4第四章 微生物的营养和培养基
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第四章:微生物的营养和培养基名词解释:1、异养微生物;2、自养微生物;3、营养类型;4、培养基;5、天然培养基;6、组合培养基;7、固化培养基;8、选择性培养基;9、鉴别性培养基;10、营养;11、营养物;12、双功能营养物;13、单功能营养物;问答(知识点):1、微生物六大类营养物质是什么?在元素水平,都需要20种左右的元素,以C、H、O、N、P、S 6种元素为主。
在营养要素水平上都需要:碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。
2、微生物按照能源、氢供体和基本碳源的需要来分,可分为哪4种类型?3、选用和设计培养基的原则和方法是什么?4个原则:目的明确;营养协调;理化适宜;经济节约。
4种方法:生态模拟;参阅文献;精心设计;试验比较。
4、培养基中各营养要素的含量间一般遵循何种顺序5、按对培养基成分的了解进行分类,培养基可分为哪几类,各有什么优缺点?1、天然培养基:利用化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物质制成的培养基。
优点:营养丰富、种类多样、配制方便、价格低廉、微生物生长良好。
缺点:成分不清楚、不稳定。
2、组合培养基:由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基。
优点:组成成分精确、重复性强。
缺点:价格昂贵配制麻烦,微生物生长较慢。
3、半组合培养基:指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。
严格地讲,凡含有未经处理的琼脂的任何组合培养基,都只能看作是一种半组合培养基。
优点:在合成培养基的基础上添加些天然成份,以更有效地满足微生物对营养物的需要。
6、什么是鉴别性培养基?试以EMB培养基为例,分析其鉴别作用的原理。
鉴别性培养基:在培养基中加入某种特殊化学物质,某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物,而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。
EMB琼脂培养基EMB(Eosin Methylene Blue)agar伊红美蓝琼脂培养基的简称。
第四章 微生物的营养与培养基目的要求:通过本章的课堂教学,使学生了解微生物营养类型的特点及多样性,以及根据不同微生物各自的营养要求,配制相应的培养基对微生物培养的理论知识,为今后对微生物的研究与利用打下基础。
教学内容:1、微生物的6类营养要素2、微生物的营养类型3、营养物质进入细胞的方式单纯扩散(simple diffusion)促进扩散(facilitated diffusion)主动运输(active transport)基团移位(group translocation)4、培养基(media)配制的原则5、培养基的种类重点内容:微生物 营养类型营养物质进入细胞的方式培养基(media)配制的原则及主要培养基类型营养(nutrition):微生物CUN 从外部环境中摄取对其生命活动必须的能量和物质,以满足其生长和繁殖等生理活动的过程。
营养物质(nutrient):那些能够满足机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需要的物质称为营养物质。
营养物质是微生物生存的物质基础,而营养是微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。
第一节 微生物的六种营养要素一、微生物细胞的化学组成细胞化学元素组成:主要元素: 包括碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等,碳、氢、氧、氮、磷、硫等微量元素: 包括锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。
微生物细胞组成:有机物、无机物和水。
有机物:主要包括蛋白质、糖、脂、核酸、维生素以及它们的降解产物和一些代谢产物等物质。
无机物:是指与有机物相结构或单独存在于细胞中的无机盐(inorganic salt)等物质。
水:细胞维持正常生命活动所不可少的,一般可占细胞重量的70%-90%。
二、微生物的营养要素营养物质按照它们在机体中的生理作用不同,可以将它们区分成碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。
1、碳源:在微生物生长过程中能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养物质称为碳源。
碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的细胞物质(如糖类、脂类、蛋白质等)和代谢产物,同时绝大部分碳源物质在细胞内生化反应过程中还能为机体提供维持生命活动所需的能源,因此碳源物质通常也是能源物质。
第四章微生物的营养和培养基微生物的营养:为了满足其生长和繁殖的的需要微生物从外界摄取其生命活动所必须的能量和物质,以满足其生长和繁殖需要的一种生理功能。
即获得与利用营养物质的功能。
微生物的营养物质:能够满足微生物的生长繁殖和完成其各种生理活动所需要的物质称为微生物的营养物质。
即具有营养功能的物质。
微生物的营养物质可为它们正常的生命活动提供结构物质(大分子碳架)、能量、代谢调解物质和良好的生理环境。
微生物的营养物质来源除无机、有机物质外,还包括光能这种非物质形式的能源。
第一节微生物的六类营养要素1 微生物的营养要求2 微生物的六类营养要素一微生物的营养要求(一)微生物细胞的化学组成微生物细胞由C、H、O、N、S、P、Mg、K、Na、Ca、Fe、Mn、Cu、Co、Mo、Zn等化学元素组成,且以C、H、O、N、S、P六种元素为主,占细菌细胞干重的97%。
微生物细胞中的这些元素主要以水、有机物和无机盐的形式存在于细胞中。
有机物主要为:蛋白质、糖、脂、核酸、维生素及它们的降解物与一些代谢产物等物质组成。
无机物则是:参与有机物组成或单独存在于细胞原生质内的无机盐等灰分物质中。
水是细胞的一种主要成分,一般占微生物营养体重量的百分比:细菌80%左右、酵母菌75%左右、霉菌85%左右;霉菌孢子含水约39%、细菌芽孢核心部分的含水量低于30%。
细胞内的有机物、无机物和水等共同赋予细胞的遗传连续性、透性和生化活性。
(二)微生物的营养要求微生物细胞也和其他高等生物细胞一样,在元素水平都需要20种左右,且以C、H、O、N、S、P六种元素为主;在营养要素水平上都在六大类的范围内:碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。
二微生物的六类营养要素(一)碳源1 碳源(carbon source)一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养物,称为碳源。
碳源是微生物需要量最大的营养物,又称大量营养物。
2 微生物的碳源谱微生物可利用的碳源范围即碳源谱。
第四章微生物的营养和培养基1.营养:生物体从外部环境中摄取对其生命活动必需的能量和物质,以满足正常生长和繁殖需要的一种最基本的生理功能。
2.六要素:碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水3.微生物细胞含碳量:约占干重的(50%)。
4.异养微生物:凡是必须利用有机碳源的微生物。
自养微生物:凡是以无机碳源作主要碳源的微生物。
5.异养微生物在元素水平上的最适碳源则是“C•H•O”型。
其次是有机类、醇类和脂类等。
糖类优于双糖和多糖,己糖优于戊糖,葡萄糖、果糖优于甘露糖、半乳糖6.双功能物质:对一切异养微生物来说,其碳源同时又兼作能源7.最长用的有机氮源是牛肉侵入物(牛肉膏)、酵母膏、植物的饼粉和蚕蛹粉。
8.生长因子:是一类调节微生物正常代谢所必须,但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。
(生长因子有酵母膏,玉米浆,肝液,麦芽汁)营养类型能源氢供体基本能源实例光能无机自养型(光能自养型) 光无机物CO2蓝细菌,紫硫细菌,绿硫细菌,藻类光能有机异养型(光能异养型) 光有机物CO2及其简单有机物红螺菌科的细菌(即紫色无硫细菌)化能无机自养型(化能自养型) 无机物无机物CO2硝化细菌,硫化细菌,铁细菌,氢细菌,硫磺细菌等化能有机自养型(华能异养型)有机物有机物有机物绝大多数细菌和全部真菌10.化能异养:生长所需要的能量均来自有机物氧化过程中放出的化学能。
11.营养物质进入细胞的方式①自由扩散:原生质膜是一种半透性膜,营养物质通过原生质膜上的小孔,由高浓度的胞外环境向低浓度的胞内进行扩散。
②促进扩散:通过促进扩散进入细胞的营养物质主要有氨基酸、单糖、维生素及无机盐等。
一般微生物通过专一的载体蛋白运输相应的物质,但也有微生物对同一物质的运输由一种以上的载体蛋白来完成。
③主动运输:主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式。
它的一个重要特点是物质运输过程中需要消耗能量和载体,而且可以进行逆浓度运输。
④基团转移:基团移位是另一种类型的主动运输,它与主动运输方式的不同之处在于它有一个复杂的运输系统来完成物质的运输,而物质在运输过程中发生化学变化。
第四章微生物的营养和培养基A部分习题一、选择题1. 大多数微生物的营养类型属于:()A. 光能自养B. 光能异养C. 化能自养D. 化能异养2. 蓝细菌的营养类型属于:()A.光能自养 B. 光能异养 C.化能自养 D. 化能异养3. 碳素营养物质的主要功能是:()A. 构成细胞物质B. 提供能量C. A,B 两者4. 占微生物细胞总重量70%-90% 以上的细胞组分是:()A. 碳素物质B. 氮素物质C. 水5. 能用分子氮作氮源的微生物有:()A. 酵母菌B. 蓝细菌C. 苏云金杆菌6. 腐生型微生物的特征是:()A. 以死的有机物作营养物质B. 以有生命活性的有机物作营养物质C. A,B 两者7. 自养型微生物和异养型微生物的主要差别是:()A. 所需能源物质不同B. 所需碳源不同C. 所需氮源不同8. 基团转位和主动运输的主要差别是:()A. 运输中需要各种载体参与B. 需要消耗能量C. 改变了被运输物质的化学结构9. 单纯扩散和促进扩散的主要区别是:()A. 物质运输的浓度梯度不同B. 前者不需能量,后者需要能量C. 前者不需要载体,后者需要载体10. 微生物生长所需要的生长因子(生长因素)是:()A. 微量元素B. 氨基酸和碱基C. 维生素D. B,C二者11. 培养基中使用酵母膏主要为微生物提供:()A. 生长因素B. C 源C. N 源12. 细菌中存在的一种主要运输方式为:()A. 单纯扩散B. 促进扩散C. 主动运输D. 基团转位13. 微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的:()A. 10%B. 30%C. 50% %14. 用牛肉膏作培养基能为微生物提供:()A. C 源B. N 源C. 生长因素D. A,B,C 都提供15. 缺少合成氨基酸能力的微生物称为:()A. 原养型B. 野生型C. 营养缺陷型二、是非题1. 最常用的固体培养基的凝固剂是琼脂。
2. 大多数微生物可以合成自身所需的生长因子,不必从外界摄取。
第4章微生物的营养和培养基填空题1.微生物生长繁殖所需六大营养要素是、、、、和。
碳源氮源无机盐生长因子水能源2.根据,微生物可分为自养型和异养型。
碳源3.根据,微生物可分为光能营养型和化能营养型。
能源4. 根据,微生物可分为无机营养型和有机营养型。
氢供体5. 根据碳源、能源和氢供体性质的不同,微生物的营养类型可分为、、和。
光能无机自养光能有机异养化能无机自养化能有机异养6.设计、配制培养基所要遵循的原则包括、、和。
目的明确营养协同理化适宜经济节约7.按所含成分划分,培养基可分为、、和。
天然培养基组合培养基半组合培养基8.按物理状态划分,培养基可分为、、和。
固体半固体液体脱水培养基9.按用途划分,培养基可分为、、和等4种类型。
基础加富鉴别选择10.营养物质进入细胞的方式有、、和。
单纯扩散促进扩散主动运输基团移位11. 在营养物质的四种运输方式中, 只有__________ 运输方式改变了被运输物质的分子结构.基团移位12. 在营养物质运输中, 能逆浓度梯度方向进行营养物运输的运输方式是__________,__________。
主动运输、基团移位13. 在营养物质运输中顺浓度梯度方向运输营养物质进入微生物细胞的运输方式是__________ 和__________。
单纯扩散、促进扩散14. 在营养物质运输中既消耗能量又需要载体的运输方式是__________,__________。
主动运输、基团移位15、化能自养型和化能异养型微生物,生长所需的能量前者来自于_______的氧化放能,而后者则来自于_______的氧化放能;生长所需的碳源前者以_______为主,后者则以______为主要来源。
无机物有机物CO2 有机物16、光能自养型和光能异养型微生物的共同点是都能利用__________; 不同点在于前者能以__________ 作唯一碳源或主要碳源, 而后者则以__________ 作主要碳源, 前者以__________ 作供氢体而后者则以__________ 作供氢体。
第四章微生物的营养和培养基一、名词解释单纯扩散;指疏水双分子层细胞膜在无载体蛋白参与下,单纯依靠物理扩散方式让许多小分子、非电离分子尤其是亲水性分子被动通过的一种物质运送方式。
通过这种方式运送的物质主要有O2、CO2、乙醇、甘油和某些氨基酸分子。
基团移位:指一类既需特异性载体蛋白的参与,又需耗能的一种物质运送方式,其特点是溶质在运送前后还会发生分子结构的变化,因此不同于一般的主动运送。
它广泛存在于原核生物中,尤其是一些兼性厌氧菌和专性厌氧菌,主要用于运送各种糖类(葡萄糖、果糖、甘露糖)、核苷酸、丁酸和腺嘌呤等物质。
主动运输;指一类须提供能量并通过细胞膜特异性载体蛋白构象的变化,而使膜外环境中低浓度的溶质运入膜内的一种运送方式。
它可以逆浓度运送营养物,主要有无机离子、有机离子(某些氨基酸、有机酸)和一些糖类(葡萄糖、乳糖和核糖)。
促进扩散:指溶质在运送过程中,必需借助存在于细胞膜上的底物特异载体蛋白的协助,但不消耗能量的一类扩散性运送方式。
其载体蛋白一般通过诱导产生,它借助自身构象的变化,在不耗能的条件下加速把膜外高浓度的溶质扩散到膜内,而且这个过程是可逆的。
生长因子;是一类对调节微生物正常代谢所必需,但不能用简单的碳、氮源自行合成的微量有机物。
广义的生长因子除了维生素外,还包括碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、C4-C6的分支或直链脂肪酸,有时还包括氨基酸营养缺陷突变株所需要的氨基酸在内;而狭义的生长因子一般仅指维生素。
鉴别性培养基;是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。
最常见的鉴别性培养基是伊红美蓝乳糖培养基(即EMB培养基)。
选择性培养基;是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素抗性原理而设计的培养基,具有是混合菌样中劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。
二、填空题1.根据微生物利用碳源和能源的不同可将微生物分成为__光能自养型_______、__光能异养型_______、化能自养型_________和_化能异养型________四种类型,2.按照营养物质在机体中生理作用不同可将其分为6种营养要素即__碳源___、氮源_______、能源_______、生长因子______、无机盐________和_水________。
3.凡是必须利用_有机碳________作为主要碳源的微生物为异养微生物,凡是以_无机碳________作为主要碳源的微生物为自养微生物。
4.根据利用碳源不同,微生物可以分为_自养微生物________和__异养微生物_______等类群。
根据利用能源不同,微生物可以分为___光能营养型______和______化能营养型___等类群。
5.微生物吸收营养物质的四种运输方式为___单纯扩散______、_促进扩散________、_主动运送________和_基团移位________;在营养物质的四种运输方式中,只有__基团移位________运输方式改变了被运输物质的化学组成。
能逆浓度梯度方向进行营养物运输的运输方式是_主动运送_________、___基团移位_______,既消耗能量又需要载体的运输方式是____主动运送________________。
6.根据物理性状不同,微生物的培养基可以分为_固体培养基________、___半固体培养基______、__液体培养基_______等,根据物质成分不同,微生物的培养基可以分为天然培养基_________、__合成培养基_______、__半合成培养基_______等。
7.既能作为碳源又能作为能源的营养物称为___双功能营养物______。
8.微生物细胞的主要组成元素是__C、N、O、P、S_______,细菌细胞的碳、氮比为_________9.广义的生长因子除了维生素外,还包括_碱基____、_卟啉及其衍生物______、_甾醇______、_胺类_____、___C4-C6的分支或直链脂肪酸___、__氨基酸______和_________。
10.大肠杆菌细胞参与基团移位的特异蛋白载体称为___热稳载体蛋白(HPr)_______________,运输某营养物至少需要__酶Ⅰ___、__酶Ⅱa______、__酶Ⅱb______和____酶Ⅱc______4种蛋白质,葡萄糖通过基团移位的方式进入细胞内,分子结构发生_________变化。
11.一般好氧微生物生长需要的的氧化还原电势为___+0.3-+0.4V______,兼性厌氧菌在氧化还原电势高于_+0.1V________进行呼吸产能,低于_____+0.1V ____进行发酵产能,厌氧菌只能生活在氧化还原电势低于__+0.1V _______的环境中。
12.培养基配置的时候,C/N比通常为___10______,测定培养基中的氧化还原电势用_刃天青________作为指示剂。
13.光能异养菌以__光________作能源,以____CO2和简单有机物______为碳源,以__有机物________作供氢体将___碳源_______合成细胞有机物,化能自养菌以__无机物________取得能量,以_____无机碳_____作碳源合成细胞有机物。
14.一般将化合物水解时释放自由能在5.0千卡(20.9千焦)以上的称为高能化合物。
15.光能自养型微生物含_叶绿素________,主要以无机物如水,H2S、硫代硫酸钠等作为供氢体还原_CO2________。
16.化能自养型微生物的能源十分独特,可以利用一些_____还原态无机物____,如NH4+,S,H2S,NO2-,H2,F2+等作为能源。
三、选择题1.PDA培养基属于(B )。
A、合成培养基B、半合成培养基C、鉴别培养基D、天然培养基2.半固体培养基中琼脂使用浓度为(c )。
A、10-20%B、0.2-0.7%C、1.5-2.0%D、5-10%3.从土壤中分离得到的微生物的营养类型属于( D )。
A、光能自养B、光能异养C、化能自养D、化能异养4.蛋白胨水培养基属于(D )。
A、合成培养基B、半合成培养基C、鉴别培养基D、天然培养基5.高氏一号培养基属于( A )。
A、合成培养基B、半合成培养基C、鉴别培养基D、天然培养基6.光能无机营养型微生物不以下列哪种物质作为电子供体,以CO2作为生长的唯一碳源或主要碳源。
( A )A、NO3-B、SC、H2D、H2S7.红螺菌科细菌的营养类型属于(B )。
A、光能自养B、光能异养C、化能自养D、化能异养8.基团转位和主动运输的主要差别是(D )。
A、需要载体参与B、物质从低浓度向高浓度运输C、需要消耗能量D、被运输物质的化学结构发生变化9.酵母菌属于( A )微生物。
A、好氧型B、厌氧型C、兼性厌氧型D、微厌氧型10.金黄色葡萄球菌属于( D )型的微生物。
A、光能无机自养B、光能有机异养C、化能无机自养D、化能有机异养11.可利用无机物为电子供体而以有机物为碳源属于(B )型的微生物。
A、兼养型B、异养型C、自养型D、原养型12.蓝细菌和藻类细菌的营养类型属于(A )。
A、光能自养B、光能异养C、化能自养D、化能异养13.马铃薯培养基属于( B )。
A、合成培养基B、半合成培养基C、鉴别培养基D、天然培养基14.牛肉膏蛋白胨培养基属于(D )。
A、合成培养基B、半合成培养基C、鉴别培养基D、天然培养基15.培养真菌时,不可采用下列哪种措施防止细菌污染(C )。
A、培养基中加抗生素B、培养基中加入乳酸C、培养基中加入合适的染料D、降低培养温度16.培养真菌时,为防止细菌污染,通常可以加入抗生素,下列哪种抗生素可以进行高压蒸汽灭菌()。
A、青霉素B、磷霉素C、链霉素D、氯霉素17.配置培养基时通常加入(A )作为备用碱进行pH内源调节。
A、CaCO3B、氨水C、生物碱D、K2PO418.实验室培养放线菌常用的培养基是(B )。
A、PDA培养基B、高氏一号培养基C、营养肉汤培养基D、EMB培养基19.实验室培养细菌常用的培养基是( A )。
A、牛肉膏蛋白胨培养基B、马铃薯培养基C、高氏一号培养基D、查氏培养基20.实验室培养细菌常用的培养基是( C )。
A、PDA培养基B、高氏一号培养基C、营养肉汤培养基D、EMB培养基21.实验室培养真菌常用的培养基是(A )。
A、PDA培养基B、高氏一号培养基C、营养肉汤培养基D、EMB培养基22.实验室制作固体培养基时,最常使用的凝固剂为(B )。
A、明胶B、琼脂C、纤维素D、硅胶23.试剂公司出售的糖发酵基础培养基和LB培养基属于(C )。
A、液体培养基B、合成培养基C、脱水培养基D、天然培养基24.碳源和能源来自同一有机物的是微生物属于(D )。
A、光能自养型B、化能自养型C、光能异养型D、化能异养型25.微生物生长所需要的生长因子(生长因素)是(E )。
A、卟啉和甾醇B、氨基酸和碱基C、维生素D、C4~C6的分支或直链脂肪酸E、以上都是26.微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的(C )。
A、10%B、30%C、50%D、70%27.细菌中存在的一种主要运输方式为( C )。
A、单纯扩散B、促进扩散C、主动运输D、基团转位28.下列不属于主动运输特点的是( B )。
A、逆浓度B、不需载体C、需能量D、运输速度有饱和性29.下列哪项不是难养菌(C )。
A、类支原体B、类立克次氏体C、动物病毒D、寄生性真菌30.下列哪项说法是错误的( A )。
A、无机的氮源物质一般不为微生物提供能量,有机的氮源物质则提供能源。
B、生长因子主要是构成酶的辅基或辅酶,是某些酶的活性所必须的成份。
C、微生物可以通过水合作用与脱水作用控制由多亚基组成的结构如酶、微管、鞭毛与病毒等的装配与解离。
D、酵母菌最适生长的a w值比细菌最适a w值高,霉菌一般比其他微生物更耐干燥,生长的a w值通常在0.80左右。
31.下列哪种培养基不属于选择性培养基的是(D )。
A、Ashby无氮培养基B、Martin培养基C、酵母菌富集培养基D、高氏一号培养基32.下列哪种培养基属于鉴别培养基的是(A )。
A、EMB培养基B、Martin培养基C、Czapek培养基D、McClary培养基33.下列哪种微生物不属于化能无机营养型微生物的是( E )。
A、硝化细菌B、硫化细菌C、铁细菌D、氢细菌E、紫色非硫细菌34.下列培养基哪种不是是半合成培养基(D )。
A、豆芽汁培养基B、PDA培养基C、米曲汁培养基D、察氏培养基35.下列培养基哪种是合成培养基(D )。
A、LB培养基B、PDA培养基C、米曲汁培养基D、高氏一号培养基36.下列物质,哪一项是微生物通过基团移位进行运输的( D )。