血涂片制备的操作方法血涂片制备是一种用于检查血液细胞形态和计数的常见实验方法。
以下是血涂片制备的详细操作方法：1. 实验前准备：- 准备好所需的实验器材和试剂，包括玻璃刮片、镊子、培养皿、荧光显微镜片、血液采集管、无菌生理盐水、硝酸盐涂片、形态涂片、涂片染色试剂（Wright 染色液）等。
- 仔细阅读实验操作方法，并进行必要的安全措施。
2. 血液采集：- 选择一个合适的采集部位，一般为患者的指尖或耳垂侧面。
- 用无菌棉球或无菌纱布清洁采集部位，消毒使用无菌棉球沾取酒精擦拭。
- 使用无菌注射器或针头，通过轻轻按压患者的采集部位，采集足够的血液样品。
3. 血涂片制备：- 先将玻璃刮片清洗干净，并在一侧的一个角落上写上标签，以示采集来源。
- 取一滴血液样品，将其滴在玻璃刮片的一端，并迅速将另一张刮片斜放在接触点上。
- 刮片形成一个小角度，然后将两张刮片迅速向前移动，使血液样品均匀涂开。
- 在制备血涂片的同时，要注意控制制片速度和角度，以保证血液样品的均匀和适当稀释。
4. 干燥与固定：- 制片完成后，应将其垂直放置在一个干净、无尘的地方，以允许刮片的自然干燥。
在炎热的季节或高湿度的环境中，可以使用加温脱水槽，将温度设定在37-40摄氏度，以加速干燥过程。
- 干燥后，将血涂片固定，可使用60-70%乙醇或其他合适的固定液，将刮片浸泡在固定液中1-2分钟，然后取出并晾干。
5. 涂片染色：- 取出固定的血涂片，逐一浸泡在Wright染色液中，浸泡时间一般为3-5分钟，可根据需要调整。
- 取出血涂片，用流动自来水轻轻冲洗，将多余的染色剂冲洗掉，直至冲洗水流变为清澈。
- 将血涂片倒挂在流动自来水下自然干燥，避免用纸巾擦拭，以免造成细胞形态的破坏。
6. 显微镜检查：- 取一滴橄榄油滴于血涂片中心，并将其覆盖与荧光显微镜片。
- 将显微镜调至合适的倍数，放入血涂片下进行观察和分析。
- 观察细胞形态，计算细胞数目，评估红细胞形态、白细胞分类及数量、血小板计数等。
