下载文档原格式
猪肠膜蛋白与鸡肠膜蛋白的差异对比肠膜蛋白粉（Dried Porcine Solubles,DPS）是当下比较热门的一种新型动物蛋白质原料，因其富含小肽和游离氨基酸，具有易消化吸收、改善动物肠道健康、增强机体免疫力等特点，被广泛应用于多种动物及同种动物不同生发育阶段的饲料，尤其是在早期断奶仔猪饲料中可以部分或全部代替血浆蛋白粉（AP）、乳清粉和脱脂奶粉等较昂贵的动物蛋白原料，大大节约饲料成本（高欣等，2001）。
目前我们熟知的市场在售的肠膜蛋白粉产品有SDP50、DPS80、高利肽等。
一个蛋白产品的好坏可以从4个方面进行评价：1.产品营养成分和功能成分；2.产品的可消化吸收性；3.产品的稳定性；4.产品的生物安全性。
一、营养成分和功能成分的对比众所周知肠膜蛋白属于功能性蛋白，其主要功能均源于小肽。
然而小肽并不是原料赋予的，未经处理的鸡肠和猪肠不含任何小肽，小肽是生产工艺造就的，所以单从这点来看，肠膜蛋白的好坏与来源没有关系。
此外，氨基酸平衡性往往是蛋白原料最为关注的。
以1988年的生长猪氨基酸平衡模式NRC标准为参考，其中赖氨酸的需要量我们设定为100，其他氨基酸的数值均是其与赖氨酸的比值*100所得。
从下表中我们不难看出：动物蛋白氨基酸平衡性都不差，其中鱼粉、鸡肠膜蛋白、猪肠膜蛋白氨基酸组分都十分接近，氨基酸平衡性都很好。
而同样作为动物蛋白的血球蛋白和羽毛粉氨基酸平衡性却不好，这主要是因为血球蛋白主要为胶原蛋白，羽毛粉主要为角蛋白。
豆粕是公认的氨基酸平衡性最好的植物蛋白，从下表中也能看出端倪。
表1 不同原料氨基酸平衡性表由此可见，无论是从肠膜蛋白的主要功能成分小肽来考量，还是从蛋白原料最为关注的氨基酸平衡性来考量，肠膜蛋白的好坏与来源均无关系，其主要取决于后期加工工艺能否赋予原料更多的小肽。
二、产品的可消化吸收性对比在可消化吸收性方面，考察原料来源给肽产品带来的差异，其实没有太大的意义。
因为肽产品一定是经过酶解或者发酵等手段处理过的，这些手段的意义就在于改变原料的可消化吸收性，工艺对其影响程度远胜于原料本身带来的差异。
肠膜蛋白的研究现状猪肠膜蛋白（DPS）是一种新型功能营养性动物蛋白质原料，其来自猪肠膜的酶水解蛋白，是一种肽类饲料。
DPS粉的主要成分是猪肠黏膜水解蛋白，是利用猪小肠黏膜或萃取肝素过程的副产物，经过特定的酶处理，浓缩，再以黄豆皮或小麦麸皮为赋形剂，最后经高温灭菌干燥等过程制造而成。
近年来的研究发现，蛋白质经消化道酶促水解后主要以小肽的形式吸收，比完全游离氨基酸更易、更快被机体吸收利用，这是肽理论和实践的重大突破。
新的蛋白质营养理论提出，小肽（二、三肽）可以在动物消化道完整吸收，由于动物蛋白质营养理论的研究进展，肽类饲料的理论研究和开发利用成为近期的研究热点。
1 肠膜蛋白的特性DPS源于健康猪肠道上皮黏膜，不含任何其他源性蛋白，其可减少幼龄乳仔猪采食植物性或动物性异源大分子蛋白而出现的肠道免疫应激；DPS含有丰富的蛋白质及脂肪、纤维和磷、钙、钾等矿物质元素，还含有8种氨基酸。
并具有独特的促进乳猪胃肠系统成熟的功效，可加快乳猪增重，提高饲料报酬，减少乳猪发病率，并降低死亡率；DPS中含有丰富的小肽。
其生物利用率高，提高抗病性，增强免疫力，能有效防止乳仔猪细菌性下痢和降低断奶应激；DPS 中含绒毛膜促生长因子，可诱导小肠绒毛发育，增强膜刷状缘酶活性，对断奶引起的肠膜损伤有修复作用；DPS肠膜蛋白为浅黄色粉状，具有肉腥香味，可增加饲料的风味，含丰富味觉刺激肽，提高动物的采食量；猪肠膜蛋白的生产过程包含了持续高温及蛋白酶消化两大步骤，猪的主要致病原，如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒以及传染性胃肠炎病毒等，都在肽生产的过程被杀灭。
因此，DPS 应用于养猪生产中是安全的。
2 肠膜蛋白的研究现状早在20世纪90年代，美国爱荷华州立大学就开始研究猪小肠水解，且目前美国爱荷华州Nutra-flo 蛋白质生物制品公司是生产DPS 较早的公司，其产品普遍应用于美国、越南、中国等区域。
王春维等对比研究胰蛋白酶与木瓜蛋白酶对猪肠膜的水解效果，试验证明木瓜蛋白酶效果较好，因其在相同时间内水解产生的可溶性蛋白及小肽含量均高于胰蛋白酶。
肠膜蛋白粉肠膜蛋白粉（Dried Porcine Solubles,DIS）是以猪小肠为单一来源（防止交叉感染），经一系列蛋白酶长时间水解与特殊酶解处理，而后经高温灭菌和特殊条件下干燥等过程制造出来的新型动物蛋白质原料。
DPS含有大量的小肽和游离氨基酸（MeUor,2000），可应用于多种动物及同种动物不同生长发育阶段的饲料，尤其是在早期断奶仔猪饲料中可以部分或全部代替血浆蛋白粉（AP）、乳清粉和脱脂奶粉等较昂贵的动物蛋白原料，大大节约饲料成本（高欣等，2001）。
1 DPS的加工工艺及营养特性1.1 DPS的加工工艺DIS 是利用猪小肠黏膜萃取肝素过程的副产物，目前国内市场上的DIS 多为进口产品，其大致的生产工艺是将屠宰场收集的猪小肠及肠黏膜，用特定蛋白酶在62~74℃下处理5 h,浓缩，再与赋形剂充分混合，最后经107℃，15 min高温灭菌及干燥等工序加工制造而成。
加工工艺是影响DIS质量的重要因素。
王春维等（2005）在猪DIS 生产工艺的研究中指出，胰蛋白酶与木瓜蛋白酶对猪肠膜的水解效果相比，木瓜蛋白酶较好，因为其在相同时间内水解产生的可溶性蛋白及小肽含量均显著高于胰蛋白酶。
此外，木瓜蛋白酶价格低廉，酶解条件温和（最佳酶解条件为加酶量2% ,60℃ ,pH 6,水解7 h），生产出的DIS 主要指标达到或超过了进口产品DIS 50（美国伊阿华收稿日期2006-03-27州的Nutra-flo蛋白质制品公司生产）。
纯肠黏膜蛋白的吸湿性很强，易板结，因此DIS的主要成分除了肠膜蛋白水解物外，还含有一定量的赋形剂。
进口DIS 多用黄豆皮作防板结分散剂，但黄豆皮中有抗营养因子存在，影响DIS 的吸收利用。
因此，去除黄豆皮中的抗营养因子或选用新材料作赋形剂是DIS 加工工艺中需要进一步研究的问题。
1.2 DIS 的营养特性1.2.1 含有丰富的游离氨基酸和小肽小肠黏膜经过酶解处理后，肠黏膜蛋白被分解为小肽（二肽、三肽、多肽和苦肽）和游离氨基酸，水溶性好，且易于被动物利用。
肠膜蛋白粉的营养特性及在养猪业生产中的应用贾晓燕浙江大学饲料科学研究所程文虹浙江杭州汇能生物技术有限公司摘要肠膜蛋白粉是一种新型的动物蛋白源，它是猪小肠黏膜水解萃取肝素过程的副产物，含有大量的游离氨基酸和小肽。
关键词肠膜蛋白粉营养特性仔猪母猪中图分类号：$872 文献标识码：B 文章编号：1002—2813(2006)08—0039—03肠膜蛋白粉(Dried Porcine Solubles，DPS)是以猪小肠为单一来源(防止交叉感染)，经一系列蛋白酶长时间水解与特殊酶解处理，而后经高温灭菌和特殊条件下干燥等过程制造出来的新型动物蛋白质原料。
DIS含有大量的小肽和游离氨基酸(Mellor，2000)，可应用于多种动物及同种动物不同生长发育阶段的饲料，尤其是在早期断奶仔猪饲料中可以部分或全部代替血浆蛋白粉(AP)、乳清粉和脱脂奶粉等较昂贵的动物蛋白原料，大大节约饲料成本(高欣等，2001)。
1 DPS的加工工艺及营养特性1．1 DPS的加工工艺DPS是利用猪小肠黏膜萃取肝素过程的副产物，目前国内市场上的DPS多为进口产品，其大致的生产工艺是将屠宰场收集的猪小肠及肠黏膜，用特定蛋白酶在62～74℃下处理5 h，浓缩，再与赋形剂壳分混合，最后经107 oC，15 rain高温灭菌及干燥等工序加工制造而成。
加工工艺是影响DPS质量的重要因素。
王春摊等(2005)在猪DPS生产工艺的研究中指出，胰蛋白酶与木瓜蛋白酶对猪肠膜的水解效果相比，木瓜翟白酶较好，因为其在相同时间内水解产生的可溶牲蛋白及小肽含量均显著高于胰蛋白酶。
此外，木圾碌白酶价格低廉，酶解条件温和(最佳酶解条件为寝嚼羊?％，60~C，pH 6，水解7 h)，生产出的DPs主鞯达到或超过了进口产品DPS 50(美国伊阿华“ka-k 州的Nutra—flo蛋白质制品公司生产)。
纯肠黏膜蛋白的吸湿性很强，易板结，因此DPS 的主要成分除了肠膜蛋白水解物外，还含有一定量的赋形剂。
肠膜蛋白粉产品特性：采用猪小肠组织作为原料，经过生物酶水解、附着和烘干制成。
是一种新型的动物源性饲料蛋白质，富含短链肽和平衡的氨基酸；增强动物特别是幼小动物的生产性能和健康水平；以短链肽形式存在的氨基酸和自由氨基酸具有较高的生物活性。
在饲料中使用肠膜蛋白粉可以促成动物生长，保障健康，带来更好的经济效益。
高含量的蛋白质多以短链肽的形式存在，为生长动物提供极宜消化利用的蛋白质，特别适用于高档幼畜饲料的配制。
促进动物肠道健康发育；能够经济有效地替代幼小动物饲料里的高档鱼粉、血浆蛋白粉等昂贵的饲料蛋白质原料，并获得更高的生产性能；鱼粉生产的卫生安全程度常常没有保证，鱼粉的质量变化很大，不同产地、不同批次都会有差异；另外，鱼粉价格的大起大落，也使在幼小动物饲料中常规使用鱼粉增加了许多困难。
多美蛋白粉所含的水解短链肽能够促进动物的肠道健康及早日发育成熟，并可获得更高的生产性能；降低了使用其它昂贵蛋白原料（如血浆蛋白粉等）的可行性；有效地降低饲料成本，提高市场竞争力，在激烈的市场竞争中赚的更多的利润；流动性好，易于和其它饲料原料混合均匀。
成分：粗蛋白≥48.00%、粗纤维≤5.00%、粗脂肪≤2.00%、灰分≤18.00%、钙0.42%、磷0.49% 、钾1.88% 、钠5.67%、猪代谢能3.65Mcal/kg、猪消化能3.95Mcal/kg。
氨基酸组成：赖氨酸3.50%、蛋氨酸0.70%、胱氨酸0.77%、苏氨酸2.22%、色氨酸0.44%、精氨酸3.20%、组氨酸1.30%、亮氨酸3.81、异亮氨酸1.95%、苯丙氨酸2.32%、颉氨酸2.52%。
用法、用量及储存：仔猪或其它动物的全价饲料中添加，推荐用量25-50公斤/吨，或依实际情况作适当增减；存放于阴凉、干燥、通风处、注意避光、防潮、防霉、防鼠、开封后尽快使用完。
肠膜蛋白粉是采集健康猪小肠的肠粘膜在萃取肝素纳产品后，用蛋白酶在62～74℃下处理5小时，浓缩后经107℃高温喷雾干燥而成的。
肠屏障相关紧密连接蛋白免疫荧光全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：肠道是人体最重要的消化器官之一，同时也是人体内免疫细胞最为密集的器官之一。
肠道黏膜作为免疫屏障，不仅需要有效防止有害微生物通过，而且还需要保持足够的通透性以促进养分吸收。
在肠道黏膜细胞间的连接中，肠屏障相关紧密连接蛋白起着至关重要的作用。
肠屏障相关紧密连接蛋白是一类重要的跨膜蛋白，主要分布在肠道上皮细胞的细胞间连接处，负责维持细胞之间的紧密连接，防止有害微生物、毒素等物质通过肠道黏膜。
ZO-1、claudin和occludin是肠屏障相关紧密连接蛋白中最为重要的代表性蛋白。
ZO-1是一种与胞浆蛋白骨架相连的紧密连接蛋白，在肠道上皮细胞间的连接中起着至关重要的作用。
研究表明，当ZO-1的表达量降低或发生异常，会导致肠道屏障功能受损，促进有害微生物的穿透，进而引发肠道炎症和疾病。
ZO-1在维持肠道屏障功能和调控肠道免疫反应中具有重要作用。
claudin和occludin是另外两种与ZO-1密切相关的肠屏障相关紧密连接蛋白。
它们分别位于细胞间连接的不同位置，共同构成了肠道上皮细胞之间的紧密连接。
研究表明，claudin和occludin的表达水平与肠道屏障的通透性密切相关，过高或过低的表达都会影响肠道屏障的功能，导致肠道疾病的发生。
为了研究肠屏障相关紧密连接蛋白在肠道屏障功能中的具体作用，科学家们开发了肠屏障相关紧密连接蛋白免疫荧光技术。
这种技术利用特异性的抗体标记肠屏障相关紧密连接蛋白，在显微镜下观察和分析其在肠道上皮细胞中的分布和表达水平。
通过肠屏障相关紧密连接蛋白免疫荧光技术，科学家们可以深入了解肠道上皮细胞之间的连接状态，探究肠道屏障功能的变化与疾病的关联性。
除了作为科研工具，肠屏障相关紧密连接蛋白免疫荧光技术也在临床诊断和治疗中发挥着重要作用。
通过检测肠屏障相关紧密连接蛋白在患者肠道黏膜中的表达水平，医生可以及时发现肠道屏障功能的异常，指导治疗方案的选择和调整。
TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白摘要】目的：建立一种快速方便提取大肠杆菌膜蛋白的方法。
方法：收集临床分离的大肠杆菌，利用TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白，Bradford法测定蛋白浓度，运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）进行质谱分析，采用CiphergenProteinchip软件采集数据。
重复测定20次大肠杆菌的混合标本，评价TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白的重复性。
结果：TritonX-114去污剂法成功提取出了大肠杆菌膜蛋白。
重复测定20次大肠杆菌的混合标本，蛋白峰的分子量变异系数均小于0.05%。
结论：TritonX-114去污剂法可以快速方便的提取大肠杆菌膜蛋白，并具有很好的重复性，这不仅对大肠杆菌耐药机制和治疗方法的研究起着重要作用，也为膜蛋白的快速提取提供了新的思路。
【关键词】大肠杆菌；膜蛋白；TritonX-114；表面增强激光解析电离飞行时间质谱【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）12-0059-03MEMBRANE PROTEINS OF ESCHERICHIA COLI WERE EXTRACTED BY USING TRITON- X-114 Wang Qin, Xu Jian, LIiu Chenggui.Clinical Laboratory of Chengdu Women and Children Center Hospital, Chengdu, Sichuan, 610091, China【Abstract】Objective To establish a rapid and convenient extracted method of membrane proteins from Escherichia coli. Methods The clinical isolates of E. coli were collected, membrane proteins of E. coli were extracted by using Triton X-114 detergent, and protein concentrations were detected by Bradford method. The membrane proteins of E. coli were analyzed by surface enhanced laser desorption /ionizationtime-of-flight mass spectrometry (SELDI-TOF- MS), and the data was collected by Ciphergen Proteinchip software. The mixed proteins of E. coli were measured for twenty times to evaluate the repeatability. Results The membrane proteins of E. coli were successfully extracted by using Triton X-114 detergent. The mixed samples of E. coli were measured for twenty times, and the results showed that the CV of protein in molecular weight was less than 0.05%. Conclusion The membrane protein of E. coli can be extracted quickly and easily by using Triton X-114 detergent. This method has good repeatability, which provides a new idea for the extraction of membrane protein, this study not only make an important role in the research of E. coli resistance mechanisms and treatment, but also is beneficial to the further study of membrane proteomics.【Key words】Escherichia coli; Membrane protein; Triton X-114; SELDI-TOF- MS 大肠杆菌(E.coli)是引起临床感染最常见的革兰阴性杆菌，该菌易产生超广谱B-内酰胺酶（ESBL），从而导致对第三代头孢菌素耐药，甚至引起严重的院内感染暴发[1]。
肠膜蛋白
（贝倍壮）
产
品
技
术
资
料
农业部饲料工业中心北京中科景明生物技术有限公司
肠膜蛋白（贝倍壮）
目录
一、产品简介-------------------------------------------------2
二、产品成分-------------------------------------------------3
三、产品工艺流程-------------------------------------------4
四、产品特点-------------------------------------------------5
五、产品安全性----------------------------------------------6
六、试验报告--------------------------------------------------7
七、使用方法--------------------------------------------------11
八、注意事项-------------------------------------------------11
产品简介
肠膜蛋白是由农业部饲料工业中心利用“948”项目开发的新型生物蛋白饲料，生产肠膜蛋白的设备、技术、工艺、质量控制完全按美国标准进行，并且在喷雾干燥和后加工工艺上进行了改进，本产品完全溶于水，提高了产品的适口性、稳定性和安全性。
贝倍壮为猪小肠黏膜经多种蛋白酶酶解的产物，同时加入苦肽分解酶，提高适口性，用膜分离技术清除大部分的粗灰分，然后喷雾干燥而成。
通过该工艺加工的肠膜蛋白粉，除含有丰富的氨基酸外，还含有大量的小肽类蛋白和未知生长因子（UGF），非常易于小猪消化吸收，是幼畜专用的水溶性功能蛋白源。
产品成分
一、成分组成：肠膜蛋白
二、主要成分：
粗蛋白≥50.0% 粗脂肪≤3.0%
粗灰粉≤18.0% 水份≤10.0%
粗纤维≤3.0% 消化能≥16.5MJ/kg
钙0.5~2.0% 磷0.2~1.0%
赖氨酸≥3.2%
三、主要氨基酸组成：
精氨酸-------------3.26% 赖氨酸---------------3.2%
蛋氨酸-------------1.0% 色氨酸---------------0.20%
苏氨酸-------------2.0% 亮氨酸---------------3.65%
异亮氨酸------------1.94% 缬氨酸-------------1.20%
组氨酸---------------0.90% 苯丙氨酸----------2.15%
谷氨酸--------------5.85%
产品工艺流程
生化制药的基本物质主要是氨基酸、肽、蛋白质、酶与辅酶、多糖、脂类、核酸及其降解产物，肠膜蛋白就是用肠膜生产多糖类药物---肝素的产物。
工艺如下：
一、第一次酶解：
将猪肠粘膜和分解酶、催化剂混合，在PH=10，温度=60℃酶
解，使肠粘膜成液状，从液体中分离出多糖类药物---肝素。
二、二次酶解：
将剩余滤液、滤渣进行二次酶解，使肠黏膜蛋白98%以寡肽
形式存在，此时的肠黏膜蛋白被酶解为小肽（二肽、三肽、多
肽、苦肽）和游离氨基酸，可完全溶于水，极易被幼畜吸收利
用。
三、三次酶解：
由于肠黏膜二次酶解液中含有苦肽，我们在总结国外产品的基
础上，改进工艺，进行第三次酶解。
在二次酶解液中加入苦肽
分解酶，使苦肽分解，去掉苦味。
这也是贝倍壮在幼畜上使用
适口性优于进口肠膜蛋白的主要原因。
四、超临界流体萃取灰份：
在肠黏膜酶解液中加入一种特殊溶剂，在超临界温度和压力
下，大部分粗灰分和粗脂肪会溶解于该溶剂，使肠黏膜中的粗
灰份从28%降到18%以下。
五、改变肠黏膜蛋白的吸湿性：
纯肠黏膜蛋白的吸湿性很强，易板结，进口肠膜蛋白多用大豆
皮作防板结分散剂，但大豆皮中有大量的抗营养因子存在，影
响肠膜蛋白的吸收利用。
我们为此在载体选择上做了大量试
验，最后选择水溶性膳食纤维作肠膜蛋白的载体。
水溶性膳食
纤维的优点：（1）促进幼畜肠道有益菌群的繁殖。
（2）不含抗
营养因子。
（3）促进肠蠕动，帮助消化。
（4）流散性好，不具
有吸湿性。
六、干燥、灭菌：
产品经过多道工序后，此时的产品干物质含量在35—45%，使用离心喷雾干燥机，通入180---195℃的热空气，使雾状肠黏膜蛋白和热空气充分接触，即杀灭病菌，又快速干燥。
产品特点
一、贝倍壮为高含量肠膜蛋白，纯度高达95%。
二、贝倍壮肠膜蛋白90%以寡肽形式存在，可完全溶于水。
三、产品为浅黄粉状，具特殊腥味、粘弹性和水中稳定性。
四、流散性好，易于混合。
五、味道纯正，无苦涩味，适口性及诱食性极佳。
六、母猪饲料添加，乳猪出生重可提高100—300克，仔猪的断奶重
可增加10—20%。
产品功能
一、缓解仔猪断奶应激，减少断奶失重，降低腹泻，促进生长发育。
二、含丰富游离氨基酸和大量小肽（二肽、三肽）、寡肽，易被幼畜
吸收。
三、含丰富诱食肽（Feed Attractant Peptides），提高饲料适口性和
仔猪采食量。
四、含丰富免疫调节肽（Immunomodulator Peptides）提高乳猪免疫
力和抗病能力。
五、含丰富肠膜素，对断奶引起的肠道损伤，有修复作用。
六、激活消化道脂肪酶和胰淀粉酶的活性，提高仔猪对营养物质的消
化吸收。
产品安全性
农业部饲料工业中心对贝倍壮的安全性已做过数次的试验及实验室的分析，对已上市的产品追踪分析，没有发现任何问题，本产品是安全的！
(1) 产品出厂检验：样品在农业部兽医诊断中心的检测结果;
(2) 样品存放试验：将贝倍壮在实验室存放90天后，进行实验室检验，细菌数如下：
(3) 在贝倍壮样品上人工接种沙门氏菌，然后测定其繁殖情况。
取20克贝倍壮接种3种不同菌株沙门氏菌，在当天及7天后测细菌数。
试验报告
一、贝倍壮与乳清粉的对比试验
时间：2003年9月地点：中国农大试验场
试验负责人：胥学新副研究员
料肉比
从第三周起5%贝倍壮组比乳清粉组，在日增重、采食量、饲料效率方面
均有明显改善。
二、贝倍壮与血浆蛋白粉及其并用的对比试验
时间：2004年1月地点：河北昊友种猪场
试验负责人：马永喜博士
结果：
日采食量（kg）
料肉比
在统计5周的试验后可以看出，所有饲喂贝倍壮的猪在日增重、日采食量方面，均有明显的改善。
使用方法：
1、仔猪前期（体重小于10公斤），每吨饲料添加20--50公斤。
2、仔猪前期（体重10--30公斤），每吨饲料添加20--30公斤。
3、怀孕母猪及哺乳母猪，每吨饲料添加15--30公斤。
4、虾、蟹饲料使用，每吨饲料添加50公斤。
注意事项：
1、乳仔猪使用本品，饲料中不需另加食盐。
2、本品保存在阴凉、干燥、通风处。
3、本品保质期为12个月。
