基因工程 公开课

基因工程的基本操作程序一. 教学内容：基因工程的基本操作程序二. 学习内容本节是《基因工程》专题的核心，上承《DNA重组技术的基本工具》一节，下接《基因工程的应用》。

通过教材上的图示，理解掌握基因工程的相关概念和操作程序，理解基因工程操作的意义。

三. 教学重点和难点1. 教学重点提取目的基因的方法目的基因导入受体细胞的途径。

基因工程基本操作程序的四个步骤。

2. 教学难点从基因文库中获取目的基因。

利用PCR技术扩增目的基因。

四. 教学过程基因文库：用重组DNA技术将某种生物细胞的总 DNA 或染色体DNA的所有片断随机地连接到基因载体上，然后转移到适当的宿主细胞中，通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系（克隆），在制备的克隆数目多到可以把某种生物的全部基因都包含在内的情况下，这一组克隆的总体就被称为某种生物的基因文库。

基因组文库：用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，可以得到大量的基因组DNA片段，然后将这些DNA片段与载体连接，再转化到细菌中去，让宿主菌长成克隆。

这样，一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。

cDNA基因文库：cDNA是由细胞内的mRNA通过逆转录的方式获得的，其包含的一个细胞内的表达信息。

多细胞生物的不同细胞的表达信息往往是不同的。

若将某一个细胞全部的mRNA（又称为这个细胞的转录组）都逆转录成cDNA，再将这些cDNA连接到载体上（基本上不打断）并转入微生物，那么这些微生物就组成了cDNA文库。

cDNA 组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。

同一定义也适用于某种生物的线粒体DNA或叶绿体DNA的基因文库。

由于制备DNA片段的切点是随机的，所以每一克隆内所含的 DNA片段既可能是一个或几个基因，也可能是一个基因的一部分或除完整基因外还包含着两侧的邻近DNA顺序。

基因文库与基因库的概念不同。

基因库是指某一生物群体中的全部基因。