水杨酸钠血浆半衰期的测定

川北医学院讲稿水杨酸钠半衰期（t1/2）的测定【实验前预习】药物代谢动力学。

【实验目的】用比色法测定水杨酸钠的血药浓度并计算半衰期。

【实验原理】药物血浆半衰期（或称消除半衰期，elimination half-life time，t）1/2是指血浆药物浓度下降一半所需的时间。

绝大多数药物是按一级动力学的规律消除，其血浆半衰期的数值是固定的。

水杨酸钠在酸性条件下与三氯化铁反应生成一种紫色络合物。

该络合物在波长510nm下比色，其光密度与水杨酸浓度成正比。

利用比色法测定药物在血中两个以上浓度值，即可求得药物的血浆半衰期。

【实验器材与药品】V1100分光光度计，离心机，10m1试管，试管架，5ml注射器及针头，吸耳球，计算器，10%水杨酸钠溶液，10%三氯醋酸溶液，10%三氯化铁溶液，0.1%肝素(heparin)溶液，蒸馏水。

【实验对象】家兔。

【实验方法与步骤】1．取离心管3支，分别标记为A、B、C，各加入10%三氯醋酸7ml。

2．取家兔1只，称重后由心脏(或颈动脉、耳缘静脉)取血2ml，置A管中(注射器内壁用0.5%肝素生理盐水溶液润湿)。

3．由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠2 ml/kg，并记录注射完毕的时间。

4．给药后10min和40min，先后自心脏取血2 ml，分别置入离心管B及C 中,记录取血的准确时间。

5．将3支离心管摇匀，以2000转/min的转速离心5 min。

准确吸取离心后的上清液各6 ml分别置入编号的试管中，每管加10%三氯化铁溶液0.5 ml，摇匀，显色。

6．以A管为对照，用V1100分光光度计在510nm波长处分别测定B管和C管的光密度值D1和D2，测定方法如下：1.接通V1100分光光度计电源，打开检测室盖板，调整波长为510mm；2.合盖→拉滑杆3.将黑体放入光路中→按MODE键到T档→按0%T键校零；4.将A管对准光路→按MODE键到A档→按100%T键调零；5.将B、C管依次对准光路→测出D1和D2值7．根据K＝CD将测得的D1和D2代入下面的公式计算水杨酸钠的血浆半衰期。

《生理药理学》实验指导课程编号：0741535048实验一水杨酸钠血浆半衰期的测定一、实验目的了解分光光度法测定水杨酸钠的血药浓度和计算半衰期的方法。

二、实验内容家兔静脉采血、静脉注射、离心、光电比色等。

三、实验要求集中授课形式。

四、实验准备预习药物代谢动力学，药动学参数的概念、意义、计算方法等理论知识。

五、实验原理、方法和手段在酸性条件下，水杨酸钠解离为水杨酸，后者与三氯化铁生成一种紫色络合物，该络合物在520nm波长处，其光密度与水杨酸的浓度成正比。

采用光电比色法，计算血药浓度，进一步计算药物的半衰期。

六、实验条件1. 动物家兔，2～3kg，雌雄均可。

2. 药品10% 及0.02% 水杨酸钠（sodium salicylic），10% 三氯化铁，10% 三氯醋酸（trichloroacetic acid），0.5% 肝素（heparin），蒸馏水。

3. 器材试管架、试管、离心管、吸管（10mL、2mL、1mL 0.5mL）、注射器（2mL、5mL）、针头、吸耳球、分光光度计、离心机、计算器等。

七、实验步骤1、取4支离心试管，编号后各加入10% 三氯醋酸5mL。

2、取家兔一只，称体重，使其耳部充血后，用经0.5% 肝素湿润过的注射器由耳缘静脉缓慢抽血2.5mL，分别置于1号管和2号管内各1 mL，余血弃掉，将试管摇匀静置。

3、由耳缘静脉缓慢注射10% 水杨酸钠1.5 mL/kg，（150mg/kg），给药后5min 和35min，各采血1mL，分别置于3号管和4号管内，摇匀静置。

4、1，3，4号管内各加入蒸馏水1mL ，2号管内加入0.02%水杨酸钠1mL。

摇匀。

5、将4支离心管置于离心机内，以1500～3000rpm，离心5min，使血浆蛋白沉淀。

6、另取相应编号的试管4支，将离心后的上清液倒入相应编号的试管中，从中准确吸取3mL 分别置入相应编号的另外4支试管中，每管再加入10% 三氯化铁溶液0.5mL，摇匀显色。

【精品】水杨酸钠半衰期的测定水杨酸钠是一种常用的药物，广泛应用于治疗炎症和疼痛等疾病。

了解其药代动力学参数对于对药物的合理使用非常必要，而药物的半衰期是其中一个比较重要的指标。

本研究旨在测定水杨酸钠在人体内的半衰期，并探讨其影响因素。

一、实验方法1、药物注射将水杨酸钠溶解在10毫升的生理盐水中，注入人体体内。

2、血液采集在药物注射后，每隔一定时间采集被测者的血液样本，同时记录每次的时间。

3、样本处理采集的血液样本在室温下放置一定时间，离心去除血细胞，再将血样转移到新离心管中，冰箱中保存以用于后续分析。

4、分析测定采用高效液相色谱法（HPLC）对血样中的水杨酸钠含量进行分析。

同时，将测得的水杨酸钠含量值与采集样本时间进行对比，绘制药物浓度-时间曲线。

5、半衰期计算根据药物浓度-时间曲线，计算药物的半衰期，公式为T1/2=0.693/K。

其中，K为药物消除速率常数。

二、实验结果1、药物浓度-时间曲线根据实验测定到的数据，得到水杨酸钠的药物浓度-时间曲线如下图：（图片）2、药物的半衰期三、实验分析从实验结果可以得出，水杨酸钠在人体内的半衰期为3.5小时。

这说明，水杨酸钠在人体内的代谢速度较快，需要在相对短的时间内进行频繁的使用才能维持药物浓度的稳定。

此外，半衰期的长短受到许多因素的影响，如体内药物代谢酶的活性、肝功能状态等。

因此，需要将半衰期测定结果与个体情况结合考虑，制定合理的用药方案。

根据本实验结果，得出以下结论：1、水杨酸钠在人体内的半衰期为3.5小时。

2、个体差异和一些因素可能影响药物的半衰期，需要在用药时进行综合考虑。

实验九水杨酸钠的血浆半衰期（t1/2）的测定
【目的】用分光光度计测定水杨酸钠的血浓度及计算半衰期。

【原理】标准含量推算法。

用标准管内水杨酸钠浓度y与光密度x，求比值k=y/x。

再根据k=y/x由x1和x2，求得y1和y2，进行半衰期的计算。

=0.301t/(logy1- logy2)
t
y2
利用比色法测定药物在血中两个以上的浓度值，可求得药物的血浆半衰期。

【材料】
1、动物：家兔；
2、器材：移液管，注射器，镊子
3、药品：10%三氯乙酸、0.5%肝素、10%水杨酸钠、0.02%水杨酸钠、10%三氯化铁。

【方法】
1、取离心管3支，分别标记A、B、C，各加入10%三氯乙酸3.5毫升
2、取家兔1只，称重后由耳缘静脉取血1毫升置于A管内
3、由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，并记录注射完毕时间
4、给药后5分钟以及间隔25分钟，先后由耳缘静脉取血1毫升分别置于B、C管内，记录取血的准确时间t0以及t1。

5、将三只离心管摇匀，以2000转/分钟的转速离心5分钟，取上清液加10%三氯化铁0.3毫升，摇匀，显色。

6、以给药前管为对照，用750型分光光度计510波长测定x1和x2
7、配标准管：0.02%水杨酸钠： 2毫升 + 三氯化铁0.6毫升
空白管：蒸馏水2毫升 + 三氯化铁0.6毫升【结果】用750型分光光度计测定结果，计算水杨酸钠的半衰期
【注意事项】
1、剂量要准确，时间掌握好；
2、给药后应保持室内安静，避免刺激实验动物。

药代动力学参数测定水杨酸钠血浆半衰期的测定 【目的和原理】掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度,并学会用公式计算半衰期。

水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。

该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。

反应式为：OH CO O H【实验对象】【实验器材和药品】 722分光光度计、离心机、50ml 烧杯、effendorff 管、加样器（1000μl）、试管、试管架、记号笔、兔手术台、手术器械一套、动脉插管、注射器（2ml、5ml、10ml）、BL-410生物机能实验系统。

10%水杨酸钠，0.02%水杨酸钠标准液，10%三氯醋酸，10%三氯化铁，0.3%肝素生理盐水，1%普鲁卡因等。

【实验步骤和观察项目】1. 取兔一只，称重，然后将其固定在兔手术台上。

2. 颈总动脉插管：用1%普鲁卡因在颈部正中局麻后，在气管上方将皮肤剪一纵向开口，用止血钳钝性分离皮下筋膜及肌肉组织，将气管暴露，在气管旁边可见较粗大的颈总动脉，将其与周围的组织分离，然后将充满肝素生理盐水的动脉插管插入，固定确切。

由颈总动脉缓慢给入0.2%肝素生理盐水，1ml/kg，防止凝血。

3. 取试管5只编号，各管中加入10%三氯醋酸3.5ml。

4. 由颈总动脉放血2ml，分别放入1号管（对照管）和2号管（标准管）内各1.0ml,摇匀静置。

5. 由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠，2ml/kg，给药后开始计时。

6. 给药后10min、25min、40min，先后取血1ml，分别置于3 、4、5号试管内，摇匀静置。

7. 以0.02%水杨酸钠标准液1ml 放入2号管内，其余各管加入蒸馏水1ml，摇匀。

8. 将5支试管离心5分钟（2000转/分），精确吸取上清液3.0ml，分别放入另一编号的试管中，每管加10%三氯化铁0.5ml，摇匀显色。