生物实验室常用试剂的配制
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实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L
□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl(pH8.8)□配制量1L
□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调pH值至8.8。4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl,10mMEDTA(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L □配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1MTri-HClBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500mMEDTA(pH8.0)20mL
2.向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。3.将溶液定至1L后,高温高压灭菌。4.室温保存。
4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL
□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
标准铁溶液的配制
铁溶液是一种常用的化学试剂,广泛应用于生物、医药、环境等领域。标准铁溶液的配制是实验室工作中常见的操作,正确的配制方法可以确保实验结果的准确性和可重复性。本文将介绍标准铁溶液的配制方法及注意事项。
一、配制方法。
1.准备试剂和设备,需要的试剂包括硝酸铁(III)、硫酸、盐酸等,设备包括烧杯、量筒、磁力搅拌器等。
2.称取硝酸铁(III),首先使用天平称取一定质量的硝酸铁(III),通常按照所需浓度和体积计算。
3.稀释硝酸铁(III),将称取的硝酸铁(III)溶解在少量去离子水中,然后转移至容量瓶中。
4.加入盐酸,在容量瓶中加入适量盐酸,用玻璃棒搅拌均匀。
5.定容,将容量瓶加入去离子水至刻度线,摇匀即可得到标准铁溶液。
二、注意事项。
1.操作要严格按照配制方法进行,避免因操作不当导致实验失败。
2.硝酸铁(III)具有腐蚀性,操作时应戴上手套和护目镜,避免接触皮肤和眼睛。
3.配制过程中应注意安全,避免溅洒和吸入有害气体。
4.配制完成后,要及时标记溶液的浓度和配制日期,并存放在阴凉干燥处。
5.标准铁溶液的配制要求严格,不同实验可能需要不同浓度和体积的铁溶液,因此在配制前应明确实验要求。
三、总结。 正确的标准铁溶液配制方法对实验结果的准确性和可重复性至关重要。在配制过程中,操作要规范,注意安全,严格按照配制方法进行。配制完成后,要及时标记溶液信息并妥善保存。希望本文的介绍能够帮助大家正确配制标准铁溶液,提高实验工作的效率和准确性。
以上就是标准铁溶液的配制方法及注意事项的详细介绍,希望对大家有所帮助。祝大家实验工作顺利!
30%聚丙烯酰胺溶液-----30%(w/v)Acrylamide 100mL
【组分浓度】
各种组分名称 配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g)
30%Acr-Bis(29:1) 1000ml 100ml
29%Acrylamide(丙烯酰胺) 290g 29g
1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰胺) 10g 1g
【配制方法】
将29克丙烯酰胺和1克N,N’-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml温热(37℃左右)的去离子水中,充分搅拌溶解,补加水至终体积为100ml。0.45µm微孔滤膜过滤除菌和杂质,储于棕色瓶,4℃避光(用铝箔纸包扎起来)保存。严格核实PH不得超过7.0,因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月,隔几个月须重新配制。如有沉淀,可以过滤。
【保存条件】
4℃避光(用铝箔纸包扎起来)保存
【注意事项】
丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收,其作用具有累积性。称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能含有少量未聚合材料。
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液----- 5×Tris-Glycine buffer (SDS-PAGE电泳缓冲液)
【组分浓度】
各种组分名称 配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g)
1000ml 500ml
0.125M Tris 15.1g
1.25M glycine(甘氨酸) 94g
0.5%(W/V)SDS 5.0g
【配制方法】
称取15.0gTris,94.0g甘氨酸(glycine),5.0gSDS,用800ml蒸馏水或去离子水溶解,充分搅拌溶解,定容至1000ml,室温保存。得0.125mol/L Tris-1.25mol/L甘氨酸电极缓冲液。临用前稀释5倍。
【保存条件】
室温保存,两年有效。
实验室常用生化试剂配方
1.常用抗生素配制以及使用说明(参考链霉菌室操作手册2019版)
抗生素
英文名称及缩写
抗性基因
贮藏液浓度(mg/ml) 100
25(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 35
25(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)
50 50
MM
使用终浓度(μg/ml) 链霉菌
2CM
YEME
大肠杆菌
LA或LB
氨苄青霉素 氯霉素 潮霉素 卡那霉素 壮观霉素 链霉素 硫链丝菌素 红霉素 阿泊拉霉素 紫霉素 萘锭酮酸 TMP
Ampicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km
Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery
Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprim
cat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph
-* 10 10 2 5 10 5 100 10
- - 25 25 20 25 10 - 50
- - - - - - 2.5 - 5
50-100 25 - 25 50 25 25 20 10-30 注意事项:
(1) – 表示无记录或不能使用,贮存液除特别说明外均用无菌水配制,配制过程请确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装;
(2)Km 和Am有交叉抗性,同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量,并设置阴性对照;
(3)Hyg、Vio易见光分解,配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。有些抗生素需要在低盐的环境(如DNA培养基)下筛选效率较高,如Hyg, Km, Vio