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SSR标记荧光毛细管电泳在种子检测中常见问题分析李巧英（山西省种业发展中心，太原030006）摘要：SSR分子标记荧光毛细管电泳在农作物种子质量检测中常用于种子真实性检测、种子纯度鉴定和指纹数据库的构建。
试验过程中模板DNA浓度、特异峰型的统计分析以及仪器设备运行和维护、试验结果与指纹数据库的比对等关键环节都直接影响待测样品的结果判定。
就检测中遇到的问题进行分析，并提出相应的解决方法，以期为农作物种子质量检测荧光毛细管电泳技术平台提供参考。
关键词：SSR标记；荧光毛细管电泳；种子检测；问题；分析分子标记技术是近年来发展较快的基因检测技术，随着新标记方法的开发和试验技术的改进，在基因水平上检测农作物种子信息逐渐成为监控种子质量的一个重要手段。
由于分子标记法不受自然条件和表现性状的约束，实现了种子品种遗传信息室内快速检测，受到大家的青睐。
SSR作为第2代分子标记方法，是一种共显性标记，具有重复性好、等位变异多、数据分析简便、易操作等优点，在农作物种子质量检测中被广泛使用。
荧光毛细管电泳技术将荧光检测的高灵敏度和毛细管电泳的高效性结合，利用电泳和电渗流的电动力学原理，在毛细管中灌满胶分离PCR产物，检测荧光信号，数据软件分析系统将其转化成峰图，显示试验结果。
该技术自动化程度高，检测通量高，试验操作简单，数据统计程序化，避免人为估算的主观性，结果精确到1bp[1]，直接显示扩增产物片段的大小，实现了指纹图谱与碱基序列长短之间的对应转换，易于实验室间结果比对，常用GeneMapper 和GeneMarker分析SSR扩增片段[2]。
本文就试验中遇到的荧光信号强度、特异峰型的统计分析以及毛细管电泳仪运行和维护、试验结果与数据库比对等问题进行分析，为SSR分子标记荧光毛细管电泳检测农作物种子质量试验技术标准化提供参考。
拟，为所有专业方提供可控管、无破坏性、性价比高、低风险并允许反复运用的可行性方法。
BIM技术可以有效地提高施工技术水准，预防施工事故，减少施工成本浪费并缩短时程，强化施工过程中决策、控管能力。
毛细管分析及色谱常见问题一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器验证。
2.未接入检测器，或检测器不起作用，检查设定值。
3.进样温度太低，检查温度，并根据需要调整。
4.柱箱温度太低，检查温度，并根据需要调整。
5.无载气流，检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速。
6.柱断裂，如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端，是可以补救的，切去柱断裂部分，重新安装。
二、前沿峰1.柱超载，减少进样量。
2.两个化合物共洗脱，提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开。
3.样品冷凝，检查进样口和柱温，如有必要可升温。
4.样品分解，采用失活化进样器衬管或调低进样器温度。
三、拖尾峰1.进样器衬套或柱吸附活性样品：更换衬套。
如不能解决问题，就将柱进气端去掉1~2圈，再重新安装。
2.柱或进样器温度太低：升温（不要超过柱最高温度）。
进样器温度应比样品最高沸点高25度。
3.两个化合物共洗脱：提高灵敏度，减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开。
4.柱损坏：更换柱。
5.柱污染：从柱进口端去掉1~2圈，再重新安装毛细管分析常见问题的解决。
四、只有溶剂峰1.注射器有毛病：用新注射器验证。
2.不正确的载气流速（太低）：检查流速，如有必要，调整之。
3.样品太稀：注入已知样品以得出良好结果。
如果结果很好，就提高灵敏度或加大注入量。
4.柱箱温度过高：检查温度，并根据需要调整。
5.柱不能从溶剂峰中解析出组分：将柱更换成较厚涂层或不同极性。
6.载气泄漏：检查泄漏处（用肥皂水）。
7.样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套。
如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2圈，并重新安装。
五、宽溶剂峰1.由于柱安装不当，在进样口产生死体积：重新安装柱。
2.进样技术差（进样太慢）：采用快速平稳进样技术。
3.进样器温度太低：提高进样器温度。
4.样品溶剂与检测相互影响（二氯甲烷/ECD）：更换样品溶剂。
5.柱内残留样品溶剂：更换样品溶剂。
电泳中断原因分析毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（high perform ance capillary electrophoresis，HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。
毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容，它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平，并使单细胞分析，乃至单分子分析成为可能。
毛细管电泳技术的不断发展，毛细管电泳仪也越来越多的得到了大家的认同，但往往我们在试验的过程中经常会遇到一些问题，如样品的重现性，运行时的电流波动，阻碍电泳进一步发展的重要问题，及时的解决电泳的相关问题，对电泳的发展乃是分析化学的未来有这重要的现实意义。
毛细管电泳是在高压的作用下，以毛细管为分离通道，柱子中充满着缓冲溶液，毛细管两端浸泡在缓冲溶液的小瓶中，如图1所示，这样就构成了回流，对应的回流也就有了电流，但往往在试验的过成中电流并不像我们想的那样稳定，甚至有断流的现象，接下我们分析一下产生这种现象可能的原因。
图1 毛细管电泳仪示意图可能导致断流的原因：1、毛细管电泳柱子1.1柱子断裂毛细管柱子外壁涂有聚亚酰胺涂层，有很好的韧性，一段这层涂层脱落，毛细管柱子将失去原有的韧性，变得很脆，很容易折断。
取毛细管柱子时千万不要用利器划柱子，否则柱子很容易在划痕处断开。
毛细管柱子断裂后，缓冲溶液从断裂处流出色谱柱子，进而不能构成回路，从而导致电流迅速下降，致使电流中断，分离分析中断。
解决方法：更换柱子（平时更换柱子特别注意，不要用利器划到柱子）图2 断了柱子的毛细管电泳示意图1.2毛细管电泳柱子堵了常用的毛细管电泳柱子内径有50微米、75微米及100微米，内径很小，如果我们在试验的过场中不注意缓冲溶液及样品的纯度，或是使用了粘度很大的缓冲溶液，很容易堵死毛细管柱子，造成电流的中断。
图3柱子被堵后毛细管电泳示意图解决方法：压力反向冲洗柱子、样品及缓冲溶液使用前过滤2、气泡问题2.1缓冲溶液中的气泡我们在配置缓冲溶液时，所选用的水及在配置的过程中会使缓冲溶液溶解少量的气体，当这部分缓冲溶液进入到毛细管柱子内部时，两端加高压，运行一段时间会是缓冲溶液中的气体溢出，使柱子内产生气泡，从而使电流中断。
电泳过程中常见的问题及解决的方法电泳施工中常见漆膜缺陷及防止办法虽然电泳涂装是大量操作变量的动态平衡，操作人员不时地对电泳涂装工艺的控制参数进行监控和调整，就可以获得良好的外观、膜厚和物理特性。
因此，当检测出漆膜缺陷时，就应对它进行一系列准确、可靠的分析，然后及时提出解决办法1 ）纯水水质要求在电导率＜5μs/cm2 ）槽液液温控制在25 -30℃（冷热循环控制）3 ）进槽要清洗干净，不要将酸碱带入槽中问题原因解决对策膜厚不足固体份低提高固体份电压低提高电压温度低提高温度漆膜过厚工作周围循环不好通常因泵，过滤器及喷嘴阻塞所致固体份高降低固体份温度高降低温度电导率高提高超滤液排放量电压高降低电压水迹沌水不干净换纯水温度过高降低湿度固体份过低加漆起泡工作表所不洁净充分水洗漆膜外观不丰满颜色基比过高减少颜料补加，增加树脂含量槽液有泡沫进气漏气检查管道和泵是否泄漏溢流槽液体过低提出高液体高度涂膜粗糙颜料份高减少色浆，增加树脂电导率高超滤，降低电导率针孔槽液温度低升高槽液温度电导率过高超滤降低电导率漆膜不均匀，破裂槽液温度高降低温度电压高降低电压电导率高超滤降低电导率斑纹地图斑痕底材表面污染检查金属表面漆迹清洗不够增加清洗凹孔，缩孔杂质污染清除工件上杂质颜料份低补加色浆硬度烘烤时间延长，严格按工艺操作烘烤温度升温不够流平加溶剂麻点液温低升温溶剂少加溶剂浓度低加漆条纹表面外观不佳电压升高快溶剂含量低槽液固含量低常见故障及其纠正方法故障产生原因纠正方法桔皮或表面粗糙电压过高降低电压溶液温度高降低温度固体分过高稀释溶液极距太近加大极距烘烤加温太快压缩空气吹干后再烘烤PH 值过高用有机酸调整针孔或麻点固体分过低调整至工艺范围PH 值过低降低溶液酸度清洗水不干净换清洗水溶液电导率太高超滤去掉杂质离子膜厚太薄增加电泳电压或时间电镀表面针孔压缩空气吹干后再烘烤火山口或油点工件上附有油加强除油工序槽液面有油渍防止槽液被油污染颗粒污染加强循环过滤和超滤电压高膜层厚降低电泳电压和时间彩虹膜层太薄增加电泳电压颜色不符膜层太厚或太薄选择合适的工作电压和时间调配涂料时，颜色比例错严格按工艺配方配制电泳漆溶剂太多，渗透能力差，膜层厚薄不均调整溶剂含量，使其符合工艺规范不规则图形前处理不彻底加强前处理工序硬度不够烤烘时间短或温度低严格按工艺规范进行涂装面点状或片状颜色差异零件有针孔或砂眼杜绝不合格工件下槽色料乳化搅拌不匀加强电泳漆搅拌表面有水液用压缩空气吹干水滴未干即烘烤用压缩空气吹干电泳前水洗不彻底加强入槽产零件的清洗。
高效毛细管电泳仪实验过程中常见问题解答序号现象可能原因纠正措施1电源开启后毫无反应1.电源没接通2.保险丝已断将仪器插头从电源插座中取出，确认插座里有电，检查保险丝，更换电源线。
2 电流指示为零电极断掉，弯曲或没有插对更换、校正、重插。
3仪器实验过程中电流不稳或电流指示远底于正常值，但电压值正常1.毛细管堵塞2.毛细管中无缓冲溶液3.毛细管破裂4.电压未加5.仪器参数设定错误6.柱内有大气泡7.用水做溶剂配样，在压力进样时将一部分水压入缓冲溶液中重新用HCl、NaOH清洗毛细管或剪去进样端小段毛细管，如果仍旧不能清洗，更换毛细管。
检查毛细管是否浸在缓冲溶液中。
更换毛细管。
检查电压值。
重新设定仪器参数。
重新注入缓冲溶液。
用稀释的运行缓冲溶液代替水配样。
4 电流指示过高毛细管柱过热用干净缓冲溶液冲洗毛细管柱，使之冷却。
5电流指示不断变化1.毛细管内有许多小气泡2.环境温度过高或过底，通风不好重新注入缓冲液。
调整环境温度，最好使用控温装置。
6恒压操作时电压显示值闪动电流设置过底重新设置电流值。
7电泳谱图上没有出现峰1.样品浓度太低或体积太小2.样品被管壁严重吸附3.毛细管检测窗与检测器光路未对准4.信号线连接错误增加样品浓度或样品体积。
对毛细管壁进行修饰处理。
取出毛细管，重新安装。
检查信号线连接情况。
8基线漂移或噪声较大1.毛细管被污染或未清洗2.毛细管柱的光学窗口被污染3.有小气泡4.操作电压太高5.缓冲溶液浓度太大6.缓冲溶液或样品中有小颗粒物质7.毛细管有很小裂缝8.检测器灯源老化9.接地问题10.检测器参数设定错误11.数据系统设定错误用0.5mol/LNaOH溶液、水、缓冲液清洗毛细管。
取下检测池，清洗光学透镜。
缓冲溶液脱气。
降低操作电压。
降低冲溶液浓度。
过滤缓冲溶液或样品溶液并检查缓冲溶液与样品是否发生作用。
更换毛细管。
更换灯源。
将检测仪和电泳仪连接在同一电源上。
检查检测器参数设定值。
重新设定数据处理参数。
毛细管分析常见问题的解决一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器验证。
2.未接入检测器，或检测器不起作用，检查设定值3.进样温度太低，检查温度，并根据需要调整4.柱箱温度太低，检查温度，并根据需要调整5.无载气流，检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速6.柱断裂，如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端，是可以补救的，切去柱断裂部分，重新安装二、前沿峰1.柱超载，减少进样量2.两个化合物共洗脱，提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开3.样品冷凝，检查进样口和柱温，如有必要可升温4.样品分解，采用失活化进样器衬管或调低进样器温度三、拖尾峰1.进样器衬套或柱吸附活性样品：更换衬套。
如不能解决问题，就将柱进气端去掉1~2圈，再重新安装2.柱或进样器温度太低：升温（不要超过柱最高温度）。
进样器温度应比样品最高沸点高25度3.两个化合物共洗脱：提高灵敏度，减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开4.柱损坏：更换柱5.柱污染：从柱进口端去掉1~2圈，再重新安装四、只有溶剂峰1.注射器有毛病：用新注射器验证。
2.不正确的载气流速（太低）：检查流速，如有必要，调整之3.样品太稀：注入已知样品以得出良好结果。
如果结果很好，就提高灵敏度或加大注入量。
4.柱箱温度过高：检查温度，并根据需要调整5.柱不能从溶剂峰中解析出组分：将柱更换成较厚涂层或不同极性6.载气泄漏：检查泄漏处（用肥皂水）7.样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套。
如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2圈，并重新安装五、宽溶剂峰1.由于柱安装不当，在进样口产生死体积：重新安装柱。
2.进样技术差（进样太慢）：采用快速平稳进样技术。
3.进样器温度太低：提高进样器温度。
4.样品溶剂与检测相互影响（二氯甲烷/ECD）：更换样品溶剂。
5.柱内残留样品溶剂：更换样品溶剂6.隔垫清洗不当：调整或清洗7.分流比不正确（分流排气流速不足）：调整流速六、假峰1.柱吸附样品，随后解吸：更换衬管，如不能解决问题，就从柱进样口端去掉1~2圈，再重新安装。
一、无样品峰出现A、检查电流是否稳定：①没有电流。
可能原因——毛细管堵塞或断裂。
解决方法——用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。
缓冲溶液需要过滤，将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。
②电流波动很大，直至几乎消失。
可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。
解决方法——将缓冲溶液超声脱气，如果还有此现象发生，则可能是样品区带有析出，可以通过降低样品浓度/延长ramp time来试图解决这一问题；对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。
③电流初始值较小，后逐渐增大。
可能原因——样品进样量过大。
解决方法——减少进样量，通常进样参数设置在0.5psi,5sec左右。
④电流正常。
可能原因：a样品浓度过低：使用高浓度样品测试，如果无法解决则有可能是以下其他原因。
b检测波长设置不正确：请确认被分析物的特征吸收，检查方法中的检测波长设置。
c分离极性错误：对于蛋白样品，请注意蛋白在分离条件下其PI及所带电荷；对于核酸样品，通常条件下会带负电荷。
d样品在毛细管内壁吸附：对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
e光学检测器或光纤损坏：进行标准样品的测试，如果没有对应的结果出现，则有可能存在硬件问题，请联系工程师。
B、检查毛细管窗口，是否有透明窗口：可能原因——忘记开毛细管窗口或窗口位置不正。
解决方法——重新开毛细管检测窗口，或将窗口调整到正确位置。
二、样品峰出现拖尾可能原因——样品在毛细管内壁吸附。
解决方法——对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
三、样品峰形不对称A、检查毛细管入口：可能原因——毛细管入口切口不平齐。
解决方法——重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用力过猛或反复刮擦。
毛细管分析及色谱常见问题一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器验证。
2.未接入检测器，或检测器不起作用，检查设定值。
3.进样温度太低，检查温度，并根据需要调整。
4.柱箱温度太低，检查温度，并根据需要调整。
5.无载气流，检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速。
6.柱断裂，如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端，是可以补救的，切去柱断裂部分，重新安装。
二、前沿峰1.柱超载，减少进样量。
2.两个化合物共洗脱，提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开。
3.样品冷凝，检查进样口和柱温，如有必要可升温。
4.样品分解，采用失活化进样器衬管或调低进样器温度。
三、拖尾峰1.进样器衬套或柱吸附活性样品：更换衬套。
如不能解决问题，就将柱进气端去掉1~2圈，再重新安装。
2.柱或进样器温度太低：升温（不要超过柱最高温度）。
进样器温度应比样品最高沸点高25度。
3.两个化合物共洗脱：提高灵敏度，减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开。
4.柱损坏：更换柱。
5.柱污染：从柱进口端去掉1~2圈，再重新安装毛细管分析常见问题的解决。
四、只有溶剂峰1.注射器有毛病：用新注射器验证。
2.不正确的载气流速（太低）：检查流速，如有必要，调整之。
3.样品太稀：注入已知样品以得出良好结果。
如果结果很好，就提高灵敏度或加大注入量。
4.柱箱温度过高：检查温度，并根据需要调整。
5.柱不能从溶剂峰中解析出组分：将柱更换成较厚涂层或不同极性。
6.载气泄漏：检查泄漏处（用肥皂水）。
7.样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套。
如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2圈，并重新安装。
五、宽溶剂峰1.由于柱安装不当，在进样口产生死体积：重新安装柱。
2.进样技术差（进样太慢）：采用快速平稳进样技术。
3.进样器温度太低：提高进样器温度。
4.样品溶剂与检测相互影响（二氯甲烷/ECD）：更换样品溶剂。
5.柱内残留样品溶剂：更换样品溶剂。
毛细管电泳仪器的相关问题1：电源部分问题现有的毛细管芯片电源作为芯片毛细管电泳系统的一部分，在整个系统的产品化之前还需要进行相应的改进。
除了整体功能上需要进行一些小的改动之外，在体积、外形、外观以及如何与系统中其他部分进行系统集成，成为一个完整的整体仪器方面还需要做很多工作。
1）现有电源设计方案及功能：现有电源已经实现的功能有：●两个0－20kV CZE系列电源模块输出控制●两个0－2kV MP系列电源模块输出控制以及8路开关信号输出。
●软件控制四路电源输出及实时监测四路电源输出信号。
（软件部分还包括光电倍增管信号的采集）2）现有电源可以改进的部分：（1）去掉CZE系列电源模块，只使用MP系列电源模块。
由于CZE系列电源模块的体积较大，而且现在芯片毛细管电泳使用的电压MP系列的电源模块已经可以满足要求。
（2）电源信号监测部分的改进。
将原来的8位AD改为12位AD，可以监测提高精度，而且如果精度足够，可以将光电倍增管信号采集电路合并进来，可以省去目前光电倍增管信号采集使用的AD转换卡。
（3）控制电路电源的改进。
控制电路需要＋15V、＋5V、－5V直流电源，MP系列电源模块需要＋24V直流电源。
现有电源分别使用两个变压器，并且＋24V直流电源使用风扇降温。
可以考虑将两部分合并，减小总体积。
3）改进方案从时间和成本上考虑，我们设计了两种改进方案。
（1）改进方案一：考虑项目的整体时间进度，只对（1）进行改进。
具体工作内容及时间安排如下：●MP系列电源模块直接购买。
●电路原理图及PCB图改进设计（1周）●电路板加工（7－10天）●PC端软件改动（一周以内）●焊接及调试（一周）（2）改进方案二：对1、2、3项都进行改进具体工作及时间安排：●MP系列电源模块购买●电路原理图及PCB图改进设计（2周）●电路板加工（7－10天）●单片机程序改动（1周）●PC端软件改动（1周以内）●焊接及调试（2－3周）2：芯片定位问题1）现有结构需要改进的地方（1）现有芯片结构简单，制造完全靠手工实现，没有定位的基准，导致每块芯片上的毛细管道位置千差万别，在应用时只能够依靠显微镜观察并调整平台位置来进行毛细管道位置的调整，操作起来相对繁琐。
一、无样品峰出现
A、检查电流是否稳定：
①没有电流。
可能原因——毛细管堵塞或断裂。
解决方法——用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水
流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有
断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。
缓冲溶液
需要过滤，将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。
②电流波动很大，直至几乎消失。
可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。
解决方法——将缓冲溶液超声脱气，如果还有此现象发生，则
可能是样品区带有析出，可以通过降低样品浓度/延长ramp time来试图解决这一问题；对于在缓冲溶液中溶解度不高的样
品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。
③电流初始值较小，后逐渐增大。
可能原因——样品进样量过大。
解决方法——减少进样量，通常进样参数设置在0.5psi,5sec
左右。
④电流正常。
可能原因：a样品浓度过低：使用高浓度样品测试，如果无法
解决则有可能是以下其他原因。
b检测波长设置不正确：请确
认被分析物的特征吸收，检查方法中的检测波长设置。
c分离
极性错误：对于蛋白样品，请注意蛋白在分离条件下其PI及所带电荷；对于核酸样品，通常条件下会带负电荷。
d样品在毛细管内壁吸附：对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
e光学检测器或光纤损坏：进行标准样品的测试，如果没有对应的结果出现，则有可能存在硬件问题，请联系工程师。
B、检查毛细管窗口，是否有透明窗口：
可能原因——忘记开毛细管窗口或窗口位置不正。
解决方法——重新开毛细管检测窗口，或将窗口调整到正确位置。
二、样品峰出现拖尾
可能原因——样品在毛细管内壁吸附。
解决方法——对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
三、样品峰形不对称
A、检查毛细管入口：
可能原因——毛细管入口切口不平齐。
解决方法——重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用力过猛或反复刮擦。
B、检查更改样品溶剂：
可能原因——缓冲溶液与样品溶液电解率差别过大。
解决方法——可采用缓冲溶液作为样品溶剂
四、样品峰过宽
降低样品进样量：
a有改善：可能原因——样品浓度太大。
解决方法——可降低样品浓度或减少进样量。
b无改善：可能原因——样品本身性质不均一。
解决方法——此原因主要是针对蛋白样品，小分子样品发生的概率较低。
五、迁移时间不稳定
①出峰时间不稳定且无规律：可能原因——缓冲溶液与毛细管内壁平衡较慢。
解决方法——每次样品运行之间避免用NaOH冲洗毛细管。
②出峰时间依次后延：可能原因——样品中有物质易发生吸附。
解决方法——首先在每次样品运行之前用0.1N NaOH短时间冲洗毛细管，看迁移时间能否重复，如果效果不佳请使用涂层毛细管来改善结果或者将样品再次处理，以去除样品中易吸附的组分。
六、峰形和出峰时间不稳定
更换缓冲溶液种类：
①峰形和时间稳定：可能原因——缓冲溶液不稳定，易电解，或者是样品在原缓冲溶液条件下不稳定。
解决方法——更换其它种类的缓冲溶液。
②峰形和出峰情况仍不稳定：可能原因——样品中物质易在毛细管内壁吸附。
解决方法——可采用涂层毛细管来克服此问题，或对样品进行前处理。
七、无法加气压
检查瓶塞是否盖紧或更换瓶塞。
①更换后问题解决。
可能原因a瓶塞老化，失去弹性。
解决方法——请购买新的瓶塞，并注意瓶塞不可烘干，只能自然晾干。
b瓶颈处有液体，导致瓶塞易滑。
解决方法——向瓶中装液体时不要过满，也不要沾湿瓶颈。
②若瓶塞无问题，可先采用真空方式，若真空方式可以使用，但压力仍不可用。
可能原因——压力系统问题。
解决方法——请联系工程师。
八、迁移时间可重复但峰面积重复性不好
重新切割毛细管两端。
①若问题解决。
可能原因——毛细管入口处不平。
解决方法——重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用力过猛或反复刮擦。
②问题依然存在，尝试电动进样。
可能原因——若电动进样可保持重现，则压力控制或气路存在问题。
解决方法——请联系工程师。
九、毛细管或电极易折断
①检查瓶盖是否老化。
可能原因——瓶盖老化。
解决方法——购买新的瓶盖。
②电极是否不垂直。
可能原因——电极不垂直。
解决方法——将电极拉直。
十、谱图基线不稳定
①先用0.1N NaOH冲洗毛细管，然后不进样运行原方法。
a基线改善。
可能原因——则为样品中物质有吸附。
解决办法——重新预处理样品或更改电泳条件。
b基线未改善。
可能原因——毛细管内有强烈吸附，或缓冲体系不稳定。
解决办法——更换新的毛细管，不进样，只运行缓冲，观察基线情况。
②更换新毛细管后基线仍然不稳，可采用Run Buffer A测试。
a基线改善。
可能原因——缓冲溶液与毛细管内壁平衡较慢。
解决办法——更换缓冲溶液种类，若基线变化对检测无干扰，可保持原来电泳条件。
b基线未改善。
可能原因——检测光源或其他光学器件不正常。
解决办法——请联系工程师。
