ABI公司 SNPshot试剂盒,中文说明书
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ABI 7500型荧光定量核酸扩增仪作业指导书1.目的:使ABI 7500型核酸扩增荧光定量检测仪能够正确和正常的使用,保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2.范围:ABI 7500型核酸扩增荧光检测仪。
3.性能参数:详见说明书4.程序:4.1.依次打开电脑显示器及电脑主机电源,进入windows XP 界面4.2.打开PCR主机电源4.3.点击桌面7500 software V2.0.6 图标,打开软件4.4.主界面点击SET UP 菜单下ADVANCED SETUP4.4.1.在试验属性界面:选择正确的机器型号,试验类型及试剂类型(探针法/染料法)4.4.2.在plate setup 界面,首先设定试验使用的探针,及样品名称,然后按照事先加样的位置顺序设定样品名称、类型,包括待检样本、阴性对照、阳性对照、阳性标准品、阳性室内质控样本。
4.4.3.在run method界面,编辑与试剂盒提供的温度程序相同的温度程序,包括温度与时间,及循环数4.5.将预先加好的0.2ML样品管按照设定顺序放置到仪器里面,进入到RUN界面,点击绿色START 按钮,弹出保存试验对话框,设定保存后,试验立即开始运行。
界面显示运行倒计时。
运行过程中在amplification plot界面可以查看实时的扩增曲线,在temperature plot界面可以查看实时的温度变化情况。
温度循环结束后试验自动结束。
5.结果分析5.1.在analysis setup里面修改各个探针的baseline与threshold数值,点击绿色analyze图标,软件及完成自动分析。
5.2.在amplification plot界面查看所有样品的扩增曲线。
6.整体曲线的观察,将所有曲线选中进行整体观察。
6.1.观察是否存在污染情况(包括标本污染和试剂污染),特别应注意大量曲线在同一 Ct值出现上涨的情况。
6.2.观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。
ABI公司测序仪的应用, Ph.D.Technical Product Specialistchenyd@提要DNA测序仪应用概况ABI遗传分析仪家族1 4 16 48 96测序仪三大功能测序仪可以用来做什么?Diagram from Celera Genomics线粒体DNA测序MITOMAP: A Human Mitochondrial Genome Database.–Mouse Karyotype ZooWeb-Karyotypes home page Human Karyotype医学测序杂合子检测:发现新突变112006-11-17 |© 2006 Applied Biosystems细菌和真菌鉴定MicroSeq® ID Analysis SoftwareMicroSeq® 500 16S Bacterial Identification Kit MicroSeq® D2 LSU Fungal Identification KitDNA Sequencing of the 16S ribosomal RNA gene Classification of Eubacteria, Yeasts,and Filamentous Fungi Sequence polymorphisms Bacterial category A biothreat agents Food pathogens Same day results122006-11-17 |© 2006 Applied BiosystemsSAGE™ Analysis基因组范围的基因表达图式分析 鉴定转录子(mRNA)132006-11-17 |© 2006 Applied Biosystems基于测序的HLA配型Donor / Recipient compatibility prior to tissue transplantation HLA typing products - distributed directly by Celera Diagnostics for research purposes only.1-866-235-3723/cdx/HLA_TypingReferenced to GENBANK: HLA–C 6p21.3 major histocompatibility complex, class I, C. 142006-11-17 |© 2006 Applied Biosystems功能强大的片段分析• 片段长度多态性• AFLP和T-RFLP• BAC指纹图谱 • 相对荧光定量• LOH和QMPSF• 构象分析扫描突变• SSCP和CSCE• InVivoScribe B细胞和T细胞clonality • TILLING152006-11-17 |© 2006 Applied Biosystems相对荧光定量细胞淋巴瘤(cell lymphomas) 及其他肿瘤中的等位基因丢失 染色体不平衡 部分和全部染色体丢失LOH (Loss of Heterozygosity) P53 17p13.1非遗传的in-vivo LOH162006-11-17 |© 2006 Applied Biosystems寻找新的SNP位点Mutation Profiling - SNP Discovery and Analysis172006-11-17 |© 2006 Applied BiosystemsSNP扫描SNPlex™ Genotyping SystemSNaPShot® Multiplex System SNP Validation Linkage Mapping and Association Studies Pharmacogenomic Research182006-11-17 |© 2006 Applied BiosystemsSSCP突变快速扫描SSCPAmplify region of interest Heat denature in HiDi formamide and NaOHA T A T A TG C G CRapidly chill and electrophoresis under non denaturing conditionsGCWT Wild Type20rfuMUTmobilityMutant© 2006 Applied Biosystems2006-11-17 |SSCP WorkflowPost PCR PurificationSSCP data on ABI 3130 Series植物AFLP®分析AFLP技术原理AFLP工作流程AB公司AFLP相关产品AFLP Data Generated on AB SystemsExpt1:Polymorphic peakCommon peakExperiment 2: AFLP collaboration with U.S. customerCustomer Research Project GoalsGenotypes from AFLP Analysis of Hedysarum LinesHedysarum Variety Identification by AFLP AnalysisHO U5 01 09HO U5 01 18HO U5 01 11HO U5 01 14MicroSeq®细菌鉴定500 bp试剂盒全长基因试剂盒FDA Draft Guidelines分子生物学手段鉴定微生物MicroSeq®Microbial Identification Kit试剂盒组成细菌鉴定策略forwardreverseMicroSeq®工作流程or样品制备特别简单MicroSeq®真菌鉴定真菌鉴定试剂盒rDNA在真菌染色体上的排列测序目标是D2强项:MicroSeq®ID 软件methylSEQr Bisulfite Conversion Kit 甲基化分析重亚硫酸钠转化试剂盒Applied Biosystems Products for Each Step of the WorkflowmethylSEQr™Bisulfite Conversion Kit。
上海笃玛生物科技有限公司本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断植物(Plant)激素脱落酸(ABA)ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被激素脱落酸(ABA)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的激素脱落酸(ABA)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本:请1000x g离心20分钟,取上清即可检测。
4.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、5、10、20、40、80ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
1、测序方法这个是最原始的,也是最简单的(操作简单,工作量不小啊!)一种方法,估计各位都明白,就不再累述了!2、Taqman探针法Taqman探针法可是一种无敌的方法,可用于基因荧光定量分析、甲基化检测、SNP分型、miRNA定量分析等等,差不多只要能用到的分子检测技术都有Taqman的身影。
Taqman探针法SNP分型技术的核心就是特异性的MGB探针技术,已证实的Taqman探针,3·段结合MGB技术,能更好的进行等位基因的区分。
MGB分子结合到DNA螺旋小沟,通过稳定MGB探针/模板联合体提高杂交的检验。
这种超强的稳定性可使短至13个碱基的探针提高错配的辨别力,并为困难多变的序列设计提供更高的灵活性。
所有的MGB探针都包括一个不发荧光的猝灭基团(NFQ),它能真正消除传统猝灭基团产生的背景荧光,提高信噪比,从而提供检测灵敏性。
Taqman探针法还有个好处据说AB公司能提供数以万计的现成探针,只要你付得起钱就可以了,什么可将illumina SNP芯片上的所有SNP位点都检测一遍。
Taqman探针法的缺点就是探针购买太贵,一般他们的试剂盒是1500人份的,价格可以咨询AB公司在国内的总代!1000份左右标本,几个位点用Taqman还是蛮核算的。
3、Beckman SNP genomestream技术Beckman技术的特点就是单碱基延伸法,设计时每个位点共设计3条引物,2条是扩增引物,1条为单碱基延伸引物(这个引物也可理解为探针)。
现在Beckman探针法可做到48重(也就是一次检测48个SNP 位点),引物及探针的设计可以直接提交给Beckman(这点同Taqman,不赚你,赚谁啊!),他们帮你有偿设计啊!Beckman的技术比较适合恰好有12个位点,48个位点检测,假如你的只有几个位点,或者恰巧不是12或48的倍数时,这个就有些不合算了!另外标本量不能太低,Beckman检测采用384板,一两百个样本那就算了吧!4、SNPshotSnaPshot技术平台是Applied Biosystems,ABI公司推出了专为检测SNP 设计的分析软件和试剂盒可对多个SNP 位点同时进行基因分型,也被称为minisequencing 。
Matrix Standard DS-02/3130 and 3100 Series SystemsProduct P/N 4323014Insert P/N 4363121 REV A Printed in USA For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.Dye-labeled oligonucleotides included in the Matrix Standard Set DS-02 [dR110, dR6G, dTAMRA, dROX, and LIZ] are used to generate the "multicomponent matrix" required for the SNaPshot ® Multiplex Kit on the Applied Biosystems 3130 and 3100 Series Systems. The Data Collection software utilizes the multicomponent matrix to automatically correct for the spectral overlap in samples labeled with DS-02 dyes.Matrix standards do not need to be run with every set of sample injections. A set of five matrix standards only needs to be run once in order to generate a matrix file which is then applied to samples run under similar conditions. For more information on the use of matrix standards, refer to the instrument User's Manual or Getting Started Guide.The kit consists of one tube of matrix standard which is sufficient for eight 16-capillary array runs. This tube contains a mixture of DNA fragments of specific sizes, each labeled with a unique fluorescent dye within the DS-02 dye set. The standards are diluted in 1x TE buffer and are stable for one year when stored at 2°C to 8°C. (Do not freeze.)Preparing the Matrix Standard Set DS-02 for the Applied Biosystems 3130 and 3100 Series Systems:WARNING! CHEMICAL HAZARD. Hi-Di™ Formamide. Exposure causes eye, skin, and respiratory tract irritation. It is a possible developmental and birth defect hazard. Read the MSDS, and follow the handling instructions. Wear appropriate protective eyewear, clothing, and gloves.1. Thoroughly mix the contents of the Matrix Standard Set DS-02 tube and spin briefly in a microcentrifuge.2. Prepare the Matrix Standard by combining 5 µL of the tube labeled "Matrix Standard DS-02 for the 3130 and 3100 Series system" supplied in the kit and 195 µL of Hi-Di™ Formamide (P/N 4311320) in a 1.5 mL microcentrifuge tube.3. Mix thoroughly and spin briefly in a microcentrifuge.4. Denature:For convenience, we recommend dispensing the contents of the tube into a 96-well microtiter plate first, and then using a GeneAmp ® PCR System 9600 thermal cycler for denaturation.If a GeneAmp 9600/9700 thermal cycler is available for denaturation, follow steps A and B below.A) Dispense 10 µL of the Matrix Standard / Hi-Di™ Formamide mixture into two columns (16 wells) of a 96-well microtiter plate.B) Cover the plate and denature at 95°C for 5 minutes. Immediately place on ice.ORIf a GeneAmp 9600/9700 thermal cycler is not available, follow steps C and D below.C) Heat the mixture at 95°C for 5 minutes to denature, and immediately place on ice.D) Dispense 10 µL of the denatured mixture into two columns (16 wells) of a 96-well microtiter plate.5. Place the 96-well microtiter plate on the instrument.6. Refer to your User's Manual or Getting Started Guide for instructions on running samples.Note: In the spectral display window on some versions of Data Collection software, the LIZ dye is displayed in a light blue color instead of the orange color used in ABI P RISM GeneScan ® or Gene Mapper™ software. If the LIZ dye is displayed in light blue, the color will not cause any problems with data output or analysis. If you would like to change the color to orange, simply open the "Instrument" menu within the menu bar of the "Run View" window, select "Data Acquisition" and then select "Set Color." The "Edit Dye Display Information" window will automatically open. Click on the fifth dye color tile. Then select an orange color of your choice on the color wheel and click ok.©Copyright 2004. Applied Biosystems All rights reserved. ABI PRISM, Applied Biosystems, GeneScan, LIZ, and SNaPshot are registered trademarks and Gene Mapper, Hi-Di, ROX, and TAMRA aretrademarks of Applera Corporation or its subsidiaries in the U.S. and/or certain other countries.Product Insert 8/Dec/2004。
ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明基因有限公司Gene Company Limited(声明:此说明仅供一般操作参考,未经厂家审核也不代表任何技术承诺,请以原版资料为准)操作步骤:1、打开PCR仪的热盖,插入0.2ml的样品管。
盖好热盖。
2、打开PCR仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟。
3、初始化完成后,显示主菜单:4、点“Browse/New Methods”,进入PCR程序列表:5、可以直接点一个PCR程序,选择“Start Run”运行;点右边的符号,可以选择不同的文件夹。
如要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序:6、添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一段新的程序。
7、修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。
依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。
8、增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤。
9、删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除。
1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下2)点“V eriFlex step”,出现梯度创建窗口:输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定。
注意:相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃!1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下2)点“Auto Delta”,出现渐变模式创建窗口。
点“Staring Cycle”,输入起始循环数;点“Delta Temperature”,输入温度变化值;点“Delta Time”,输入时间变化值。
渐变模式适用于touchdown PCR,可以提高PCR 反应的特异性。
例:输入起始循环数为2,温度变化值为+0.5℃,时间变化值为+5s,则表示从第2个循环开始,每循环一次升温0.5℃,时间增加5s。
sNPSHOT 试剂盒1. 关于试剂盒:一次最多检测10个SNP位点试剂盒包括对照模板和引物的Mix试剂,做对照反应。
2.产品简介需要备的东西:1)SNPshot Multiplex Ready reaction MIX2)模板和引物3)对照的Multiples Control DNA and Primer Mix 只提供对照模板和对照引物,用于做对照反应4)ddNTP 荧光标记颜色组合分三种包装备注:-20℃保存4 软件及其它材料要求1. GeneScan-120 LIZ Size Standard Recommended2. 3700 Data Collection version 1.1 (enabled with 3700 data collection 5-Dye Update File P/N4324208)3. SNP1_POP5 (凝胶)5 自备材料1)Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) 碱性磷酸酶2)PCR纯化试剂盒6 基本流程备注:PCR产物须纯化,0.01 to 0.4 pmol 模板(PCR产物纯化试剂盒)7 对照反应1)对照引物小片段来,片段越小,标记基团在分子量上占得比例就越大,所以与实际片段长度相差越大。
2)对照反应体系,如下表:备注:颠倒混匀,混匀后,迅速置于冰上。
如果常温20分钟以上,会导致背景加深。
3)实验样品多个引物混合后,推荐各引物终浓度0.2u M,注Snapshot MIX 引物设计为反应后,耗尽所有反应中的引物。
推荐各引物初始浓度为0.2u M。
如某一引物浓度特别低或特别高,应调整引物浓度。
在6引物组合中,引物浓度范围,0.05 u M 到1 u M ,是适宜的。
模板浓度一般不需调整。
4)反应体系SNaPshot Multiplex ready Reaction mix 冰上解冻。
注:依据引物及模板体积,适当调整水的体积。
一、原理SNP (Single Nucleotide Polymorphism)即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性(Polymorphism)。
据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个SNP,无论是比较于限制性片段长度多态性(RFLP)分析还是微卫星标记(STR),都要广泛得多。
SNP是我们考察遗传变异的最小单位,据估计,人类的所有群体中大约存在一千万个SNP位点。
一般认为,相邻的SNP s倾向于一起遗传给后代。
于是,我们把位于染色体上某一区域的一组相关联的SNP等位位点称作单体型(haplotype)。
大多数染色体区域只有少数几个常见的单体型(每个具有至少5%的频率),它们代表了一个群体中人与人之间的大部分多态性。
一个染色体区域可以有很多SNP位点,但是我们一旦掌握了这个区域的单体型,就可以只使用少数几个标签SNPs(tagSNP)来进行基因分型,获取大部分的遗传多态模式。
二、样品准备1. DNA抽提①1、取新鲜肌肉组织约100mg,PBS漂洗干净,置于1.5ml离心管中,加入液氮,迅速磨碎。
②加200μl 缓冲液GA,震荡至彻底悬浮。
加入20μl 蛋白酶K(20mg/ml)溶液,混匀③加220μl 缓冲液GB,充分混匀,37℃消化过夜,溶液变清亮。
加220μl 无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。
④将上述一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB 中,(吸附柱放入废液收集管中)12000rpm 离心30 秒,弃掉废液。
⑤加入500μl 去蛋白液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rp m 离心30 秒,弃掉废液。
⑥加入700μl 漂洗液GW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心30 秒,弃掉废液。
加入500μl 漂洗液GW, 12000rpm 离心30 秒,弃掉废液。
将吸附柱CB 放回废液收集管中,12000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液。
前言基因:包含生命遗传信息的DNA片段,人类生命天书的密码。
人类的基因是相对稳定的遗传信息。
人从胚胎开始到生命终结的那一刻,一般情况下基因是不会发生突变的。
但由于当今我们生活环境存在着许多对我们机体造成损害的危险因素,如电磁辐射、食品、噪声、气体污染等;以及自身不正确的生活、行为方式等造成我们基因信息发生了突变,让我们的健康时刻面临危险。
中国健康服务网与上海医药临床研究中心合作,推出了以“基因检测”服务为主体的分子诊断研发检测平台。
它是目前医学科学检测手段中科技含量最高、信息容量最大、疾病判断最超前的一种分子诊断方式。
基因检测不仅为您提供个人的遗传信息,而且为您预警部分疾病发生的风险系数、提供必要的健康指导和健康促进计划。
如不良生活、行为方式的调整,有害因素的规避等。
使您真正意义上对自己的健康、对家庭的幸福负责。
目前通过“基因检测”服务,我们可以了解100多种常见疾病的相关信息,为健康提供科学的指导依据。
目录一、基础知识 (3)1.1基因 (3)1.2疾病易感基因 (5)1.3基因检测 (5)1.4基因检测意义 (6)1.5基因检测适应人群 (7)二、公司产品 (8)2.1分类:单种病系列 (8)2.2产品价格 (11)2.3产品特色 (12)三.常见问题(FAQ) (14)一、基础知识1.1基因基因(Gene)是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。
它通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。
基因位于染色体上,并在染色体上呈线性排列。
基因不仅可以通过复制把遗传信息传递给下一代,还可以使遗传信息得到表达。
人的基因中既有相同的部分,又有不同的部分。
不同的部分决定人与人的区别,即人的多样性。
基因有三个基本特性:基因可自体复制;基因决定性状,即基因通过转录和翻译决定多肽链的氨基酸顺序,从而决定某种酶或蛋白质的性质,而最终表达为某一性状;基因的突变,即基因虽很稳定,但也会发生突变。
肺炎支原体(MP)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)说明书【产品名称】通用名称:肺炎支原体(MP)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)英文名称:PCR-Fluorescence Detection Kit for Mycoplasma Pneumonia【包装规格】32人份/盒【预期用途】本产品用于定性检测痰液或咽拭子中的肺炎支原体核酸。
肺炎支原体()是人类支原体肺炎的病原体,主要经飞沫传染,潜伏期2~3周,支原体肺炎的临床表现和胸部X线检查并不具特征性,单凭临床表现和胸部X线检查无法做出诊断。
若要明确诊断,需要进行病原体的检测。
而病原体核酸检测是目前最为直接的检测手段。
适应症:由肺炎支原体感染引起的肺炎等疾病。
【检验原理】本试剂盒选用肺炎支原体(MP)保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针,该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合,在PCR延伸反应过程中,Taq酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来,使之游离于反应体系中,从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽,即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光,从而实现在全封闭反应体系中对肺炎支原体核酸的自动化检测。
【主要组成成份】注: 不同批号试剂盒中各组份不可以互换。
【储存条件及有效期】试剂-20℃可保存12个月。
【适用仪器】ABI7300、ABI7500荧光PCR扩增仪。
【样本要求】1. 标本:痰液及咽拭子。
2. 采集器:应当选用国家批准生产的一次性使用的咽拭子,拭子应当包括洁净海绵头、PP杆、PP杆与海绵头应连接牢固,经无尘清洗包装。
3. 采集:样本采集具体方法请参考《微生物标本采集手册》一书。
a. 自然咳痰法以晨痰为佳,用力咳出呼吸道深部的痰,痰液直接吐入痰盒中,标本量应大于等于1ml。
b. 咽拭子取痰法用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,转动拭子取出粘液。
4.存放:2-8℃保存,不超过24小时;-20℃下保存,不超过3个月;-70℃下长期保存,但应避免反复冻融。
病毒核酸纯化试剂盒说明书病毒核酸纯化试剂盒Cat. No. 5次样品400200550次制备4002050250次制备4002250核酸纯化柱2 ml离心管蛋白酶K贮存液Carrier RNABuffer VLBuffer WBR(浓缩液)Buffer TE说明书5个5个120 µl40 µl1.5 ml1.5ml0.5 ml1份50个50个1.2 ml400 µl15 ml6.5ml×25 ml1份250个250个1.2 ml×5400 µl×575 ml32 ml×225 ml1份产品储存1.蛋白酶K贮存液和Carrier RNA请置于-20℃贮存。
2.其他试剂与物品如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品贮存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部产品介绍本产品适合从血浆、全血、无细胞体液(包括血浆、血清、尿液、CSF及细胞培养上清)、病毒原液和感染病毒的组织中提取各种病毒RNA或病毒DNA。
用本试剂盒最高可从病毒拷贝数为50copies/ml的体液样品(DNA病毒)中检测到病毒核酸。
与传统的煮沸法提取病毒DNA相比,检测灵敏度可提高10-50倍;与传统Trizol法提取病毒RNA相比,检测灵敏度可提高5-10倍。
被溶解的病毒中的核酸结合到纯化柱上后,Buffer WBR洗涤去除残留在纯化柱上PCR抑制物,然后用Buffer TE洗脱,即可用于PCR或RT-PCR反应。
用户需自备的试剂与物品1.无水乙醇2.1.5ml离心管(推荐选用DNase-free & RNase-free的1.5ml离心管)3.移液器吸头(为避免样品间的污染,请选用含有滤芯的DNase-free & RNase-free移液器吸头)4.一次性手套及防护用品和纸巾5.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)6.水浴锅与旋涡震荡器7.可能需要生理盐水使用前准备1)如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。
sNPSHOT 试剂盒
1. 关于试剂盒:
一次最多检测10个SNP位点
试剂盒包括对照模板和引物的Mix试剂,做对照反应。
2.产品简介
需要备的东西:
1)SNPshot Multiplex Ready reaction MIX
2)模板和引物
3)对照的Multiples Control DNA and Primer Mix 只提供对照模板和对照引物,用于做对照反应
4)ddNTP 荧光标记颜色组合
分三种包装
备注:-20℃保存
4 软件及其它材料要求
1. GeneScan-120 LIZ Size Standard Recommended
2. 3700 Data Collection version 1.1 (enabled with 3700 data collection 5-Dye Update File P/N
4324208)
3. SNP1_POP5 (凝胶)
5 自备材料
1)Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) 碱性磷酸酶
2)PCR纯化试剂盒
6 基本流程
备注:
PCR产物须纯化,0.01 to 0.4 pmol 模板(PCR产物纯化试剂盒)
7 对照反应
1)对照引物
小片段来,片段越小,标记基团在分子量上占得比例就越大,所以与实际片段长度相差越大。
2)对照反应体系,如下表:
备注:颠倒混匀,混匀后,迅速置于冰上。
如果常温20分钟以上,会导致背景加深。
3)实验样品
多个引物混合后,推荐各引物终浓度0.2u M,
注Snapshot MIX 引物设计为反应后,耗尽所有反应中的引物。
推荐各引物初始浓度为0.2u M。
如某一引物浓度特别低或特别高,应调整引物浓度。
在6引物组合中,引物浓度范围,0.05 u M 到1 u M ,是适宜的。
模板浓度一般不需调整。
4)反应体系
SNaPshot Multiplex ready Reaction mix 冰上解冻。
注:依据引物及模板体积,适当调整水的体积。