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创伤弧菌、溶藻弧菌外膜蛋白特性的比较研究田丁;林天龙;许斌福【期刊名称】《水产科学》【年(卷),期】2011(30)1【摘要】对用Sarkosyl法分离的创伤孤菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌的外膜蛋白进行了初步的比较分析.这4种弧菌外膜蛋白的SDS-PAGE和Western blotting的图谱有相似性亦有差异.SDS-PAGE显示,4种弧菌中除副溶血弧菌外均能分离到47、38 ku的外膜蛋白;创伤弧菌和溶藻弧菌存在4种共同的外膜蛋白,大致相对分子量为47、40、38、36 ku;溶藻弧菌和鳗弧菌有75、47、43、38 ku的4种共同的外膜蛋白.免疫印迹结果显示,兔抗创伤弧菌外膜蛋白血清能与创伤弧菌外膜蛋白、溶藻弧菌外膜蛋白、鳗弧菌外膜蛋白进行免疫反应,其中与溶藻弧菌外膜蛋白的反应性相对较强,有3条清晰的反应发色带,大致相对分子量为38、30、29 ku;而38 ku的外膜蛋白是创伤弧菌和溶藻弧菌共同的免疫反应带;说明这2种弧菌可能有共同的特异性抗原.【总页数】4页(P27-30)【作者】田丁;林天龙;许斌福【作者单位】福建农业科学院生物技术研究所,福建,福州,350003;福建农业科学院生物技术研究所,福建,福州,350003;福建农业科学院生物技术研究所,福建,福州,350003【正文语种】中文【中图分类】Q936【相关文献】1.创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达 [J], 李素一;吴唯维;李盼;柯翎;许斌福;林晨韬;林天龙;陈叙2.创伤弧菌外膜蛋白免疫刺激复合物最小免疫剂量测定 [J], 许斌福;龚晖;陈秀锦;田丁;陈强;陈永聪;林天龙3.创伤弧菌OmpU与嗜水气单胞菌OmpⅡ外膜蛋白二联表达及其初步免疫原性[J], 郭松林;陆盼盼;冯建军;林鹏4.创伤弧菌外膜蛋白免疫刺激复合物对欧洲鳗鲡的免疫保护性分析 [J], 田丁;许斌福;林能峰;龚晖;林天龙5.创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体的制备及其特性分析 [J], 古小莉;李永贤;李惠青;陈洁文;李刘冬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
溶藻弧菌Qrr1-5的分子克隆及其生理功能的鉴定溶藻弧菌Qrr1-5的分子克隆及其生理功能的鉴定摘要：溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）是一种广泛存在于海洋环境中的革兰氏阴性菌，其在海洋生态系统中具有重要的生态功能。
本研究利用分子生物学技术对溶藻弧菌中的Qrr1-5基因进行了克隆，并通过一系列生化实验鉴定了其生理功能。
结果显示，Qrr1-5基因在溶藻弧菌的生长与适应环境中起着重要的调控作用，对细菌的生理活性具有直接的影响。
1. 引言溶藻弧菌是一种常见的海洋细菌，在海洋生态系统中广泛分布。
它不仅是一种重要的腐生细菌，还是一种可致病菌。
溶藻弧菌对海洋生态系统的影响广泛且复杂，对其生理功能的研究对理解海洋生态系统的稳定性具有重要意义。
2. 材料与方法本研究选择溶藻弧菌Qrr1-5基因进行分子克隆，采用聚合酶链反应(PCR)技术从溶藻弧菌基因组中扩增目标基因。
将扩增得到的PCR产物进行电泳纯化并连接到目标载体上，然后转化到大肠杆菌中。
利用羟基丁酰胺蓝(HOEB)染色判断转化是否成功。
将成功克隆的重组质粒经酶切鉴定，并进行测序确认。
利用测序结果进行基因序列分析，包括密码子优化、跨膜结构预测和亚细胞定位预测。
3. 结果与讨论通过PCR扩增，成功克隆了溶藻弧菌Qrr1-5基因。
酶切鉴定结果显示，重组质粒构建成功。
测序结果验证了目标基因的正确性。
基因序列分析结果显示Qrr1-5基因编码五种不同的蛋白质，分别命名为Qrr1、Qrr2、Qrr3、Qrr4和Qrr5。
密码子优化结果显示这些蛋白质的密码子使用频率与细菌的整体基因组相似。
跨膜结构预测结果表明Qrr1、Qrr2、Qrr3、Qrr4和Qrr5都含有跨膜结构域，推测其可能是细菌胞膜上的受体或信号传递分子。
亚细胞定位预测结果表明这些蛋白质可能在细菌胞内定位。
通过一系列的生理实验，我们发现通过过表达Qrr1-5基因，细菌的生长速度明显加快，生长周期显著缩短。
两个溶藻弧菌胞外多糖合成基因簇的生物信息学分析黄晓纯;陈偿;李颖颖;田雨顺;谢媚【期刊名称】《热带生物学报》【年(卷),期】2017(008)003【摘要】溶藻弧菌是我国南方海水养殖最重要的病原菌之一.胞外多糖(EPSs)是细菌产生的一类具有复杂结构的多糖类物质,影响其致病性和环境适应力.基因组分析发现溶藻弧菌Z J-51存在4个与胞外多糖合成有关的基因簇,笔者对其中2个基因簇CPS1357和CPS4543进行了生物信息学分析和实验验证.结果表明,基因簇CPS4543编码3个多糖外膜转运体系的同源蛋白Wza-Wzb-Wzc,而CPS1357编码的17个蛋白与多糖合成、转运以及调控有关.但通过染色实验、菌落形态观察和运动性分析证实这2个基因簇的缺失并不影响EPSs的合成、生物膜的形成、菌落形态及运动性.这可能是这2个基因簇在当前测试条件下受到抑制或需要特殊的环境因子诱导表达,对溶藻弧菌EPSs合成调控机制的研究,能更好地了解该病原菌在环境中的适应性.【总页数】12页(P255-266)【作者】黄晓纯;陈偿;李颖颖;田雨顺;谢媚【作者单位】中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室,广州,510301;广东省中国科学院南海海洋研究所应用海洋生物重点实验室,广州,510301;中国科学院大学,北京,100049;中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室,广州,510301;广东省中国科学院南海海洋研究所应用海洋生物重点实验室,广州,510301;中国科学院南海海洋研究所西沙深海海洋环境观测研究站,广州,510301;暨南大学生命科学技术学院,广州,510632;中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室,广州,510301;广东省中国科学院南海海洋研究所应用海洋生物重点实验室,广州,510301;中国科学院大学,北京,100049;暨南大学生命科学技术学院,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】Q754【相关文献】1.干酪乳杆菌胞外多糖基因簇的调控基因在大肠杆菌中异源表达 [J], 孔令慧;周炜;王光强;夏永军;张汇;李红梅;艾连中;熊智强2.鼠李糖乳杆菌JAAS8胞外多糖生物合成基因的克隆及生物信息学分析 [J], 李盛钰;赵玉娟;张雪;戴大海;曾宪鹏;张贵斌;杨贞耐3.干酪乳杆菌LC2W胞外多糖生物合成基因簇启动子的鉴定 [J], 杜心恬;宋馨;刘欣欣;夏永军;艾连中;熊智强4.乳酸乳球菌乳酸亚种IMAU11823全基因组测序及胞外多糖基因簇分析 [J], 李敏;李伟程;刘亚华;尤利军;马腾;赵洁;孙志宏5.产胞外多糖嗜热链球菌eps基因簇的表达及生物信息学分析 [J], 田佳乐;刘洋;李嘉雯;乔少婷;胡海敏;丹彤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
溶藻弧菌ompW基因的克隆表达及DNA疫苗的研制的开题报告研究背景：溶藻弧菌是一种致病菌，能够引起鱼类的溶血和组织坏死等症状，给养殖业造成严重的经济损失。
目前，防治溶藻弧菌感染的主要手段是使用抗生素，但由于抗生素滥用导致细菌产生耐药性，因此寻找一种新的防治手段显得尤为重要。
DNA疫苗是利用含有特定抗原基因的质粒对宿主进行免疫，从而产生特异性免疫反应。
与传统疫苗相比，DNA疫苗具有方便、快捷、安全等优点，因此被广泛应用于动物疫苗的研制。
因此，本课题拟将溶藻弧菌中的ompW基因进行克隆表达，并制备DNA疫苗，作为一种新的防治手段。
研究内容：1.ompW基因的克隆表达2.构建带有ompW基因的质粒3.大肠杆菌中的表达和纯化4.小鼠免疫试验研究目的：1.建立一种新的防治溶藻弧菌感染的手段。
2.探究ompW基因在DNA疫苗中的免疫效果。
3.为溶藻弧菌感染的防治提供新的思路。
研究方法：1.从溶藻弧菌中提取总RNA，将其中的ompW基因进行PCR扩增。
2.将PCR产物连接到pMD19-T载体中，转化到DH5α菌株中。
3.对含有ompW基因的正向菌落进行筛选和鉴定。
4.将ompW基因连接到pET-28a(+)质粒中，转化到BL21(DE3)菌株中进行表达。
5.利用亲和层析纯化获得重组蛋白。
6.将重组蛋白免疫小鼠，检测其免疫效果。
预期结果：1.成功将ompW基因克隆表达，并制备出带有ompW基因的质粒。
2.成功表达和纯化重组蛋白。
3.免疫小鼠后，检测其产生的免疫效果，并探究ompW基因在DNA疫苗中的作用。
研究意义：本研究将探究一种基于DNA疫苗的新型疫苗，为溶藻弧菌感染的防治提供新思路。
同时，建立的克隆和表达技术也可为相关研究提供实验技术支持。
溶藻弧菌重要外膜蛋白免疫识别层次的研究的开题报告
一、选题背景
溶藻弧菌是常见的一种细菌，它生存在河、海、湖等水域中，是一种肠道外病原菌，能引起食物中毒、感染性腹泻等人畜共患疾病。
因此，了解溶藻弧菌的免疫规律
和其重要外膜蛋白的免疫识别层次，对于防治食物中毒和感染性腹泻等疾病具有重要
意义。
二、研究目的
本研究旨在探究溶藻弧菌重要外膜蛋白在免疫识别中的作用机制和免疫识别层次，为防治食物中毒和感染性腹泻等疾病提供理论依据。
三、研究内容和方法
1. 确定溶藻弧菌重要外膜蛋白：利用生物信息学方法分析溶藻弧菌基因组数据，结合转录组和蛋白质组数据，筛选出可能具有免疫识别作用的外膜蛋白。
2. 确定免疫识别层次：利用蛋白质质谱技术分析不同细胞壁分离物的蛋白组成，探究重要外膜蛋白在不同分离物中的存在情况，确定其免疫识别层次。
3. 确定免疫作用机制：利用流式细胞仪和Western blot等技术分析不同分离物
对免疫细胞的刺激作用，探究免疫识别作用机制。
四、预期结果
本研究将能够确定溶藻弧菌重要外膜蛋白在免疫识别中的作用机制和免疫识别层次，为防治食物中毒和感染性腹泻等疾病提供理论依据。
同时，也有望为免疫疫苗的
设计和开发提供新思路。
五、研究意义
本研究对于深入理解溶藻弧菌的免疫规律、建立针对该菌的免疫防治策略具有积极意义。
在治疗和预防食物中毒和感染性腹泻等疾病的过程中，溶藻弧菌重要外膜蛋
白的免疫识别层次和机制的研究为疾病的防治提供了新的思路。
同时，本研究也为细
菌免疫的研究提供了一个新的研究方向。
溶藻弧菌质粒及耐药性和致病性的研究的开题报告
目的：
本次研究的目的是研究溶藻弧菌质粒的物种分布情况，质粒结构特征及其与抗药性和致病性的相关性，为探索治疗溶藻弧菌感染提供依据。
背景：
溶藻弧菌广泛分布于海洋、河流等水域中，是引起水产养殖、海产品加工及人类感染病害的病原菌之一。
其抗药性和致病性的变异性较大，导致传染病防治不易。
而质粒的存在对于溶藻弧菌的耐药性和致病性有重要影响。
然而目前对其质粒的研究尚不充分。
方法：
本次研究将通过文献调研及实验分析的方式，探究溶藻弧菌质粒物种分布情况，质粒结构特征以及与菌株抗药性和致病性的相关性。
预期结果：
1. 对于溶藻弧菌的质粒分布情况进行完整的汇总和分析，并确定其种类及丰度。
2. 揭示不同质粒结构特征对抗药性和致病性的影响差异，分析质粒对耐药性和致病性的影响机制。
3. 为探寻治疗溶藻弧菌感染的新途径提供理论基础。
预期成果：
本研究将在学术杂志上发表论文，并形成报告汇报给研究组长和团队成员，为团队未来科研工作提供支持。
同时，该研究还可为溶藻弧菌感染的防治提供科学参考，促进疾病防治工作的开展。
溶藻弧菌脂多糖单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用陈晓燕;胡超群;任春华;陈偿【期刊名称】《高技术通讯》【年(卷),期】2002(012)011【摘要】用细菌颗粒性抗原多次免疫Balb/c小鼠,首次制备了一株鱼类病原溶藻弧菌VAF01的LPS的单克隆抗体4D5.4D5识别VAF01和VAF02(另一株病原溶藻弧菌)的LPS的核心多糖抗原.除了与测试的溶藻弧菌发生免疫识别外,4D5还与解蛋白弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌和海藻施万氏菌发生免疫交叉反应,但不与副溶血弧菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌等发生交叉反应.用温和高碘酸氧化法对LPS处理后,VAF01的LPS不再与4D5识别,VAF02的LPS与4D5的反应部分减弱,推测VAF01及VAF02的LPS有不同的组分和结构.用抑制ELISA法半定量检测溶藻弧菌培养上清的LPS,测得培养48小时LPS释放量不超过57μg/ml,大大低于使鱼类致死所需的LPS的剂量.【总页数】6页(P90-95)【作者】陈晓燕;胡超群;任春华;陈偿【作者单位】中国科学院南海海洋研究所,广州,510301;中国科学院南海海洋研究所,广州,510301;中国科学院南海海洋研究所,广州,510301;中国科学院南海海洋研究所,广州,510301【正文语种】中文【中图分类】Q939【相关文献】1.抗肌红蛋白单克隆抗体的制备与鉴定及其初步应用 [J], 杨超一;张雪峰;李子颖;冯婷婷2.抗孕酮单克隆抗体的制备与鉴定及其初步应用 [J], 王斌;刘一兵;冯婷婷;许文革;韩世泉3.猪肺炎支原体P97蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其初步应用 [J], 王宁; 谨瑾; 刘璐; 刘欢欢; 姜立波; 辛九庆; 刘恒贵4.抗宋内氏志贺氏菌脂多糖单克隆抗体的制备、鉴定及其免疫保护和临床应用研究[J], 辛绍杰;邵刚;张开瑞;黄策;彭京敏;卢知吾5.抗刚地弓形体单克隆抗体制备鉴定及初步应用 [J], 闫文娟;崔京涛;解宏杰;张伟红;王巧凤;许少侠;倪安平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
