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金银花中绿原酸成份的提取方法分析研究陈茜【摘要】目的对金银花中绿原酸的提取方法进行分析研究.方法针对绿原酸的性质,设计了纯乙醇提取、50％乙醇提取、水提取与超声波提取方法对比实验、醇提法与超声波提取方法对比实验,并对每种提取方法的优缺点进行了分析.结果50％的乙醇水溶液比纯乙醇提取效果好.与传统的醇提取法相比较,超声波法提取绿原酸的提取效果更好.研究亦表明,增加乙醇的浓度,提取绿原酸的浓度会增加,但是当绿原酸浓度到达最高峰后,随着乙醇浓度的增加,绿原酸的含量却呈降低趋势.传统醇提法乙醇的最佳浓度是70％,超声波醇提法乙醇的最佳浓度是60％.结论与水提法相比较,醇提法提取效果较好,绿原酸的提取效率也较高,加入超声波后提取效率变得更高,提取物绿原酸的含量也会增加.【期刊名称】《中国中医药现代远程教育》【年(卷),期】2018(016)005【总页数】3页(P88-90)【关键词】金银花;绿原酸;超声波;乙醇提取;中药化学【作者】陈茜【作者单位】锦州市妇婴医院中药局,辽宁锦州121000【正文语种】中文金银花为常用中药，具有清热解毒，保肝利胆、凉风散热，抗病毒等功能[1]。
近年来研究表明，金银花还具有抗人类免疫缺陷病毒、抗肿瘤的功效，具有广阔的临床应用前景。
金银花的主要成分包括绿原酸、肌醇、木犀草素、异绿原酸以及三萜皂苷等，其中，绿原酸是金银花的抗菌有效成分，一般常用绿原酸的含量高低来评价金银花质量的好坏[2]。
绿原酸是一种有机酸，同时含有羧基和邻二酚羟基，易溶于醇溶液、丙酮和水等溶剂。
当前，从金银花当中提取出绿原酸的常用提取方法包括传统的水提法、乙醇提取法、酶提取法等。
本文将对绿原酸的常用提取方法进行实验和分析总结，并根据绿原酸的性质，设计出了水提取、纯乙醇提取、50%乙醇提取、超声波提取方法与醇提法对比实验、水提法与超声波提取方法对比实验，对每种提取方法的优缺点进行了分析。
1 材料与方法1.1 仪器和试药电子天平、烧杯若干、量筒、锥形瓶、漏斗、超声波发生器（郑州予华仪器制造有限公司）、离心机（江苏天瑞仪器股份有限公司）、高效液相色谱仪（上海仪电分析仪器有限公司）。
超声回流法提取金银花中绿原酸最佳工艺条件探究一、超声回流法提取原理超声波是指频率高于20kHz的声波，其在传播过程中会产生超声空化效应，使液体中产生剧烈的振动和破碎作用，从而破坏细胞壁和细胞膜，有利于药物成分的释放和提取。
而超声回流法是在超声波的作用下，通过热能和物质的迁移，加快提取物质的速率和提取量，是一种集超声波和传统回流提取方法于一体的新型提取技术。
超声回流法具有提取效率高、作用时间短、温度均匀、操作简便等优点，因而受到了广泛的关注和应用。
二、金银花中绿原酸的提取方法目前，金银花中绿原酸的提取方法主要包括传统煎煮法、浸提法、超声波提取法等。
而超声波提取法又包括了超声波波浸提取法、超声波辅助提取法、超声回流提取法等。
超声回流法是目前提取金银花中绿原酸的一种较为先进的方法，其操作简便、提取效率高、对活性成分的保护性好。
三、影响超声回流提取绿原酸的因素（一）溶剂种类在超声回流提取过程中，溶剂的选择是影响提取效果的重要因素之一。
传统的金银花提取工艺中，一般选用95%乙醇、80%乙醇、水、乙醇-水混合溶剂等。
不同的溶剂对金银花中绿原酸的提取效果具有显著的影响。
合理选择溶剂种类对超声回流提取绿原酸具有重要意义。
（二）料液比料液比是指单位质量药材与溶剂的比值，是影响超声回流提取效果的关键操作条件之一。
适当的料液比可以有效提高提取效率，而过高或过低的料液比则会影响提取效果。
合理控制料液比对超声回流提取绿原酸的影响至关重要。
（三）提取温度提取温度是影响超声回流提取效果的重要因素之一。
在超声波的作用下，提取温度会对药材中的活性成分释放产生一定影响，过高或者过低的提取温度都会影响提取效果。
合理控制提取温度，对超声回流提取绿原酸的工艺条件具有重要意义。
（四）超声功率（一）实验材料与仪器实验材料：金银花实验仪器：超声波提取仪（二）实验步骤1. 将金银花粉碎成适当颗粒度，并且进行粉碎得到的金银花颗粒入提取仪；2. 选择适当溶剂，加入提取仪中，使得金银花颗粒完全浸没；3. 将提取仪置于超声波提取仪中，设置不同的料液比、提取温度、超声功率等条件，进行提取实验；4. 在提取结束后，用滤纸过滤提取液，将药液收集，并进行绿原酸的浓缩、分离和测定。
第5期刘金磊，等:金银花中绿原酸提取工艺研究-5 -金银花中绿原酸提取工艺研究刘金磊，邓皮凯,邓仕英（长江大学工程技术学院，湖北荆州434020）摘要:绿原酸作为金银花中的主要 成分,具有高 抗氧化、抗病毒、保肝利胆等功效，在医化工和食 有广泛的应用。
金银花为原料， 醇提法 ，探讨了 、、料液比、 、 浓及 pH 值 素对绿原酸 影响， 了 金银花中绿原酸的最：以70%的乙醇，料比为1 : 25,控制pH 值为6,60 < , 60 min 。
关键词：金银花；绿原酸;提中图分类号:TQ460.7文献标识码：A 文章编号：1008-021X （ 2021） 05-0005-02金银花作 见的植物，具有清热解毒,疏散风 功效,广泛用于中药制剂、抗病毒、降血脂等。
其中最主要的有效 成分为绿原酸，是 抗氧化剂,是重要 质，具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗氧化等功效,在临床 中有重要作用。
近年来，从金银花中 绿原酸受到广泛关注”勺。
，绿原酸方法主要有：酶 法、超声波法、水醇 !法*4*。
王 [5]方 金银花中绿原酸，探讨了最 工艺；[6] 水热法对绿原酸进， 响分析法优化了 。
通过醇提法,对金银花中的绿原酸 ，探了 素对绿原酸影响， 过程中，影响 量 素 了分析。
1实验部分15实验材料与仪器金银花，无水乙醇（AR ）、甲醇（AR ）、丙酮（AR ）、 酸 （AR ）、氢氧化纳（AR ）、绿原酸 （98%）、723分光光度计、DZTW -电子 、 、真空泵、 瓶、 烧瓶璃仪器。
15实验过程1.2.1 标准曲线的绘制6 mg 绿原酸，加 量80%的乙醇 解后，定容到50 mL 容量瓶的刻度线，静 备用。
用移 管分别量取 1.0,2.0,3.0,4.0,55） mL 的母 于 25 mL 的容量瓶中，用 80%乙醇 定容至刻度线，测光度， 328 nm , 测吸光值及 浓度绘制绿原酸 曲线， 方程。
1.2.2绿原酸的提取回 法⑴, 金银花粉末2.5000 g ,用25 mL 的乙醇 回 ，控制 、 、 pH 值、料比、 体积分数。
金银花中绿原酸提取方法的比较和优化研究引言金银花（学名：L oni c er aj ap on ic aT hun b.）是一种常见的传统药用植物，被广泛应用于中药领域。
其中，绿原酸（C hl or og en ic A ci d，简称C GA）作为一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种药理作用，备受关注。
然而，目前对金银花中绿原酸的提取方法仍存在一定的局限性。
本文旨在通过比较不同提取方法，并对优化方案进行研究，以提高绿原酸的提取效率和质量。
1.传统提取方法的比较1.1水提法水提法是传统的金银花提取方法之一，其操作简便，成本较低。
该方法通过水溶液与金银花中的目标成分发生物理或化学作用，将绿原酸溶解并提取出来。
然而，水的极性较小，限制了其对绿原酸的溶解能力，导致提取效果不尽如人意。
1.2乙醇提法乙醇提法是一种常用的金银花提取方法，通过乙醇与金银花中的目标成分发生物理或化学作用，可以实现较好的提取效果。
乙醇作为一种中极性溶剂，能够更好地溶解绿原酸，但同时也会带来一定的环境和安全问题。
2.新兴提取方法的研究2.1超声波辅助提取法超声波辅助提取法是近年来新兴的金银花提取方法，利用超声波在提取体系中的振动效应，加速提取过程。
该方法具有速度快、效率高、提取温度低等优点，对于绿原酸等目标成分的提取有着很好的效果。
2.2超临界流体提取法超临界流体提取法是一种基于超临界流体萃取原理的提取方法，通过调节温度和压力，将溶剂处于超临界状态，提高其液相中的溶解度，从而实现对绿原酸等目标成分的高效提取。
该方法能够实现对溶剂和环境的绿色化，受到越来越多的重视。
3.提取方法的优化研究3.1原料预处理优化金银花的原料预处理对提取效果和产品质量有着重要的影响。
通过优化原料的处理方式，如清洗、研磨等，可以有效提高绿原酸的提取率和纯度。
3.2溶剂选择和比例优化溶剂的选择和比例对提取效果有着直接的影响。
根据绿原酸的特性和提取溶剂的溶解度，选择合适的溶剂，并优化其比例，可以进一步提高提取效率和产品纯度。
┃2009.2（下）┃首都医药 CAPITAL MEDICINE53摘要：目的 探讨不同炮制方法对金银花中绿原酸含量的影响。
方法 采用HPLC法测定金银花不同炮制品中绿原酸的含量。
结果 绿原酸的含量顺序为阴干品>蒸晒品>生晒品。
结论 金银花蒸晒或生品晒干后绿原酸含量降低。
关键词 金银花；炮制品；绿原酸；HPLC 法金银花即忍冬花，为忍冬科忍冬属植物的干燥花蕾，具有清热解毒、凉散风热的作用。
金银花中的主要有效成分是绿原酸和异绿原酸等，其有效成分在很多方面有着显著的药理作用。
但金银花药材中绿原酸含量极不稳定，易受多种内外因素的影响而发生变化。
不同加工炮制方法可直接影响金银花中绿原酸等成分的含量。
如蒸晒品绿原酸和异绿原酸含量比生晒品高，阴干法含绿原酸最高，生品晒干法含量最低。
本文采用HPLC法测定金银花不同炮制品中绿原酸的含量，为金银花饮片炮制工艺的优化及质量控制提供科学依据。
1 仪器与试药 仪器 DIONEX SUMMIT高效液相色谱仪(P680HPLC Pump ASI-100自动进样器，UVD170u检测器)。
金银花样品（山东省平邑县供销社提供）。
绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号0753—200611)；高效液相用乙腈；其他化学试剂均为色谱纯或分析纯。
2 样品的制备按《中华人民共和国药典》(2005年版一部)标准[1]，分别采用阴干法、蒸晒法、生品晒干法制备阴干金银花、蒸晒金银花和生晒金银花。
3 方法与结果3.1 供试品溶液的制备 取各样品粉末(过4号筛)约l g ，精密称定，加石油醚(60～90℃)25ml，加热回流30min，滤过，药渣挥去石油醚，加50％甲醇50ml，密塞，摇匀，称定重量，超声处理(功率250W，频率40 kHz)20min，取出，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精取续滤液25ml，蒸干，残渣加蒸馏水l0ml溶解，用0.5mol •L 盐酸调pH值至2～3，用丙酮一乙酸乙酯(1：2.5)振摇提取5次，每次l5ml，回收溶剂，残渣加50％甲醇溶解并定容至10ml棕色容量瓶中，摇匀，即得(每毫升相当于原药材0.05g)。
硅胶G 薄层板上,展开,扫描,测定各斑点的峰面积积分值。
以点样量为横坐标,斑点峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线。
异秦皮啶在0105～0125Λg 呈现良好的线性关系,回归方程为:Y =10618X -2181,r =01995。
214 稳定性试验:于硅胶G 薄层板上,点异秦皮啶
对照品溶液3ΛL ,展开,晾干,每隔5m in 扫描一次,
持续1h ,峰面积的R SD =1132,(n =11),结果基本不变,稳定性良好。
215 精密度测定:取供试品溶液,于硅胶G 板上交叉点供试液5ΛL 各5份,对照品3ΛL 各4份,扫描测定,计算结果供试品中异秦皮啶含量的R SD =2188◊,(n =5)。
216 重复性测定:取同法制备的供试品溶液,按211测定条件,于5块硅胶G 薄层板上,分别交叉点供试品溶液5ΛL 5份,对照品溶液3
ΛL 4份,进行薄层荧光扫描测定,计算供试品中异秦啶的含量,结果其R SD =2127,(n =5)。
217 回收率测定:精密量取供试品溶液5mL ,异秦皮啶对照品溶液(0153725m g mL )0125mL 于分液漏斗中,加水稀释至20mL ,氯仿萃取2次(20,15mL ),合并,回收溶剂,氯仿定容至5mL ,摇匀,作为加样混合液。
取本品10mL 同法制备样品液。
在同一块硅胶G 薄层板上,相距2c m 分别点混合液3ΛL ,样品液3ΛL ,对照品溶液3ΛL 各2份,展开,取出,晾干,扫描,用外标法测定,5次加样回收率测定
结果为10018%,R SD =2106%。
取刺五加阴性液10mL ,加异秦皮啶(0153725m g mL )015ΛL ,同法制备空白回收液,在硅胶G 薄层板上点3ΛL ,同上法操作展开、
扫描,5次空白回收率的平均值为99185%,R SD =2135。
218 样品中异秦皮啶的测定:取10批样品,按211、212项下测定方法进行样品制备及荧光扫描测
定,结果见表1。
表1 养血升白口服液中异秦皮啶的含量(n =3)
批号
异秦皮啶含量(m g g )
批号
异秦皮啶含量(m g g )
0205
161
0.514175
0208146081413602131160816117050217808201770508
182
0825
182
3 讨论
311 按供试品溶液制备方法,氯仿萃取(20mL ,15mL ×5)6次,分别回收溶剂,定容,进行薄层荧光扫
描测定,结果前2次异秦皮啶的含量占总量的97142%,故用氯仿萃取2次即可。
312 本法方法灵敏,精密度高,为控制本品质量提
供了一个可靠的方法。
参考文献:
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不同提取工艺对金银花中绿原酸提取率的影响
李志华,许让翻Ξ
(解放军第146医院,山东临沂 276001)
绿原酸为众多中药材(如:金银花、茵陈、杜仲等)中抗菌、消炎利胆的主要有效成份[1]。
绿原酸的提取方法较多,目前主要有水提醇沉法、水提石灰乳沉淀法、醇提铅盐沉淀法、聚酰胺柱层析法、超滤法等[2]。
本实验比较水提醇沉法及超滤法对金银花中绿原酸提取率的影响,以确定最佳提取方法。
1 实验材料
金银花药材为忍冬科植物忍冬的花蕾(山东省平邑县流峪镇产),绿原酸对照品(中国药品生物制
品检定所提供),L C 210A T vp 高效液相色谱仪(日本岛津公司),SPD 210A vp 紫外检测器(日本岛津公司)。
中空纤维超滤器分子计流量(河北大城水净化设备厂)。
2 实验方法
211 样品的制备:取金银花1kg ,加水8L ,煎煮2
次,每次1h ,滤过,滤液浓缩至2L ,静置,滤过,备用。
21111 超滤法:取提取液1L ,超滤,收集超滤液,
・417・中草药 Ch inese T raditi onal and H erbal D rugs 2002年第33卷第8期
Ξ收稿日期:2001211208
浓缩至500mL ,静置,滤过,备用。
21112 水提醇沉法:分别取提取液200mL ,共3份,浓缩至50mL ,分别加乙醇,使含醇量达70%,75%,80%,静置48h ,滤过,回收乙醇,加水至100mL ,静置,滤过,备用。
212 总固体测定:分别精密吸取样品溶液10mL (相当于含金银花10g ),置干燥至恒重的蒸发皿中,
水浴蒸干,105℃干燥3h 至恒重,取出,置干燥器中,冷却30m in ,迅速称重,计算。
213 色谱条件与系统适用性试验:色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈21%醋酸2水(45∶255∶200)为流动相;流速:017mL m in ;检测波长:324nm 。
214 对照品溶液及供试品制备:精密称取绿原酸5m g ,加甲醇溶解并加流动相稀释得50Λg mL 的对
照品溶液。
精密取样品液10mL ,置水浴蒸干,用甲醇溶解,转移至50mL 量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。
3 结果
分别取对照品溶液及样品溶液20ΛL ,进样,依法测定。
结果见表1。
可见,直观看绿原酸的提取量,水提醇沉法75%乙醇沉淀>80%乙醇沉淀>85%乙醇沉淀,从
含量看,超滤法>75%乙醇沉淀>80%乙醇沉淀>85%乙醇沉淀。
因此,以上水提醇沉法提取,超滤法精制较好。
表1 不同提取方法中绿原酸及总固体含量比较
方法绿原酸(m g mL )
总固体(m g mL )含量(%)
超滤法
19.
755.
6635.3985%乙醇沉淀6.392.886.7880%乙醇沉淀21.288.6923.9075%乙醇沉淀
22.
2
95.
16
23.
33
4 讨论
乙醇沉淀的浓度越高,绿原酸含量越低,可能是由于醇沉过程中伴随吸附和包夹致使绿原酸有不同
程度的损失所致[3]。
文献报道[4]醇沉法对绿原酸的保留明显比超滤法低,如金银花注射液中绿原酸含量超滤法为33181m g mL ,而醇沉法为30187m g mL 。
与本研究不尽一致,可能是由于样品量少,中空纤维吸附所致。
参考文献:
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[J ]1中成药,1996,18(3):5161
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517・中草药 Ch inese T raditi onal and H erbal D rugs 2002年第33卷第8期。
