免疫分析技术和相关仪器
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临床检验分析技术及仪器1. 引言临床检验分析技术及仪器在现代医疗领域起着至关重要的作用,它们可以提供医生所需的实验数据以便做出准确的诊断和治疗决策。
本文将对几种常见的临床检验分析技术及仪器进行介绍。
2. 生化分析技术及仪器生化分析技术及仪器能够对体内的生物大分子(如蛋白质、酶、代谢产物等)进行分析,从而了解人体的健康状况。
其中,常见的仪器包括酶标仪、光谱仪和生化分析仪等。
这些仪器通过测量样本中特定物质的浓度或反应速率,帮助医生判断疾病的类型和程度,并制定相应的治疗方案。
3. 血液分析技术及仪器血液分析技术及仪器能够对血液中的各项指标进行测定,如血细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数等。
常见的仪器包括血细胞分析仪和血气分析仪等。
这些仪器可以帮助医生判断患者的贫血程度、血液流变学指标以及呼吸功能等,为临床诊断提供重要依据。
4. 免疫分析技术及仪器免疫分析技术及仪器能够检测体内的抗体、抗原及其相互作用,从而判断机体的免疫状态。
常见的仪器包括酶联免疫吸附法仪器、流式细胞仪和免疫荧光分析仪等。
这些仪器可以帮助医生诊断感染性疾病、自身免疫病以及肿瘤等,并监测疾病的进展和治疗效果。
5. 分子生物学分析技术及仪器分子生物学分析技术及仪器主要用于分析和研究基因、DNA、RNA 以及相关蛋白质等分子生物学构成。
常见的仪器包括PCR仪、电泳仪和基因芯片等。
这些仪器可以帮助医生进行遗传病的筛查、基因突变的鉴定,以及确定肿瘤的分子标记物,从而指导个性化治疗方案的制定。
6. 影像学分析技术及仪器影像学分析技术及仪器能够对人体内部的结构和功能进行直观展示和评估。
常见的仪器包括X线机、CT机、MRI和超声仪等。
这些仪器可以帮助医生发现和诊断肿瘤、骨折、心血管疾病等,同时为手术规划和治疗效果评估提供有效依据。
7. 结论临床检验分析技术及仪器在现代医疗中扮演着重要的角色,不仅能够提供医生所需的实验数据,还有助于准确诊断和有效治疗。
不断的技术创新和仪器更新将进一步推动临床检验的发展,为医务工作者提供更好的医疗服务。
16免疫分析仪器第十六章免疫分析仪器* 免疫分析法:应用不同的标记物,以抗原抗体相互结合为基础的免疫学测定方法。
* 类型:(1)用酶作标记物,称为酶免疫分析法。
(2)以化学发光物质作标记,为化学发光免疫分析法。
(3)用放射性核素作标记物,称为放射免疫分析法。
第一节酶标分析仪一、酶免疫分析法* 分类:有两种类型。
(1)均相酶免疫测定:主要用于药物测定。
(2)非均相酶免疫测定:也叫酶联免疫吸附测定(ELISA),常用于医学检验。
二、酶标仪的工作原理及结构(1)微机:可通过控制电路控制微孔板在X和Y方向的移动。
(2)微孔板:是一透明塑料板,板上有装载待测样品的多排小孔。
1、原理:采用比色法。
光源光线经滤光片后成单色光,射入微孔板中待测样品后被吸收掉一部分,透射光到达光电检测器,经放大及模数转换后,送入微机处理、显示和打印结果。
2、光路系统:光源发出的光,经聚光镜、光栏、到反射镜作900反射后,垂直通过比色溶液,然后经滤光片到达光电管。
3、酶标仪和光电比色计的不同点:两者都用比色法测定,不同点为(1)装载比色液的容器不是比色皿,而是塑料微孔板。
(2)光束垂直通过待测液即微孔板。
(3)通常不用吸光度A而是用光密度OD表示。
4、酶标仪类型:有两种。
(1)单通道:分自动型和手动型。
(2)多通道:均为自动型,特点是检测速度快。
三、EL312E型酶标仪简介是美国BIO-TEK公司的产品。
1、光学系统原理:采用比色法。
滤光片类型为后密封式干涉滤光片,半通带宽度10nm;比色板为标准96孔板。
2、技术指标:如表。
四、半自动微孔板式ELISA分析仪结构在酶标仪的基础上再配置加液器、温育器、洗板机、测读仪。
测定中需由手工将微孔板移至下一步骤的仪器中进行。
五、全自动微孔板式ELISA分析仪结构自动化酶免疫分析系统由加样系统、温育系统、洗板系统、判读系统、机械臂系统、液路动力系统、软件控制系统等组成第二节化学发光免疫分析仪* 发光剂:指能产生化学发光反应的物质,也叫发光底物。
4.1 POCT概述4.1.1 POCT的概念、基本原理及主要技术POCT是指在病人旁边分析病人标本的分析技术,或者说只要测试不在主实验室做,并且它是一个可移动的系统,就可以称为POCT。
“POCT”的组成包括:地点、时间(point)、保健、照料(care)、检验、试验(testing),point-of-care testing英文字面的意思是在受治疗者现场的保健检验。
POCT的基本原理是:把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料中,成为整合的干燥试剂块,然后将其固定于硬质型基质上,成为各种形式的诊断试剂条;或把传统分析仪器微型化,操作方法简单化,使之成为便携式和手掌式的设备;或将上述两者整合为统一的系统。
POCT主要技术包括:(1)简单显色(干化学法测定)技术将多种反应试剂干燥、固定在纸片上,加上检验标本(全血、血清、血浆、尿液等)后产生颜色反应,用肉眼观察定性或仪器检测(半定量)。
(2)多层涂膜(干化学法测定)技术多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来的。
将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片,用仪器检测,可以准确定量。
(3)免疫金标记技术胶体金颗粒具有高电子密度的特性,金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的标记处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,这一反应可以通过银颗粒的沉积被放大。
该类技术主要有斑点免疫渗滤法(DIGFA)和免疫层析法(ICA)。
(4)免疫荧光技术通过检测板条上激光激发的荧光,定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。
检测系统通常由荧光读数仪和检测板组成。
检测板多用层析法,分析物在移动的过程中形成免疫复合物,通过检测区域、质控区域的荧光信号值的不同与分析物的不同浓度成一定的比例,获得定标曲线,可检测未知样本中分析物的浓度。
(5)生物传感器技术利用离子选择电极,底物特异性电极,电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。
临床检验分析仪器临床检验分析仪器在医学领域中起着至关重要的作用。
它们是现代医疗中不可或缺的工具,用于协助诊断和治疗各种疾病。
这些仪器具备高度的精确性和准确性,可以帮助医生和医疗人员快速获取必要的信息,以便为患者提供最佳的治疗方案。
一、血液分析仪器血液分析仪器是临床检验中最常见的一类仪器,广泛应用于血液常规指标测定和疾病相关指标检测。
血液常规指标包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等,这些指标可以为医生提供患者的基本健康状态信息。
在某些疾病的诊断和治疗中,血液分析仪器也可以检测特定的指标,如糖化血红蛋白、肝功能指标、肾功能指标等。
二、免疫分析仪器免疫分析仪器是用于检测体内免疫学指标的一类仪器。
随着医疗科技的进步,免疫分析技术不断发展,为临床医学提供了更多的诊断手段。
通过测定血清中的免疫球蛋白、肿瘤标记物等指标,免疫分析仪器可以帮助医生早期发现肿瘤、感染、自身免疫性疾病等疾病。
三、生化分析仪器生化分析仪器用于测定生物体内液体(血清、尿液等)中的生化指标,包括血糖、血脂、肝肾功能指标、电解质等。
这些指标的异常变化往往与多种疾病的发生和发展相关。
生化分析仪器的出现,使得临床医学可以通过测定这些指标来评估患者的健康状况,并提供相应的治疗方案。
四、核酸分析仪器核酸分析仪器主要用于检测和分析体内的核酸序列,如DNA和RNA。
这些仪器通过分子生物学技术,可以对基因突变、染色体缺失等进行精确的检测,为遗传性疾病的诊断和治疗提供有力的支持。
此外,核酸分析仪器在病毒感染检测和基因工程领域也有着广泛的应用。
五、图像诊断仪器图像诊断仪器包括CT扫描、MRI、X射线等,它们能够生成人体内部的高分辨率影像,帮助医生发现和诊断各种疾病。
CT扫描和MRI可以提供全身各个部位的详细结构图像,对于肿瘤、损伤和异常情况的检测非常有价值。
X射线影像则可以用于骨骼和肺部疾病的诊断。
在临床实践中,各类仪器的有效运用可以提高疾病的诊断和治疗效果,对于改善患者生活质量和健康状况起到重要作用。
临床检验分析技术及仪器在当代医学领域中,临床检验分析技术及仪器的发展起到了至关重要的作用。
临床检验是判断疾病诊断、病情监测以及治疗效果评估的基础,而分析技术和仪器则是实现准确、快速临床检验结果的关键。
本文将对临床检验分析技术及仪器的发展进行探讨,并介绍其中几种常用的技术和仪器。
一、血液分析技术及仪器血液分析是临床检验中最常见的项目之一。
通过对血液中不同指标的检测,可以了解患者的健康状况,并进行疾病的诊断和监测。
目前,常用的血液分析技术包括血常规、凝血功能、电解质等项目。
而血液分析仪器主要有自动血球分析仪、凝血分析仪和电解质分析仪等。
血常规是一项最常见的血液分析技术,常用以评估患者的贫血、感染及炎症等情况。
而自动血球分析仪则是实现血常规检测的主要仪器,通过对血液中细胞形态学、数量和功能进行检测和分析,可以给出准确的血细胞计数和分类结果。
凝血功能是评估患者血液凝固能力的重要指标,常用于判断出血和血栓等疾病的可能性。
凝血分析仪能够对患者血液凝固因子进行检测和分析,通过测量凝血时间、凝块形成和血小板功能等指标,为临床提供准确的凝血功能评估结果。
电解质是人体维持内环境稳定所必需的物质,常用于判断患者的电解质平衡情况。
电解质分析仪可以通过对血液中个别离子的测定,如钠、钾、钙和氯等,帮助医生判断患者是否存在电解质紊乱的影响。
二、生化分析技术及仪器生化分析是临床检验中另一个重要的项目。
通过检测患者体液中不同的生化指标,可以了解患者的器官功能、代谢状态以及营养水平等信息。
常用的生化分析技术包括血糖、血脂和肝功能等项目。
而生化分析仪器主要有生化分析仪、酶标仪和血糖仪等。
血糖是评估患者糖代谢情况的主要指标,常用于糖尿病的诊断和管理。
而血糖仪是一种用于测量血液中葡萄糖浓度的仪器,通过电化学、光学或生物传感等原理,可实现准确、便捷的血糖检测。
血脂是评估患者脂质代谢情况的重要指标,常用于心血管疾病的风险预测和预防。
生化分析仪可以通过测定血液中胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白等指标,为患者提供准确的血脂水平评估结果。
免疫检验实践技能操作方法免疫检验是一种通过检测体内免疫系统产生的免疫反应来判断人体健康状况的方法。
它可以用于诊断疾病、评估疫苗效果和监测治疗效果。
免疫检验实践需要掌握一定的技能和操作方法,以下将对免疫检验实践技能的相关操作方法进行详细说明。
首先,进行免疫检验实践前,需要准备样本和试剂。
样本可以是血液、尿液、体液等,而试剂则是用于检测目标物质的荧光标记物、抗原、抗体等。
在准备样本时,需要注意先后顺序,避免污染。
试剂要按照规定的浓度和保存条件进行保存和配置,以保证实验的准确性。
其次,进行免疫检验实践时需要遵循一定的操作步骤。
首先是样本的预处理,包括离心、过滤、稀释等。
这些操作旨在去除样本中的干扰物质,提高检测的敏感性和准确性。
其次是试剂的加入和混匀,将待测样本和试剂按照指定比例混合,确保样本与试剂充分接触,使抗原和抗体结合。
然后是孵育反应,将混合液体置于恒温孵育箱中,在适当的温度和时间条件下使抗原和抗体结合反应。
最后是结果的读取和分析,根据实验设计使用特定的仪器检测并记录结果数据,然后进行数据分析和解释。
免疫检验实践中,还需要掌握相关的实验技术和仪器操作。
例如,酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种常用的免疫检测方法,需要使用酶标仪进行测试。
在操作酶标仪时,需要按照相关的仪器使用说明进行操作,调整好波长、程序和参数,以保证测试的准确性。
另外,还需要掌握如何使用显微镜观察细胞、组织的免疫染色结果,在操作显微镜时需要调节合适的倍数和焦距,以获取清晰的图像。
同时,免疫检验实践需要注意实验的质量控制。
质量控制是免疫检验的重要环节,可以通过加入已知结果的质控品来评价实验的准确性和稳定性。
质控品的运用可以帮助检验者判断实验过程中是否存在误差,并及时对实验结果进行修正。
此外,免疫检验实践需要严格遵守实验室的操作规范和安全操作标准。
例如,实验室操作时要佩戴防护手套、实验服等个人防护装备,避免实验化学药品接触皮肤和粘膜。
生化分析技术和仪器在临床诊断中的应用随着医学科技的不断发展和进步,现代临床医学采用的生物技术和仪器已经越来越复杂,同时对临床医疗的质量和效率也有了更高的要求。
而生化分析技术和仪器则是其中的一项重要技术,在临床医学诊断中发挥着举足轻重的作用。
本文将会详细介绍生化分析技术和仪器在临床诊断中的应用和优势。
一、生化分析技术和仪器的概述生化分析技术和仪器是一种基于生物化学反应原理,通过测量生物体内某些物质的含量、性质和结构等信息来帮助医生确定某种疾病的诊断和鉴别诊断。
常用的生化分析技术和仪器包括生化免疫分析技术、纳米酶标仪、荧光光谱仪、质谱仪等。
这些技术和仪器的应用已经广泛覆盖到多个临床医学科目,如内科、外科、妇科、小儿科、肿瘤科等。
二、1. 生化免疫分析技术生化免疫分析技术是指一种将化学分析和免疫学相结合的新型分析技术。
它可以利用免疫反应的高特异性和高灵敏性测定生物体内的生化指标,例如血清中的酶、蛋白质、激素、抗体等,以便为临床医生提供一些重要的诊断和治疗指导。
生化免疫分析技术已经广泛应用于肝功能、肾功能、心功能、免疫功能、血液疾病、内分泌疾病等疾病的诊断和治疗。
通过测定不同生化指标的含量和性质,可以帮助医生更好地判断疾病的类型、程度和进展情况,从而为治疗提供依据和方向。
2. 纳米酶标仪纳米酶标仪是一种用于生物分子检测的新型分析仪器。
它通过检测样品中的抗体、蛋白质、DNA、RNA等生物分子的含量和结构信息,来帮助医生判断和诊断某种疾病。
纳米酶标仪不仅具有高度的灵敏性和通透性,而且可以实现多样化的生物分子检测方法。
通过使用纳米酶标仪,医生可以更快速、更精确地进行生物分子检测,从而为临床医学提供更加准确和敏感的诊断工具。
3. 荧光光谱仪荧光光谱仪是一种用于检测样品的荧光物质的仪器。
它可以通过检测样品中不同生物分子的荧光信号,来帮助医生判断该样品中是否存在某种疾病,以及疾病的类型和程度等重要信息。
荧光光谱仪常常用于检测荧光物质的含量和性质,例如病毒RNA、抗体、细胞色素等,从而为临床医生提供了更加全面和准确的诊断工具。
全自动化学发光免疫分析仪(1套)技术参数要求1.检测原理:化学发光技术。
2.测试项目要求:包括自身免疫抗体(多项目优先)、生殖激素(多项目优先)、肿瘤标志物、感染性疾病(多项目优先)、肝纤维化标志物等多项检测参数。
3.试剂位:25个试剂位以上,工作中可在线添加更换。
4.样本位:50个以上可随时在线装载的自动条码识别样本位。
5.检测速度:200测试/小时以上。
6.试剂系统: 2-8℃冷藏试剂盘,试剂可在机冷藏存储,试剂不足报警且可在线添加更换。
7.通讯功能:可与LIS、HIS系统双向通讯。
8.厂商、代理商双重售后服务及技术支援保障。
高敏化学发光全自动免疫分析仪(1套)技术参数要求1、设备可用于TAT、PIC、TM、t-PAIC等血栓项目的检测。
2、方法学:化学发光免疫分析。
3、单机测试速度:单机速度≥50测试/小时;首个检测项目出结果时间:≤30min。
4、仪器类型:全自动连续进样。
5、取样方式:采用一次性TIP头,有效杜绝交叉污染。
6、样本位及进样方式:轨道进样,可连续进样;具备自动读取条码功能。
7、具有专用急诊通道。
8、试剂:试剂位足够,可随时监测记录试剂用量及批号信息等。
9、具备远程服务,性能验证,质控,定标,校准等能协助。
10、配套性:提供同品牌配套的仪器、试剂、校准品、质控品,以保证良好的质量和稳定性。
11、具有良好的溯源性:校准品可溯源到国际标准血浆。
13、具备一定的成熟用户数量,可提供3家或以上三甲医院的试剂设备的性能验证报告等助证。
全自动化学发光免疫分析仪(1套)技术参数要求1.国际知名品牌,具有SFDA、FDA、CE认证。
2.采用直接化学发光检测方法。
3.速度≥200测试/小时。
4.具有冷藏和湿度控制功能,连续和自动混合以保持颗粒悬浮。
5.可检测心脏标志物、甲状腺功能、性激素、代谢类疾病、贫血、糖尿病、肿瘤、传染病、药物监测等。
6.试剂和耗材装载:不停机装载。
7.试剂完整性控制:试剂盒条形码识别,自动追踪和标记:试剂存量、校准和质控有效性、在机稳定性、试剂效期和试剂气泡检测。
检测器和仪器技术在免疫学中的应用随着现代科技的不断发展,检测器和仪器技术在免疫学中的应用越来越广泛。
免疫学作为研究生物体免疫系统的学科,对于疾病的诊断、治疗以及药物研发都起着至关重要的作用。
本文将探讨检测器和仪器技术在免疫学中的应用。
一、流式细胞仪流式细胞仪是一种能够检测、分析和排序单个细胞的仪器。
它可以检测细胞的大小、形状、表面标记物、细胞器等多个参数,被广泛应用于细胞免疫学领域。
通过流式细胞仪,研究人员可以了解免疫细胞在不同状态下的表型和功能,为免疫疾病的研究提供了有力的工具。
流式细胞仪还可以用于手术中术中快速诊断病变。
例如,对于某些白血病或淋巴瘤患者,流式细胞仪可以帮助医生判断癌细胞的种类和数量,为病人制定治疗方案提供重要依据。
二、ELISA法ELISA法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种利用酶标记的抗体或抗原来定量检测目标化合物的方法。
在免疫学领域中,ELISA法被广泛应用于检测免疫球蛋白(抗体)和细胞因子等生物分子。
例如,在临床诊断中,ELISA法可以用于检测某些肿瘤标志物,如胃癌标志物CA72-4、肝癌标志物AFP等。
此外,ELISA法还可以用于监测疫苗接种后人体内抗体的产生情况。
三、PCR技术PCR技术(Polymerase Chain Reaction)是一种基于DNA复制的技术,可以从微量DNA或RNA样品中扩增出特定片段的DNA序列。
在免疫学研究中,PCR技术被广泛应用于细菌和病毒的检测和鉴定。
例如,在流行病学调查中,PCR技术可以帮助确定病原体的种类和数量,为疾病防控提供重要参考。
此外,在免疫治疗中,PCR技术也可以用于监测患者病情的变化。
四、免疫荧光法免疫荧光法是一种利用荧光标记的抗体来检测特定生物分子的方法。
在免疫学中,免疫荧光法被广泛应用于检测免疫球蛋白、细胞因子等生物分子。
例如,在自身免疫性疾病的诊断中,免疫荧光法可以用于检测患者体内自身抗体的存在情况,帮助医生确定疾病种类和严重程度。
免疫分析仪的主要作用是什么免疫分析仪是一种具有高度自动化的仪器设备,广泛应用于生物医学领域。
它的主要作用是通过检测和分析生物体内的免疫反应,以获得关于疾病诊断、治疗监测和科学研究等方面的重要信息。
本文将详细探讨免疫分析仪的主要作用,并介绍其在不同领域的应用。
1. 疾病诊断与监测免疫分析仪在临床医学中被广泛应用于疾病的诊断和监测。
通过检测患者体内的免疫反应指标,如抗体、抗原、免疫球蛋白等,可以帮助医生对疾病进行准确的诊断。
例如,ELISA(酶联免疫吸附试验)技术可以用于检测HIV、肝炎、流感等传染病,而免疫荧光分析技术可以用于检测自身免疫性疾病和肿瘤标志物。
2. 药物研发与剂量监控免疫分析仪在药物研发和剂量监控中起到重要作用。
在药物研发过程中,免疫分析仪可以用于筛选药物候选化合物、评估药物的效力和毒性。
对于已上市的药物,免疫分析仪可以通过检测药物在患者体内的浓度,实现药物剂量的个体化调整,提高治疗效果。
3. 遗传性疾病筛查免疫分析仪可以通过检测遗传性疾病相关的免疫标记物,进行遗传性疾病的筛查和诊断。
例如,新生儿疾病筛查中常用的TSH(甲状腺刺激素)测定、肌酶谱检测等都可以通过免疫分析仪来实现,早期发现并治疗遗传性疾病,对儿童的健康发育至关重要。
4. 免疫学研究免疫分析仪在免疫学研究中发挥着重要作用。
它可以用于研究免疫系统的功能、调控机制和疾病机理等方面。
例如,通过检测特定的细胞因子、白细胞亚群、细胞表面标记物等,可以深入了解免疫系统的疾病发生机制,为新药开发和治疗策略的制定提供依据。
5. 环境监测与食品安全免疫分析仪可以应用于环境监测和食品安全领域。
它可以检测水源、土壤、大气等环境中的污染物及有害物质,确保环境质量满足相关标准要求。
在食品安全方面,免疫分析仪广泛用于检测食品中的农药残留、食品中的过敏原、食品质量控制等,保障食品安全。
综上所述,免疫分析仪在各个领域发挥着重要作用。
它不仅在医学领域帮助医生进行疾病的诊断和监测,还在药物研发、遗传性疾病筛查、免疫学研究、环境监测和食品安全方面发挥着重要作用。
全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求
一、全自动荧光免疫分析仪技术要求
1、检测方法:荧光免疫层析法
2、检测时间:≤15min
★3、检测项目:N末端-B型钠尿肽原(NT-PrOBNP)、降钙素原(PCT)。
4、样本类型:全血,血清,血浆
5、样本最小用血量W75u1.
★6、检测通道,20通道,各通道能同时开展项目检测。
★7、试剂仓位:24个。
★8、加样方式:原始采血管穿刺取样(无需拔帽,无需TIP头)。
9、检测通量2100测试/小时。
10、检测参数的升级:可通过外部U盘或联网升级软件,使用新的测试卡即可完成,无需增加模块
11、内置计算机:仪器自带彩色电容式液晶触摸屏
12、连接管理:支持USB接口、RS232、RJ45接口
13、结果存储:主机存储检测数据数量,IOoOo条
二、配套试剂
三、售后服务要求:。
免疫荧光分析仪原理免疫荧光分析仪是一种常用的生物分析仪器,广泛应用于生物医学、生命科学、临床诊断等领域。
其原理基于免疫学和荧光技术,通过特定的抗体和荧光探针来检测和分析目标物质。
免疫荧光分析仪的工作原理如下:1. 样品预处理:首先,需要对样品进行适当的处理,以去除杂质、提取目标物质或增强目标物质的浓度。
常见的预处理方法有离心、洗涤、加热等。
2. 抗体标记:免疫荧光分析仪中的关键部分是抗体标记。
抗体是一种能够识别并结合特定抗原的蛋白质,可以通过不同的方法与荧光染料结合,形成荧光标记的抗体。
常见的荧光染料有荧光素、荧光素同位素、荧光蛋白等。
标记的抗体可以选择性地结合目标物质。
3. 抗原与抗体结合:将样品中的目标物质与标记抗体一起孵育,使其发生特异性结合。
这种结合是由于抗体与抗原之间的特异性识别和结合作用。
4. 清洗:将未结合的物质从样品中洗去,以降低背景噪音和假阳性反应。
常用的清洗方法有洗涤液、盐溶液、缓冲液等。
5. 测量荧光:将样品放入免疫荧光分析仪中,通过激发光源对荧光标记的抗体进行激发,激发后的抗体会发出荧光信号。
当光源与荧光染料的激发波长相匹配时,荧光染料会发出较强的荧光信号。
6. 信号检测和分析:免疫荧光分析仪会收集和记录样品发出的荧光信号,并将其转换为数字信号。
仪器会通过对信号进行定量和分析,得到样品中目标物质的含量和性质信息。
常见的分析参数有荧光强度、荧光光谱、荧光寿命等。
总结起来,免疫荧光分析仪用于检测目标物质的原理是通过特异性的抗体与目标物质结合,并利用标记的抗体的荧光信号来测定目标物质的含量。
该原理结合了免疫学的特异性识别和荧光技术的灵敏性、准确性,为科研和临床提供了一种快速、准确、灵敏的分析方法。
免疫荧光分析仪在肿瘤标志物检测、感染病原体检测、疾病诊断、药物筛选等领域具有广泛的应用前景。
仪器免疫知识点总结第一节仪器免疫学概述仪器免疫学是指利用现代科学技术手段,对免疫学的相关研究进行检测和分析的一门学科。
它涉及到疾病的诊断、治疗和预防等方面,是临床免疫学的重要分支。
随着科学技术的不断发展,仪器免疫学在临床医学领域的应用也越来越广泛。
仪器免疫学主要包括免疫分析仪器的种类、原理和应用。
通过这些仪器,可以对疾病的发生和发展进行准确的检测和诊断,为临床医学提供了重要的依据。
本文将对仪器免疫学的相关知识点进行总结和分析。
第二节免疫分析仪器的种类1. 酶联免疫吸附分析仪(ELISA)ELISA是一种常用的检测方法,可用于检测各种生物分子,包括蛋白质、抗体等。
它的原理是将被检测物与特异性抗体结合,然后用酶标记的二抗或底物进行检测,最后通过酶反应产生可测的信号。
ELISA方法简单、灵敏,广泛应用于临床医学、生物学和生物医学等领域。
2. 免疫荧光分析仪免疫荧光分析仪是一种利用荧光标记的抗体对细胞或组织中特定蛋白质或抗原进行检测的仪器。
它的原理是利用激光或其他光源激发样品中的荧光标记物,然后测量其发光强度,从而确定被检测物的存在与否。
免疫荧光分析仪在临床诊断、生物学研究和药物开发等领域有着广泛的应用。
3. 流式细胞仪流式细胞仪是一种用于检测和分析细胞的仪器,通过检测细胞的荧光信号、散射信号等信息,可以对细胞的数量、大小、形态、表面分子表达等进行快速、精确的分析。
流式细胞仪在免疫学研究、临床诊断、药物筛选等领域有着重要的应用价值。
4. 免疫印迹仪免疫印迹仪是一种通过检测、分析被检测物与特定抗体的结合情况,来确定被检测物的存在与否的仪器。
它的原理是将被检测物与特异性抗体结合后,用荧光标记的二抗进行检测,最终通过荧光成像确定被检测物的存在与否。
免疫印迹仪在蛋白质定量、抗体检测、病毒筛查等方面有着重要的应用。
第三节仪器免疫学的原理1. 抗体与抗原的结合仪器免疫学的原理之一是抗体与抗原的结合反应。
在免疫分析过程中,抗体与特定抗原结合后形成抗原-抗体复合物,这种复合物对应用光学、荧光等技术进行检测和分析,从而确定被检测物的存在与否。
免疫分析技术和相关仪器4.1.酶免疫分析仪4.1.1酶免疫分析技术的分类酶免疫分析(enzyme immunoassay,EIA) 是目前临床应用最多的一类免疫分析技术,可分为非均相(或异相)酶免疫测定和均相酶免疫测定两种方法。
均相酶免疫分析法(homogeneous enzyme immunoassay,HEI)均相酶免疫分析主要有酶扩大免疫测定技术和克隆酶供体免疫测定两种方法。
非均相酶免疫分析法(heterogeneous enzyme immunoassay)常用的酶免疫分析法多为非均相法,又可分为液相酶免疫法和固相酶免疫法两种,以后者最常用,称为酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。
ELISA是临床上最常用的免疫分析方法,目前常用的酶免疫分析仪都是基于ELISA技术,称为酶免疫分析仪。
4.1.2酶免疫分析仪的类型、工作原理及基本结构根据仪器结构和自动化程度, 针对固相支持物的不同(如微孔板、试管、小珠、磁微粒等)作为吸附免疫试剂的载体,因而设计成不同的酶免疫分析仪,其基本工作原理就是分光光度法,在光电比色计或分光光度计的基础上根据ELISA技术的特点而设计。
包括:微孔板固相酶免疫测定仪器国际上微孔板式ELISA使用的载体为96孔板,采用直接对微板孔测定吸光度(A)的比色计。
(1) 酶标仪酶标仪也称为ELISA测读仪(ELISA reader),有单通道和多通道两种类型。
自动型多通道酶标仪有多个光束和多个光电检测器,检测速度快。
如8通道的仪器,设有8条光束(或8个光源)、8个检测器和8个放大器。
多通道酶标仪的检测速度较快。
酶标仪的工作原理与主要结构和光电比色计几乎完全相同(见图16-1)。
既可以使用和分光光度计相同的单色器,也可以使用干涉滤光片来获单色光,此时将滤光片置于微孔板的前、后的效果是一样的。
图16-1 酶标仪工作原理酶标仪的工作原理和光路与普通光电比色计的不同之处在于(见图16-2):比色液的容器不是比色皿,而是用塑料微孔板;酶标仪以垂直光束通过微孔板中的待测液;酶标仪通常使用光密度OD来表示吸光度。
现在大部分的酶标仪还加上了判读系统和软件操作分析系统等。
图16-2 酶标仪光路系统简图(2) 半自动微孔板式ELISA分析仪半自动微孔板式ELISA分析仪在酶标仪的基础上再配置加液器、温育器、洗板机和测读仪等分别组成。
测定中需由手工将微孔板移至下一步骤的仪器中进行。
洗板机要求洗涤后固相表面非特异性物质洗涤干净,吸液后每孔中残留的液量极小。
较精密的洗板机有可调节的定时、洗涤液定量及振荡微孔板的功能。
(3) 全自动微孔板式ELISA分析仪自动化酶免疫分析系统由加样系统、温育系统、洗板系统、判读系统、机械臂系统、液路动力系统、软件控制系统等组成,这些系统既独立又紧密联系。
全自动微孔板式ELISA分析仪用在大批量标本的检测中,不但提高了工作效率,而且测定的精密度亦得到改善。
微孔板式ELISA仪器均为开放式的,即适用于所有微板式ELISA试剂。
ELISA检测结果的精密度主要取决于试剂的质量。
全自动ELISA仪器本身的精密度一般在3%左右。
应用优质试剂测定结果的精密度,定量测定可达到7%以下;常用的定性测定为感染性疾病抗原、抗体的检测,精密度在10%左右。
(4)管式固相酶免疫测定仪应用管式固相载体的ELISA分析仪器不多,在我国应用的有:① 1990年德国推出的全自动管式ELISA分析系统和配套试剂。
试剂包括用链霉亲和素包被的聚苯乙烯管、生物素结合的抗原或抗体,辣根过氧化物酶标记的抗体和显色底物ABTS。
测定中标准曲线可使用2星期,每次测定只需一点定标。
测定的精密度CV在3%左右。
测定项目齐全,包括激素、肿瘤标志、心肌标志和感染性疾病的抗原、抗体等。
② 法国生产的是一种特殊形状的管式全自动ELISA的分析仪,配套使用一个特别的“试剂条”(reagent strip)。
(5)微粒固相酶免疫测定仪美国生产自动酶免疫分析仪应用聚苯乙烯微粒(颗粒直径0.47μm)作为固相,特异抗体或抗原包被在微粒上。
第一次抗原抗体反应后,将反应液通过特制的玻璃纤维膜,聚苯乙烯微粒吸附在玻璃纤维膜上,液体则通过膜滤出。
以后的反应在膜上进行,用过滤方式洗涤。
标记酶为碱性磷酸酶,底物为4-甲基伞酮磷酸酶,反应后进行荧光测定。
其后生产的作药物测定的荧光偏振分析仪与一体多项目全自动免疫分析仪也在检验实验室广泛应用。
(6)磁微粒固相酶免疫测定仪磁微粒可用磁铁吸引与液相分离,是免疫测定中较为理想的固相载体,较早应用磁微粒作为酶免疫测定固相的是瑞士出品的分析系统,由分光光度测读仪、磁铁板和试剂3部分组成。
试剂包括抗异硫氰酸荧光素(FITC)抗体,特异抗体或抗原包被的磁微粒(颗粒直径1μm),FITC结合的特异抗体或抗原,碱性磷酸酶标记的特异抗体或抗原及底物酚肽(phenolphthalein)磷酸酯。
其应用的抗FITC-抗体是与亲和素-生物素原理相同的间接包被系统,反应模式与电化学发光免疫测定亦相似。
反应在试管中进行,基本上用手工操作。
反应结束后将试管架放在磁铁板上,磁微粒被磁铁吸引至管底,完成固相与液相的分离。
酶作用后反应液呈粉红色。
4.1.3 酶免疫分析仪的性能评价和维护保养评价指标和方法(1)滤光片波长精度检查及其峰值测定(2)灵敏度和准确度灵敏度准确度(3)通道差与孔间差检测通道差检测孔间差的测量(4)零点飘移(5)精密度评价(6)线性测定(7)双波长评价(8)全自动酶免分析仪的主要技术参数应达到如下要求:可随机安排项目检测,每板上可同时做8个相同条件的项目检测。
可用加样针或Tip头加样;加样速度应>700个/h;加样体积为:用针时2μl~300μl,用Tip头时10μl ~300μl,精度均为1μl可调;加样精度为:用针时CV<1%,用Tip头时CV<2%。
试剂加样速度应2800孔/h;加样体积2μl~300μl ,精度为lμl 可调;加样精度为100μl 时,CV<2%。
有液面感应装置。
标本架为可移动架,可同时放置92管标本。
标本架中心为12个可移动的试剂架,并有8个稀释液架。
有标本识别的条码阅读器,温育系统有可控温在200C ~400C的平台加热器,温度设置误差在±0.50C内,有>4个加热孵育板位,轨道式振荡,每个板位独立控温,互不干扰。
洗板机液残量控制在2μl 以内。
滤光片吸光度范围为0~3.0D。
酶免疫分析仪的维护酶免疫分析仪维护的重点是在光学部分,防止滤光片霉变。
应定期检测校正,保持其良好的工作性能。
4.1.4 酶免疫分析仪的临床应用1.病原体及其抗体的检测2.各种免疫球蛋白和细胞因子、补体等3.肿瘤标志物4.多种激素5.药物和毒品4.2发光免疫分析仪发光免疫技术根据示踪物检测的不同而分为荧光免疫测定、化学发光免疫测定及电化学发光免疫测定三大类。
化学发光免疫根据标记物的不同,有化学发光免疫分析、微粒子化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和生物发光免疫分析等分析方法。
现临床以前三者较为常用。
本节主要介绍目前国内临床应用较多的化学发光免疫分析仪和电化学发光免疫分析仪。
4.2.1发光免疫分析的种类和基本原理4.2.1.1 发光免疫分析的基本种类根据标记物的不同有下列几种分析方法:1.化学发光免疫分析其标记物为氨基酰肼类及其衍生物如5—氢基邻苯二甲酰肼(鲁米诺)等。
2.化学发光酶免疫分析先用辣根过氧化物酶标记抗原或抗体,在反应终点时再用鲁米诺测定发光强度。
3.微粒子化学发光免疫分析其标记物为二氧乙烷磷酸酯等。
4.生物发光免疫分析荧光素标记抗原或抗体,直接或间接参加发光反应。
5.电化学发光免疫分析所采用的发光试剂标记物为三氯联吡啶钉[Ru(bpy)3]2++N羟基琥珀酰胺酯。
此种方法较常用。
4.2.1.2 发光免疫分析基本测定方法根据发光反应检测方式的不同可分为下列主要的测定方法。
1.液相法免疫反应在液相中进行,反应后经离心或分离措施后,再进行测定发光强度。
所用分离方法包括葡聚糖包被的活性炭末、SephadexG—25层析柱、第二抗体等。
2.固相法将抗原抗体复合物结合在固相载体(如聚苯乙烯管)或分离介质上(如磁性微粒球、纤维素、聚丙烯酰胺微球等),再进行测定发光强度,此法较常用。
试验原理与固相RIA和ELISA方法基本相同。
3.均相法如同均相酶免疫测定一样,在免疫反应后,不需要经过离心或分离步骤,即可直接进行发光强度检测。
其原理是某些化学发光标记物(如甾体类激素的发光标记物)与抗体或蛋白结合后,就能增强发光反应的发光强度。
4.2.2 发光免疫分析仪的种类、工作原理和基本结构重点介绍全自动化学发光免疫分析系统、全自动微粒子化学发光免疫分析系统和全自动电化学发光免疫分析仪。
4.2.2.1 全自动化学发光免疫分析系统全自动化学发光免疫分析系统采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统。
在90年代初首次应用后又不断改进,将微机与主机分开,软件程序加以改进,使操作更灵活,试剂贮存时间长,结果准确可靠,自动化程度高等优点。
1.仪器测定原理该类分析技术有两种方法,小分子抗原物质测定采用的是竞争法,而大分子抗原物质测定采用的是夹心法。
仪器所用固相磁粉颗粒极微小,其直径仅1.0μm。
这样大大增加了包被表面积,增加抗原或抗体的吸附量,使反应速度加快,也使清洗和分离更简便。
其反应基本过程有: (1)竞争反应 (2)夹心法2.仪器组成一般由主机和微机两部分组成。
(1)主机部分:是仪器的运行反应测定部分,包括原材料配备部分、液路部分、机械传动部分、光路检测部分。
材料配备部分包括反应杯、样品盘、试剂盘、纯净水、清洗液、废水在机器上的贮存和处理装置;液路部分包括过滤器、密封圈、真空泵、管道、样品及试剂探针等;机械传动部分包括传感器、运输轨道等;电路部分包括光电倍增管和线路控制板。
(2)微机系统是仪器的核心部分,是指挥控制中心。
其功能有程控操作、自动监测、指示判断、数据处理、故障诊断等,并配有光盘。
主机还配有预留接口,可通过外部贮存器自动处理其它数据,并摇控操作,用于实验室自动化延伸发展。
4.2.2.2 全自动微粒子化学发光免疫分析系统全自动微粒子化学发光免疫分析系统采用微粒子化学发光技术对人体内的微量成分以及药物浓度进行定量测定。
系统具有高度的特异性、高度的敏感性和高度的稳定性等特点。
1.分析方法及过程采用磁性微粒作为固相载体,以碱性磷酸酶作为发光剂,固相载体的应用扩大了测定的范围。
以竞争法、夹心法和抗体检测等免疫测定方法为基础:(1)抗原抗体结合将包被单克隆抗体的顺磁性微粒和待测标本加入反应管中,标本中的抗原与微粒子表面的抗体结合,再加入碱性磷酸酶标记的抗体,经温育后形成固相包被抗体—抗原—酶标记抗体复合物;(2)洗涤、分离 (3)加入底物 (AMPPD)发光剂,AMPPD被结合在磁性粒子表面的碱性磷酸酶的催化下迅速去磷酸基因,生成不稳定的中介体AMPD,AMPD很快分解,从高能激发态回到低能量的稳定态,同时发射出光子,从标准曲线上计算出待测抗原的浓度。