实验 血涂片的制作与血细胞的观察
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实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,特别是对各种血液病的诊断有很大价值,但血涂片制备和染色不良,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论,因此,制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一.二、实验目的掌握血涂片的制作,观察血细胞的形态及在不同环境下的反应.三、实验器材与试剂器材:显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等.试剂:瑞氏染液、%Nacl溶液、蒸馏水等.四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位人的指腹,使血流通畅,采血前用70%酒精消毒人的指腹,干燥后用采血针刺破指腹,使血液自然流出第一滴血不要.取干净载玻片,让血滴在离玻片一端中4-5mm处,注意手指持载玻片的边缘,不触电及表面,也不能使载玻片接触取血部位的皮肤.2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片.将其一端置于血滴前方,向后移动到接触血滴,使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40o角,向另一端平稳地推出图1.涂片推好后,迅速在空气中摇,使之自然干燥.图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线,防止染液外溢.再将瑞氏染色液伊红-亚甲基蓝滴在血膜上,至染液淹没全部血膜,染30秒.加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟.最后用蒸馏水把染色液洗掉,用吸水纸吸干,自然干燥后,即可观察.4、封片经染色的涂片完全干燥后,用中性树胶封片保存.五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示.血细胞包括红细胞、白细胞和血小板.1、红细胞:小而圆,没有细胞核,血涂片中最多,常被染成淡红色,细胞的边缘厚,中间薄,使细胞边缘的颜色比中间的深.2、白细胞:分为有粒白细胞和无粒白细胞,有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞;无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞.1嗜酸性白细胞:数量较少,但在血涂片中可以找到.细胞质中存在粗大的嗜酸性颗粒,胞质常被染成红色或玫瑰花色,细胞核分叶形,染成紫红色.2嗜碱性白细胞:数量最少,在血涂片中很难找到.细胞质中存在粗大的嗜碱性颗粒,胞质常被染成兰紫色,细胞核分叶形,染色较深,但常被粗大的兰紫色颗粒掩盖.3嗜中性白细胞:在有粒白细胞中,它的数量最多,很容易找到.细胞质染成淡红色,胞质内含有细小的颗粒,一般不易看清,细胞核为兰紫色,核分杆状、蹄形和分叶形.4淋巴细胞:在白细胞中数目是最多的,大小不等,可分为大淋巴细胞、中淋巴细胞、小淋巴细胞.大淋巴细胞较少,占中小淋巴细胞的1/4~1/18.细胞质所占的比例较小,但随细胞体积增大而相应增多,核周围细胞质,染成天兰色,细胞核大,圆形,染成紫兰色.5单核细胞:数目不多,是血细胞中最大的细胞.核为肾形或马蹄形,颜色比淋巴细胞较淡,细胞质为淡灰兰色.3、血小板:为不规则的细胞质小块或碎片,形状象雪花,在血小板中有细小的紫兰色颗粒.血小板常聚集在红细胞之间注意:在观察过程中注意染料、渣子和细胞及血小板等的区别.图2 血涂片中血细胞观察结果五、注意事项:1、载玻片的清洗:新玻片有游离碱质,因此应用10%盐酸浸泡24小时,然后再清水和蒸馏水清洗.2、使用玻璃片时只能手持边缘,切忌触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥,无油腻.3、血涂片制好后,立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变.3、血膜必须要干燥,以免在染色过程中容易脱落.5、染色时间应视具体情况而定.染色与染液浓度、室温高低、细胞多少有关.染色液浓度越淡,室温越低,细胞越多,所需要的染色时间越长,或适当增加染色液.6、染液不可过少,以防止蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗.7、冲洗时应用流水将染色液冲去,不能先倒掉染色液,以免染料沉着于血片上.六、作业说明红细胞在不同渗透环境中的变化情况并讨论原因.。
第1篇一、实验目的1. 熟悉血液永久涂片的制作过程。
2. 掌握观察血液细胞的基本方法。
3. 了解红细胞、白细胞和血小板的形态结构及其功能。
二、实验原理血液是人体内重要的液体组织,主要由红细胞、白细胞和血小板组成。
通过制作血液永久涂片,可以在显微镜下观察血液细胞的形态结构,从而了解其功能。
三、实验材料与器材1. 实验材料:新鲜血液、生理盐水、瑞氏染液、固定液、盖玻片、载玻片、吸管、滴管、显微镜等。
2. 实验器材:烧杯、酒精灯、烘箱、剪刀、镊子、剪刀、计时器等。
四、实验步骤1. 血液采集:取新鲜血液约1ml,置于无菌试管中。
2. 制备涂片:将血液滴于载玻片中央,用另一张载玻片轻轻涂抹均匀,形成薄片。
3. 固定:将涂片置于固定液中浸泡5-10分钟,取出后用蒸馏水冲洗。
4. 染色:将涂片置于瑞氏染液中染色5-10分钟,取出后用蒸馏水冲洗。
5. 晾干:将涂片置于空气中自然晾干或用烘箱烘干。
6. 观察与记录:用显微镜观察涂片,记录红细胞、白细胞和血小板的形态结构。
五、实验结果与分析1. 红细胞:呈两面凹的圆饼状,无细胞核,细胞质呈红色。
红细胞的主要功能是运输氧气和二氧化碳。
2. 白细胞:有细胞核,体积较大。
白细胞分为粒细胞和淋巴细胞,其中粒细胞又分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
白细胞具有防御和免疫作用。
3. 血小板:无细胞核,体积较小,呈不规则形状。
血小板的主要功能是止血和凝血。
六、实验讨论1. 血液永久涂片是一种常用的观察血液细胞的方法,可以清晰地观察到血液细胞的形态结构。
2. 在观察血液细胞时,应掌握显微镜的使用方法,调整好焦距和亮度,以便更好地观察。
3. 通过观察血液细胞,可以了解血液的组成和功能,有助于诊断疾病。
七、实验总结通过本次实验,我们掌握了血液永久涂片的制作方法和观察技巧,了解了红细胞、白细胞和血小板的形态结构及其功能。
这对我们进一步学习血液学知识具有重要意义。
八、实验报告实验名称:血液永久涂片实验实验时间:____年____月____日实验者:____实验结果:1. 红细胞:呈两面凹的圆饼状,无细胞核,细胞质呈红色。
一、实验目的1. 掌握血涂片的制作方法。
2. 了解血涂片在临床医学中的应用。
3. 观察血细胞的形态和分布。
二、实验原理血涂片是临床医学中常用的一种检测方法,通过将血液涂抹在载玻片上,经过固定和染色处理,使血细胞在显微镜下清晰可见,从而对血液中的各种细胞进行形态学和数量的观察,有助于诊断某些疾病。
三、实验器材1. 载玻片2. 盖玻片3. 刺血针4. 消毒酒精5. 蒸馏水6. 瑞氏染液7. 显微镜8. 移液器9. 计数板四、实验步骤1. 采血:选择合适的采血部位(如耳垂或手指尖),用消毒酒精消毒皮肤,待干。
用刺血针刺破皮肤,血液自然流出。
2. 制备血涂片:a. 将载玻片倾斜45度,用移液器吸取少量血液。
b. 将血液滴在载玻片的右端,用另一载玻片作为推片,将推片的末端斜置于血液滴的左缘,成30°~40°角。
c. 将推片稍向后退,使之与血液滴接触,使血液在两载玻片之间充满斜角。
d. 将推片向前推动,使血液均匀涂抹在载玻片上,形成薄薄的一层。
e. 将盖玻片轻轻放置在血涂片上,避免产生气泡。
3. 固定:将血涂片放入固定液(如甲醇)中浸泡5分钟,取出晾干。
4. 染色:将固定后的血涂片放入瑞氏染液中染色10分钟,取出后用蒸馏水冲洗,晾干。
5. 观察:将染色的血涂片放在显微镜下观察,先低倍镜观察,再高倍镜观察。
五、实验结果与分析1. 观察到血涂片上红细胞呈两面凹的圆饼状,没有细胞核,细胞质呈淡红色。
2. 观察到白细胞有核,呈圆形、椭圆形或不规则形,细胞质呈蓝色或紫色。
3. 观察到血小板呈不规则形,细胞质呈蓝色或紫色。
六、实验总结通过本次实验,我们掌握了血涂片的制作方法,了解了血涂片在临床医学中的应用。
在实验过程中,我们观察到了红细胞、白细胞和血小板的形态和分布,为后续的医学诊断提供了基础。
七、注意事项1. 采血时,要确保采血部位消毒彻底,避免感染。
2. 制备血涂片时,要保持推片与载玻片之间的角度,避免血液涂抹不均匀。
一、实验目的1. 掌握血涂片的基本制作方法。
2. 了解血涂片在临床诊断中的应用。
3. 观察并分析血细胞形态学特点。
二、实验原理血涂片制作是血液学检查的基本技术之一,通过将血液涂抹在载玻片上,经过固定和染色,使血细胞在显微镜下呈现出不同的形态学特点,从而帮助医生进行疾病的诊断。
三、实验器材与试剂1. 器材:显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、载玻片、盖玻片、推片、瑞氏染液、0.9%NaCl溶液、蒸馏水等。
2. 试剂:瑞氏染液、0.9%NaCl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 消毒与采血- 用70%酒精棉球消毒受试者的指腹,待酒精干燥后用采血针刺破指腹,使血液自然流出。
- 待第一滴血流出后,弃去,取干净载玻片,让血滴在离玻片一端中4-5mm处。
2. 推片- 取一块边缘光滑的载玻片作为推片,将其一端置于血滴前方,向后移动到接触血滴,使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40°角。
- 平稳地向另一端推出,使血液在载玻片上形成一层均匀的薄膜。
3. 干燥- 将推好的载玻片在空气中轻轻摇动,使血液自然干燥。
4. 固定- 用瑞氏染液将干燥的血涂片染色,放置约10分钟。
5. 洗涤- 用蒸馏水将染色的血涂片轻轻冲洗,去除多余的染液。
6. 吸水- 用吸水纸轻轻吸干血涂片上的水分。
7. 观察与记录- 在显微镜下观察血涂片,记录红细胞的形态、白细胞数量和类型等。
五、实验结果与分析1. 红细胞- 红细胞呈两面凹的圆饼状,边缘微暗,中间较宽,无细胞核。
2. 白细胞- 白细胞数量较少,体积比红细胞大,有细胞核。
根据细胞核的形态和染色特点,可将白细胞分为以下类型:a. 中性粒细胞:细胞核呈分叶状,染色较浅。
b. 嗜酸性粒细胞:细胞核呈2-3叶,染色较深。
c. 嗜碱性粒细胞:细胞核呈2-3叶,染色较深。
d. 淋巴细胞:细胞核呈圆形或椭圆形,染色较浅。
六、实验结论1. 通过本次实验,掌握了血涂片的基本制作方法。
2. 了解了血涂片在临床诊断中的应用。
血涂片制作实验报告血涂片制作实验报告一、引言在医学领域,血涂片是一项常见的实验技术,用于观察和分析血液中的各种细胞和成分。
本实验旨在探究血涂片制作的方法和步骤,并观察不同染色剂对细胞的影响。
二、材料与方法1. 实验材料:- 血液样本- 血涂片- 血涂片玻璃片- 血涂片染色剂(如吉姆萨染色液、伊昔洛尔染色液)- 显微镜2. 实验步骤:1)取一滴新鲜的血液样本,放在血涂片玻璃片的一端。
2)将另一片玻璃片倾斜放在血涂片上,使血液沿着玻璃片的一侧均匀涂开。
3)将血涂片晾干,避免阳光直射。
4)将干燥的血涂片,分别放入吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液中浸泡,按照染色液说明书上的时间要求。
5)取出血涂片,用水轻轻冲洗,使多余的染色剂洗掉。
6)将血涂片晾干,然后放置在显微镜下观察。
三、结果与讨论1. 血涂片制作过程中,需要注意的细节:- 血液样本应新鲜,避免血液凝固。
- 血涂片制作时,玻璃片的倾斜角度要适中,以保证血液均匀涂开。
- 血涂片晾干时,应避免阳光直射,以免影响后续观察。
2. 不同染色剂对细胞的影响:- 吉姆萨染色液:吉姆萨染色液主要用于染色细胞核,使其呈现暗蓝色或紫色。
这种染色剂对红细胞、白细胞和血小板的染色效果较好,能清晰地显示细胞核的形态和细胞数量。
- 伊昔洛尔染色液:伊昔洛尔染色液主要用于染色红细胞,使其呈现橙红色。
这种染色剂对红细胞的染色效果较好,能够清晰地显示红细胞的形态和数量。
3. 观察结果:- 在吉姆萨染色液中染色的血涂片下,可以清晰地观察到红细胞、白细胞和血小板的细胞核,细胞核呈现暗蓝色或紫色。
- 在伊昔洛尔染色液中染色的血涂片下,可以清晰地观察到红细胞的形态和数量,红细胞呈现橙红色。
4. 结果分析:- 吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液分别适用于不同的细胞成分的观察和分析。
- 吉姆萨染色液适用于细胞核的染色,可以帮助研究者观察和计数细胞核的数量。
- 伊昔洛尔染色液适用于红细胞的染色,可以帮助研究者观察和计数红细胞的数量。
血涂片实验报告血涂片实验报告引言:血涂片实验是一种常见的临床检验方法,用于观察和分析血细胞的形态和数量,从而帮助医生判断患者的健康状况。
本次实验旨在通过对血涂片的制备和观察,了解血液中各类细胞的形态特征及其数量变化,进一步加深对血液疾病的认识。
实验步骤:1. 血液采集:使用无菌注射器从患者的指尖或静脉采集适量的血液样本,注意避免血液污染和交叉感染。
2. 制备血涂片:将采集到的血液样本滴在玻片上,利用另一块玻片将血液涂抹成薄膜,然后晾干。
3. 固定染色:将制备好的血涂片浸入甲醇中,固定血细胞的形态,然后再放入染色剂中,如吉姆萨染色液,使细胞成为可观察的颜色。
4. 镜检观察:将染好的血涂片放在显微镜下,通过调节镜头和光源,观察血细胞的形态和数量。
实验结果:在显微镜下观察血涂片,我们可以看到不同种类的血细胞以及它们的形态特征。
红细胞呈圆形或扁平的双凸形,中间凹陷,边缘光滑。
白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞等。
中性粒细胞具有多个核,细胞质内有颗粒状物质;淋巴细胞则呈圆形,细胞质较少,核浓染;单核细胞呈圆形或椭圆形,核偏心,细胞质较多。
嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞则带有颗粒状物质,分别呈酸性和碱性反应。
讨论:通过血涂片的观察,我们可以了解到血液中各类细胞的数量和形态特征,进而判断患者的健康状况。
例如,红细胞的形态异常可能提示贫血或其他血液疾病的存在,而白细胞的数量和比例变化则可能与感染、炎症或免疫系统的异常有关。
此外,血涂片还可以用于诊断一些特定的血液疾病。
例如,淋巴细胞的数量增多可能与淋巴细胞白血病有关,而中性粒细胞的数量增多则可能与感染或炎症有关。
嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量增多则可能与过敏反应或寄生虫感染有关。
结论:血涂片实验是一种简单而有效的临床检验方法,通过观察和分析血细胞的形态和数量,可以帮助医生判断患者的健康状况和诊断一些特定的血液疾病。
通过本次实验,我们更加深入地了解了血液的组成和特点,为进一步研究和治疗血液疾病提供了基础。
实验血涂片的制作与血细胞的观察
一、引言
血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,特别是对各种血液病的诊断有很大价值,但血涂片制备和染色不良,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论,因此,制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的
掌握血涂片的制作,观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂
器材:显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂:瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤
1、消毒与采血
先按摩采血部位(人的指腹),使血流通畅,采血前用70%酒精消毒人的指腹,干燥后用采血针刺破指腹,使血液自然流出(第一滴血不要)。
取干净载玻片,让血滴在离玻片一端中4-5mm处,注意手指持载玻片的边缘,不触电及表面,也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片
取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方,向后移动到接触血滴,使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角,向另一端平稳地推出(图1)。
涂片推好后,迅速在空气中摇,使之自然干燥。
图1 推片示意图
3、染色
用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线,防止染液外溢。
再将瑞氏染色液(伊红-亚甲基蓝)滴在血膜上,至染液淹没全部血膜,染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉,用吸水纸吸干,自然干燥后,即可观察。
4、封片
经染色的涂片完全干燥后,用中性树胶封片保存。
五、结果观察
显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞:
小而圆,没有细胞核,血涂片中最多,常被染成淡红色,细胞的边缘厚,中间薄,使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞:
分为有粒白细胞和无粒白细胞,有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞;无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
(1)嗜酸性白细胞:
数量较少,但在血涂片中可以找到。
细胞质中存在粗大的嗜酸性颗粒,胞质常被染成红色或玫瑰花色,细胞核分叶形,染成紫红色。
(2)嗜碱性白细胞:
数量最少,在血涂片中很难找到。
细胞质中存在粗大的嗜碱性颗粒,胞质常被染成兰紫色,细胞核分叶形,染色较深,但常被粗大的兰紫色颗粒掩盖。
(3)嗜中性白细胞:
在有粒白细胞中,它的数量最多,很容易找到。
细胞质染成淡红色,胞质内含有细小的颗粒,一般不易看清,细胞核为兰紫色,核分杆状、蹄形和分叶形。
(4)淋巴细胞:
在白细胞中数目是最多的,大小不等,可分为大淋巴细胞、中淋巴细胞、小淋巴细胞。
大淋巴细胞较少,占中小淋巴细胞的1/4~1/18。
细胞质所占的比例较小,但随细胞体积增大而相应增多,核周围细胞质,染成天兰色,细胞核大,圆形,染成紫兰色。
(5)单核细胞:
数目不多,是血细胞中最大的细胞。
核为肾形或马蹄形,颜色比淋巴细胞较淡,细胞质为淡灰兰色。
3、血小板:
为不规则的细胞质小块或碎片,形状象雪花,在血小板中有细小的紫兰色颗粒。
血小板常聚集在红细胞之间(注意:在观察过程中注意染料、渣子和细胞及血小板等的区别)。
图2 血涂片中血细胞观察结果
五、注意事项:
1、载玻片的清洗:新玻片有游离碱质,因此应用10%盐酸浸泡24小时,然后再清水和蒸
馏水清洗。
2、使用玻璃片时只能手持边缘,切忌触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥,无油腻。
3、血涂片制好后,立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。
3、血膜必
须要干燥,以免在染色过程中容易脱落。
5、染色时间应视具体情况而定。
染色与染液浓度、室温高低、细胞多少有关。
染色液浓度越淡,室温越低,细胞越多,所需要的染色时间越长,或适当增加染色液。
6、染液不可过少,以防止蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗。
7、冲洗时应用流水将染色液冲去,不能先倒掉染色液,以免染料沉着于血片上。
六、作业
说明红细胞在不同渗透环境中的变化情况并讨论原因。