饲料中的氨基酸分析检测方法包

蛋白质营养价值评定体系一、非反刍动物饲料中蛋白质营养价值评定方法（一）粗蛋白质CPCP反映饲料或饲粮含氮物质的总量，是饲料营养价值评定和配合饲粮的基础指标。

测定方法简单，应用广泛。

（二）可消化粗蛋白质DCP饲料中蛋白质能够被消化吸收的部分，是饲料总蛋白质减去粪中排出的部分。

即饲料粗蛋白质含量乘以消化率。

饲料可消化蛋白质含量是表达蛋白质质量的指标之一。

（三）蛋白质的生物学价值BV表观生物学价值（ABV）指动物沉积氮与吸收氮之比。

食入氮-(粪氮+尿氮)ABV ＝──────────×100% 食入氮-粪氮真生物学价值(TBV）在ABV基础上从粪氮中扣除内源的代谢粪氮(MFN)，从尿氮中扣除内源尿氮(EUN)。

食入氮-(粪氮-MFN)-(尿氮-EUN)TBV ＝──────────────×100% 食入氮-(粪氮-MFN)BV反映了蛋白质消化率和可消化蛋白质的平衡。

BV高，说明饲料中蛋白质可消化氨基酸组成与动物需要更接近。

（四）净蛋白利用率（NPU）指动物体沉积的氮与食入的氮的比。

沉积氮 食入氮-(粪氮+尿氮)NPU ＝─────×100％＝──────────×100％ 食入氮 食入氮也可以应用BV×氮的消化率。

净蛋白利用率是饲料蛋白质营养价值的综合评定指标，既反映了饲料蛋白质的消化性，也反映了消化产物中氨基酸组成的平衡状况。

（五）蛋白质效率比PER蛋白质效率比是动物体增重与食入蛋白质或氮的比例。

体增重（g)PER ＝────────── 蛋白质或氮的食入量(g)蛋白质效率比也是饲料蛋白质营养价值的综合评定指标，与净蛋白利用率相比，用体增重代替了蛋白质或氮的沉积量，更为简单、直观。

蛋白质的生物学价值、净蛋白利用率、蛋白质效率比、化学比分和必需氨基酸指数缺陷：都不具有可加性，反映的是单一饲料的营养价值，不能预测几种饲料配合使用时氨基酸互补效果，从饲粮原料的营养价值也不能推测出饲粮的营养价值。

文章编号:1004-7964(2004)03-0039-05收稿日期:2003-11-05基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)经费资助,课题编号:2001AA647020四川大学青年基金,课题编号:H2002[9-057]第一作者简介:戴红,女,1966年出生,副教授。

主要研究方向:分析检验。

氨基酸分析的检测方法评述戴红,张宗才,张新申(皮革化学与工程教育部重点实验室(四川大学),四川成都610065)摘　要:对氨基酸分析常用的化学方法、电化学方法、分光光度法(包括可见光分光光度法,紫外光分光光度法和荧光分光光度法)等检测方法进行综述,以期为提高氨基酸分析的灵敏度、准确性,为快速、高效的氨基酸分析方法的建立提供参考。

关键词:氨基酸;检测;分析中图分类号:Q517;Q503 文献标识码:ADetermination M ethods of Amino A cids A nalysisDA I Hong ,ZHA N G Zong 2cai ,ZHA N G Xi n 2shen (Key L aboratory of L eather Chemist ry and Engi neeri ng(S ichuan U niversity ),M i nist ry of Education ,Chengdu 610065,Chi na )Abstract :Determination methods for amino acids ,including chemistry determination ,elec 2tric 2chemistry determination ,spectrophotometer determination and conductivity detection method were reviewed for the sake of improving the analysis sensitivity and accuracy.The paper aimed at providing useful reference to building a fast and effective amino acids aualytic methods.K ey w ords :amino acid ;analysis ;determination 氨基酸是蛋白质的基本结构单位和生物代谢过程中的重要物质,氨基酸分析技术对蛋白质化学、生物化学和整个生命科学研究以及产品开发、质量控制和生产管理等具有重要意义,广泛地应用于化工、轻工、食品加工、医药卫生行业的医药、食品、保健品等的分析,并且用于皮革化学鞣革机理的研究中[1,2,3]。

饲料氨基酸检测标准饲料氨基酸检测主要依据GB/T 18246-2000 《饲料中氨基酸的测定》这一标准。

该标准规定了配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、单一饲料、预混料等饲料中氨基酸总量或者游离氨基酸的检测评定方法。

在氨基酸检测方法方面，主要有酸水解法、碱水解法、酸提取法三种。

其中酸水解法又分为常规水解法和氧化水解法两种。

常规水解法适用于检测除含硫氨基酸（如胱氨酸、蛋氨酸等）以外的蛋白水解氨基酸，而氧化水解法则适用于检测除酪氨酸以外的蛋白水解氨基酸。

碱水解法只适用于检测色氨酸。

对于游离氨基酸、赖氨酸、蛋氨酸含量的检测，可以使用酸提取法。

随着技术的发展，反相液相色谱法逐渐成为氨基酸检测的常用手段。

这种方法具有操作简便、准确度高、重现性好等优点，可以同时测定多种氨基酸的含量。

在进行饲料氨基酸检测时，还需要注意以下几点：1.样品处理：样品的收集和制备过程要保证不破坏氨基酸的结构，避免污染和变质。

同时，样品制备后要进行及时检测，避免长时间保存导致氨基酸发生变化。

2.仪器设备：氨基酸检测需要使用专业的仪器设备，如氨基酸自动分析仪、液相色谱仪等。

这些设备需要定期进行校准和维护，确保检测结果的准确性。

3.实验条件：实验条件如温度、湿度、压力等要严格控制，避免影响检测结果。

同时，实验过程中要保证无菌操作，避免污染样品。

4.人员操作：操作人员的技能和经验对检测结果也有影响。

因此，操作人员需要经过专业培训，掌握正确的操作方法和注意事项。

5.数据处理：检测数据要进行正确处理和分析，包括数据的记录、统计、计算等。

数据处理要遵循科学方法和程序，确保结果的准确性和可重复性。

发酵饲料原料氨基酸测定方法发酵饲料是一种常见的饲料形式，通过微生物的发酵作用，可以将一些廉价的原料转化为高质量的饲料。

而饲料中的氨基酸是动物生理功能的基本组成部分，也是评价饲料质量的重要指标之一。

因此，准确测定发酵饲料中氨基酸的含量对于饲料生产具有重要意义。

常用的发酵饲料原料氨基酸测定方法主要有以下几种：一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常用的氨基酸测定方法。

该方法通过将样品溶解并进行适当的预处理后，将氨基酸分离并通过色谱柱进行定量分析。

这种方法具有准确度高、灵敏度高、分析速度快等优点，被广泛应用于发酵饲料中氨基酸的测定。

二、气相色谱法（GC）气相色谱法是另一种常用的氨基酸测定方法。

该方法将样品中的氨基酸通过酸水解等预处理方法转化为气体化合物，然后通过气相色谱仪进行分离和定量分析。

这种方法具有分离效果好、分析速度快等优点，但对于一些热稳定性较差的氨基酸，需要进行适当的保护处理。

三、生化分析法生化分析法是一种传统的氨基酸测定方法，主要通过酶促反应将样品中的氨基酸转化为其他化合物，并通过光度计等仪器进行测定。

这种方法操作简便，灵敏度较高，但对于一些特殊的氨基酸，可能存在反应不完全的情况，影响测定结果的准确性。

以上三种方法在发酵饲料中氨基酸测定中都有其独特的优势和适用范围。

在选择合适的方法时，需要考虑样品的特性、测定的准确度要求、设备的可用性等因素。

此外，为了提高测定结果的准确性，还需要注意样品的采集和保存，避免外界污染和氨基酸的降解。

总结起来，发酵饲料原料氨基酸测定方法包括高效液相色谱法、气相色谱法和生化分析法等。

选择合适的方法可以准确测定发酵饲料中氨基酸的含量，为饲料生产提供科学依据，提高饲料的质量和营养价值。

同时，为了保证测定结果的准确性，还需要注意样品的采集和保存等实验细节。

综上所述，发酵饲料原料氨基酸测定方法对于饲料生产具有重要意义。

氨基酸分析原理与方法氨基酸是构成蛋白质的基本组成单位，它们的结构包含一个氨基基团（NH2）、一个羧基（COOH）以及一个特定的侧链基团（R）。

氨基酸分析的原理是通过特定的化学反应将氨基酸转化为可检测的化合物，然后利用不同的方法进行测定。

样品的预处理是为了去除样品中可能存在的干扰物质，例如油脂、无机盐以及非氨基酸的有机物。

常用的方法包括浸提、溶解、离心沉淀等。

蛋白质的水解是将蛋白质分解为氨基酸的过程。

水解反应一般使用强酸、强碱或酶类催化剂来进行。

其中，酶法水解是一种常用的方法，特点是反应条件温和，水解效率高。

氨基酸的衍生反应是将氨基酸中的羧基或氨基基团转化为可以检测的化合物。

常用的方法有酸衍生、碱衍生、甲酰化、丙酰化等。

例如，酰化反应可以将氨基酸中的氨基基团转化为酰基氨基酸，它在紫外光下有特征的吸收峰，便于测定。

衍生物的分离和定量测定是通过分析仪器进行的。

常用的方法包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）、毛细管电泳（CE）等。

其中，HPLC是最常用的方法，它可以根据不同的分离柱和检测器选择，实现对氨基酸的定量测定。

1.离子交换色谱法：利用离子交换树脂将氨基酸与其他离子区分开，然后通过温度梯度或者梯度洗脱的方法进行分离和定量。

2.薄层色谱法：将衍生后的氨基酸样品沿着特定的固定相（通常是硅胶或者聚脱氢乙烯等）的薄层上进行分离。

然后通过显色剂的染色或者紫外检测器检测颜色变化或吸收峰进行定量。

3.毛细管电泳法：利用毛细管内的电泳作用将氨基酸分离。

根据不同氨基酸的电荷、大小、疏水性等理化性质的差异，通过改变电流、电压、电泳缓冲液的pH值和离子强度等条件，实现氨基酸的分离和定量。

4.气相色谱法：首先将氨基酸进行酯化反应，然后通过气相色谱进行分离和定量。

气相色谱法具有高分辨率、灵敏度高等特点，适用于分析含有少量氨基酸的样品。

综上所述，氨基酸分析是通过将氨基酸转化为可检测的化合物，然后利用不同的方法进行分离和定量的过程。

饲料中游离氨基酸的检测方法
一、样品制备
1.采集样品：选择有代表性的饲料样品，用干净、干燥的容器采集，避免污染和变质。

2.粉碎样品：将采集的样品进行粉碎，使氨基酸分布更均匀。

3.称取样品：按照实验室规范，精确称取一定量的样品用于后续实验。

二、衍生化处理
1.确定衍生化试剂：根据待测氨基酸的化学性质和仪器检测需求，选择合适的衍生化试剂。

2.衍生化反应条件：确定衍生化反应的温度、时间、pH值等条件，确保反应完全、稳定。

3.衍生化产物纯化：对衍生化产物进行纯化，去除杂质，提高检测的准确性。

三、分离纯化
1.选择色谱柱：根据氨基酸的性质和分离要求，选择合适的色谱柱。

2.确定色谱条件：调整流动相的组成、pH值、流速等条件，达到最佳的分离效果。

3.检测器选择：根据需要选择合适的检测器，如紫外检测器、荧光检测器等。

4.分离纯化过程：将样品溶液进行分离纯化，得到纯化的氨基酸
溶液。

四、检测分析
1.仪器准备：根据选择的检测器类型，准备好相应的仪器设备。

2.进样分析：将纯化的氨基酸溶液进行进样分析，记录色谱图和峰信息。

3.数据处理：对色谱数据进行处理，计算各氨基酸的含量和相关参数。

4.结果分析：根据计算结果，对饲料中游离氨基酸的含量和分布进行分析。

以上是饲料中游离氨基酸的检测方法，包括样品制备、衍生化处理、分离纯化和检测分析等方面。

根据实际需求和实验室条件，可以选择合适的实验方法和仪器设备进行检测和分析。

饲料中游离氨基酸的检测方法
饲料中游离氨基酸的检测方法主要包括以下几种：
1. 比色法：利用氨基酸与重金属离子或某些化学试剂形成特定颜色的配合物，通过比色反应来定量测定游离氨基酸的含量。

2. 色谱法：常用的色谱方法包括气相色谱（GC）和高效液相色谱（HPLC）。

色谱法可以对多种氨基酸进行分离和定量，具有准确、灵敏、高效的特点。

3. 生物传感器法：利用生物传感器对游离氨基酸进行检测。

常用的生物传感器包括酶传感器、抗体传感器和细胞传感器等，这些传感器具有高灵敏度和高选择性。

4. 光谱法：包括紫外光谱、红外光谱和质谱等分析方法，可以利用氨基酸的特征吸收峰或质谱图谱进行定量测定。

以上方法在游离氨基酸的检测中都有各自的优缺点，在实际应用中可以根据需要选择合适的方法进行分析。

dl—蛋氨酸含量的测定方法蛋氨酸（Dl-methionine）是一种重要的氨基酸，广泛应用于动物饲料、食品和医药领域。

准确测定蛋氨酸含量对于保证产品质量和合理饲料配方具有重要意义。

下面将介绍蛋氨酸含量的常见测定方法。

一、盐酸加热法盐酸加热法是一种常用的蛋氨酸含量测定方法。

具体步骤如下：1. 将样品溶解于盐酸溶液中，加入几滴甲醛作为还原剂。

2. 将溶液加热，蛋氨酸会与甲醛发生反应生成虫草素。

3. 加入取代法洗涤过氧化氢消除剩余的甲醛。

4. 用氯化亚铁试剂测定虫草素的含量，从而计算出蛋氨酸的含量。

二、高效液相色谱法（HPLC）HPLC是一种精确、灵敏且快速的蛋氨酸含量分析方法。

具体步骤如下：1. 将样品溶解于适当的溶剂中。

2. 采用反相色谱柱，以适当的流动相作为移动相。

3. 使用荧光检测器进行检测，荧光检测器对蛋氨酸具有高度选择性。

4. 通过峰面积比值法或内标法来计算出蛋氨酸的含量。

三、氨氧化法氨氧化法也是一种常用的蛋氨酸含量测定方法。

具体步骤如下：1. 将样品溶解于碱性溶液中，如氢氧化钠溶液。

2. 加入适量的过氧化氢作为氧化剂。

3. 加热反应液，使其进行氧化反应生成亚硫酸盐。

4. 用硫酸检测反应液中亚硫酸盐的含量，从而计算出蛋氨酸的含量。

四、酶解法酶解法是一种基于酶的催化作用测定蛋氨酸含量的方法。

具体步骤如下：1. 将样品溶解于酶解试剂中，加入特定的酶，如蛋氨酸酶。

2. 在适当的反应条件下，酶催化蛋氨酸与底物发生反应。

3. 反应结束后，用比色法或色谱法测定反应液中产物的含量，从而计算出蛋氨酸的含量。

综上所述，蛋氨酸含量的测定方法包括盐酸加热法、高效液相色谱法、氨氧化法和酶解法等。

不同的方法有各自的优劣势，可以根据需要选择适合的方法进行分析。

正确测定蛋氨酸含量可以有效地指导饲料配方和产品质量控制，对于提高饲料效果和产品营养价值具有重要意义。