。
另外,还有硅基柱法DNA提取方法。
硅基柱法是利用硅胶膜对DNA的亲和性进行DNA提取的方法。
在此方法中,DNA首先与硅胶膜结合,然后通过洗涤和离心步骤将DNA从其他杂质中分离出来。
硅基柱法适用于各种类型的生物样本,提取的DNA质量高,适用于后续的PCR扩增、测序等实验。
最后,我们介绍了离心柱法DNA提取方法。
离心柱法是一种基于硅胶膜或硅胶颗粒的DNA提取方法,其原理类似于硅基柱法。
不同之处在于,离心柱法使用了离心柱进行离心分离,更加方便快捷。
这种方法适用于小样本量的DNA提取,操作简单,提取效率高。
综上所述,DNA提取方法有多种多样,每种方法都有其特点和适用范围。
在选择DNA提取方法时,需要根据实验样本的特点、实验需求和实验条件来进行选择。
希望本文介绍的DNA提取方法能够对您的实验工作有所帮助。
祝您实验顺利!。
dna提取实验报告分析DNA 提取实验报告分析一、引言DNA 提取是分子生物学研究中的一项基础且关键的技术。
通过从细胞中分离和纯化 DNA,可以为后续的基因分析、疾病诊断、遗传研究等提供重要的材料。
本次实验旨在探讨一种常用的 DNA 提取方法,并对实验结果进行详细的分析。
二、实验材料与方法(一)实验材料1、新鲜的植物叶片(如菠菜叶)或动物组织(如鸡血)。
2、提取试剂盒(包含裂解液、蛋白酶 K、缓冲液、乙醇等)。
3、离心机、移液器、微量离心管、水浴锅等实验设备。
(二)实验方法1、样本处理植物叶片:称取一定量的新鲜叶片,洗净、剪碎后放入研钵中,加入液氮充分研磨成粉末。
将粉末转移至离心管中。
动物组织:取适量的鸡血,加入抗凝剂,离心去除血浆,收集血细胞。
2、细胞裂解向离心管中加入裂解液和蛋白酶 K,充分混匀,在 55℃水浴中孵育一段时间,使细胞充分裂解,蛋白质变性。
3、 DNA 沉淀加入适量的缓冲液,混匀后加入预冷的无水乙醇,轻轻颠倒离心管,可见白色的 DNA 絮状物沉淀出现。
4、 DNA 洗涤将离心管离心,倒掉上清液,保留沉淀。
加入适量的 70%乙醇洗涤沉淀,再次离心去除乙醇。
5、 DNA 溶解室温干燥沉淀后,加入适量的 TE 缓冲液或去离子水溶解 DNA,置于-20℃保存备用。
三、实验结果与分析(一)DNA 浓度和纯度的测定使用紫外分光光度计测定提取的 DNA 在 260nm 和 280nm 处的吸光度值(A260 和 A280)。
通常,A260/A280 的比值在 18 20 之间表示DNA 纯度较高。
若比值小于 18,可能存在蛋白质污染;若比值大于20,则可能存在 RNA 污染。
实验中得到的A260/A280 比值为185,表明提取的DNA 纯度较好,基本没有蛋白质和 RNA 的污染。
同时,根据 A260 值,结合公式计算出 DNA 的浓度为_____ng/μL。
(二)琼脂糖凝胶电泳分析将提取的 DNA 进行琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像系统中观察电泳结果。
使用家用化学品从水果和蔬菜中提取的DNA教学时间:45分钟的活动准备时间:30-40分钟该草案采用机械破碎和常见的日用化工品,从水果和蔬菜中提取DNA。
学生将能够看到DNA作为纤维状聚集。
该过程会根据水果或蔬菜和最终的沉淀步骤中使用的酒精的类型产生一定量的DNA。
虽然在这个实验中分离出的DNA纯度不足以进行凝胶电泳或限制性酶切分析实验。
它是一个很好的适合学生的动手实验室,并且预算是有限的。
这是一个很好的试验,包括细胞生物学,遗传学,生物技术,普通生物学实验室和先进的生物课。
在开始实验前学生学习DNA的结构和细胞的功能,如细胞膜,细胞器和细胞壁结构。
该草案是基于一个由肖恩·卡尔森在“科学美国人”(1998年9月96-97)发表的文章。
一、实验目的1掌握DNA的基本性质2学习DNA的结构和细胞的功能3了解从植物细胞中提取DNA所需的步骤二、实验原理DNA是所有生物体的遗传物质。
DNA的提取和纯化是许多分子生物学实验的第一步。
无论是科学家研究有机体的整个基因组或克隆一个基因的有机体的DNA,还是提取涉及到相同的三个步骤:1。
细胞裂解用机械和化学的手段使细胞被破开或溶解。
细胞壁(如果存在的话),细胞膜和核膜(如果存在的话)都必须被打乱以释放DNA。
细胞膜是可以被洗涤剂(在本实验中用洗衣粉)溶解的的脂肪和蛋白质。
由细胞壁包围的植物细胞,酵母,和许多细菌细胞可以用机械力(如混合或研磨)打乱,或用酶消化。
核膜存在于真核细胞。
2。
纯化一旦细胞被破开,整个细胞内容物被混合在一起。
大多数操纵需要的DNA是无蛋白质和RNA。
在实验室中,科学家们将灭活会降低或故障DNA的细胞酶。
他们可能会使用蛋白消化酶,加热,某些化学品,和有机溶剂,如苯酚,使核酸酶失活并除去蛋白质。
在这个实验中,我们无需纯化DNA,因为我们不会使用DNA做进一步的实验。
3。
聚沉和浓度DNA易溶于水,不溶于醇。
加无水乙醇使DNA的细胞裂解液可视化。
提取dna的方法提取DNA的方法。
DNA提取是分子生物学和遗传学研究中的一项基础工作,它是分析DNA序列、进行PCR扩增、测序等实验的前提。
本文将介绍几种常用的DNA提取方法,希望能为科研工作者提供一些参考。
首先,我们来介绍化学法提取DNA的方法。
化学法是最常用的DNA提取方法之一,其原理是利用蛋白酶K和盐酸胍等试剂破坏细胞膜和蛋白质,使DNA从细胞中释放出来。
具体操作步骤为,首先,将待提取的细胞样品加入含有蛋白酶K 的溶液中,经过一定时间的消化后,再加入盐酸胍等试剂,使DNA沉淀出来。
最后,用乙醇洗涤和溶解,即可得到纯净的DNA。
其次,机械法也是一种常用的DNA提取方法。
机械法主要利用机械力破碎细胞壁,释放DNA。
常用的机械法包括玻璃珠研磨法和超声波破碎法。
玻璃珠研磨法是将样品和玻璃珠一起加入管中,通过高速震荡使细胞破碎,释放DNA。
超声波破碎法则是利用超声波的高能量震荡作用,破坏细胞壁,释放DNA。
这两种方法操作简单,适用于大批量的样品提取。
另外,磁珠法也是一种高效的DNA提取方法。
磁珠法利用表面修饰的磁珠与DNA的亲和性,通过磁力场控制DNA的分离和纯化。
操作步骤为,首先,将待提取的细胞样品与表面修饰的磁珠混合,使DNA与磁珠结合;然后,通过磁力场的作用,将磁珠与结合的DNA沉淀到管底;最后,去除上清液,用洗涤缓冲液洗涤,即可得到纯净的DNA。
最后,有机溶剂法也是一种常用的DNA提取方法。
有机溶剂法利用有机溶剂与DNA的亲和性,将DNA从细胞溶液中提取出来。
操作步骤为,首先,将待提取的细胞样品加入有机溶剂中,使DNA与有机相结合;然后,通过离心将DNA沉淀到管底;最后,去除上清液,用洗涤缓冲液洗涤,即可得到纯净的DNA。
综上所述,化学法、机械法、磁珠法和有机溶剂法是常用的DNA提取方法,每种方法都有其适用的场合和特点。
在实际操作中,可以根据实验需要和样品性质选择合适的提取方法。
希望本文对DNA提取方法有所帮助,谢谢阅读!。
106 食品安全导刊 2017年11月Tlogy科技工艺技术饮料市场的品种类型相对较多,比较常见的有果蔬汁饮料、茶饮料、植物蛋白饮料以及植物提取物饮料等,它们都是饮料市场中相对主流的品类,由于其绿色、营养、健康的产品特点,深受大众喜爱,具有良好的市场前景1 我国饮料市场前景与主要的产品形式分析1.1 饮料市场前景分析品类多样且丰富的植物资源,为我国饮料加工与生产提供了充足的资源支持。
饮料加工与生产中需要的一些具有功能性的天然食品添加剂多来源于我国丰富的植物资持。
尤其是随着人类对食品安全重视程度的不断提升,以及人类身体保健意识的不断增强,采用纯天然植物资源加工生产的食物在市场上也越来越受欢迎,集植物功能性与食品性加工生产的饮料、食品,其市场前景越来越广阔。
比如,在饮料加工生产中,将甘草、罗汉果或者是甘菊等天然植物的提取物进行提取之后,用于饮料加工生产,形成具有独特口味与功能性特征的绿色饮料,在市场上就深受大众的喜爱[1]。
或是将甘草、罗汉果、甘菊等植物作为生产加工的原料,通过原料提取工艺应用,在生产加工工程中替代蔗糖,合成甜味剂,在饮料加工生产中作为调味剂进行应用,不仅能够有效解决传统饮料含糖过高,容易引起糖尿病人群血糖升高等变化,对其健康危害较大的问题,同时还能够有效避免传统饮料加工对化学合成甜味剂的使用,满足现代人群追求绿色、营养、保健的食品与饮料需求。
1.2 饮料市场的主要产品形式果蔬汁饮料、茶饮料、植物蛋白饮料以及植物提取物饮料作为当前市场上流行的主要饮料品类,它们共同具有的产品特点就是绿色、营养和健康,这也是其在市场以深受大众喜爱,能够成为主流饮料品类的重要原因。
其中,果蔬汁饮料主要以果蔬汁、果粒等饮料产品为主,而茶饮料则包含红茶、绿茶、乌龙茶等多种不同形式的茶饮料产品,植物蛋白饮料比较常见的像核桃露、杏仁露以及花生露等[2]料。
此外,植物提取物饮料,则以市场中较为常见的植物养生饮料、凉茶、酸梅汤等为主,总之,不同的饮料品探讨果蔬汁饮料、茶饮料、植物蛋白饮料及 植物提取物饮料生产技术□ 王洪成 杭州娃哈哈集团有限公司摘 要:果蔬汁饮料、茶饮料、植物蛋白饮料以及植物提取物饮料都是当前市场上较为常见的饮料类型,对其生产技术的研究分析,有利于满足饮料市场需求,促进其生产技术提升,具有积极作用和意义。
dna提取方法发展历程DNA提取是一种重要的分子生物学实验,对于研究基因组结构、功能和遗传变异等起着关键作用。
随着科学技术的不断进步,DNA提取方法也在不断发展。
以下是DNA提取方法的发展历程:1. 盐析法(Salt precipitation method):早期的DNA提取方法主要采用盐析法。
该方法利用高盐浓度和低pH值的条件,使DNA在水溶液中沉淀出来。
虽然此方法简单易行且成本低廉,但提取的DNA质量较差,同时还存在着DNA损伤和污染的风险。
2. 酚/氯仿方法(Phenol/chloroform method):20世纪50年代,酚/氯仿法被引入到DNA提取中。
该方法通过酚提取DNA,氯仿去除蛋白质,最终得到纯净的DNA。
酚/氯仿法具有较高的提取效率和DNA质量,但需要有机溶剂的使用,操作繁琐且有毒。
3. 商用DNA提取试剂盒(Commercial DNA extraction kits):进入21世纪后,商用DNA提取试剂盒开始广泛应用。
这些试剂盒通常使用一系列化学试剂和离心等步骤,可快速、高效地提取DNA。
与传统方法相比,商用试剂盒具有提取过程简单、操作方便的优势,同时还能够保证提取的DNA质量和纯度。
4. 硅胶膜法(Silica membrane method):硅胶膜法是目前较为常用的DNA提取方法之一。
该方法基于DNA与硅胶膜表面的相互作用,凭借DNA与硅胶膜表面的亲和力将DNA固定在硅胶膜上,然后通过洗涤等步骤去除杂质,最终提取纯净的DNA。
硅胶膜法具有高效、快速和可靠的特点,被广泛应用于基因组学研究、临床诊断和法医学等领域。
5. 微流体技术(Microfluidics):近年来,微流体技术在DNA提取中的应用得到了迅速发展。
微流体技术利用微小尺度通道和微流体控制,可以实现样品的快速分离和处理。
通过微流体芯片、微流控设备等,在减少样本用量、提高提取效率和快速性等方面有着巨大潜力。
食品中风味成分的提取与分析方法比较研究食品中的风味成分是食品的重要组成部分,决定了食品的口感和风味特点。
如何有效地提取和分析食品中的风味成分是食品科学领域的一个重要研究方向。
本文将对不同的食品风味成分的提取和分析方法进行比较研究。
一、提取方法比较研究1. 蒸馏法:蒸馏法是一种常用的提取方法,通过加热食品样品,使其挥发性成分蒸发,然后冷凝收集。
这种方法适用于挥发性成分含量较高的食品,如香草、咖啡等。
但是,蒸馏法存在着提取效率低、样品破坏和操作复杂等问题。
2. 溶剂提取法:溶剂提取法是将食品样品与适当的溶剂进行混合,使风味成分溶解在溶剂中,然后用分离方法将溶剂和溶解的成分分离。
这种方法适用于非挥发性成分的提取。
溶剂提取法操作简单,但存在溶剂残留和成分损失的问题。
3. 超声波提取法:超声波提取法通过超声波的作用,使食品样品中的成分从固态或液态转化为溶液。
超声波提取法具有操作简单、提取效率高的优点,适用于多种食品中风味成分的提取。
然而,超声波提取法也存在样品破坏和超声波功耗大的问题。
二、分析方法比较研究1. 气相色谱法(GC):气相色谱法是一种常用的分析方法,通过气相色谱仪将样品分离,然后使用检测器进行检测和定量。
气相色谱法对食品中挥发性成分的检测具有高分辨率和高灵敏度的优点,但需要对样品进行预处理和样品破坏。
2. 液相色谱法(HPLC):液相色谱法是一种通过液相色谱仪对样品进行分离和分析的方法。
液相色谱法适用于挥发性成分含量较低的食品,具有分离效果好、精度高的优点,但操作复杂和分离时间长。
3. 气相质谱法(GC-MS):气相质谱法是将气相色谱与质谱相结合的方法,能够对样品进行更加准确的分析和定量。
气相质谱法在食品风味成分的分析中具有高灵敏度和高特异性的优点,但需要样品预处理和仪器条件的严格控制。
三、综合分析方法比较综合上述提取和分析方法的优点和缺点,为了提取和分析食品中风味成分,可以综合使用不同的方法。
一、实验目的1. 掌握果蔬汁的制备方法及原理。
2. 了解不同果蔬汁的营养成分及功效。
3. 学习使用榨汁机等设备进行果蔬汁的制作。
二、实验原理果蔬汁是将新鲜水果和蔬菜榨取汁液,保留了果蔬中的营养成分和有益成分。
制备果蔬汁的原理是利用榨汁机将果蔬压榨,使汁液与固体部分分离,从而获得纯净的果蔬汁。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:苹果、橙子、黄瓜、胡萝卜等新鲜果蔬。
2. 实验仪器:榨汁机、电子秤、玻璃杯、滤网、温度计等。
四、实验步骤1. 准备新鲜果蔬,洗净去皮去核。
2. 将洗净的果蔬放入榨汁机中,加入适量的纯净水。
3. 启动榨汁机,将果蔬压榨成汁液。
4. 将汁液通过滤网过滤,去除固体杂质。
5. 将过滤后的果蔬汁倒入玻璃杯中,用温度计测量温度。
6. 根据需要,加入适量的糖或蜂蜜调味。
五、实验结果与分析1. 实验结果(1)苹果汁:呈红色,酸甜可口,富含维生素C、维生素A等营养成分。
(2)橙汁:呈橙色,酸甜可口,富含维生素C、维生素A等营养成分。
(3)黄瓜汁:呈绿色,口感清甜,富含维生素C、维生素E等营养成分。
(4)胡萝卜汁:呈橙色,口感微甜,富含β-胡萝卜素、维生素A等营养成分。
2. 实验分析(1)不同果蔬汁的营养成分不同,根据个人需求选择合适的果蔬汁。
(2)榨汁过程中,部分营养成分可能因氧化等原因损失,建议尽快饮用。
(3)在榨汁过程中,注意安全操作,避免受伤。
六、实验结论通过本次实验,我们掌握了果蔬汁的制备方法及原理,了解了不同果蔬汁的营养成分及功效。
在日常生活中,我们可以根据自己的口味和需求,制作适合自己的果蔬汁,既美味又健康。
七、实验建议1. 在选择果蔬时,尽量选择新鲜、无污染的果蔬。
2. 在榨汁过程中,注意安全操作,避免受伤。
3. 尽量现榨现饮,保证果蔬汁的营养成分。
4. 可以尝试将不同果蔬汁混合,制作口感更丰富的果蔬汁。
生物七年级实验研究报告
标题:DNA的提取与观察
摘要:本实验旨在通过一系列实验步骤,从香蕉中提取DNA,并进行观察和分析。
实验结果表明,香蕉细胞中存在DNA,
并且DNA具有一定的可见性。
引言:DNA是生物体内的遗传物质,它包含了生物体的遗传
信息。
提取和观察DNA可以帮助我们更好地理解生物体的遗
传机制。
同时,本实验选择香蕉作为实验材料,因为香蕉的细胞壁相对较薄,易于提取DNA。
材料与方法:
1. 香蕉2个
2. 盐水100ml
3. 酒精300ml
4. 刀具、塑料袋、搅拌棒、滤纸、比色皿等实验器材
实验步骤:
1. 将香蕉去皮,切成小块放入塑料袋中。
2. 在塑料袋中加入盐水,用手或搅拌棒将香蕉均匀压碎,使细胞释放出DNA。
3. 将碎香蕉和盐水混合物过滤,用滤纸将香蕉渣滤出,将过滤液收集在比色皿中。
4. 慢慢加入等体积的酒精,不要搅拌。
观察到有白色棉絮状物质沉淀下来,即为DNA。
结果与讨论:
经过实验步骤4的操作,我们观察到了酒精中出现了白色棉絮状的沉淀物,这就是提取出来的DNA。
实验证明香蕉细胞中含有一定量的DNA,并且其形态块状,表明提取的DNA较为完整。
通过本实验,学生们深入了解了DNA提取过程和DNA的可见性。
结论和启示:本实验成功地从香蕉中提取到了DNA,并且观察到了DNA的形态特征。
通过这个实验,学生们对DNA的存在和提取有了直观的认识,加深了对生物遗传学的理解。
同时,实验也启示学生们要珍惜生物遗传物质,尊重生物多样性的重要性。
功能性食品开发中的生物活性成分提取技术比较近年来,随着人们对健康保健的需求不断增长,功能性食品受到了广泛的关注和热捧。
功能性食品是指含有一定特殊生理功能成分,对人体健康具有保健、治疗或改善功效的食品。
而生物活性成分则是功能性食品的核心,其提取技术的选择对功能性食品的质量和效果具有重要意义。
本文将对目前常用的生物活性成分提取技术进行比较和分析。
1. 传统浸提法传统浸提法是最常见的生物活性成分提取技术之一。
它通过将植物材料浸泡在溶剂中,使溶剂渗透到细胞内部,从而使目标物质溶解出来。
与其他提取技术相比,传统浸提法的操作简单、成本较低,具有广泛的适用性。
然而,传统浸提法存在提取效率低、工艺时间长以及对环境的污染等问题。
2. 超声波辅助提取法超声波辅助提取法是利用超声波的机械振动作用加速物质传质过程的一种技术。
超声波可以产生液体中物质的空泡和液泡产生破裂、融合等现象,使植物细胞壁破碎,加速目标物质从细胞内部释放出来。
超声波提取具有高效快速、节省溶剂、对环境污染小等优点。
但是,超声波提取法的设备成本较高,操作较为复杂,对设备和工艺参数控制要求较高。
3. 超临界流体萃取法超临界流体萃取法是利用超临界流体作为提取剂,将其压力和温度调整到超临界状态,使其同时具备液体和气体的特性。
超临界流体萃取法操作简便、速度较快,对植物细胞损伤小,能够高效地提取目标物质。
此外,超临界流体萃取法还具有溶剂残留少、环境友好等优点。
然而,超临界流体设备成本较高,且其操作压力和温度对提取效果有一定影响。
4. 微波辐射提取法微波辐射提取法是利用微波的电磁辐射作用加速提取过程的一种技术。
微波的电磁辐射能够使植物材料内部分子快速振动,在短时间内产生热效应,从而使目标物质释放出来。
微波辐射提取法具有提取速度快、效果好、对目标活性成分保护较好等优点。
然而,微波辐射提取法的设备成本较高,对操作技术要求高,且对植物细胞的损伤较大。
综上所述,不同的生物活性成分提取技术具有各自的优点和适用范围。
果汁DNA提取方法的比较齐玲倩;刘秀;丁梦璇;李静媛;刘远远;尹建军【摘要】为了获得高效通用的果汁DNA提取方法,以7种浑浊果汁和6种澄清果汁为研究对象,从前处理方法、裂解液成分、异丙酵沉淀时间等方面对CTAB法进行了改进,并比较了CTAB法、试剂盒法、改良CTAB法的提取效果,结果发现:改良CTAB法提取的浑浊果汁DNA,浓度都在24.10 μg/mL以上,澄清果汁的DNA,浓度都在5.72 μg/mL以上,且两类果汁的DNA纯度均为1.8左右,同时都能扩增出18 SrDNA的137 bp的条带,从而确定了高效通用的果汁DNA提取方法——改良CTAB法.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2015(041)012【总页数】5页(P224-228)【关键词】果汁;DNA提取;改良CTAB法【作者】齐玲倩;刘秀;丁梦璇;李静媛;刘远远;尹建军【作者单位】中国食品发酵工业研究院,北京,100015;中国食品发酵工业研究院,北京,100015;中国食品发酵工业研究院,北京,100015;中国食品发酵工业研究院,北京,100015;中国食品发酵工业研究院,北京,100015;中国食品发酵工业研究院,北京,100015【正文语种】中文果汁是一种重要的饮品,但如今果汁掺假问题日趋严重,如市场上存在着橙汁掺加柑橘汁、西柚汁、胡柚汁,苹果汁掺加梨汁、白葡萄汁,红色浆果汁掺加苹果汁及相互掺加等问题[1-2]。
这损害了消费者的利益,阻碍了果汁行业的发展和国际贸易的进行,因此,果汁中水果成分的检测显得尤为重要。
分子生物学技术具有方便、准确、迅速、简洁的特点,能够准确无误地从基因水平分析果汁的品种和来源,其结果为证明果汁的真伪提供了可靠的依据。
目前,分子生物学方法在中草药鉴定、肉类鉴别上均有应用,在果汁鉴伪领域亦有广阔的发展空间[1,3-4]。
然而,应用分子生物学技术进行果汁鉴伪的关键是高质量DNA 提取方法的建立。
使用家用化学品从水果和蔬菜中提取的DNA教学时间:45分钟的活动准备时间:30-40分钟该草案采用机械破碎和常见的日用化工品,从水果和蔬菜中提取DNA。
学生将能够看到DNA作为纤维状聚集。
该过程会根据水果或蔬菜和最终的沉淀步骤中使用的酒精的类型产生一定量的DNA。
虽然在这个实验中分离出的DNA纯度不足以进行凝胶电泳或限制性酶切分析实验。
它是一个很好的适合学生的动手实验室,并且预算是有限的。
这是一个很好的试验,包括细胞生物学,遗传学,生物技术,普通生物学实验室和先进的生物课。
在开始实验前学生学习DNA的结构和细胞的功能,如细胞膜,细胞器和细胞壁结构。
该草案是基于一个由肖恩·卡尔森在“科学美国人”(1998年9月96-97)发表的文章。
一、实验目的1掌握DNA的基本性质2学习DNA的结构和细胞的功能3了解从植物细胞中提取DNA所需的步骤二、实验原理DNA是所有生物体的遗传物质。
DNA的提取和纯化是许多分子生物学实验的第一步。
无论是科学家研究有机体的整个基因组或克隆一个基因的有机体的DNA,还是提取涉及到相同的三个步骤:1。
细胞裂解用机械和化学的手段使细胞被破开或溶解。
细胞壁(如果存在的话),细胞膜和核膜(如果存在的话)都必须被打乱以释放DNA。
细胞膜是可以被洗涤剂(在本实验中用洗衣粉)溶解的的脂肪和蛋白质。
由细胞壁包围的植物细胞,酵母,和许多细菌细胞可以用机械力(如混合或研磨)打乱,或用酶消化。
核膜存在于真核细胞。
2。
纯化一旦细胞被破开,整个细胞内容物被混合在一起。
大多数操纵需要的DNA是无蛋白质和RNA。
在实验室中,科学家们将灭活会降低或故障DNA的细胞酶。
他们可能会使用蛋白消化酶,加热,某些化学品,和有机溶剂,如苯酚,使核酸酶失活并除去蛋白质。
在这个实验中,我们无需纯化DNA,因为我们不会使用DNA做进一步的实验。
3。
聚沉和浓度DNA易溶于水,不溶于醇。
加无水乙醇使DNA的细胞裂解液可视化。
一、实验目的1. 掌握果汁提取的基本原理和方法。
2. 了解不同提取方法的优缺点。
3. 掌握果汁提取过程中的注意事项。
二、实验原理果汁提取是将水果中的汁液分离出来的过程,常用的提取方法有压榨法、离心法、萃取法等。
本实验采用压榨法进行果汁提取,其原理是利用机械压力将水果中的汁液挤出。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜苹果、梨、葡萄等水果。
2. 实验仪器:榨汁机、电子天平、烧杯、漏斗、滤纸、玻璃棒等。
四、实验步骤1. 准备工作:将新鲜水果洗净,去皮去核,切成适当大小的块状。
2. 压榨果汁:将切好的水果放入榨汁机中,启动榨汁机,将果汁挤出。
3. 过滤:将榨出的果汁通过漏斗和滤纸进行过滤,去除果肉和杂质。
4. 调整果汁浓度:根据实验要求,可适当调整果汁的浓度。
若需浓缩果汁,可将过滤后的果汁放入烧杯中,用玻璃棒搅拌均匀,加热至沸腾,待果汁浓缩至所需浓度后,关火。
5. 冷却与储存:将浓缩后的果汁冷却至室温,装入无菌容器中,密封储存。
五、实验结果与分析1. 实验结果:本实验共提取了三种水果的果汁,分别为苹果汁、梨汁和葡萄汁。
实验过程中,三种果汁的提取率分别为:苹果汁30%、梨汁25%、葡萄汁28%。
2. 结果分析:(1)三种水果的果汁提取率存在差异,这可能与水果的品种、成熟度、水分含量等因素有关。
(2)实验过程中,榨汁机的性能对果汁提取率有较大影响。
性能良好的榨汁机能够充分提取水果中的汁液,提高提取率。
(3)过滤过程中,滤纸的孔径大小对果汁纯度有影响。
孔径较小的滤纸可以更好地去除果肉和杂质,提高果汁的纯度。
六、实验结论1. 本实验采用压榨法成功提取了苹果、梨、葡萄等水果的果汁。
2. 实验结果表明,不同水果的果汁提取率存在差异,榨汁机的性能和过滤效果对果汁提取率有较大影响。
3. 本实验为果汁提取提供了参考依据,有助于提高果汁的提取率和纯度。
七、实验注意事项1. 选择新鲜、成熟的水果进行实验,以保证果汁的品质。
设计家庭科学实验“水果DNA粗提取”作者:陈芊何佳颖彭龙云来源:《小学科学》2023年第23期〔摘要〕家庭科学实验的普及,对培养学生从小就具有一定的科学素养有十分广泛的作用并切实可行。
利用简单的材料,让学生在家就能感受科学的魅力,值得我们深入思考和积极探索。
我采用简单的“水果DNA粗提取”实验,提出小学应该增加对DNA知识的普及,真实感受水果的DNA,从中认识到我们祖先都来源于一个神奇的微生物——露卡。
〔关键词〕小学科学;家庭科学实验;水果DNA;粗提取〔中图分类号〕 G424 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1674-6317 (2023) 23-0043-03从19世纪末开始,科学的迅猛发展使人类的生活方式、价值观念、知识素养都发生了翻天覆地的改变,也為世界创造了巨大的物质财富。
人们开始日益重视科学。
科学地位的提高,也为科学教育的发展铺就了垫脚石。
科学本身散发着的独特魅力,吸引着探索世界万物的学生。
学生的好奇心是与生俱来的,从小就会对自己身边的科学现象十分感兴趣,如:为什么树叶会变黄?为什么白醋和白开水一模一样却是酸的,能发出刺鼻的味道?人是怎么来的?先有鸡,还是先有蛋?学生的天性就像科学家一样,喜欢提问、思考、动手做,对周围的一切事物都兴趣十足,想一探究竟。
因此,科学教育就成了学生解开万物之谜的一把钥匙,而科学实验又是科学教育的基础。
一、开展家庭科学实验的意义(一)对课堂教学的补充与延伸1.对科学课堂教学的延伸校内科学实验课程时间有限,家庭科学实验极大地弥补了在学校科学实验课上未完成的教学知识。
体现在家庭科学实验的内容,让学生复习了科学实验课的教学内容,并延伸了一些课外知识或更深层次内容。
2.对实验教学的有效补充首先,家庭科学实验与学生的日常生活密切相关,它的开展有利于引导学生学习,体验与感知在课堂上不能亲身体验的科学现象以及日常生活中有趣的科学知识。
其次,家庭科学实验能有效地培养学生的自主动手能力、自主创新能力、自主学习能力。
1984年世界上第一例转基因植物延迟成熟番茄问世,1995年抗虫转基因马铃薯进入商品化生产,次年,抗虫转基因棉花和玉米也进入商品化收稿日期:2012-08-28 *通讯作者基金项目:北京农林科学院创新能力建设专项课题(JCX201103002)。
作者简介:任君安(1988—),女,硕士研究生,研究方向为农产品加工及贮藏工程。
生产,转基因农作物由此得到迅猛发展[1]。
我国正在研究的转基因植物种类达几十种,涉及各类基因上百种。
许多与抗虫、抗病、抗逆、产量、品任君安1,2,3,王国兰2,3,程 曦2,3,罗 昌2,3,张秀海2,3*,任建武1*(1.北京林业大学,北京 100083;2.农产品质量安全风险评估区域实验室(北京),北京 100097;3.北京农业生物技术研究中心,北京 100097)摘要:以澄清型果蔬汁为实验材料,用3种DNA 提取方法(普通CTAB 法、试剂盒法、改良试剂盒法)提取果蔬汁中DNA 片段。
以紫外分光光度计测量吸光值计算DNA 的纯度和得率,以内源rbcL 基因为目标基因建立了PCR 扩增技术体系。
实验结果表明:试剂盒法和改良试剂盒法均适用于果蔬汁饮料DNA 的提取,其中改良试剂盒法提取DNA 的纯度和产率要高于另外2种方法,该方法为从果蔬汁加工品提取高质量的DNA 并进行分子检测提供技术参考。
关键词:果蔬汁;DNA 提取;聚合酶链式反应中图分类号:TS 275.5 文献标志码:A 文章编号:1005-9989(2013)02-0042-04Comparison of DNA extraction method for fruit and vegetable juicesREN Jun-an 1,2,3, WANG Guo-lan 2,3, CHENG Xi 2,3, LUO Chang 2,3, ZHANG Xiu-hai 2,3*, REN Jian-wu 1*(1.Beijing Forestry University, Beijing 100083; 2.Regional Laboratory of Agri-product Quality and Safety Risk Appraisal, Beijing 100097; 3.Beijing Agro-Biotechnology ResearchCenter, Beijing 100097)Abstract : Three kinds of DNA extraction method (CTAB, DNA extraction kit, modified DNA extraction kit) to extract genomic DNA fragment from clarified type fruit and vegetable juice. The purity and yield of the DNA were determined by A 260/A 280 respectively. The PCR amplification of partical rbcL gene fragement was set up. The results showed that both the DNA extraction kit and modified DNA extraction kit were suitable for DNA extraction from fruit and vegetable juices, the DNA purity and yield extracted with modified DNA extraction kit is higher than with the other method in this research. The research provides an effective method for DNA extraction from fruit and vegetable juices.Key words: fruit and vegetable juices; DNA extraction; polymerase chain reaction果蔬汁饮料DNA提取方法的比较研究2013年 第38卷 第2期质和保鲜等有关基因被转入众多植物基因组中。
随着转基因农作物的规模化行业种植,转基因农产品及其加工品也逐步流入了百姓餐桌,转基因生物的环境安全和食用安全性问题引起了全球范围内广泛的争论和关注。
为此各国对转基因产品都实行监督检测,进行标识管理,保护消费者的知情权和选择权[2]。
果蔬汁是人们日常生活中常见的饮料,其产品种类繁多,有许多是混合了不同原材料加工而成,从源头上去检测是否含有转基因成分相对复杂,因此建立一套针对果蔬汁成品的检测方法是很有必要的。
目前,转基因检测的方法主要有两大类:基于蛋白质的检测方法和基于核酸的检测方法。
基于核酸的检测方法应用最为广泛,因此高质量基因组DNA的提取是进行检测的基础和关键。
对于植物基因组DNA的提取,通常采用幼嫩部位如嫩叶,作为实验材料[3-8]。
然而,不同于直接从植物体采取的材料,果蔬汁产品经过复杂的加工工序,并且里面含有许多人工添加的各类物质以及水果果肉本身含有的多糖、多酚类物质与一些次生物质,这势必会对DNA的提取造成许多不利的影响。
这就需要对常规的DNA提取方法加以改进,以提取出高质量DNA。
当前国内外已有从单一水果果肉中提取总DNA进行分子检测的报道[9-12],而对于果蔬汁的研究集中在分类、含量的测定、果汁鉴伪等方面。
Chang Chai Ng [13]等用分子生物学方法鉴定了鲜榨和还原果汁,并对鲜榨橙汁的添加量进行了测定。
Sass Kiss [14]等人也做了关于商业掺假西柚汁鉴别的工作,而对DNA 提取的研究则较少,本项研究以澄清型果蔬汁为研究材料,建立了高效提取DNA的方法,为转基因果蔬汁检测提供理论支持。
1 材料与方法1.1 材料与试剂牵手果蔬汁(胡萝卜、鲜橙、木瓜):市售;RNaseA、Taq DNA聚合酶、β-巯基乙醇、DL 2000 Marker:大连(宝)生物技术有限公司;Wizard Genomic DNA purification试剂盒:普洛麦格(北京)生物技术有限公司。
1.2 仪器与设备微量离心机,电热恒温水槽,PCR仪,电泳仪及凝胶成像系统,紫外分光光度计。
1.3 DNA提取方法1.3.1 CTAB法 称取400 μL果蔬汁至一洁净2.0 mL离心管中,加入CTAB提取液600 μL[1 mol/L Tris-HCL(pH8.0)、5 mol/L NaCl、0.5 mol/L EDTA(pH8.0)](65 ℃预热),充分混匀,65 ℃温浴1 h,每隔5~10 min温和颠倒混匀1次;加入600 μL水饱和酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),震荡,于室温抽提10 min后,10000 r/min离心10 min,取上清液,再加等体积的氯仿:异戊醇(24:1),震荡混匀,10000 r/min离心10 min;取上清液,加等体积异丙醇,混合均匀,-20 ℃预冷1 h后,10000 r/min离心5 min;弃去上清液,将沉淀用75%的乙醇清洗2次,干燥,溶于50 μL TE(pH8.0)溶液中,置于37 ℃溶解1 h后于-20 ℃保存备用。
1.3.2 试剂盒法 取400 μL果蔬汁至1.5 mL离心管中,加入600 μL Nuclei Lysis Solution,剧烈震荡1~3 s,65 ℃温浴15 min后,加入3 μL RNA酶,混合翻转2~5次,37 ℃温育15 min,再在室温下放置5 min,使样品冷却至室温后加200 μL蛋白沉淀液,剧烈震荡20 s,16000 g离心3 min;取上清液,加入600 μL异丙醇(室温)翻倒混匀,室温下16000 g离心1 min,弃上清液,加入600 μL乙醇(70%),16000 g离心1 min,风干15 min后加入50 μL DNA Rehydration Solution,65 ℃温育1 h,定期混合(轻敲)。
1.3.3 改良试剂盒法 主要步骤同试剂盒法,其中,蛋白沉淀后转移至吸附柱,加入600 μL异丙醇,翻倒混匀,16000 g离心1 min,弃上清液,加70%乙醇洗涤3次,晾干,加50 μL ddH 2O,-20 ℃保存,备用。
1.4 DNA纯度和浓度的检测用紫外分光光度计测定以上3种方法提取的DNA,由其OD 260/OD 280和浓度值判断DNA的含量和质量,每份样品重复测定3次。
1.5 PCR扩增及电泳检测为比较3种方法提取的DNA是否适合于PCR分析,采用植物内源基因rbcL基因对果蔬汁DNA进行特异性引物扩增。
引物序列分别为:rbcL:5’AA TCTTCTACTGGTACATGGAC 3’;5’TCATC ATCTTTGGTAAAATCAAG 3’片段大小为433 bp。
扩增采用25 μL反应体系,各组分组成是:DNA模板60 ng,10 μmol/L的上下游引物各0.5 μL,dNTP(10 mmol/L)2.0 μL、TaqDNA聚合酶(5U/μL)0.2 μL、10×PCR反应液2.5 μL、加入双蒸无菌水(ddH2O)将总体积调整为25 μL。
反应扩增程序:94 ℃预变性5 min;接着94 ℃变性30 s,50℃退火40 s,72 ℃延伸60 s,共30个循环,最后72℃延伸7 min。
PCR扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测。
2 结果与分析2.1 3种DNA提取方法效率比较分别用CTAB法、试剂盒法和改良试剂盒法提取果蔬汁的基因组DNA。
紫外分光光度计检测结果如表1所示。
注:M.DL 2000 Marker;1.空白组;2.阴性对照组;3.阳性对照组;4~7.CTAB法;8~11.改良试剂盒法;12~15.试剂盒法。
±±±±±±B 1.9133±0.125819.0133±0.07371.8433±0.010026.7667±0.1633 2.01±0.029113.43±0.2221C 2.0967±0.029016.1±0.04 1.7467±0.025822.8667±0.3033 2.6767±0.0462 3.9667±0.0433D 1.6367±0.008117.37±0.2233 1.7833±0.027725.5333±0.0433 1.6933±0.02109.4167±0.1714较纯DNA的OD260/OD280应在1.7~1.9之间,大于1.9说明有RNA污染,而小于1.7则说明有蛋白质和酚类物质的污染。