生化常用试剂配制

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生物化学实验常用试剂的配制方法

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1.0.5mol/L氢氧化钠溶液

组份浓度 0.5mol/L ;配制量 2L

配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。

2.0.5mol/L盐酸溶液

组份浓度 0.5mol/L ;配制量 2L

配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离子水稀释至2L。

3.含 0.5mol/L氯化钠的 0.5mol/L氢氧化钠溶液

组份浓度 0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠 ;配制量 1L

配置方法 1.准确量取氯化钠29.3g。 2.准确量取氢氧化钠20g。 3.用去离子水稀释至1L。 注意: 此溶液供回收纤维素时使用。

4、0.2%葡萄糖标准溶液

组份浓度 0.2% ;配制量 1L

配置方法 1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中, 在70℃干燥2小时。 2.干燥器中冷却至室温, 重复干燥, 冷却至恒重。 3.准确称取葡萄糖2.000g。 4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。

5.250μg/mL牛血清白蛋白标准液

组份浓度 250μg/mL ;配制量 2L

配置方法 1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。

3.4℃保存。

6、Folin试剂.

配置方.1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g无水碳酸钠,溶解,待用。2.称取0.5g酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0.25g硫酸铜?5水,溶解。3.将1:2:去离子水按20:4:1的比例混合即可.4.4℃保存,可用一周.

7、Folin试剂乙

配置方法:

1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g, 钼酸钠?2水6.2526g, 去离子水175mL,

85%磷酸12.5mL, 浓盐酸25mL, 充分混合。

2.回流10小时, 再加硫酸锂37.5g, 去离子水12.5mL及数滴溴。

3.然后开口沸腾15min, 以驱除过量的溴, 冷却后定容到250mL。

4.于棕色瓶中保存, 可使用多年。

注意: 上述制备的Folin试剂乙的贮备液浓度一般在2mol/L左右, 几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的 浓度作为应用液, 我们这时是把贮备液于使用前稀释18 倍, 使之浓度为0.1mol/L略高。这种稀释18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的“应用液”。Folin试剂乙贮备 液浓度的标定, 一般是以酚酞为指示剂。用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液, 当溶液颜色由红变为紫灰, 再突然变成墨绿即为终点, 如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙, 终点不太好掌握, 溶液地颜色是由浅黄变为浅绿,

再变为灰紫色为终点。 8、DNS试.(3,5-二硝基水杨酸试剂.

配置方.1.取3,5-二硝基水杨酸10g,加入2mol/L氢氧化钠溶液200mL。2.将3,5-二硝基水杨酸溶解,然后加入酒石酸钾钠300g.3.待其完全溶解,用去离子水稀释至2000mL,棕色瓶保存。

9、5%蔗糖溶液

组份浓度 5% ;配制量 1L

配置方法 称取蔗糖50g, 用去离子水溶解定容至1L。

10、0.1mol/L蔗糖溶液

组份浓度 0.1mol/L ;配制量 1L

配置方法 称取蔗糖34.230g, 用去离子水溶解并定容至1L。

11.20%乙酸溶液

组份浓度 20% ;配制量 1.2L

配置方法 量取冰乙酸300mL, 用去离子水稀释至1200mL。

12.30%(W/V)Acrylamide

组份浓度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% ;配制量 1L

配置方法 1.称量下列试剂, 置于1L烧杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水, 充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L, 用0.45μm滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意: 丙稀铣胺具有很强的神经毒性, 并可通过皮肤吸收, 其作用有积累性, 配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒, 但也应谨慎操作, 因为有可能含有少量的未聚合成份。

13.40%(W/V)Acrylamide

组份浓度 40%(W/V)Acrylamide 0.05% ;配制量 1L

配置方法 1.称量下列试剂, 置于1L烧杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g

2.向烧杯中加入约600mL的去离子水, 充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L, 用0.45μm滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。

注意: 丙稀铣胺具有很强的神经毒性, 并可通过皮肤吸收, 其作用有积累性, 配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒, 但也应谨慎操作, 因为有可能含有少量的未聚合成份。

14、10%(W/V)过硫酸铵

组份浓度 10%(W/V)过硫酸铵; 配制量 10mL

配置方法 1.称取1g过硫酸铵。 2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。 3.贮存于4℃。 注意: 10%过硫酸胺溶液在4℃保存时间可使用2周左右, 超过期限会失去催化作用。

15.考马斯亮蓝R-250染色液

组份浓度 0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250, 25%(V/V)异丙醇, 10%(V/V)冰醋酸

配制量 1L

配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。 2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中, 搅拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸, 均匀搅拌。 4.加入650mL的去离子水, 均匀搅拌。 5.用滤纸出去颗粒物质后, 室温保存。

16.考马斯亮蓝染色脱色液

组份浓度 10%(V/V)醋酸, 5%(V/V)乙醇 ;配制量 1L

配置方法 1.量取下列溶液, 置于1L烧杯中。 醋酸100mL、 乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。 17、凝胶固定液 (SDS-PAGE银氨染色用)

组份浓度 50%(V/V)甲醇, 10%(V/V)醋酸 ;配制量 100L

配置方法 1.量取下列溶液, 置于1L烧杯中。 甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均匀混合后室温保存。

18、凝胶处理.(SDS-PAGE银氨染色用.

组份浓.50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二...;配制.1.

配置方.1.量取下列溶液,置于1L烧杯中.甲醇50m..戊二.10m.、H2.40m.2.均匀混合后室温保存.

19、凝胶染色液 (SDS-PAGE银氨染色用)

组份浓度 0.4%(W/V)硝酸银, 1%(V/V)浓氨水, 0.04%(W/V)氢氧化钠 ;配制量 100L

配置方法: 1.量取下列试剂, 加入100~200mL试剂瓶中。 20%硝酸银 2mL

浓氨水 1mL 4%氢氧化钠 1mL H2O 96mL 2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈现混浊状, 此时应补加浓氨水, 直至透明。

3.本染色液应现用现配, 不宜保存。

20、显影液 (SDS-PAGE银氨染色用)

组份浓度 0.005%(V/V)柠檬酸, 0.02%(V/V)甲醛 ;配制量 1L

配置方法 1.称取下列试剂, 置于1L试剂瓶中。 柠檬酸 50mg 甲醛 0.2mL

2.加入1L去离子水后, 摇动混合后溶解。 3.室温保存。

21.45%乙醇溶液

组份浓度 45% ;配制量 1L

配置方法 量取无水乙醇450mL, 加入去离子水550mL, 混匀。

22.5%的十二烷基硫酸钠溶液 (W/V)

组份浓度 5% ;配制量 0.1L

配置方法 称取5.0g十二烷基硫酸钠, 溶于100mL4%的乙醇溶液中。

23.三氯甲烷-异戊醇混合试剂

配置方法 取500mL三氯甲烷试剂, 加入21mL异戊醇试剂, 混匀。

24.1.6%乙醛溶液

组份浓度 1.6% ;配制量 0.1L

配置方法 取47%乙醛3.4mL, 用去离子水定容至100mL。

25、二苯胺试.

配置方.1.称取二苯胺试剂0.8g,溶解于180mL冰乙酸中.2.再加入8mL高氯酸混匀.3.临用前加入0.8m.1.6%乙醛溶液.注意: 配制完成后试剂应为无色.

26.15%三氯乙酸溶液

组份浓度 15% ;配制量 2L

配置方法 称取三氯乙酸300g, 用去离子水溶解定容至2000mL。

27、1%谷氨酸溶.

组份浓.1...;配制.0.5. 配置方.1.称取5g谷氨酸, 先用适量得用去离子水溶解.2.再用氢氧化钾溶液中和至中性.3.最后用去离子水定容至0.5L.

28、1%丙酮酸溶.

组份浓.1...;配制.0.5.

配置方.1.称取5g丙氨酸,先用适量得用去离子水溶解.2.再用氢氧化钾溶液中和至中性.3.最后用去离子水定容至0.5L.

29、0.1%的碳酸氢钾溶液

组份浓度 0.1% ;配制量 0.5L

配置方法 称取碳酸氢钾0.5g, 用去离子水溶解定容至0.5L。

30、0.05%的碘乙酸溶液

组份浓度 0.05% ;配制量 0.25L

配置方法 称取0.125g碘乙酸, 用去离子水溶解定容至0.25L。

31、Locke氏溶液

配制量 2L ;

配置方法 称取18g氯化钠, 0.84g氯化钾, 0.48g氯化钙, 0.3g碳酸氢钠, 2g葡萄糖, 用去离子水溶解定容至2000mL。

32.0.2mol/L的丁酸溶液

组份浓度 0.2mol/L ;配制量 1L

配置方法 1.量取18mL正丁酸试剂。 2.用1mol/L的氢氧化钠中和。 3.再用去离子水定容至1L。

33、0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液

组份浓度 0.1mol/L ;配制量 10L

配置方法 称248.17g硫代硫酸钠, 用去离子水溶解并定至10L。

34.0.1mol/L的碘溶液

组份浓度 0.1mol/L ;配制量 1L

配置方法 1.称取碘12.7g和碘化钾25g。 2.用去离子水溶解并定容至1L。

3.用0.1mol/L的硫代硫酸钠标定。

35.10%氢氧化钠溶液

组份浓度 10% ;配制量 2L

配置方法 称取200g氢氧化钠, 用去离子水溶解并定容至2L。

36.10%盐酸溶液

组份浓度 10% ;配制量 0.2L

配置方法 量取浓盐酸49.3mL, 用去离子水定至0.2mL。

37、0.1%标准丙氨酸溶液

组份浓度 0.1% ;配制量 0.5L

配置方法 称取丙氨酸0.5g, 用去离子水溶解并定容至0.5mL。