半夏的组织培养和植株再生
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10% 1. 27 4. 29± 1. 20 3. 38 20% 1. 31 4. 38± 1. 08 3. 34
500 1. 28 5. 44± 1. 35 4. 25 1 000 1. 02 3. 92± 1. 04 3. 84
表 4 6-BA对半夏植株再生的影响
试验号 6-BA 丛生芽生长效果 mg· L- 1
重要因素 ,光照是半夏组培的一个有利 因素。提高氮素 中的硝态氮含量可以提高半夏愈伤组织产量。 CH有利 于半夏 愈伤组 织生长 ,半夏 的植株 再生应 选用较 低水 平的 6-BA 和 N A A,这 与其它植 物的植 株再生 的表现 有一定差异。
参考文献 [ 1 ]阴健 . 中药现代研究与临床应用 [ M ]. 北京: 学苑出版社 ,
生长后平 平均增
均鲜重 /g 长倍数
5. 13± 1. 01 3. 54
6. 59± 1. 23 4. 02 5. 84± 0. 95 3. 72 4. 94± 1. 38 3. 58 4. 47± 0. 85 2. 85 5. 24± 1. 27 3. 32 6. 99± 1. 33 3. 57 4. 45± 0. 92 3. 05 3. 10± 1. 03 2. 82 3. 84± 0. 76 2. 78
目前 国内外 对半夏 的化学 成分分 析、品种 资源、药理、 毒 理、炮 制、栽培 技术等 方面 都有深 入的 研究 [1] ,随 着
连年采挖 和农业生产精耕细 作 ,野生资 源日益减少 ,外 贸和内销 均感不足 ,人工栽培亟待解决 种源缺乏、繁 殖
系数低的问题。本文拟通过组织培养和植株再生技术 , 从而寻找提 高半夏繁殖系数和 加快生产周期的有 效途
(江西 中医学院药学系 南昌 330006)
摘要: 采用单因素 比较的方 法 ,考察 了半夏愈 伤组织生长 的影响因素 ,结果 表明激素水 平、光 照与否、
氮素以及天然附加物均能直接影响其生 长。 此外 ,还就 激素对半夏植株再 生的影响做了研究 ,较低浓度 的
6-BA和 N A A对半夏的植株再生有利。
芽 ,其他步骤同前 ,观察生根情况 ,数据见表 5。
表 5 N A A对半夏丛生芽生根的影响
试验号
NAA
生根效果
1
0. 5
++
2
1
+++
3
2
+++
4
3
++
5
4
+
3 结果分析 3. 1 不同 激素水 平及光 照与否 对半夏 愈伤组 织生 长 影响 生长 素与细 胞分裂 素在一 定的比 例下 ,才最 适 于植物 愈伤组织的生长。 从表 1可以看出无论是光 照 组还 是暗培养组 ,在 6-BA浓度 一定情况下 ,随着 2. 4D 浓 度的 升高 ,愈 伤 组织 产量 降 低 ,所以 2. 4-D 与 6BA 的 浓度 比例 在 2∶ 1时 较适 于半 夏愈 伤组 织的 生 长 ; 同时 还表明 ,在同 等条件下 ,光 照组 产量均 较暗 培 养组高 ,所以光照对半夏的愈伤组织生长有利。 3. 2 氮素 对半夏 愈伤组 织生长 的影响 氮素 是植 物
〔查摘自《针灸临床杂志》 1999年 9月第 9期〕
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2. 3 天然附 加物对 半夏愈伤 组织生 长的 影响 选用 M S+ 2. 4-D 1+ 6-BA 1和 2水平的 4种有 机附加 物: 干酵母 提取 液、麦芽提 取液、黄 豆芽提 取液、 CH,其他 步骤同前 ,数据见表 3。
表 3 天然附加物对半夏愈伤组织生长的影 响
试验号
1 2 3 4 5 6 7 8
第 第
132期卷
江西中医学院学报 JO U RN A L O F JIAN GX I CO LL EGE O F T RA DITION A L C HIN ESE M ED ICIN E
V ol. 12 N o. 3 2000
半夏的组织培养和植株再生※
罗光明 刘贤旺 姚振生 赖学文 葛菲
因素
干酵母 提取液
麦芽 提取液 黄豆芽 提取液
CH
水平 平均接 生长后的平 平均增 种量 /g 均鲜重 / g 长倍数
10% 1. 24 4. 29± 1. 04 3. 46 20% 1. 20 4. 12± 1. 13 3. 43
10% 0. 98 3. 50± 1. 11 3. 57 20% 1. 22 4. 25± 0. 96 3. 48
表 2 氮素对半夏愈伤组织生长的影响
生 长后的
试验号 NH4N O3 K NO3 氮总量 氨态氮 硝态氮 平均接 平 均鲜重
/mg· L- 1
/mg /%
/% 种量 /g
/g
平均 增长 倍数
1 1800 1500 838. 4 37. 6 62. 4 2. 30 7. 54± 1. 26 3. 39
1
0. 5
++ +
2
1
++ + +
3
1. 5
++ +
4
2
++ +
5
2. 5
++
6
3
++
7
3. 5
+
丛生芽生长时间及状态
6-BA 浓 度 低 时 , 丛 生 芽出芽时间早 ,而且 丛 生芽 高 大、粗 壮 , 但 随 着 6-BA 浓 度升 高 , 不 仅出芽时间延长 ,而 且 丛生芽矮小。
· 125·
高 ,反而有所下降。这表明高浓度的天然附加物并不一 定对愈伤组织生长有利。 3. 4 激素 水平对半夏植 株再生的影 响 一般来 说 , 6BA 与 N A A浓 度的升 高有 利于 植物愈 伤组 织的 丛芽 生长与生根 ,而本实验所得的 结果恰好相反 ,这说明半 夏在这方面的特异性。 4 小结
本文针对半夏愈 伤组织生长和植株 再生的几个影 响因素 ,采用单因素比较法 进行研究。 结果表明: 生长 素与细胞分裂素的 浓度比合适与否是影 响组培的一个
表 1 不同激素水平及光照对半夏愈伤组织生长的影响*
试验号 2. 4-D 光照 /mg· L- 1
1
0. 5 +
2
1
+
3
2
+
4
3
+
5
4
+
6
0. 5 -
7
1
-
8
2
-
9
3
-
10
4
-
平均接
种量 /g
1. 45
1. 64 1. 57 1. 38 1. 57 1. 58 1. 96 1. 46 1. 10 1. 38
江西中医学院学报
12卷
2. 4 激 素水 平对 半夏 植株 再生 的影 响 选用 M S+
N AA 0. 5和 7水 平的 6-BA 于人 工气 候箱 中培 养 25
d,观察丛生芽生长情况 ,其他步骤同前 ,数据见表 4。选
用 M S+ 6-BA 1和 5水平的 N A A,分 别接种半夏丛 生
生长 不可缺 少的大 量元素 ,自然 界中的 氨态氮 和硝 态 氮均 能被植 珠利用 ,硝态 氨能直 接被植 物利用 来生 产 含氮 有机物 ,而氨 态氮要 先被氧 化成硝 态氮才 可被 植 物利用 [2]。 因此 ,硝态氮的利用速度 和利用率均较氨态
氮大。 从表 2可看出 ,随着硝态氮 的百分含量的 升高 , 产量增高 ,本实验结果与其相吻合。 3. 3 天然附加物对半夏愈伤组织生产的影响 从表 3 可看 出 , CH产量 最高 ,麦 芽组 产 量较 高 ,干酵 母 组次 之 ,黄豆 芽组最次 ,但后 3组之间差异并 不显著。 值得 注意的是某些天然 附加物浓度的升高并 没有使产量增
径 ,并为 半夏的工 业化生 产和开 展人工 种子的 研究 做 一些前期基础工作。
1 实验材料和试剂 1. 1 原植物 半夏 P. ternata 采自江西中医学院 药圃 及南昌市近郊。
1. 2 化学试剂和药品 2. 4-D( C P) ,北京化工厂生产 , 批号 870825;萘乙 酸 ( N A A) , AR,上海制药 四厂生产 , 批 号 900401; 6-苄氨 基嘌 呤 ( 6-BA) ,中科 院上 海生 化 研究所制 ,批号 920104。 2 实验方法
使电流均匀分布 ,电极外用塑 料套保护皮肤 ;治疗电压 为 6～ 10 V ,电流一般在 30～ 100 m A; 1次治疗总电量 与肿 瘤的 直 径大 小 有关 ,以 每 1 cm 直 径 100库 仑计 算 ,平 均治疗 时间为 115 min;治 疗次数 亦与肿 瘤大小 有关 ,最多达 12次 ,平均 3～ 4次 ; 治疗前 后均用 B超 测定肿瘤平均直 径。 治 21个肿瘤 ,治前肿瘤 平均直径 为 6. 53 cm ,治后为 2. 91 cm,其中 7例肿块消失 。
2. 1 不同 激素水 平及光 照对半 夏愈伤 组织生 长的 影 响 选用 M S+ 6-BA 1 mg /L (单位 下同 )和不 同水 平 的 2. 4-D,调节 pH值至 5. 8～ 6. 0,分装 ,常规灭菌后接 种 ,恒 温培 养 ,并观 察光 照 与否 对愈 伤 组织 生长 的 影
响。25 d后 ,称取样重 ,计算平均增长倍数 ,数据见表 1。
关键词: 半夏 ;组织培养 ;植株再生
中图分类号: S 567. 23+ 9
文献标识码: A
半夏 Pinellia ter nata ( Thunb) Br eit为天南星 科植 物 ,以 块茎 入 药 ,具润 燥化 痰、降 逆止 呕、消 痞散 结 之
500 1. 28 5. 44± 1. 35 4. 25 1 000 1. 02 3. 92± 1. 04 3. 84
表 4 6-BA对半夏植株再生的影响
试验号 6-BA 丛生芽生长效果 mg· L- 1
重要因素 ,光照是半夏组培的一个有利 因素。提高氮素 中的硝态氮含量可以提高半夏愈伤组织产量。 CH有利 于半夏 愈伤组 织生长 ,半夏 的植株 再生应 选用较 低水 平的 6-BA 和 N A A,这 与其它植 物的植 株再生 的表现 有一定差异。
参考文献 [ 1 ]阴健 . 中药现代研究与临床应用 [ M ]. 北京: 学苑出版社 ,
生长后平 平均增
均鲜重 /g 长倍数
5. 13± 1. 01 3. 54
6. 59± 1. 23 4. 02 5. 84± 0. 95 3. 72 4. 94± 1. 38 3. 58 4. 47± 0. 85 2. 85 5. 24± 1. 27 3. 32 6. 99± 1. 33 3. 57 4. 45± 0. 92 3. 05 3. 10± 1. 03 2. 82 3. 84± 0. 76 2. 78
目前 国内外 对半夏 的化学 成分分 析、品种 资源、药理、 毒 理、炮 制、栽培 技术等 方面 都有深 入的 研究 [1] ,随 着
连年采挖 和农业生产精耕细 作 ,野生资 源日益减少 ,外 贸和内销 均感不足 ,人工栽培亟待解决 种源缺乏、繁 殖
系数低的问题。本文拟通过组织培养和植株再生技术 , 从而寻找提 高半夏繁殖系数和 加快生产周期的有 效途
(江西 中医学院药学系 南昌 330006)
摘要: 采用单因素 比较的方 法 ,考察 了半夏愈 伤组织生长 的影响因素 ,结果 表明激素水 平、光 照与否、
氮素以及天然附加物均能直接影响其生 长。 此外 ,还就 激素对半夏植株再 生的影响做了研究 ,较低浓度 的
6-BA和 N A A对半夏的植株再生有利。
芽 ,其他步骤同前 ,观察生根情况 ,数据见表 5。
表 5 N A A对半夏丛生芽生根的影响
试验号
NAA
生根效果
1
0. 5
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2
1
+++
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2
+++
4
3
++
5
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3 结果分析 3. 1 不同 激素水 平及光 照与否 对半夏 愈伤组 织生 长 影响 生长 素与细 胞分裂 素在一 定的比 例下 ,才最 适 于植物 愈伤组织的生长。 从表 1可以看出无论是光 照 组还 是暗培养组 ,在 6-BA浓度 一定情况下 ,随着 2. 4D 浓 度的 升高 ,愈 伤 组织 产量 降 低 ,所以 2. 4-D 与 6BA 的 浓度 比例 在 2∶ 1时 较适 于半 夏愈 伤组 织的 生 长 ; 同时 还表明 ,在同 等条件下 ,光 照组 产量均 较暗 培 养组高 ,所以光照对半夏的愈伤组织生长有利。 3. 2 氮素 对半夏 愈伤组 织生长 的影响 氮素 是植 物
〔查摘自《针灸临床杂志》 1999年 9月第 9期〕
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2. 3 天然附 加物对 半夏愈伤 组织生 长的 影响 选用 M S+ 2. 4-D 1+ 6-BA 1和 2水平的 4种有 机附加 物: 干酵母 提取 液、麦芽提 取液、黄 豆芽提 取液、 CH,其他 步骤同前 ,数据见表 3。
表 3 天然附加物对半夏愈伤组织生长的影 响
试验号
1 2 3 4 5 6 7 8
第 第
132期卷
江西中医学院学报 JO U RN A L O F JIAN GX I CO LL EGE O F T RA DITION A L C HIN ESE M ED ICIN E
V ol. 12 N o. 3 2000
半夏的组织培养和植株再生※
罗光明 刘贤旺 姚振生 赖学文 葛菲
因素
干酵母 提取液
麦芽 提取液 黄豆芽 提取液
CH
水平 平均接 生长后的平 平均增 种量 /g 均鲜重 / g 长倍数
10% 1. 24 4. 29± 1. 04 3. 46 20% 1. 20 4. 12± 1. 13 3. 43
10% 0. 98 3. 50± 1. 11 3. 57 20% 1. 22 4. 25± 0. 96 3. 48
表 2 氮素对半夏愈伤组织生长的影响
生 长后的
试验号 NH4N O3 K NO3 氮总量 氨态氮 硝态氮 平均接 平 均鲜重
/mg· L- 1
/mg /%
/% 种量 /g
/g
平均 增长 倍数
1 1800 1500 838. 4 37. 6 62. 4 2. 30 7. 54± 1. 26 3. 39
1
0. 5
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丛生芽生长时间及状态
6-BA 浓 度 低 时 , 丛 生 芽出芽时间早 ,而且 丛 生芽 高 大、粗 壮 , 但 随 着 6-BA 浓 度升 高 , 不 仅出芽时间延长 ,而 且 丛生芽矮小。
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高 ,反而有所下降。这表明高浓度的天然附加物并不一 定对愈伤组织生长有利。 3. 4 激素 水平对半夏植 株再生的影 响 一般来 说 , 6BA 与 N A A浓 度的升 高有 利于 植物愈 伤组 织的 丛芽 生长与生根 ,而本实验所得的 结果恰好相反 ,这说明半 夏在这方面的特异性。 4 小结
本文针对半夏愈 伤组织生长和植株 再生的几个影 响因素 ,采用单因素比较法 进行研究。 结果表明: 生长 素与细胞分裂素的 浓度比合适与否是影 响组培的一个
表 1 不同激素水平及光照对半夏愈伤组织生长的影响*
试验号 2. 4-D 光照 /mg· L- 1
1
0. 5 +
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1. 64 1. 57 1. 38 1. 57 1. 58 1. 96 1. 46 1. 10 1. 38
江西中医学院学报
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2. 4 激 素水 平对 半夏 植株 再生 的影 响 选用 M S+
N AA 0. 5和 7水 平的 6-BA 于人 工气 候箱 中培 养 25
d,观察丛生芽生长情况 ,其他步骤同前 ,数据见表 4。选
用 M S+ 6-BA 1和 5水平的 N A A,分 别接种半夏丛 生
生长 不可缺 少的大 量元素 ,自然 界中的 氨态氮 和硝 态 氮均 能被植 珠利用 ,硝态 氨能直 接被植 物利用 来生 产 含氮 有机物 ,而氨 态氮要 先被氧 化成硝 态氮才 可被 植 物利用 [2]。 因此 ,硝态氮的利用速度 和利用率均较氨态
氮大。 从表 2可看出 ,随着硝态氮 的百分含量的 升高 , 产量增高 ,本实验结果与其相吻合。 3. 3 天然附加物对半夏愈伤组织生产的影响 从表 3 可看 出 , CH产量 最高 ,麦 芽组 产 量较 高 ,干酵 母 组次 之 ,黄豆 芽组最次 ,但后 3组之间差异并 不显著。 值得 注意的是某些天然 附加物浓度的升高并 没有使产量增
径 ,并为 半夏的工 业化生 产和开 展人工 种子的 研究 做 一些前期基础工作。
1 实验材料和试剂 1. 1 原植物 半夏 P. ternata 采自江西中医学院 药圃 及南昌市近郊。
1. 2 化学试剂和药品 2. 4-D( C P) ,北京化工厂生产 , 批号 870825;萘乙 酸 ( N A A) , AR,上海制药 四厂生产 , 批 号 900401; 6-苄氨 基嘌 呤 ( 6-BA) ,中科 院上 海生 化 研究所制 ,批号 920104。 2 实验方法
使电流均匀分布 ,电极外用塑 料套保护皮肤 ;治疗电压 为 6～ 10 V ,电流一般在 30～ 100 m A; 1次治疗总电量 与肿 瘤的 直 径大 小 有关 ,以 每 1 cm 直 径 100库 仑计 算 ,平 均治疗 时间为 115 min;治 疗次数 亦与肿 瘤大小 有关 ,最多达 12次 ,平均 3～ 4次 ; 治疗前 后均用 B超 测定肿瘤平均直 径。 治 21个肿瘤 ,治前肿瘤 平均直径 为 6. 53 cm ,治后为 2. 91 cm,其中 7例肿块消失 。
2. 1 不同 激素水 平及光 照对半 夏愈伤 组织生 长的 影 响 选用 M S+ 6-BA 1 mg /L (单位 下同 )和不 同水 平 的 2. 4-D,调节 pH值至 5. 8～ 6. 0,分装 ,常规灭菌后接 种 ,恒 温培 养 ,并观 察光 照 与否 对愈 伤 组织 生长 的 影
响。25 d后 ,称取样重 ,计算平均增长倍数 ,数据见表 1。
关键词: 半夏 ;组织培养 ;植株再生
中图分类号: S 567. 23+ 9
文献标识码: A
半夏 Pinellia ter nata ( Thunb) Br eit为天南星 科植 物 ,以 块茎 入 药 ,具润 燥化 痰、降 逆止 呕、消 痞散 结 之
