培养基构成与选择
- 格式:pptx
- 大小:82.28 KB
- 文档页数:15
什么是选择培养基?常⽤的选择培养基有哪些。
选择培养基是根据某⼀种或某⼀类微⽣物的特殊营养要求或对⼀些物理、化学抗性⽽设计的培养基。
利⽤这种培养基可以将所需要的微⽣物从混杂的微⽣物中分离出来⼀、⽜⾁膏蛋⽩胨培养基(培养细菌⽤)⽜⾁膏 3g;蛋⽩胨 10g;NaCl 5g;琼脂 15—20g;⽔ 1000ml;pH 7.0—7.2;1.05kg/cm2 ,121.3℃灭菌20分钟。
⼆、淀粉琼脂培养基(⾼⽒1号培养基,培养放线菌⽤)可溶性淀粉 20g;KNO3 1g;NaCl 0.5g;K2HPO4 0.5g;MgSO4 0.5g;FeSO4 0.01g琼脂 20g;⽔ 1000ml;pH 7.2—7.4配制时,先⽤少量冷⽔,将淀粉调成糊状,在⽕上加热,边搅拌边加⽔及其他成分,溶化后,补⾜⽔分⾄1000ml。
1.05kg/cm2 ,121.3℃灭菌20分钟。
三、查⽒培养基(培养霉菌⽤)NaNO3 2g;K2 HPO4 1g;KCl 0.5g;MgSO4 0.5g;FeSO4 0.01g;蔗糖 30g琼脂 15—20g;⽔ 1000ml;pH ⾃然;1.05kg/cm2 ,121.3℃灭菌20分钟。
四、马丁⽒(Martin)琼脂培养基(分离真菌⽤)葡萄糖 10g;蛋⽩胨 5g;KH2PO4 1g; MgSO4·7H2O 0.5g;1/3000孟加拉红溶液 100ml;琼脂 15—20g;pH ⾃然;蒸馏⽔ 800ml;0.56kg/cm2 (8磅/英⼨2 ),112.6℃灭菌30分钟。
临⽤前加⼊0.03%链霉素稀释液100ml,使每毫升培养基中含链霉素30µg。
五、马铃薯培养基 (实验16)马铃薯 200g;蔗糖(或葡萄糖) 20g;琼脂 15—20g;⽔ 1000ml;pH ⾃然马铃薯去⽪,切成块煮沸半⼩时,然后⽤纱布过滤,再加糖及琼脂,溶化后补⾜⽔⾄1000ml。
1.05kg/cm2 ,121.3℃灭菌20分钟。
培养基配置和灭菌的注意事项一、培养基配置1.选用适当的培养基组成:根据实验的需要选择适当的培养基成分,包括碳源、氮源、矿质盐、维生素等。
根据不同微生物的要求,可以选择不同的培养基,如富集培养基、选择性培养基等。
2.正确计量和混合培养基成分:根据实验需要和比例,精确地称取和混合培养基成分。
注意避免污染和交叉污染,使用干燥器、称重纸和清洁器具等进行操作。
3.正确调节培养基的pH值:根据不同微生物的偏好,调节培养基的pH值。
使用pH计和相应的酸碱溶液进行调节,确保培养基的pH值符合微生物的需求。
4.加热溶解和固化培养基:将培养基成分加入适量的蒸馏水中,加热搅拌溶解,然后分装到培养皿或试管中。
对于固化培养基,需要加入适量的琼脂或琼脂糖,在混合均匀后加热至溶解,然后分装到培养皿或试管中。
二、培养基灭菌1.选择合适的灭菌方法:有常见的三种灭菌方法,包括热处理(如蒸汽灭菌、热风灭菌)、化学灭菌和滤器灭菌。
根据实验需求和培养基的性质选择合适的灭菌方法。
2.准备合适的灭菌器具:根据实验需求和培养基的量,选择合适的灭菌器具,如蒸馏锅、高压灭菌器、紫外线灭菌箱等。
3.正确操作灭菌设备:根据灭菌设备的说明和操作指南,正确操作和调节灭菌设备。
4.合理选择灭菌时间和温度:根据不同培养基的特性和实验需求,合理选择灭菌时间和温度。
通常情况下,蒸汽灭菌的时间为15-30分钟,温度为121摄氏度;热风灭菌的时间为1-2小时,温度为160摄氏度。
5.注意灭菌后的处理:在灭菌后,及时关闭灭菌设备,避免灭菌后的污染。
将培养基冷却后,进行温度验证,然后保存在合适的温度和条件下。
培养基类型引言在生物科学研究中,培养基是一种重要的工具,它提供了一种人工的环境,使得生物样本可以在实验室中继续生长和繁殖。
培养基类型广泛,各种生物样本都需要适合其生长特性和需求的培养基。
本文将介绍常见的培养基类型,包括液体培养基和固体培养基。
一、液体培养基液体培养基是最常见的一种培养基类型。
它由水、营养物以及其他添加物组成,可以提供生物样本所需的养分和环境条件。
液体培养基通常用于细菌和酵母等微生物的培养。
在制备液体培养基时,我们需要注意以下几个关键因素:1. 成分选择:液体培养基的成分选择应根据生物样本的特性和需求进行。
常见的成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
根据不同的微生物要求,可以选择合适的成分组合。
2. pH值调节:液体培养基的pH值对生物样本的生长和繁殖起着重要作用。
不同的生物样本对pH值有不同的要求,一般范围在6.5-7.5之间。
可以使用缓冲溶液来调节液体培养基的pH值。
3. 混合均匀:在制备液体培养基时,需要将各种组分充分混合,以确保培养基中各种养分分布均匀。
可以使用搅拌器或摇床等设备进行混合。
液体培养基的优点是易于制备和操作,可以提供大量的生物样本供科研人员使用。
然而,它也存在一些缺点,如难以分离和纯化生物样本等。
为了解决这些问题,人们采用了固体培养基。
二、固体培养基固体培养基是一种将液体培养基添加凝胶剂(通常是琼脂)后制成的固体状培养基。
它可以提供更稳定的平台,使得生物样本能够在其表面上生长和繁殖。
固体培养基通常用于培养细菌、真菌和植物等生物样本。
制备固体培养基与液体培养基有一些不同之处:1. 凝胶剂添加:在制备固体培养基时,需要将合适的凝胶剂添加到液体培养基中。
琼脂是最常用的凝胶剂,它可以增加培养基的稳定性和坚固性。
2. 灭菌:由于固体培养基中存在微生物生长的可能性,制备过程中需要严格控制卫生条件,并进行灭菌处理,以杀死潜在的污染微生物。
3. 均匀涂布:在制备固体培养基时,需要将凝胶状的培养基均匀涂布在培养皿或培养瓶的表面上。
培养基的配制简介培养基是在实验室中广泛使用的一种生物学培养材料,它提供了生长微生物和其他细胞的所需营养物质和理想的环境条件。
培养基的配制是制备培养基的过程,通过合理的配比和操作,可以获得高质量的培养基。
培养基的组成培养基的组成是根据所培养的微生物或细胞的生理特点和营养需求来确定的。
一般来说,培养基由以下几个组分组成:1.碳源:提供微生物或细胞生长所需的碳质物质,常见的碳源有葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等。
2.氮源:提供微生物或细胞生长所需的氮质物质,常见的氮源有氨基酸、尿素、氯化铵等。
3.磷源:提供微生物或细胞生长所需的磷质物质,常见的磷源有磷酸二氢盐、磷酸氢二钠等。
4.硫源:提供微生物或细胞生长所需的硫质物质,常见的硫源有硫酸铵、硫酸钠等。
5.微量元素:为微生物或细胞提供必需的微量元素,如铁、锰、锌等。
6.维生素:提供微生物或细胞生长所需的维生素,如维生素B群。
7.pH调节剂:维持培养基的理想pH值,如磷酸盐缓冲液。
8.凝胶剂:使液态培养基凝固成凝胶状,常用的凝胶剂有琼脂和洋菜。
培养基的配制步骤1. 准备所需实验器材和试剂在开始培养基的配制之前,需要准备好所需的实验器材和试剂。
常见的实验器材包括量筒、烧杯、移液管、培养皿等;试剂包括碳源、氮源、磷源、硫源、微量元素、维生素等。
2. 确定培养基组成根据所培养的微生物或细胞的生理特点和营养需求,确定培养基的组成,并计算各组分的配比。
3. 配制培养基按照确定的配比,依次称取所需试剂并溶解于适量的去离子水中,然后使用量筒或烧杯调整总体积。
4. 调节pH值使用pH计测量培养基的pH值,并根据需要使用适当的酸碱溶液进行调节,直到达到理想的pH值。
5. 凝胶化培养基(可选)如果需要制备凝胶状的培养基,可以在配制好的液态培养基中加入适量的凝胶剂,并在加热过程中充分混合,待其冷却凝固。
6. 灭菌配制好的培养基需要进行灭菌处理,常见的方法有高温灭菌和滤过灭菌。
高温灭菌通常使用高压高温的压力罐进行,滤过灭菌则需要使用0.22微米的滤膜进行过滤。
培养基的配制方法培养基是微生物学、生物学等实验中将微生物培养的一种物质基质,它提供了微生物生长所必需的营养和环境条件。
培养基的配制方法主要包括选择基质、添加营养成分、调节pH值、灭菌和包装等步骤。
以下是一般的培养基配制方法及注意事项。
1.选择基质培养基的基质可以选择为水或含有必要营养成分的溶液。
一般情况下,使用蒸馏水或双蒸馏水作为基质是比较常见的选择。
2.添加营养成分培养基中必须添加适当的营养成分,以满足微生物的生长需求。
常用的营养成分有碳源、氮源、无机盐、维生素和生长因子等。
常用的碳源有葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等,常用的氮源有氨基酸、酵母浸出物、肉浸出物等。
此外,还可以根据微生物的特殊要求增加一些其他的营养成分。
3.调节pH值pH值对于微生物的生长十分重要,大多数微生物的最适生长pH在6.5-7.5之间。
因此,培养基在配制过程中需要进行pH值的调节。
可以使用酸碱溶液(如HCl和NaOH)进行pH调节,并通过使用pH试纸或pH计监测pH值。
4.灭菌培养基的灭菌工作非常重要,它可以防止杂菌的污染。
常用的灭菌方法有高压灭菌、干热灭菌和滤过灭菌等。
高压灭菌是指将配制好的培养基放置在高压锅中,经过高温高压的处理。
干热灭菌是将配制好的培养基放置在烘箱中进行加热处理。
滤过灭菌是将培养基通过0.22um的无菌滤膜过滤,以去除微生物。
灭菌后,需要用无菌操作将培养基倒装入无菌培养器皿中。
5.包装灭菌后的培养基需要进行包装保存,以防止污染。
常用的包装方式有试管包装、琼脂平板包装和瓶装包装等。
试管包装是将培养基倒入试管中,用苏打棒打破试管口,并通过注封的方法密封试管。
琼脂平板包装是将培养基倒入无菌琼脂平板中,并使用无菌的平板封口膜密封。
瓶装包装是将培养基倒入无菌玻璃瓶中,用无菌胶塞封闭瓶口。
在配制培养基的过程中,还需要注意以下几点:1.保持操作环境无菌,使用无菌操作台、无菌器具和无菌操作方法。
2.注意各种添加物的浓度,不可过量或过少。
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分:牛肉膏或牛肉汤500克,葡萄糖10克,胰蛋白胨10克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分:NaCl300克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分:果胶5克,葡萄糖5克,NaNO32克,K2HPO40.2克,MgSO4·7H2O0.1克,CaCO30.02克,FeSO4·7H2O0.01克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分:土豆提取物4克,蛋白胨2克,乳糖10克,NaCl10克,胆盐0.75克,碱性蓝2克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分:石蜡300克,肉浸膏100克,大豆酪蛋白胨20克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分:肉膏1克,酵母提取物2克,葡萄糖2克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani(LB)培养基成分:酵母提取物5克,酪蛋白胨10克,NaCl10克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖40克,醇20克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分:鱼精膏20克,胆盐胆红素15克,玛琪琼脂25克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分:马加提琼脂50克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖20克,醇30克,琼脂20克,蒸馏水1000毫升。
培养基的配制简介培养基是用于在实验室中培养和繁殖各种微生物或细胞的基础物质。
正确的培养基配制对于成功进行实验和研究非常重要。
本文将介绍培养基的配制过程和常用的配方。
培养基的配方培养基的配方通常包含以下几个组分:1.碳源:提供能量和碳原子,常用的碳源有葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等。
2.氮源:提供微生物或细胞合成蛋白质和核酸的氮原子,常用的氮源有氨基酸、尿素、硝酸盐等。
3.矿物盐:提供微生物或细胞所需的微量元素,如钠、钾、镁、铁等。
4.生长因子:对于特定微生物或细胞的生长和生理活性非常重要,如维生素、激素等。
5.pH 缓冲剂:维持培养基的酸碱平衡,通常使用磷酸盐缓冲盐、碳酸盐等。
6.凝固剂:用于使液体培养基成为固体培养基,常用的凝固剂有琼脂、琼脂糖等。
常见培养基配方示例LB 培养基(大肠杆菌培养基)LB 培养基是一种常用的通用培养基,适用于大肠杆菌等许多细菌的培养。
配方: - 蛋白胨:10 g - 酵母提取物:5 g - NaCl:10 g - pH 缓冲剂(磷酸盐缓冲盐):1 g - 水:1 L将以上所有成分加入适量的蒸馏水中,加热搅拌至完全溶解后,使用滤器或高温高压灭菌器对培养基进行灭菌。
冷却后即可使用。
DMEM 培养基(哺乳动物细胞培养基)DMEM 培养基是一种常用的哺乳动物细胞培养基,适用于许多哺乳动物细胞的培养。
配方: - DMEM 培养基粉末:1 包(可在生物实验试剂商店购买) - 葡萄糖:4 g - 生长因子(如胰岛素、转铁蛋白等):依需求添加 - 水:1 L按照包装上的说明将 DMEM 培养基粉末溶解于适量的蒸馏水中,加入葡萄糖和所需的生长因子,搅拌均匀后使用滤器或高温高压灭菌器对培养基进行灭菌。
注意事项在进行培养基的配制时,有几点需要特别注意:1.使用无菌操作:在配制培养基的过程中,需要保持无菌操作,使用无菌器材和试剂,避免污染。
2.严格按照配方比例配制:不同微生物或细胞对于培养基成分的需求是不同的,需要严格按照配方比例进行配制。