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高效液相色谱的流动相极性对保留时间的影响作者：李秀川来源：《环境与发展》2017年第03期摘要：本文根据国标检测呋喃丹的方法，通过改变流动相极性，讨论了甲醇与水的流动相比例对呋喃丹出峰时间的影响。
关键词：高效液相色谱；呋喃丹；流动相；极性；保留时间中图分类号：R123.6 文献标识码：A 文章编号：2095-672X（2017）03-0196-02DOI：10.16647/15-1369/X.2017.03.107Abstract：This research has discussed the effect of changing the proportion of methanol and ultra-pure water on the retention time of high performance liquid chromatography，according to the detection method of carbofuran in national standard of drinking water.Key words：high performance liquid chromatography；carbofuran；Mobile Phase；Polarity；Retention time1 前言呋喃丹又名克百威，分子式C12H15NO3（2，3-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基-甲基氨基甲酸酯），是广泛用于粮食作物的氨基甲酸酯类广谱性杀虫剂和杀线虫剂，呋喃丹在土壤中的残留期较长（降解半衰期为1～2个月）、在土壤中的移动性能较大（水溶解度为700mg/L），其残留通过雨水、地表径流等途径污染了生活用水及其它水体。
《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）[1]规定呋喃丹限值为0.007mg/L，《生活饮用水标准检验法》（GB 5750-2006）[2]中介绍了利用高效液相色谱检测呋喃丹的方法，本文参照标准规定的方法并根据实际情况将色谱条件进行了优化。
方法验证报告项目名称：土壤和沉积物醛、酮类化合物的测定方法名称：《HJ997-2018土壤和沉积物醛、酮类化合物的测定高效液相色谱法》报告编写人：参加人员：审核人员：报告日期：1、实验室基本情况1.1人员情况实验室检测人员已通过《HJ997-2018土壤和沉积物醛、酮类化合物的测定高效液相色谱法》的培训，熟知标准内容、检测方法及样品数据采集和处理等，考核合格，得到公司技术负责人授权上岗。
表1-1参加验证的人员情况登记表姓名性别年龄职务或职称所学专业从事相关分析工作年限1.2检测仪器/设备情况设备编号设备名称规格型号校准/检定状态不确定度高效液相色谱仪恒温混匀仪振荡器平行浓缩仪1.3检测用试剂情况试剂名称生产厂家、级别、规格备注氯化钠无水硫酸钠醋酸钠冰醋酸柠檬酸柠檬酸钠2,4-二硝基苯肼乙腈醛酮类-DNPH标准溶液1.4环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在标准要求范围内，满足检测环境条件。
另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。
2、方法简介2.1方法原理及适用范围土壤和沉积物样品用醋酸-醋酸钠溶液振荡提取，提取液中醛、酮类化合物在一定温度和pH下与2,4-二硝基苯肼（DNPH）发生衍生化反应，生成稳定的腙类化合物，经萃取浓缩后，用高效液相色谱分离，紫外检测器检测，根据保留时间定性，外标法定量。
本标准适用于土壤和沉积物中甲醛、乙醛、丙烯醛、丙酮、丙醛、丁烯醛、丁醛、苯甲醛、异戊醛、正戊醛、邻-甲基苯甲醛、间-甲基苯甲醛、对-甲基苯甲醛、正己醛、2,5-二甲基苯甲醛等15种醛、酮类化合物的测定。
当取样量为10g时，定容体积为10ml时，15种醛、酮类化合物的方法检出限为0.02mg/kg-0.06mg/kg,测定下限为0.08mg/kg-0.24mg/kg。
2.2样品采集与保存按照HJ/T166的相关规定进行土壤样品的采集和保存；按照HJ494的相关规定进行海洋沉积物样品的采集。
-40-科学技术创新2019.08高效液相色谱法测定甲醛衍生物吕秀文(中车青岛四方机车车辆股份有限公司，山东青岛266100)摘要：本文建立了如何用高效液相色谱检测甲醛-二硝基苯腺，并进行了曲线分析，检出限和定量限，回收率和精密度的分析，经证实，该方法能够有效快速的检测甲醛-二硝基苯腺，从而为使用填充了涂渍DNPH硅胶的填充柱采样管吸收测定机车内空气样晶中甲醛含量提供有利证明。
关键词：高效液相色谱；甲醛:DNPH甲醛-二硝基苯腺中图分类号:0657.7+2文献标识码：A文章编号:2096-4390(2019)08-0040-021概述甲醛是建筑材料、纤维纺织品、清洁剂和粘合剂等物质的化学成分之一，机车车辆室内空气中的甲醛主要来源有内部装饰选用的真皮、电镀、油漆、塑料装饰件以及保温防寒和隔音等材料。
甲醛是世界上公认的潜在致癌物,对黏膜、上呼吸道、眼睛和皮肤有强烈的刺激性。
接触其蒸汽,容易引起结膜炎、角膜炎、鼻炎、支气管炎，重者发生喉痉挛、生门水肿、肺炎等。
甲醛对皮肤有原发性刺激和致敏作用，可致皮炎。
长期接触低浓度甲醛可造成轻度眼、鼻、咽喉刺激症状，皮肤干燥、辍裂、指甲软化等现象。
甲醛通常需要衍生以后才能用于光度分析和色谱分析,2,4-二硝基苯耕(DNPH)作为一种较稳定的甲醛衍生剂，与甲醛反应后生成甲醛-二硝基苯腺，被广泛用于甲醛的色谱测定。
2仪器及试剂2.1仪器及主要试剂。
Thermo Fisher UltiMate3000高效液相色谱仪，乙睛(色谱纯)，去离子水(色谱纯)，甲醛-二硝基苯腺(唯一编号：031876-03),第二源甲醛-二硝基苯腺(唯一编号：128340)02.2 色谱条件。
色谱柱:Venusil XBP Cl8(2)3Jim4.6*150mm;柱温：40七；流动相:水(A),乙月青(B);梯度洗脱程序：0-8min,40%A,8-10min,35%A,10-15min,5%A；柱流速：1.0mL/min;进样量:20|1L；检测波长：360nm。
高效液相色谱法测定空气中甲醛残留的一些新观点0摘要制定了一个切实可行的测定空气中甲醛的常规方法。
在被涂有2,4-二硝基苯肼的硅藻土磷担体充满的小试样管里抽取甲醛样本，吸着剂用乙腈提取，其余的DNPhydrazones由反相高效液相色谱法分离。
比较紫外检测和电化学检测在λ=345纳米的结果。
紫外检测和电化学检测的检测极限分别为100pg和50pg，一个超过三十年的线性范围。
在平均回收率为99.3%，相对标准偏差S为1.5%的情况下，甲醛在空气中的检测限为10ppb。
该方法相比使用冲击瓶抽样技术具有相同的分离和检测方法。
1简介甲醛具有多种多样的用途并且被大量的生产[1]。
它不仅影响人类健康，并可造成空气污染。
甲醛是一种致使皮肤过敏的感光剂，它与盐酸起反应形成已知的一种致癌物质二氯甲醚，并且它是导致酸雨产生的一个原因[2]。
为此一定数量的甲醛测定方法被开发出来。
分光光度法被广泛应用[3-5]，但其受到很多因素的干扰[6]。
最近，人们已经采用了使用不同肼类的色谱分析法。
最常使用的是已经申请冲击瓶采样专利[8-10]且具固体担体取样技术的衍生物2,4-二硝基苯肼[7-20]。
固体担体有：硅胶[7,11]、十八烷基凝胶[12]、玻璃纤维过滤器[13,14]、玻璃微珠[15]、XAD-2[16,17]、环形扩散管[18]、弗罗里硅[9]、硅藻土磷[19,20]。
由于硅藻土磷适合于涂料用酸，故其有和甲醛采样一样的高容量和高效率(参见3-4页）。
本文将对利用硅藻土磷的固体吸着剂技术的发展进行描述并与已被改进的冲击瓶采样法作一比较。
2实验2.1药品试剂均为分析纯，甲醛溶液（35%-37%），其他的醛和酮、二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙腈、甲醇、乙醇、硫酸、盐酸和磷酸均购自联邦德国，达姆施塔特，默克。
将水和甲醇双重蒸馏脱盐，经蒸馏提纯后，得到填满拉西环的超过1米高的柱子，以此作为高效液相色谱洗脱液。
在乙醇与水的比例为5:1的情况下将2,4-二硝基苯肼进行二次蒸馏。
高效液相色谱法分析聚甲醛中的甲醛含量作者：邓延庆来源：《科技创新导报》 2013年第23期邓延庆（神华宁夏煤业集团煤化工质检计量中心宁夏银川 751400）摘要：提出了用液相色谱法测定聚甲醛中的游离甲醛含量，并进行了检出限、精密度和准确度方法验证。
方法测定甲醛检出限为0.0035ppm。
关键词：聚甲醛液相色谱法甲醛中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1674-098X(2013)08（b）-0097-02聚甲醛产品中甲醛含量为其非常重要指标，其含量高对环境危害和聚甲醛产品的物理性能很大影响，其结果的准确度对聚甲醛产品质量有很重要的意义。
1 实验部分1.1 主要仪器试剂准备液相色谱仪色谱纯乙腈：纯度：99.9%以上甲醛标准样品：4000mg/L电子天秤：精度0.0002g衍生化试液：称取0.05g2,4-二硝基苯肼，用适量内含0.5%（体积分数）醋酸的乙腈溶解后置于100mL棕色容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
1.2 试验步骤1.2.1 液相色谱分析条件液相色谱柱：C18，5μm，4.6mm× 250mm；流动相：乙腈+水（60/40）；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：355nm;进样量：20μL。
1.2.2 标准曲线绘制用4000mg/L甲醛标准溶液分别配制成1.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L。
衍生化：准确移取1.0mL上述标准浓度试样和2.0mL衍生化试验于10mL具塞试管中，混合均匀后在（60±2）℃水浴中静置反应30min。
供HPLC分析。
上述5个样品分别进入高效液相色谱，在355nm处测定出峰，绘制标准曲线。
1.2.3 用水溶液吸收聚甲醛中的甲醛称取一定质量m的聚甲醛颗粒，放入密封的加热设备加热到190度，使其甲醛完全挥发出来，连接蠕动泵产生负压和水吸收瓶，吸收后甲醛溶液为待测溶液。
1.2.4 甲醛含量的测定待测溶液进入高效液相色谱，用标准曲线计算含量，然后通过水溶液中甲醛含量推算出聚甲醛中甲醛的含量。
醛类的衍生化液相检测方法
醛类是有机化合物中最具有活性的化合物之一，广泛应用于制药、化工、日用化妆品等诸多领域。
醛类具有唯一的碳氧双键，且易发生亲核剂反应，因此醛类在许多化学反应中扮演着重要的角色。
然而，由于其反应活性很高，醛类在检测过程中常常受到一些干扰因素的影响，导致检测结果不够准确。
为了解决这个问题，科学家们研究出了醛类的衍生化液相检测方法。
以下是醛类的衍生化液相检测方法的具体步骤：
1、醛类的衍生化处理：在检测醛类之前，需要对其进行衍生化处理。
一般情况下，醛类的衍生化处理是将其转化为相对稳定的化合物，以便于后续的液相检测。
常用的醛类衍生化试剂有二甲肼、巯基乙酸甲酯等。
2、液相高效毛细管电泳分离：在醛类的衍生化处理完成后，样品进入液相高效毛细管电泳系统，进行分离。
液相高效毛细管电泳是一种分离效果很好的方法，能够分离出醛类的不同衍生化产物。
3、检测醛类产物：醛类的衍生化物在毛细管电泳柱中进行分离后，进入检测器进行检测。
常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器等。
这些检测器能够对醛类衍生化物做出响应，并给出检测结果。
4、数据分析和结果处理：通过对检测器产生的信号进行分析和处理，可以得到醛类样品中的衍生化产物信息。
这些信息包括衍生化产物的种类、数量等，可以帮助我们更准确地了解醛类在样品中的含量。
综上所述，醛类的衍生化液相检测方法是一种非常有效的检测醛类的方法。
这种方法避免了醛类反应活性高的问题，并且采用毛细管电泳技术进行分离，在分离效果上有很好的表现。
通过合理的样品前处理、精确的检测方法和数据处理技术，醛类的检测结果更加准确可靠。
高效液相色谱法测定发酵液中3－羟基丁酮汤丹丹;王腾飞;王瑞明【摘要】The acetoin microorganism fermentation system was prepared by biological method. The method to determine acetoin by high performance liquid chromatography was studied. The fermentation broth was pre-treated by centrifuging and filtering with 0. 22 μm microporous membrane.A column of Hypersil NH2(300 mm × 4. 6 mm,5 μm)with an mobile phase containing acetonitrile and water(90∶10,V/V) was used for the analysis of acetoin in fermentation system,the flow rate was 1 mL/min,the column tem-perature and detector temperature was 35 ℃,the chromatography was completed in just 25 min. The re-covery rate was 95 . 96% ~101 . 2% and the relative standard deviations 1 . 69% ~2 . 09%. The method was proved to be a rapid and effective quantitative analysis method with simple pretreatment and high sen-sitive to determine the acetoin in fermentation broth,which was fit for guiding real-time monitoring the fermentation process.%针对生物法制备3－羟基丁酮的微生物发酵体系，研究了利用高效液相色谱法测定3－羟基丁酮的方法。
化学分析计量CHEMICAL ANAL Y SIS AND METERAGE第30卷，第5期2021年5月V ol. 30，No. 5May 202165doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2021.05.015高效液相色谱法快速测定环境空气中13种醛酮类化合物李少飞1，姜丽丽2，孙延康1（1.山东省烟台生态环境监测中心，山东烟台 264000； 2.山东润平环境科技有限公司，山东烟台 264000）摘要 建立高效液相色谱法快速测定环境空气中13种醛酮类化合物的方法。
选用Poroshell 120 SB–C 18色谱柱（250 mm ×4.6 mm ，4 μm ）为分离柱，以水–乙腈溶液为流动相，梯度洗脱，流量为1.5 mL ／min ，柱温为50 ℃，进样体积为10 μL ，采用紫外检测器检测，检测波长为360 nm 。
13种醛酮类化合物的质量浓度在0.05～2.0 μg ／mL 范围内与色谱峰面积具有良好的线性关系，相关系数均不小于0.999 8，方法检出限为0.16～0.47 μg ／m 3。
空白样品加标回收率为97.2%～101.1%，测定结果的相对标准偏差为0.5%～4.3%（n =6）。
该方法分析速度快，准确度和灵敏度高，精密度好，适用于环境空气中醛酮类化合物的快速测定。
关键词 醛酮类化合物；高效液相色谱法；快速测定；环境空气中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2021)05–0065–05Rapid determination of 13 aldehydes and ketones in ambient air by high performance liquid chromatographyLi Shaofei 1, Jiang Lili 2, Sun Y ankang 1（1. Y antai Ecological Environment Monitoring Center of Shandong Province, Y antai 264000, China ；2. Shandong Runping Environmental Technology Company, Y antai 264000, China ）Abstract A method for the rapid determination of 13 aldehydes and ketones in ambient air by high performance liquid chromatography was established. Poroshell 120 SB–C 18 column(250 mm ×4.6 mm ，4 μm) was used as the separation column, water and acetonitrile solution were used as mobile phase with gradient elution, flow rate was 1.5 mL ／min, column temperature was 50 ℃, injection volume was 10 μL, and detection wavelength was 360 nm. The mass concentration of 13 aldehydes and ketones had a good linear relationships with the chromatographic peak area in the range of 0.05–2.0 μg ／mL, the correlation coefficients were all not less than 0.999 8, and the detection limits were 0.16–0.47 μg ／m 3. The recoveries rate of standard addition in blank sampling were 97.2%–101.1%, and the relative standard deviations of determination results were 0.5%–4.3%(n =6). The method is sensitive, precise, rapid, accurate and ef fi cient, which is suitable for the rapid determination of aldehydes and ketones in ambient air.Keywords aldehydes and ketones; high performance liquid chromatography; rapid determination; ambient air醛酮类化合物是环境空气中常见的含氧有机污染物，主要来源于化石燃料、生物质燃烧、化工、建筑、木材加工及防腐、汽车尾气等。
㊀第37卷㊀第1期2021年2月中㊀国㊀环㊀境㊀监㊀测Environmental Monitoring in ChinaVol.37㊀No.1Feb.2021㊀环境空气中13种醛酮类化合物与2,4-二硝基苯肼采样管反应效率研究侯晓玲,陈㊀勇,赵陈晨,王㊀萍,刘㊀洁,黄晓丽四川省成都生态环境监测中心站,四川成都610066摘㊀要:应用13种醛酮类气体标准物质绘制工作曲线,采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器(DAD )测定环境空气中13种醛酮类化合物的含量㊂使用13种醛酮类气体标准物质作为采样对象模拟大气采样,对2,4-二硝基苯肼(DNPH )采样管反应时间㊁气体环境温度㊁采样流量等条件进行优化㊂以气体标准物质为样本,采样体积设定为5L ,在采样温度为25ħ㊁采样流量为0.5L /min 的条件下进行样品采集㊂采集完毕后,将采样管密封避光保存150min ,随后进行前处理㊂实验结果显示,大部分化合物的衍生化反应效率可以达到70%以上㊂该实验条件下,在25~500nmol /mol 浓度范围内绘制工作曲线,所得曲线线性关系良好,相关系数(r )大于0.995㊂该工作曲线定量方式适用于环境空气中醛酮类化合物的分析㊂关键词:气体标准物质;环境空气;醛酮类化合物;2,4-二硝基苯肼采样管;反应效率中图分类号:X830.2㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:1002-6002(2021)01-0149-07DOI :10.19316/j.issn.1002-6002.2021.01.20Study on the Reaction Efficiency of 13Kinds of Carbonyl Compounds in Ambient Air with 2,4-dinitrophenyhydrazineSampling TubeHOU Xiaoling,CHEN Yong,ZHAO Chenchen,WANG Ping,LIU Jie,HUANG XiaoliChengdu Ecological and Environmental Monitoring Center of Sichuan Province,Chengdu 610066,ChinaAbstract :In this paper,a working curve was drew by standard gas to accurately detect 13kinds of carbonyl compounds in ambientair that was coupled with a ultra-high performance liquid chromatography diode array detector (DAD ).In the experiment,13kinds of carbonyl compounds standard gas were used as the sampling object.Over reaction time between target object and 2,4-dinitrophenyhydrazine (DNPH )sampling tube,ambient temperature,sampling velocity and other conditions were optimizedsystemically.The sample was collected into DNPH tube with a volume of 5L at 0.5L /min flow rate under 25ħtemperature.Then sample tube was sealed and kept 150min at 4ħin a refrigerator before pretreating.The results showed that the derivatization efficiency of most carbonyl compounds was above 70%.Under optimum conditions,the working curve that plottedfrom concentration of 25nmol /mol to 500nmol /mol was good linearity,the correlation coefficient (r )was more than 0.995.This working curve is suitable for quantitative analysis of carbonyl compounds in ambient air.Keywords :standard gas;ambient air;carbonyl compounds;2,4-dinitrophenyhydrazine sampling tube;reaction efficiency收稿日期:2019-11-06;修订日期:2020-05-27基金项目:国家自然科学基金项目(51608348)第一作者简介:侯晓玲(1986-),女,福建永泰人,硕士,高级工程师㊂通讯作者:陈㊀勇㊀㊀醛酮类化合物是一类具有较强刺激性气味的气体,大多存在致癌㊁致畸㊁致突变风险[1-3]㊂例如,甲醛对人眼㊁鼻等有刺激作用,会导致阻塞性肺通气功能障碍[4]㊂世界卫生组织国际癌症研究机构2017年10月27日公布的致癌物清单中,甲醛被列为一类致癌物㊂乙醛能通过呼吸道和消化道进入人体,刺激皮肤㊁眼睛和上呼吸道黏膜,表现为眼球结膜充血㊁咽部充血和呼吸系统损害[5]㊂早在20世纪80年代,乙醛就被国际癌症研究机构列为二类致癌物㊂醛酮类化合物同时也是挥发性有机物(VOCs)的重要组成部分,在大气污染中扮演着重要角色,是光化学烟雾的主要成分,对臭氧层破坏的贡献较大[1]㊂大气中的醛酮类化合物为水溶性物质,可随降雨沉积在地表或海洋,从而对大气㊁水体㊁土壤等造成污染,破坏生态环境㊂因此,准确测定大气中醛酮类化合物的㊀150㊀中㊀国㊀环㊀境㊀监㊀测第37卷㊀第1期㊀2021年2月㊀含量,对其污染防治有重要意义㊂2018年,生态环境部发布针对重点地区VOCs的监测方案[6],其中就包括了对13种醛酮类化合物的测定㊂大气中醛酮类化合物的测定方法主要有分光光度法㊁气相色谱法㊁液相色谱法㊁热脱附-气相色谱/质谱法㊁液相色谱/质谱法等[2,7-9]㊂我国于2014年颁布实施了‘环境空气醛㊁酮类化合物的测定高效液相色谱法“(HJ683 2014)[10],将衍生液相色谱法作为进行醛酮类化合物分析的首要方法㊂在这些涉及衍生的方法中,或使用醛酮类衍生物的标准溶液配置一系列浓度点,绘制标准曲线;或使用醛酮类液体标准物质进行衍生反应,绘制相应的工作曲线㊂实际采集样品时,气态醛酮类分子与采样管中的2,4-二硝基苯肼(DNPH)发生化学反应,生成相应的衍生物,随后通过气相色谱仪㊁气相色谱-质谱联用仪或液相色谱仪进行定性定量分析㊂目前的校准曲线生成方式均未采用气体标准物质,未考虑采样条件㊁形态差异等,与实际样品采集存在显著差别,难以准确评估醛酮类化合物的真实回收率与准确度㊂因此,用气体标准物质生成工作曲线的方式,对于该方法的完善具有重大意义㊂本研究考察了以气体标准物质绘制工作曲线的方式,采用超高效液相色谱法测定环境空气中的13种醛酮类化合物㊂该工作曲线定量法的操作过程模拟了样品采集及前处理方式,可以减少系统误差,使定量结果更为准确,从而更真实地反映大气中醛酮类化合物的浓度水平㊂1㊀实验部分1.1㊀主要仪器与试剂超高效液相色谱仪配备二极管阵列检测器(DAD)(美国Agilent,HPLC1290),清罐仪(美国Entech,3100),静态稀释仪(美国Entech,4700),大气采样器(青岛众瑞,ZR-3500),自制采样器, C18反相色谱柱(美国Agilent,4.6mmˑ150mmˑ1.8μm),5L Tedlar气体采样袋(大连德霖),6L 内壁经惰性化处理的不锈钢采样罐(美国Entech),5mL容量瓶(A级),2mL医用无菌注射器,0.2μm有机滤膜(针头过滤器),DNPH采样管(天津博纳艾杰尔,1000mg/6mL)㊂13种醛酮-DNPH标准溶液(美国AccuStandard,批号218061262,有效期2020-07-20),15种醛酮类标准溶液(美国AccuStandard, 1000μg/mL,批号218011208,有效期2020-02-23),13种醛酮类标准气体(中国测试技术研究院,5μmol/mol,批号1812120014,有效期2020-12-20),乙腈(美国Honeywell,色谱纯),超纯水㊂1.2㊀标准气体配制将标准气体钢瓶及高纯氮气钢瓶与气体稀释装置连接,设定初始浓度和出口位置浓度,出口端连接抽真空的6L采样罐,配气压力设定为35psi (1psi=6.895kPa)㊂将预先用氮气清洗好并排空的5L Tedlar气袋接在采样罐出口端,通过压力差将气体转移到采样袋,充好后同时关闭气袋和采样罐阀门㊂1.3㊀标准气体采集将充满标准气体的气袋出口通过转接头连接至DNPH采样管的一端,采样管的另一端连接至采样器管路,进行样品采集㊂采集完毕后,密封采样管两端,4ħ避光保存,待洗脱㊂1.4㊀样品前处理参照HJ683 2014[10],从采样管大口径端加入乙腈洗脱采样管,使乙腈自然流过采样管㊂将洗脱液收集至5mL容量瓶,用乙腈定容㊂用注射器吸取洗脱液,经针头过滤器过滤,转移至2mL 棕色样品瓶待测㊂1.5㊀分析条件柱温40ħ,流量0.3mL/min,流动相为乙腈和水㊂采用二元梯度淋洗:0~20min,60%乙腈; 20~30min,乙腈从60%线性增至100%;30~ 32min,乙腈线性减至60%,保持8min㊂进样体积为5μL,DAD检测波长为360nm,用保留时间定性,用峰面积定量㊂2㊀结果与讨论2.1㊀采样条件的选择2.1.1㊀采样柱的选择选用美国Waters㊁上海安谱(CNW)㊁天津博纳艾杰尔(Aelga)3家公司的商品化DNPH采样管分析目标化合物标准溶液的衍生化效率㊂配制0.2μg/mL醛酮类化合物标准溶液,均匀加入DNPH采样管后,用乙腈洗脱至5mL容量瓶并定容,过滤后上机测定㊂实验结果显示,美国Waters 采样管无溶液缓存空间,洗脱操作不便;上海安谱采样管的衍生化效率为天津博纳艾杰尔采样管衍㊀侯晓玲等:环境空气中13种醛酮类化合物与2,4-二硝基苯肼采样管反应效率研究151㊀㊀生化效率的一半㊂因此,本研究后续优化过程均选用天津博纳艾杰尔采样管(Aelga-DNPH)㊂2.1.2㊀液体标准物质与气体标准物质衍生化效率比较液体标准物质衍生化效率考察:取15种醛酮类标准溶液(1000μg/mL)100μL,用乙腈试剂定容至1mL,得到浓度为100μg/mL的液标中间使用液㊂取25μL中间使用液,用乙腈定容至1mL,用滴管将该溶液完全转移至Aelga-DNPH 采样管,密封并避光保存,常温下分别静置20㊁60㊁90min,然后用乙腈溶液将其洗脱并定容至5mL容量瓶,过滤后上机测定㊂气体标准物质衍生化效率考察:将5μmol/mol 的标准气体通过静态气体稀释仪制得6L250 nmol/mol稀释气体,储存于苏玛罐中㊂通过压力差将苏玛罐中的气体转移到5L Tedlar气袋㊂实验中,将气袋出口连接至Aelga-DNPH采样管的一端,采样管的另一端与采样器管路相连㊂同时打开气袋阀门和采样器启动开关,以200mL/min的流量采集样品,温度为25ħ,采样体积为5L㊂采样完毕后,密封㊁避光保存,并于常温下分别静置20㊁60㊁90min,然后用乙腈洗脱并定容,过滤后上机检测㊂选择液体标准物质和气体标准物质重合的11种醛酮类化合物为实验对象,图1为两种不同介质中11种目标物与Aelga-DNPH采样管的衍生化效率㊂结果表明,气体标准物质的衍生化效率普遍高于液体标准物质;液体标准物质各化合物的衍生化反应效率差异较大,甲醛的衍生化效率可以达到80%~90%,而丙酮几乎不反应,其反应效率低于10%㊂图1㊀衍生化效率比较Fig.1㊀Comparison of derivatization efficiency2.1.3㊀Aelga-DNPH采样管采集方向HJ683 2014[10]提到,用乙腈洗脱采样管时,乙腈流向应与采样时的气流方向相反㊂鉴于Aelga-DNPH采样管两端孔径差别较大,采气时会影响气体与衍生物的有效接触面积,因此,本研究考察了从两端分别进行气体采集㊂其中,将气体从小口径端进入采样管称为反向采集,从大口径端进入采样管称为正向采集㊂采样完毕后,均从大口径端滴入乙腈洗脱采样管,定容㊁过滤并上机测定,比较两种采样方式的反应效率㊂结果显示,反向采集时,丁烯醛未检出,丙酮㊁甲基丙烯醛㊁苯甲醛的反应效率低于10%,其他化合物无显著差异;正向采集时,13种醛酮类化合物的反应效率均有所提高㊂经比较,从大口径端进行气体采集时,醛酮类化合物的衍生化效率更高,因此,后续实验采用正向采集方式㊂2.2㊀实验条件的优化在对环境空气中的醛酮类化合物气体进行采集时,采样器流量㊁采样温度㊁采样气与管中DNPH的反应时间㊁目标化合物的化学性质等都会影响目标化合物与DNPH采样管的衍生化效率,进而影响实验数据的稳定性及准确性㊂本研究使用250nmol/mol的13种醛酮类化合物标准气体考察实验条件优化㊂2.2.1㊀反应时间的影响在同一浓度㊁相同采样流量下,对反应时间(2㊁40㊁60㊁90㊁120㊁150㊁180min)进行了实验,考察不同反应时间对醛酮类化合物衍生化效率的影㊀152㊀中㊀国㊀环㊀境㊀监㊀测第37卷㊀第1期㊀2021年2月㊀响㊂实验结果表明,不是所有醛酮类化合物与衍生物的反应都是瞬间完成的㊂对于甲醛㊁乙醛等化合物,其反应效率较高,室温下的放置时间对这类化合物的衍生化效率几乎没有影响;而对于苯甲醛㊁间甲基苯甲醛等化合物,随着静置时间的延长,其回收率越来越高㊂反应时间对目标化合物反应效率的影响见图2㊂在将采样管静置120min以后,大部分化合物的反应效率趋于稳定㊂经综合考虑,选择将采样管在室温下避光放置150min作为后续实验反应时间的优化条件㊂图2㊀反应时间对目标化合物反应效率的影响Fig.2㊀Effects of reaction time on reactionefficiency of target compounds2.2.2㊀采样流量的影响在同一浓度下,对采样流量(200㊁300㊁500㊁800㊁1000mL/min)进行了实验,考察采样流量对醛酮类化合物与DNPH采样管衍生化效率的影响(图3)㊂结果表明,13种醛酮类化合物的反应效率随着采样流量的增大而增大㊂除苯甲醛和间甲基苯甲醛两种化合物之外,其余化合物在采样流量为500mL/min时的反应效率达到最大值,并且如继续增大流量,反应效率有所降低㊂苯甲醛和间甲基苯甲醛的反应效率随着采样流量的增加逐渐变大㊂由于这两种物质在聚四氟乙烯气袋上的吸附性较强,采样流量越大,采样时间越短,则目标分子接触气袋内表面的概率越小,吸附的影响也就越小㊂经综合考虑,选择500mL/min作为后续实验采样流量的优化条件㊂2.2.3㊀采样温度的影响模拟实际环境温度条件,在0~40ħ范围内考察采样温度对化合物反应效率的影响(图4)㊂结果表明,在0~25ħ范围内,随着温度的升高,化合物的衍生化效率逐渐提高;当温度继续升高到40ħ时,大部分化合物的衍生化效率反而降低㊂由此可见,不同环境温度条件下,由气体标准物质(同等浓度范围内)绘制的工作曲线的斜率差异较大,而液体标准物质绘制的标准曲线不会出现这种现象㊂因此,在冬季或夏季(特别是冬季),采用传统的标准曲线定量方式时,实际样品的准确度差异较大㊂经综合考虑,选择25ħ作为绘制工作曲线的环境温度㊂2.2.4㊀采样管和洗脱液的保存环境温度㊁采样流量㊁化学反应时间㊁目标化合物的化学性质等都会影响目标化合物与DNPH采样管的衍生化效率,并不是所有目标化合物的衍生化效率都能达到100%的理想化状态㊂在最优实验条件下,采集一批次浓度为100nmol/mol的气体样品(5L),密封并4ħ避光保存,放置不同时间后进行前处理并上机测定㊂将第1天测定后的洗脱液重新密封并4ħ避光保存,分别于第5㊁10㊁15㊁20㊁30天上机测定㊂㊀侯晓玲等:环境空气中13种醛酮类化合物与2,4-二硝基苯肼采样管反应效率研究153㊀㊀图3㊀采样流量对目标化合物反应效率的影响Fig.3㊀Effects of sample flow rate on reactionefficiency of targetcompounds图4㊀环境温度对目标化合物反应效率的影响Fig.4㊀Effects of temperature on reactionefficiency of target compounds㊀㊀图5显示,除甲醛和丙烯醛外,其余化合物的采样管在4ħ条件下保存30d 和保存1d 的测试结果无明显差异㊂30d 内,洗脱液中13种目标化合物的测定结果的相对标准偏差在9%以下㊂因此,若待测目标化合物中含有甲醛和丙烯醛,建议在完成样品采集后,立即送回实验室进行样品前处理并上机测定㊂若无法立即分析,则将处理后的洗脱液4ħ密封避光保存,30d 内完成测定㊂3㊀实验结果3.1㊀工作曲线的绘制在最佳实验条件下,配制25㊁50㊁100㊁250㊁500nmol /mol 的标准气体样品,并采集5L 标准气体于采样管中,得到相应的线性方程及相关系数(r )㊂结果显示,r 可达0.995以上,满足方法㊀154㊀中㊀国㊀环㊀境㊀监㊀测第37卷㊀第1期㊀2021年2月㊀定量要求㊂同时,以醛酮-DNPH标准溶液配制一系列对应浓度,得到相应的标准曲线方程及r (表1)㊂采用液体标准物质曲线法时,所有目标化合物标准曲线的r都可达到0.9999,线性关系很好㊂但除甲醛对应的两种曲线的斜率相近之外,其余化合物标准曲线线性方程的斜率都比工作曲线大㊂其原因在于甲醛的实际回收率可达100%,而其他化合物的回收率则差距显著㊂因此,除甲醛外,其他化合物采用液体标准物质绘制标准曲线会直接影响实际样品分析的准确性㊂图5㊀样品管保存时间对目标化合物反应效率的影响Fig.5㊀Effects of sample tube storage time on reaction efficiency of target compounds表1㊀工作曲线与标准曲线结果Table1㊀The results of working curve and standard curve目标化合物气体标准物质(工作曲线)液体标准物质(标准曲线)线性方程r线性方程r回收率/%甲醛y=167.7x-0.200.9999y=164.7x-0.240.9999102乙醛y=101.4x+1.040.9998y=131.6x-0.240.999977丙烯醛y=44.2x-0.460.9999y=87.0x-0.300.999951丙酮y=67.9x+0.820.9998y=93.8x-0.170.999972丙醛y=72.5x+0.680.9999y=97.4x-0.130.999974丁烯醛y=24.4x+1.050.9970y=48.3x-0.130.999951甲基丙烯醛y=43.2x+0.330.9998y=64.4x-0.210.9999672-丁酮y=51.1x+0.440.9997y=64.2x-0.040.999980正丁醛y=49.0x+0.240.9999y=75.9x-0.060.999965苯甲醛y=12.9x+0.920.9950y=24.8x-0.110.999952戊醛y=43.8x+0.0020.9998y=67.4x-0.210.999965间甲基苯甲醛y=10.3x+0.020.9992y=20.5x-0.080.999950己醛y=38.1x+0.550.9998y=60.4x-0.210.999963㊀㊀注:回收率是工作曲线斜率与标准曲线斜率的比值㊂㊀㊀表1中,除甲醛外,其他化合物的回收率在50%~80%㊂该回收率为固定最佳实验条件下多个浓度点的平均值,具有较好的代表性㊂一般而言,分子较小的醛酮类化合物的回收率较高,是因为其羰基更易与衍生物质接触并发生反应㊂若分子中的羰基是与双键碳原子相连,如丙烯醛㊁丁烯醛㊁苯甲醛等,则其回收率偏低㊂丙烯醛㊁丁烯醛等与DNPH生成的醛腙化合物含有双键不饱和键,会继续与采样管中过量的DNPH发生加成反应,从而导致回收率偏低㊂苯甲醛和间甲基苯甲醛的羰基碳上含有给电基团(芳基),降低了羰基的亲电能力,使之与DNPH的反应活性下降㊂同时,给电基团(芳基)体积较大,会降低醛酮类化合物与DNPH的反应效率㊂综上,将气体标准物㊀侯晓玲等:环境空气中13种醛酮类化合物与2,4-二硝基苯肼采样管反应效率研究155㊀㊀质绘制工作曲线法应用于环境空气中醛酮类化合物的测定,其分析结果更接近真实值㊂3.2㊀采样管的穿透容量控制配制一系列浓度的标准混合气体样品,以最优采样条件(采集体积为5L)考察DNPH采样管的穿透容量㊂按照浓度从低到高的顺序进行分析,每分析完一个样品,均将结果代入拟合工作曲线㊂当某种化合物的浓度增加至某一数值时,若该化合物的线性相关系数低于0.995,且响应值表现为偏低,即认为该化合物在此浓度已经穿透,前一个浓度点为该化合物的容量水平㊂为了表达方便,用气体摩尔浓度表示采样管容量水平㊂实验结果显示,苯甲醛㊁间甲基苯甲醛在采样管中的容量水平为500nmol/mol,丙烯醛㊁丙酮㊁丁烯醛㊁甲基丙烯醛和2-丁酮为1000nmol/mol,戊醛和己醛为1250 nmol/mol,而甲醛㊁乙醛㊁丙醛㊁正丁醛4种正构醛类可达1500nmol/mol以上㊂本实验采用标准气体考察醛酮类化合物在采样管中的穿透容量,可能与实际样品仍然存在一定差别,但实验结果与化合物反应效率考察结果基本吻合㊂醛酮类化合物在采样管中的穿透容量与化合物的化学反应效率成正比㊂甲醛等低分子量醛类化合物的活性高,化学反应效率高,在采样管中DNPH衍生物过量的情况下,高浓度的甲醛依然能够与衍生物迅速发生反应,因此,这几种化合物的穿透容量水平更高㊂4㊀结论本研究采用气体标准物质考察了醛酮类气体与DNPH采样管的反应效率㊂结果显示,化学结构的不同导致醛酮类化合物的反应效率存在差别,13种醛酮类化合物的回收率为50%~102%㊂HJ683 2014是以标准衍生物溶液绘制校准曲线,以空白管中加入标准衍生物溶液的方式进行加标回收考察,在质量保证与控制措施方面并未对回收率提出要求,因此,采用该方法测定环境空气中的醛酮类化合物时,难以保证所有化合物测定数据的准确度㊂建议在标准方法中纳入更为严格的质量保证和控制措施,可用气体标准物质对回收率进行考察,或用气体标准物质绘制工作曲线㊂本研究通过建立工作曲线的方式对环境空气中的醛酮类化合物进行了定量分析,是对传统测定方法的进一步深入研究,其定量结果更接近真实值,更适用于环境空气中醛酮类化合物的分析㊂参考文献(References):[1]UCHIYAMA S,INABA Y,KUNUGITA N.OzoneRemoval in the Collection of Carbonyl Compounds inAir[J].Journal of Chromatography A,2012,1229:293-297.[2]PAL R,KIM K H.Gas Chromatographic Approach forthe Determination of Carbonyl Compounds in AmbientAir[J].Microchemical Journal,2008,90(2):147-158.[3]王伟,卢志刚,张桂珍.醛类化合物检测方法中腙类物质的衍生条件[J].中国环境监测,2014,30(5):85-89.WANG Wei,LU Zhigang,ZHANG Guizhen.Researchon the Derivitization Conditions for HydrazonsDerivitives in the Detection Methods of the AldehydeCompound[J].Environmental Monitoring in China,2014,30(5):85-89.[4]SALTHAMMER T.Data on Formaldehyde Sources,Formaldehyde Concentrations and Air Exchange Ratesin European Housings[J].Building and Environment,2019,22:400-435.[5]NISHIKAWA H,SAKAIB T.Derivatization andChromatographic Determination of Aldehydes inGaseous and Air Samples[J].Journal ofChromatography A,1995,710(1):159-165. [6]生态环境部办公厅.2018年重点地区环境空气挥发性有机物监测方案:环办监测函[2017]2024号[A].2017.[7]周考文,岑大卫,李小军.空气中甲醛的乙酰丙酮分光光度快速测定方法[J].分析实验室,2004,23(12):82-84.ZHOU Kaowen,CEN Dawei,LI Xiaojun.Determinationof Trace Formaldehyde in Air by FastSpectrophotometry with Acetylacetone[J].ChineseJournal of Analysis Laboratory,2004,23(12):82-84.[8]LI J,FENG Y L,XIE C J,et al.Determination ofGaseous Carbonyl Compounds by TheirPentafluorophenyl Hydrazones with GasChromatography/Mass Spectrometrye[J].AnalyticaChimica Acta,2009,635(1):84-93.[9]SAKURAGAWA A,YONENO T,INOUE K,et al.TraceAnalysis of Carbonyl Compounds by LiquidChromatography-Mass Spectrometry After Collection as2,4-Dinitrophenylhydrazine Derivatives[J].Journal ofChromatography A,1999,844(1/2):403-408. [10]环境保护部.环境空气醛㊁酮类化合物的测定高效液相色谱法:HJ683 2014[S].北京:中国环境出版社,2014.。
液相色谱法测定乙醛中含量的优化研究引言乙醛是一种常见的有机化合物，广泛应用于化工、医药、食品等领域。
准确测定乙醛中的含量对于质量控制和安全保障具有重要意义。
本文将探讨液相色谱法测定乙醛中含量的优化研究。
一、乙醛的化学性质和危害乙醛，化学式为CH3CHO，是一种有刺激性气味的无色液体。
乙醛具有较强的挥发性，易溶于水和有机溶剂。
在高浓度下，乙醛对人体呼吸道和眼睛有刺激作用，长期暴露还可能导致肺功能受损和癌症等健康问题。
二、液相色谱法测定乙醛中含量的原理液相色谱法是一种常用的分析技术，其基本原理是利用样品在液相中的分配行为进行分离和测定。
液相色谱法测定乙醛中含量的原理是将样品中的乙醛分离并定量测定其浓度。
这一过程通常包括样品前处理、色谱柱的选择、流动相的优化等步骤。
三、样品前处理的优化样品前处理是液相色谱法测定乙醛中含量的关键步骤。
常用的样品前处理方法包括蒸馏、萃取和衍生化等。
为了提高测定的准确性和灵敏度，可以采用以下优化措施：1. 选择合适的样品前处理方法：根据实际需要选择合适的样品前处理方法，如对于高浓度的乙醛样品可以采用稀释的方法，而对于低浓度的样品可以采用浓缩的方法。
2. 优化萃取条件：在进行萃取过程中，可以调整溶剂的种类和比例，以提高乙醛的萃取效率。
3. 衍生化反应的优化：衍生化反应是提高乙醛测定灵敏度的重要步骤，可以通过优化反应时间、温度和试剂比例等参数，提高衍生化反应的效果。
四、色谱柱的选择和优化色谱柱的选择和优化对于液相色谱法测定乙醛中含量具有重要影响。
常用的色谱柱包括反相色谱柱和离子交换色谱柱。
在选择色谱柱时，应考虑以下因素：1. 分离效果：选择具有良好分离效果的色谱柱，以确保乙醛与其他组分的分离。
2. 分析速度：考虑分析时间的因素，选择分离速度较快的色谱柱。
3. 耐久性：选择具有较长使用寿命的色谱柱，以减少更换的频率。
五、流动相的优化流动相是液相色谱法中的重要组成部分，对于分离效果和测定结果有直接影响。
高效液相色谱法在甲醛含量测定中的应用研究发布时间：2021-11-08T01:32:37.197Z 来源：《中国科技信息》2021年10月下30期作者：李窕妍李文辉洪鉴之[导读] 本文主要探讨高效液相色谱法在化工、纺织、食品和医药等领域中测定甲醛含量的应用，通过查阅大量资料文献，综合多个研究结果，证明了高效液相色谱法在测定甲醛这一方面，能够显示其减少假阳性、准确可靠、灵敏度更高等优点，为相关的检测、科研人员提供一定的参考。
广东省揭阳市质量计量监督检测所李窕妍李文辉洪鉴之揭阳 522031摘要：本文主要探讨高效液相色谱法在化工、纺织、食品和医药等领域中测定甲醛含量的应用，通过查阅大量资料文献，综合多个研究结果，证明了高效液相色谱法在测定甲醛这一方面，能够显示其减少假阳性、准确可靠、灵敏度更高等优点，为相关的检测、科研人员提供一定的参考。
关键词：高效液相色谱；甲醛；应用研究甲醛(HCHO)是一种常见的有机物，也是一种重要的工业原料, 被广泛用于纺织、医药、建材等产业[1]，但甲醛对人体有较大危害，对眼部、呼吸、神经及内分泌系统均有毒性[2-3]，在GB 18580-2017《室内装饰装修材料人造板及其制品中甲醛释放限量》标准中规定了室内装饰装修材料用人造板及其制品中甲醛释放限量值为不大于0.124毫克每立方米（mg/m3 ）[4]，该标准的甲醛释放限量值与ISO 16893：2016《木质人造板刨花板》、ISO 16985：2016《木质人造板干法纤维板》的规定一致[5]。
我国皮革、毛皮行业唯一的强制性标准 GB 20400-2006《皮革和皮毛有害物质限量》也对甲醛限量作出明确要求[6-7]。
目前针对各种类型的产品，纺织品、化妆品、洗涤剂、畜禽肉、水产、药用材料等的甲醛的定量测定方法主要有分光光度法、色谱法、电化学法、荧光法等。
本文主要探讨高效液相色谱法在各个产品领域中定量测定甲醛的应用，为相关的检测、科研人员提供一定的参考。
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 1154-2020环境空气 醛、酮类化合物的测定溶液吸收-高效液相色谱法Ambient air—Determination of aldehyde and ketone compounds — Solution absorption-High performance liquid chromatography（发布稿）本电子版为发布稿。
请以中国环境出版集团出版的正式标准文本为准。
2020-12-14发布2021-03-15实施生态环境部发 布目 次前 言............................................................................................................................................... i i1 适用范围 (1)2 规范性引用文件 (1)3 方法原理 (1)4 干扰和消除 (1)5 试剂和材料 (2)6 仪器和设备 (3)7 样品 (3)8 分析步骤 (5)9 结果计算与表示 (6)10 精密度和准确度 (7)11 质量保证和质量控制 (7)12 废物处理 (8)附录A（规范性附录）方法检出限和测定下限 (9)附录B（资料性附录）方法精密度和准确度 (10)附录C（资料性附录）醛、酮类-DNPH衍生物的乙腈-水体系分离参考色谱图 (13)i前 言为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国大气污染防治法》，保护生态环境，保障人体健康，规范环境空气中醛、酮类化合物的测定方法，制定本标准。
本标准规定了测定环境空气和无组织排放监控点空气中醛、酮类化合物的高效液相色谱法。
本标准的附录A为规范性附录，附录B和附录C为资料性附录。
本标准为首次发布。
本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。
本标准起草单位：辽宁省沈阳生态环境监测中心。
