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金银花中绿原酸成份的提取方法分析研究陈茜【摘要】目的对金银花中绿原酸的提取方法进行分析研究.方法针对绿原酸的性质,设计了纯乙醇提取、50％乙醇提取、水提取与超声波提取方法对比实验、醇提法与超声波提取方法对比实验,并对每种提取方法的优缺点进行了分析.结果50％的乙醇水溶液比纯乙醇提取效果好.与传统的醇提取法相比较,超声波法提取绿原酸的提取效果更好.研究亦表明,增加乙醇的浓度,提取绿原酸的浓度会增加,但是当绿原酸浓度到达最高峰后,随着乙醇浓度的增加,绿原酸的含量却呈降低趋势.传统醇提法乙醇的最佳浓度是70％,超声波醇提法乙醇的最佳浓度是60％.结论与水提法相比较,醇提法提取效果较好,绿原酸的提取效率也较高,加入超声波后提取效率变得更高,提取物绿原酸的含量也会增加.【期刊名称】《中国中医药现代远程教育》【年(卷),期】2018(016)005【总页数】3页(P88-90)【关键词】金银花;绿原酸;超声波;乙醇提取;中药化学【作者】陈茜【作者单位】锦州市妇婴医院中药局,辽宁锦州121000【正文语种】中文金银花为常用中药，具有清热解毒，保肝利胆、凉风散热，抗病毒等功能[1]。
近年来研究表明，金银花还具有抗人类免疫缺陷病毒、抗肿瘤的功效，具有广阔的临床应用前景。
金银花的主要成分包括绿原酸、肌醇、木犀草素、异绿原酸以及三萜皂苷等，其中，绿原酸是金银花的抗菌有效成分，一般常用绿原酸的含量高低来评价金银花质量的好坏[2]。
绿原酸是一种有机酸，同时含有羧基和邻二酚羟基，易溶于醇溶液、丙酮和水等溶剂。
当前，从金银花当中提取出绿原酸的常用提取方法包括传统的水提法、乙醇提取法、酶提取法等。
本文将对绿原酸的常用提取方法进行实验和分析总结，并根据绿原酸的性质，设计出了水提取、纯乙醇提取、50%乙醇提取、超声波提取方法与醇提法对比实验、水提法与超声波提取方法对比实验，对每种提取方法的优缺点进行了分析。
1 材料与方法1.1 仪器和试药电子天平、烧杯若干、量筒、锥形瓶、漏斗、超声波发生器（郑州予华仪器制造有限公司）、离心机（江苏天瑞仪器股份有限公司）、高效液相色谱仪（上海仪电分析仪器有限公司）。
超声回流法提取金银花中绿原酸最佳工艺条件探究一、超声回流法提取原理超声波是指频率高于20kHz的声波，其在传播过程中会产生超声空化效应，使液体中产生剧烈的振动和破碎作用，从而破坏细胞壁和细胞膜，有利于药物成分的释放和提取。
而超声回流法是在超声波的作用下，通过热能和物质的迁移，加快提取物质的速率和提取量，是一种集超声波和传统回流提取方法于一体的新型提取技术。
超声回流法具有提取效率高、作用时间短、温度均匀、操作简便等优点，因而受到了广泛的关注和应用。
二、金银花中绿原酸的提取方法目前，金银花中绿原酸的提取方法主要包括传统煎煮法、浸提法、超声波提取法等。
而超声波提取法又包括了超声波波浸提取法、超声波辅助提取法、超声回流提取法等。
超声回流法是目前提取金银花中绿原酸的一种较为先进的方法，其操作简便、提取效率高、对活性成分的保护性好。
三、影响超声回流提取绿原酸的因素（一）溶剂种类在超声回流提取过程中，溶剂的选择是影响提取效果的重要因素之一。
传统的金银花提取工艺中，一般选用95%乙醇、80%乙醇、水、乙醇-水混合溶剂等。
不同的溶剂对金银花中绿原酸的提取效果具有显著的影响。
合理选择溶剂种类对超声回流提取绿原酸具有重要意义。
（二）料液比料液比是指单位质量药材与溶剂的比值，是影响超声回流提取效果的关键操作条件之一。
适当的料液比可以有效提高提取效率，而过高或过低的料液比则会影响提取效果。
合理控制料液比对超声回流提取绿原酸的影响至关重要。
（三）提取温度提取温度是影响超声回流提取效果的重要因素之一。
在超声波的作用下，提取温度会对药材中的活性成分释放产生一定影响，过高或者过低的提取温度都会影响提取效果。
合理控制提取温度，对超声回流提取绿原酸的工艺条件具有重要意义。
（四）超声功率（一）实验材料与仪器实验材料：金银花实验仪器：超声波提取仪（二）实验步骤1. 将金银花粉碎成适当颗粒度，并且进行粉碎得到的金银花颗粒入提取仪；2. 选择适当溶剂，加入提取仪中，使得金银花颗粒完全浸没；3. 将提取仪置于超声波提取仪中，设置不同的料液比、提取温度、超声功率等条件，进行提取实验；4. 在提取结束后，用滤纸过滤提取液，将药液收集，并进行绿原酸的浓缩、分离和测定。
第5期刘金磊，等:金银花中绿原酸提取工艺研究-5 -金银花中绿原酸提取工艺研究刘金磊，邓皮凯,邓仕英（长江大学工程技术学院，湖北荆州434020）摘要:绿原酸作为金银花中的主要 成分,具有高 抗氧化、抗病毒、保肝利胆等功效，在医化工和食 有广泛的应用。
金银花为原料， 醇提法 ，探讨了 、、料液比、 、 浓及 pH 值 素对绿原酸 影响， 了 金银花中绿原酸的最：以70%的乙醇，料比为1 : 25,控制pH 值为6,60 < , 60 min 。
关键词：金银花；绿原酸;提中图分类号:TQ460.7文献标识码：A 文章编号：1008-021X （ 2021） 05-0005-02金银花作 见的植物，具有清热解毒,疏散风 功效,广泛用于中药制剂、抗病毒、降血脂等。
其中最主要的有效 成分为绿原酸，是 抗氧化剂,是重要 质，具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗氧化等功效,在临床 中有重要作用。
近年来，从金银花中 绿原酸受到广泛关注”勺。
，绿原酸方法主要有：酶 法、超声波法、水醇 !法*4*。
王 [5]方 金银花中绿原酸，探讨了最 工艺；[6] 水热法对绿原酸进， 响分析法优化了 。
通过醇提法,对金银花中的绿原酸 ，探了 素对绿原酸影响， 过程中，影响 量 素 了分析。
1实验部分15实验材料与仪器金银花，无水乙醇（AR ）、甲醇（AR ）、丙酮（AR ）、 酸 （AR ）、氢氧化纳（AR ）、绿原酸 （98%）、723分光光度计、DZTW -电子 、 、真空泵、 瓶、 烧瓶璃仪器。
15实验过程1.2.1 标准曲线的绘制6 mg 绿原酸，加 量80%的乙醇 解后，定容到50 mL 容量瓶的刻度线，静 备用。
用移 管分别量取 1.0,2.0,3.0,4.0,55） mL 的母 于 25 mL 的容量瓶中，用 80%乙醇 定容至刻度线，测光度， 328 nm , 测吸光值及 浓度绘制绿原酸 曲线， 方程。
1.2.2绿原酸的提取回 法⑴, 金银花粉末2.5000 g ,用25 mL 的乙醇 回 ，控制 、 、 pH 值、料比、 体积分数。
金银花中绿原酸提取方法的比较和优化研究引言金银花（学名：L oni c er aj ap on ic aT hun b.）是一种常见的传统药用植物，被广泛应用于中药领域。
其中，绿原酸（C hl or og en ic A ci d，简称C GA）作为一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种药理作用，备受关注。
然而，目前对金银花中绿原酸的提取方法仍存在一定的局限性。
本文旨在通过比较不同提取方法，并对优化方案进行研究，以提高绿原酸的提取效率和质量。
1.传统提取方法的比较1.1水提法水提法是传统的金银花提取方法之一，其操作简便，成本较低。
该方法通过水溶液与金银花中的目标成分发生物理或化学作用，将绿原酸溶解并提取出来。
然而，水的极性较小，限制了其对绿原酸的溶解能力，导致提取效果不尽如人意。
1.2乙醇提法乙醇提法是一种常用的金银花提取方法，通过乙醇与金银花中的目标成分发生物理或化学作用，可以实现较好的提取效果。
乙醇作为一种中极性溶剂，能够更好地溶解绿原酸，但同时也会带来一定的环境和安全问题。
2.新兴提取方法的研究2.1超声波辅助提取法超声波辅助提取法是近年来新兴的金银花提取方法，利用超声波在提取体系中的振动效应，加速提取过程。
该方法具有速度快、效率高、提取温度低等优点，对于绿原酸等目标成分的提取有着很好的效果。
2.2超临界流体提取法超临界流体提取法是一种基于超临界流体萃取原理的提取方法，通过调节温度和压力，将溶剂处于超临界状态，提高其液相中的溶解度，从而实现对绿原酸等目标成分的高效提取。
该方法能够实现对溶剂和环境的绿色化，受到越来越多的重视。
3.提取方法的优化研究3.1原料预处理优化金银花的原料预处理对提取效果和产品质量有着重要的影响。
通过优化原料的处理方式，如清洗、研磨等，可以有效提高绿原酸的提取率和纯度。
3.2溶剂选择和比例优化溶剂的选择和比例对提取效果有着直接的影响。
根据绿原酸的特性和提取溶剂的溶解度，选择合适的溶剂，并优化其比例，可以进一步提高提取效率和产品纯度。
┃2009.2（下）┃首都医药 CAPITAL MEDICINE53摘要：目的 探讨不同炮制方法对金银花中绿原酸含量的影响。
方法 采用HPLC法测定金银花不同炮制品中绿原酸的含量。
结果 绿原酸的含量顺序为阴干品>蒸晒品>生晒品。
结论 金银花蒸晒或生品晒干后绿原酸含量降低。
关键词 金银花；炮制品；绿原酸；HPLC 法金银花即忍冬花，为忍冬科忍冬属植物的干燥花蕾，具有清热解毒、凉散风热的作用。
金银花中的主要有效成分是绿原酸和异绿原酸等，其有效成分在很多方面有着显著的药理作用。
但金银花药材中绿原酸含量极不稳定，易受多种内外因素的影响而发生变化。
不同加工炮制方法可直接影响金银花中绿原酸等成分的含量。
如蒸晒品绿原酸和异绿原酸含量比生晒品高，阴干法含绿原酸最高，生品晒干法含量最低。
本文采用HPLC法测定金银花不同炮制品中绿原酸的含量，为金银花饮片炮制工艺的优化及质量控制提供科学依据。
1 仪器与试药 仪器 DIONEX SUMMIT高效液相色谱仪(P680HPLC Pump ASI-100自动进样器，UVD170u检测器)。
金银花样品（山东省平邑县供销社提供）。
绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号0753—200611)；高效液相用乙腈；其他化学试剂均为色谱纯或分析纯。
2 样品的制备按《中华人民共和国药典》(2005年版一部)标准[1]，分别采用阴干法、蒸晒法、生品晒干法制备阴干金银花、蒸晒金银花和生晒金银花。
3 方法与结果3.1 供试品溶液的制备 取各样品粉末(过4号筛)约l g ，精密称定，加石油醚(60～90℃)25ml，加热回流30min，滤过，药渣挥去石油醚，加50％甲醇50ml，密塞，摇匀，称定重量，超声处理(功率250W，频率40 kHz)20min，取出，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精取续滤液25ml，蒸干，残渣加蒸馏水l0ml溶解，用0.5mol •L 盐酸调pH值至2～3，用丙酮一乙酸乙酯(1：2.5)振摇提取5次，每次l5ml，回收溶剂，残渣加50％甲醇溶解并定容至10ml棕色容量瓶中，摇匀，即得(每毫升相当于原药材0.05g)。
天然产物研究与开发 NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEV ELOPMEN T 2003 Vo1.15 No.2 收稿日期:2002209215 修回日期:2002211222金银花不同提取方法的绿原酸比较研究林 丹 赵国玲 刘佳佳(中南大学化学化工学院 湖南长沙 410083)摘 要 本文采用了水提法、水提醇沉法、酶解法、醇提法对金银花进行提取,并用紫外分光光度法来测定提取物中绿原酸的含量,依此来比较各种方法的优劣。
由实验结果可得:以绿原酸作为指标来考察各种方法的优劣,尤以醇提法较好,绿原酸的含量可达到15128%;以提取物的得率作为指标来考察,以酶解法为最好,提取物的得率可达到37191%。
关键词 金银花;绿原酸;酶解;提取工艺 金银花为忍冬科(Caprifoliaceae )忍冬属(L onicera )忍冬L onicera japonica Thunb.植物的干燥花蕾[1],为中医常用药,具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能。
其主要活性成分为绿原酸,别的药性成分还有黄酮类、挥发油等。
几千年传统经验及近代药理实验和临床应用都证明金银花对于多种病菌有较强的抗菌作用和较好的治疗效果。
金银花中绿原酸的提取方法[1,2]有传统的水提法、乙醇回流法、水提醇沉法、酶解法,本文对这几种方法进行了研究,采用紫外分光光度法[3,4]来测定提取产物中绿原酸的含量,依此来比较各种方法的优劣。
1 实验部分111 实验仪器 紫外分光光度计(756型)、恒温水浴锅(上海申生科技公司)、分析天平、旋转蒸发仪R 2201(上海申生科技公司)、SHB 23型循环水真空泵(郑州杜甫仪器厂)。
112 实验试剂 金银花为隆回县小沙江产,绿原酸标准品为中国药品生物制品检测所提供,纤维素酶为上海丽珠东风生物有限公司生产。
其他所用试剂均为分析纯。
113 实验方法[1,2,5]水提法:取适量干燥并粉碎的金银花粉末在80℃的水浴下加热3次,每次1h ,将提取液在60℃下减压浓缩至5ml 左右,浓缩液稀释,测其紫外吸收。
金银花中绿原酸一步提取法及绿原酸抗菌活性屈景年1, 莫运春1, 刘梦琴1, 李 荣2(1.衡阳师范学院化学与材料科学系,湖南衡阳421008,2南华大学附属第二医院,湖南衡阳421001)摘 要:以乙酸乙酯和0.05mol L HCl 组成的混合溶液作萃取剂,从金银花中一步提取绿原酸,并研究了乙酸乙酯的体积分数、温度、浸取时间对提取绿原酸的影响和绿原酸的抗菌活性,实验结果:提取绿原酸最佳实验条件是:温度65°C ,乙酸乙酯的体积分数0.8,浸取时间3h 。
提取物与金银花质量比为3.21%,绿原酸的质量分数86.3%;同时测得绿原酸抗金黄色葡萄球菌的活性比抗大肠杆菌强。
关键词:金银花;乙酸乙酯;提取;绿原酸;抗菌活性中图分类号:R 284.2 文献标识码:A 文章编号:0367-6358(2005)03-167-03Extraction of Chlorogenic Acid from Flos Lonicerae by One -step -methodand Antimicrobial Abilities of Chlorogenic AcidQU Jing -nian 1, MO Yun -chun 1, LIU Meng -qin 1, LI Rong2(1De partment of Chemist ry Heng Yang Teache r 's C oll ege ,Hunan Hengyang 421008,C hina ;2The Se cond Hospital Affiliated of Nan Hua Uni vers ity ,Hunan Hengyang 421001,China )A bstract :Chlor ogenic acid was extracted from flos lonicerae by using one -step -method .The solvent was a mixed solutioin of ethyl acetate and 0.05mol LHCl .The effect of the volume fraction of ethyl acetate ,tempeatur e and time on the extraction of chlorogenic acid was studied .The antimicr obial abilities of chlorogenic acid were also studied .The optimum conditions are :the volume fraction of ethyl acetate ,0.8;the temperature ,65°C ;and time ,3h .The mass ratioof the pr oduct to flos lonicerae is 3.21%,and the purity of chlorogenic acid is 86.3%.The antimicrobial abilities of chlorogenic acid against the staphylococcus aur ous is better than that against Esc heric hia c oli .Key words :flos lonicerae ;ethy acetate ;extraction ;chlorogenic acid ;antimicrobial abilities收稿日期:2004-03-12;修回日期:2004-03-25基金项目:湖南省教育厅自然科学基金资助项目(03C091).作者简介:屈景年(1952～),男,副教授,主要从事物理化学教学和生物热化学研究. 金银花(Flos lonicerae )是我国民间常用中草药,其味甘性寒,具有清热解毒功能[1]。
检"#测Jia n yan J ia n ee金银花中绿原酸的不同提取方法比较李泽昱，孟小玲,马秀琴，李欠!(甘肃农业大学农学院，甘肃兰州730070)摘要：绿原酸是金银花的主要有效成分，也是其质量控制指标。
本研究采用煎煮法和乙醇回流提取法分别提取金银花中的绿原酸，运用紫外分光光度法测定其浓度，以绿原酸得率来比较两种提取方法的优劣。
结果表明：乙醇回流提取法较好,绿原酸得率为7.2%，煎煮法则是2.6%。
关键词:金银花;绿原酸;回流提取法；煎煮法中图分类号：R284.2文献标识码:B文章编号：1003-6997(2019)16-0048-03金银花为忍冬科多年生半常绿缠绕性木质藤本植物忍冬(Lonieera japonica Thunb)的干燥花蕾或带初开的花，呈小棒状，多为黄白色，表面有柔毛,气清香。
《中华人民共和国药典［2015版)金银花项下仅有忍冬一种，把红腺忍冬(L.hypoglauca Miq.)、灰毡毛忍冬(L.macranthoides Hand.-Mass.)等单列为山银花⑴。
忍冬在我国分布范围广泛，除新疆、青海、黑龙江等地外，大部分地区均能自然生长。
忍冬生长具有很强的适应性，对气候和土壤选择性不严格，生长适宜温度在20-30F，常生长于山坡灌木丛或疏林中，在海拔1500m的地方也可栽培。
金银花的主产地为河南和山东，是河南的地道药材，又称为“密银花”叫金银花中含有挥发油类3)、黄酮类⑴、有机酸类BI-10V三祜类B11C等多种化学成分。
现代研究证明，金银花具有解热抗炎、抑菌抗病毒、抗氧化、抗过敏、利胆保肝、降血糖、血脂和止血等多种药理作用〔11-哄绿原酸是金银花的主要有效成分之一，具有多种药理作用。
雷玲等问研究表明:绿原酸具有一定的抗内毒素作用。
徐跃成㈤对常见的几种致病菌进行绿原酸抑菌试验，结果表明:绿原酸对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有明显的抑菌作用。
在研究金银花抗氧化作用时，发现绿原酸能清除羟自由基和DPPH 自由基，是起抗氧化作用的主要物质倒。
金银花绿原酸的提取与检测实验报告传统的金银花中有效成分绿原酸的提取工艺大多采用水提取或有机溶剂提取,这些工艺存在提取能耗大、效率低、杂质多、收率少,资源不能得到充分利用等问题。
绿原酸为热敏性物质,温度过高,会造成绿原酸的分解，这就要求提取温度不能过高。
超声波提取作为一种新型的提取技术,在天然产物提取方面得到广泛的应用,具有被提取活性物质不被破坏,提取时间短、提取效率高等优点,特别适合于热敏性物质的提取;微波提取技术具有短时、快速等特性,从而在活性物质成分的萃取中可有效地保护功能成分和风味物质,并能保护有效物质的充分溶出,微波萃取应用于金银花中绿原酸的提取具有选择性高、重现性好、省时节物、节能环保、萃取效率高、被提取成分的生物活性和化学结构不会被破坏等众多优点,近年来,超声波萃取、微波提取技术在工业上提取金银花中绿原酸的应用越来越普遍。
金银花中绿原酸的提取工艺高春荣 胡锦蓉 孙君社(中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083)收稿日期:2002209217作者简介:高春荣,硕士研究生;孙君社,博士,教授,研究方向为生物技术在农产品加工中的应用摘 要 研究了金银花绿原酸的酸醇回流提取工艺及D101大孔吸附树脂金银花提取液除杂工艺。
采用正交试验法,以绿原酸的提取率及提取物中绿原酸的质量分数为考察指标,对乙醇回流提取金银花绿原酸的工艺进行了优化;采用单因素试验法,以纯化物中绿原酸的质量分数为考察指标,对D101大孔吸附树脂金银花提取液除杂工艺进行了筛选。
结果表明:乙醇体积分数70%,乙醇p H 为4,回流时间4h ,回流温度70℃为绿原酸的最佳提取工艺条件;吸附原液金银花质量浓度0125g ・mL -1,p H 为7,流速3mL ・min -1为D101大孔吸附树脂金银花提取液较优除杂工艺条件。
本工艺绿原酸的提取率达85%(与金银花中绿原酸总含量相比)以上,质量分数可达65112%,而且工艺简便,树脂再生容易,提取方法可取。
关键词 金银花;绿原酸;提取工艺中图分类号 R 28412 文章编号 100724333(2003)0420005204 文献标识码 AStudy on extraction proce ss of chlorogenic acid from flo s loniceraeGao Chunrong , Hu Jinrong , Sun J unshe(College of Food Science &Nutritional Engineering ,China Agricultural University ,Beijing 100083,China )Abstract The extraction process of Chlorogenic acid from Flos Lonicerae was studie d.The refluxing method was us e d to extract Chlorogenic acid.D 101macroporous resin was us e d to purify chlorogenic acid as it can a ds orb impurity ef 2fectively.The extracting rate is 85%a bove.The content of Chlorogenic acid is 65112%.The optimum extraction pro 2cess is as follows :the content of alcohol is 70%,the pH of alcohol is 4,the time of refluxing is 4h ,the temp erature of refluxing is 70℃.The p arameter of purification is as follows :the content of raw material me dicine is 0125g p er mL s o 2lution ,the pH of s olution is 7,the velocity of s olution is 3mL ・min-1.K ey words flos lonicerae ;chlorogenic acid ;extraction process 金银花(flos lonicerae )是忍冬科植物忍冬的干燥花蕾,是临床常用的中药材之一。
金银花中绿原酸的提取工艺研究摘要：近年来，社会发展迅速，各行各业的发展也有了提高。
研究了金银花中绿原酸的提取工艺，利用乙醇溶液为提取剂，以不同的提取方式提取金银花中的绿原酸，研究不同因素对金银花中绿原酸提取率的影响。
结果显示，两种提取方式中的回流法提取效果较好。
回流法的最佳提取条件：乙醇体积分数55%，料液比（g∶mL）1∶40，时间60min，温度60℃，绿原酸得率11.0%；超声法的最佳提取条件：乙醇体积分数55%，料液比（g∶mL）1∶40、时间120min、温度60℃，绿原酸得率为6.23%关键词：金银花；绿原酸；提取工艺研究引言金银花为忍冬科植物忍冬（ＬｏｎｉｃｅｒａｊａｐｏｎｉｃａＴｈｕｎｂ．）干燥的花蕾或者初开的花。
研究表明，金银花含有挥发油、有机酸、黄酮类、三萜皂苷和微量元素等成分，具有广谱抗菌、抗炎及解热作用。
作为有机酸主要成分的绿原酸，具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗肿瘤、降血压及兴奋中枢神经系统等多种药理作用，因此绿原酸常被作为金银花质量控制的指标之一。
从金银花中提取绿原酸常用回流提取法、超声波提取法、微波提取法、酶解醇提法等，其中超声提取法提取时间短、提取效率高，但是应用超声提取结合ＨＰＬＣ对金银花中绿原酸含量测定的研究较少，并且研究不够全面。
作者拟在考察影响绿原酸提取率单因素实验的基础上，采用正交设计进一步优化提取工艺，为金银花的综合利用提供依据。
1材料与方法1.1材料与试剂金银花药材，购于黑龙江省药材公司；绿原酸标准品（≥98%），购于上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙腈（色谱纯99.9%），购于美国Tedia公司；无水乙醇（分析纯）、甲醇（色谱纯），购于赛默飞世尔科技（中国）有限公司。
1.2仪器LC-10AT高效液相色谱仪（岛津，日本）；C18色谱柱（岛津，LC-C18150×4.6mm）；HWS24电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）。
1.3方法1.3.1金银花提取液的制备称取0.500g金银花粉末于圆底烧瓶中，加入一定体积分数的乙醇溶液（按照乙醇与水的体积比配制），80℃回流2h，过滤并转移至离心管中，4000r/min离心15min，收集上清液，用乙醇定容至50mL容量瓶；再取4mL，定容至10mL容量瓶，取适量溶液超声、脱气、过膜后，用高效液相色谱测其浓度。
硅胶G 薄层板上,展开,扫描,测定各斑点的峰面积积分值。
以点样量为横坐标,斑点峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线。
异秦皮啶在0105～0125Λg 呈现良好的线性关系,回归方程为:Y =10618X -2181,r =01995。
214 稳定性试验:于硅胶G 薄层板上,点异秦皮啶
对照品溶液3ΛL ,展开,晾干,每隔5m in 扫描一次,
持续1h ,峰面积的R SD =1132,(n =11),结果基本不变,稳定性良好。
215 精密度测定:取供试品溶液,于硅胶G 板上交叉点供试液5ΛL 各5份,对照品3ΛL 各4份,扫描测定,计算结果供试品中异秦皮啶含量的R SD =2188◊,(n =5)。
216 重复性测定:取同法制备的供试品溶液,按211测定条件,于5块硅胶G 薄层板上,分别交叉点供试品溶液5ΛL 5份,对照品溶液3
ΛL 4份,进行薄层荧光扫描测定,计算供试品中异秦啶的含量,结果其R SD =2127,(n =5)。
217 回收率测定:精密量取供试品溶液5mL ,异秦皮啶对照品溶液(0153725m g mL )0125mL 于分液漏斗中,加水稀释至20mL ,氯仿萃取2次(20,15mL ),合并,回收溶剂,氯仿定容至5mL ,摇匀,作为加样混合液。
取本品10mL 同法制备样品液。
在同一块硅胶G 薄层板上,相距2c m 分别点混合液3ΛL ,样品液3ΛL ,对照品溶液3ΛL 各2份,展开,取出,晾干,扫描,用外标法测定,5次加样回收率测定
结果为10018%,R SD =2106%。
取刺五加阴性液10mL ,加异秦皮啶(0153725m g mL )015ΛL ,同法制备空白回收液,在硅胶G 薄层板上点3ΛL ,同上法操作展开、
扫描,5次空白回收率的平均值为99185%,R SD =2135。
218 样品中异秦皮啶的测定:取10批样品,按211、212项下测定方法进行样品制备及荧光扫描测
定,结果见表1。
表1 养血升白口服液中异秦皮啶的含量(n =3)
批号
异秦皮啶含量(m g g )
批号
异秦皮啶含量(m g g )
0205
161
0.514175
0208146081413602131160816117050217808201770508
182
0825
182
3 讨论
311 按供试品溶液制备方法,氯仿萃取(20mL ,15mL ×5)6次,分别回收溶剂,定容,进行薄层荧光扫
描测定,结果前2次异秦皮啶的含量占总量的97142%,故用氯仿萃取2次即可。
312 本法方法灵敏,精密度高,为控制本品质量提
供了一个可靠的方法。
参考文献:
[1] 王浴生1中药药理与应用[M ]1北京:人民卫生出版社,19831[2] 沙世炎,徐礼,严敏加,等1中药有效成分分析法(上册)
[M ]1北京:人民卫生出版社,19801
[3] 赵体慧,邓秀兰,叶玉兰,等1刺五加冲剂中异秦皮素的薄层扫
描[J ]1南京药学院学报,1986,17(1):521
[4] 傅克治1中国刺五加[M ]1哈尔滨:黑龙江人民出版社,19871
不同提取工艺对金银花中绿原酸提取率的影响
李志华,许让翻Ξ
(解放军第146医院,山东临沂 276001)
绿原酸为众多中药材(如:金银花、茵陈、杜仲等)中抗菌、消炎利胆的主要有效成份[1]。
绿原酸的提取方法较多,目前主要有水提醇沉法、水提石灰乳沉淀法、醇提铅盐沉淀法、聚酰胺柱层析法、超滤法等[2]。
本实验比较水提醇沉法及超滤法对金银花中绿原酸提取率的影响,以确定最佳提取方法。
1 实验材料
金银花药材为忍冬科植物忍冬的花蕾(山东省平邑县流峪镇产),绿原酸对照品(中国药品生物制
品检定所提供),L C 210A T vp 高效液相色谱仪(日本岛津公司),SPD 210A vp 紫外检测器(日本岛津公司)。
中空纤维超滤器分子计流量(河北大城水净化设备厂)。
2 实验方法
211 样品的制备:取金银花1kg ,加水8L ,煎煮2
次,每次1h ,滤过,滤液浓缩至2L ,静置,滤过,备用。
21111 超滤法:取提取液1L ,超滤,收集超滤液,
・417・中草药 Ch inese T raditi onal and H erbal D rugs 2002年第33卷第8期
Ξ收稿日期:2001211208
浓缩至500mL ,静置,滤过,备用。
21112 水提醇沉法:分别取提取液200mL ,共3份,浓缩至50mL ,分别加乙醇,使含醇量达70%,75%,80%,静置48h ,滤过,回收乙醇,加水至100mL ,静置,滤过,备用。
212 总固体测定:分别精密吸取样品溶液10mL (相当于含金银花10g ),置干燥至恒重的蒸发皿中,
水浴蒸干,105℃干燥3h 至恒重,取出,置干燥器中,冷却30m in ,迅速称重,计算。
213 色谱条件与系统适用性试验:色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈21%醋酸2水(45∶255∶200)为流动相;流速:017mL m in ;检测波长:324nm 。
214 对照品溶液及供试品制备:精密称取绿原酸5m g ,加甲醇溶解并加流动相稀释得50Λg mL 的对
照品溶液。
精密取样品液10mL ,置水浴蒸干,用甲醇溶解,转移至50mL 量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。
3 结果
分别取对照品溶液及样品溶液20ΛL ,进样,依法测定。
结果见表1。
可见,直观看绿原酸的提取量,水提醇沉法75%乙醇沉淀>80%乙醇沉淀>85%乙醇沉淀,从
含量看,超滤法>75%乙醇沉淀>80%乙醇沉淀>85%乙醇沉淀。
因此,以上水提醇沉法提取,超滤法精制较好。
表1 不同提取方法中绿原酸及总固体含量比较
方法绿原酸(m g mL )
总固体(m g mL )含量(%)
超滤法
19.
755.
6635.3985%乙醇沉淀6.392.886.7880%乙醇沉淀21.288.6923.9075%乙醇沉淀
22.
2
95.
16
23.
33
4 讨论
乙醇沉淀的浓度越高,绿原酸含量越低,可能是由于醇沉过程中伴随吸附和包夹致使绿原酸有不同
程度的损失所致[3]。
文献报道[4]醇沉法对绿原酸的保留明显比超滤法低,如金银花注射液中绿原酸含量超滤法为33181m g mL ,而醇沉法为30187m g mL 。
与本研究不尽一致,可能是由于样品量少,中空纤维吸附所致。
参考文献:
[1] 林启寿1中草药成分化学[M ]1北京:科学出版社,19771[2] 高锦明,张鞍灵,赵晓明,等1绿原酸分布、提取与生物活性研
究综述[J ]1西北林学院学报,1999,14(2):561
[3] 李稳宏,吴 红,李多伟
,等1两种醇沉方式对杜仲水提液中绿
原酸含量的影响[J ]1陕西师范大学学报,1997,25(1):642661[4] 孟根达莱,刘栓娣,青格乐1醇沉工艺对中成药质量的影响
[J ]1中成药,1996,18(3):5161
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