三种检测方法在结核感染诊断中的比较研究

三种肺结核实验室诊断方法评估发布时间：2023-02-24T03:39:06.796Z 来源：《医师在线》2022年32期作者：赵静2 田敏敏1 邓淑文1 李金方3 赵蓉芬1*[导读] 目的阐明LAMP技术联合痰涂片和培养检测在肺结核确诊诊断的价值，为制定和完善本区肺结核的防控指南提供依据.方法收集送检疑似肺结核患者痰标本563份，进行直接涂片镜检、固体培养和环介导恒温扩增检测（LAMP）检测。

赵静2 田敏敏1 邓淑文1 李金方3 赵蓉芬1*1苏州高新区人民医院检验科江苏苏州 2151292苏州市第五人民医院临床检验中心江苏苏州2151313苏州高新区疾病预防控制中心疾控科江苏苏州215011【摘要】：目的阐明LAMP技术联合痰涂片和培养检测在肺结核确诊诊断的价值，为制定和完善本区肺结核的防控指南提供依据.方法收集送检疑似肺结核患者痰标本563份，进行直接涂片镜检、固体培养和环介导恒温扩增检测（LAMP）检测。

结果检测563份结核门诊送检痰标本中，257份来自临床诊断肺结核病例痰标本，三种检测方法阳性率由高到低依次为：分子检测LAMP阳性率最高（53.7%），培养阳性率次之（47.5%），直接涂片阳性率最低（15.2%）；35例临床诊断肺结核患者三种方法检测同时阳性，占13.6%，培养和LAMP检测同时阳性率64例，最高（24.9%）；306份临床诊断非肺结核病例痰标本，272例三种检测方法检测未检到结核分枝杆菌，实验室检查阴性率占88.9%，假阳性率由高到低分别为LAMP检测5%，培养4.2%，涂片1%。

结论 LAMP（环介导恒温扩增）技术可以作为培养方法的替代技术，帮助临床医生早期诊断，确诊肺结核，并进行抗结核治疗。

【关键词】肺结核；涂片；固体培养；lamp2020 年苏州高新区发病率为 49.13/10 万，肺结核仍居苏州市法定报告甲、乙类传染病首位，防控形势仍旧严峻。

急需快速、准确、简便的诊断技术和预防结核病感染新疫苗、新药品的出现［1］。

3种不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核诊断中的对比分析杨睿【摘要】目的：通过对比3种不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核诊断中的结果,分析其临床应用价值。

方法200例涂阴肺结核患者作为涂阴肺结核组,再选取同期45例非肺结核体检者作为非肺结核组。

分别采取涂片、结核菌培养以及荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法进行检测。

观察并对比3种检测方法的结果,分析不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法的临床应用价值。

结果涂阴肺结核组涂片法检测的阳性率为21.5%,培养法检测的阳性率为34.0%,荧光定量PCR 检测的阳性率为60.5%。

涂阴肺结核组患者的涂片法、培养法以及荧光定量PCR 检测的阳性率与非肺结核组(2.2%、0、2.2%)比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。

结论涂片法检测快速方便,荧光定量PCR检测法敏感度高,假阳性低,培养法仍是诊断肺结核的金标准,3种检测方法相结合可提高涂阴肺结核的诊断率。

【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2016(000)006【总页数】2页(P35-36)【关键词】涂片法;培养法;荧光定量聚合酶链式反应;涂阴肺结核诊断【作者】杨睿【作者单位】519000 珠海市慢性病防治中心【正文语种】中文最近几年随着生活方式与生活环境的改变,我国肺结核疾病的发病率呈现上升趋势。

肺结核作为第二大传染疾病不仅严重危害了患者的身体健康,也为患病人群的生活与工作带来严重困扰［1,2］。

根据相关调查,肺结核疾病的发病可能与艾滋病和糖尿病的高发相关,由于艾滋病和糖尿病发病后使用的免疫抑制剂会对自身的免疫机制造成损伤,因此更容易感染病菌形成肺结核。

同时人口的高流动性也为疾病的传播产生不良影响［3］。

本院为了研究不同的支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核诊断中的结果,选取了部分涂阴肺结核患者和非肺结核体检者分别进行不同的检测方法诊断,现将结果总结报告如下。

比较结核感染T细胞斑点试验、结核菌素试验以及血清结核抗体检测对诊断肺结核的价值[摘要] 目的比较结核感染T细胞斑点试验（T-cell spot of tuberculosis，T-SPOT.TB）、结核菌素试验（purified protein derivative，PPD）以及血清结核抗体（Tuberculosis antibody，TB-Ab）?z测对肺结核的诊断价值。

方法随机选取自2014年1月―2016年8月在该院确诊为肺结核患者60例，作为肺结核组；确诊非肺结核就诊者30名作为非肺结核组，两组就诊者均接受了T-SPOT.TB、PPD以及TB-Ab检测。

比较两组接受不同检测方法对诊断肺结核灵敏性与特异性的差异。

结果T-SPOT.TB检测诊断肺结核的敏感性为73.30%，特异性为80.00%；PPD试验诊断肺结核的敏感性为60.00%，特异性为86.70%；血清TB-Ab检测检测诊断肺结核的敏感性为53.30%，特异性为66.70%。

结论T-SPOT.TB诊断肺结核的敏感性高于PPD试验和血清结核抗体检测；T细胞斑点试验T-SPOT.TB诊断肺结核的特异性高于血清结核抗体检测，与PPD试验差异无统计学意义。

[关键词] 结核感染T细胞斑点试验；PPD试验；血清结核抗体；肺结核[中图分类号] R322.3 [文献标识码] A [文章编号]1674-0742（2016）12（b）-0041-03Comparison of T-SPOT.TB，PPD，and TB-Ab Detection in the Diagnosis of Pulmonary TuberculosisHUANG Han-pengDepartment of Respirology，Affiliated Hospital of Jiangsu University，Zhenjiang，Jiangsu Province，212001 China [Abstract] Objective To compare of T-cell spot of tuberculosis（T-SPOT.TB），purified protein derivative test （PPD），and serum tuberculosis antibody detection（TB-Ab）in the diagnosis of pulmonary tuberculosis. Methods 90 patients from January 2014 to August 2016 in our hospital were random selected and divided into pulmonary tuberculosis group（n=60）and non-tuberculosis group（n=30）. The positive rates of T-SPOT.TB，PPD，and TB-Ab in two groups were detected and their sensitivities and specifities were compared. Results The sensitivity of T-SPOT.TB in the diagnosis of pulmonary tuberculosis was 73.30%，and the specificity was 80.00%；The sensitivity of PPD test in the diagnosis of pulmonary tuberculosis was 60.00%，and the specificity was 86.70%；The sensitivity of TB-Ab detection in the diagnosis of pulmonary tuberculosis was 53.30% and specificity was 66.70%. Conclusion The sensitivity of T-SPOT.TB in the diagnosis oftuberculosis is higher than that of PPD test and TB-Ab detection；the specificity of T-SPOT.TB in diagnosis of pulmonary tuberculosis is higher than that of serum TB-Ab detection，and is no significant difference with PPD test.[Key words] T-cell spot of tuberculosis；Purified protein derivative test；Tuberculosis antibody；Pulmonary tuberculosis 结核病是单一致病菌致死最多的疾病。

不同检测方法对结核病的诊断效果分析摘要】目的将诊断结核病的蛋白芯片法与金标法及抗酸染色法三种检测方法进行比较，以评价三种方法在临床中的应用价值。

方法用蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检测125例确诊结核病人、50例肺部其它疾病患者的血清标本，并进行相关统计分析。

结果蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检出结核分枝杆菌的灵敏度为64%，72%及22.7%，前两者比较无显著性差异(P>0.05)，但均高于抗酸染色法(P<0.05)。

三者的特异性分别为90%，76%及96%。

结论蛋白芯片法检测结核分枝杆菌，与金标法及抗酸染色法比较，具有简便、快速、敏感性较高和特异性强等优点，是临床辅助诊断结核病的有效方法。

【关键词】蛋白芯片结核分枝杆菌比较诊断1 材料与方法1.1 材料① 标本来源：125例确诊结核病人血清由我院内科肺结核确诊病人提供，50例肺部其它疾病患者的血清来源于我院胸外科、内科。

② 主要仪器和试剂：蛋白芯片阅读仪、结核分枝杆菌蛋白芯片试剂盒均为南京大渊生物技术公司提供；结核分枝杆菌免疫胶体金诊断试剂盒为上海奥普生物医药有限公司提供；抗酸染色相关试剂，根据《全国临床检验操作规程》（第3版）由实验室自行配置。

1.2 方法1.2.1 蛋白芯片法（PC）：按试剂说明书操作。

1.2.2 金标法（DIGFA）：按试剂说明书操作。

1.2.3 抗酸染色法(AFS)：参照《全国临床检验操作规程》第3版。

1.3 统计学分析概率的比较采用X2检验。

2 结果2.1 175例标本三种检测结果与临床诊断的关系见表1。

表1 175例标本三种检测结果比较注： #P<0.05(与对照组比较)，*P<0.05(与AFS法比较)。

2.2 三种检测方法的灵敏度、特异性比较蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检出结核分枝杆菌的灵敏度为64%，72%及22.7%，特异性分别为90%，76%及96%。

2.3 蛋白芯片法结核病组三种结核茵抗原的抗体构成比三种结核菌抗原的抗体阳性率以抗LAM 抗体的阳性率最高，为57.6％（72/125），其次为抗38KDa抗体44％（55/125)，最低为抗16KDa抗体20%（25/125）。

PCR技术、抗酸染色法在肺结核病理学诊断中应用比较目的比较PCR技术、抗酸染色法在肺结核病理学诊断准确性。

方法方便选择2014年3月—2015年10月该院收治的60例疑似肺结核病患者，采用超声纤维支气管镜获取肺泡液及病灶组织条后送PCR技术、抗酸染色法。

结果肺结核病43例中，PCR法83.72%优于抗酸染色法结果阳性为41.86%，差异有统计学意义（χ2=16.125 0，P＜0.000 1）。

60例患者中抗酸染色法诊断符合率58.33%，PCR法88.33%，差异有统计学意义（χ2=13.806 8，P=0.000 2）。

结论PCR技术的检出率较高，可在肺结核早期诊断与治疗中发挥更大作用。

[Abstract] Objective To compare the accuracy of PCR technique and acid-fast staining in diagnosis of pulmonary tuberculosis pathology. Methods 60 cases of patients suspected with pulmonary tuberculosis treated from March 2014 to October 2015 were selected，and the lung alveolar fluid and lesion tissue strips were obtained by the ultrasonic fiber bronchoscope，and then sent for PCR technique and acid-fast staining. Results Of the 43 cases with pulmonary tuberculosis，the positive rate of PCR technique is superior to that of acid-fast staining （83.72% vs 41.86%），and the difference had statistical significance，（χ2=16.125 0，P＜0.000 1），of the 60 cases，the difference in the diagnostic accordance rate between acid-fast staining and PCR technique had statistical significance，（χ2=13.806 8，P=0.000 2）. Conclusion The detection rate of PCR technique is higher，which can play a bigger role in the early diagnosis and treatment of pulmonary tuberculosis.[Key words] Pulmonary tuberculosis；PCR；Acid-fast staining；Diagnosis肺结核病是有结核分枝杆菌引起的一种肺部感染性疾病，该病传播性强，致残率高，严重影响人民健康，是我国重点防治疾病之一[1]。

涂片抗酸染色T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF联合检测在结核病诊断中的应用价值分析【摘要】目的分析涂片抗酸染色（涂片法）、结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert MTB/RIF）三种方法联合检测在结核病诊断中的应用价值。

方法回顾性分析2021年12月至2022年9月在广西壮族自治区人民医院同时进行涂片法、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF检测的临床疑诊结核分枝杆菌感染患者的检测结果，以临床确诊结果为“金标准”计算上述三种方法及其中两者联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率。

分析三种检测方法单独和联合检测对结核病的诊断价值。

结果298例疑似结核患者中，排除31例，最终临床确诊为结核74例，非结核193例。

涂片法、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF 检测的灵敏度分别为43.2%、94.6%、63.5%，比较差异有统计学意义（χ2=44.861，P=0.000）；T-SPOT.TB检测特异度低于涂片法和GeneXpert MTB/RIF，差异有统计学意义（χ2=74.861，P=0.000；χ2=78.162，P=0.000）；三种方法检测准确率比较差异有统计学意义（χ2=23.468，P=0.000）。

涂片法联合T-SPOT.TB检测的灵敏度与涂片法相比，差异有统计学意义(χ2=45.548，P=0.000)。

涂片法联合GeneXpert MTB/RIF检测的灵敏度与涂片法相比，差异有统计学意义(χ2=6.965，P=0.008)。

结论在结核病诊断中，GeneXpert MTB/RIF和涂片法的准确率比T-SPOT.TB高，T-SPOT.TB或GeneXpert MTB/RIF的检测灵敏度显著高于涂片法。

采用T-SPOT.TB或GeneXpert MTB/RIF联合涂片法均可显著提高结核病诊断的灵敏度，推荐采用联合检测方法以提高临床诊断效能。

作者简介:王蕊,女,主管技师,主要从事结核病检验方面的研究㊂ ә 通信作者,E -m a i l :c h e n y a n j i o n g @x jt u .e d u .c n ㊂㊃论 著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2024.09.0153种检测方法对结核病诊断效能的比较王 蕊1,2,李 妍2,杨 健2,王盼婷2,张 萌2,陈艳炯1ә1.西安交通大学医学部病原生物学与免疫学系,陕西西安710061;2.陕西省结核病防治研究所结核病参比实验室,陕西西安710048摘 要:目的 评价γ-干扰素释放试验(I G R A )㊁涂片抗酸染色镜检(A F B )和实时荧光定量核酸扩增检测技术(X pe r t MT B /R I F )诊断结核病的应用价值㊂方法 选取2019年6月至2023年6月在陕西省结核病防治研究所就诊的疑似结核病患者397例作为研究对象,所有研究对象均同时行I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测,收集患者的检测结果和病例资料㊂排除无法诊断是否为结核病的患者39例,最终纳入358例,并根据临床诊断结果将其分为结核患者141例和非结核患者217例㊂比较I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 在结核病中的阳性检出情况及其对结核病的诊断效能㊂结果 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的灵敏度分别为95.74%㊁31.21%㊁56.74%,I G R A 的灵敏度高于A F B 和X pe r t MT B /R I F (χ2=126.66,P <0.01;χ2=59.22,P <0.01),X p e r t MT B /R I F 的灵敏度高于A F B (χ2=18.65,P <0.01);I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的特异度分别为60.37%㊁99.54%㊁100.00%,其中A F B 和X pe r t MT B /R I F 的特异度均高于I G R A (χ2=103.86,P <0.01;χ2=107.25,P <0.01),而A F B 和X pe r t MT B /R I F 的特异度比较,差异无统计学意义(χ2=1.00,P =0.32)㊂I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的准确率分别为74.30%㊁72.63%㊁82.96%,其中X pe r t MT B /R I F 的准确率最高,且3种检测方法的准确率比较,差异有统计学意义(χ2=12.30,P <0.01)㊂I G R A 与A F P 检测结果的总符合率为31.21%(44/141),阳性符合率为95.45%(42/44),阴性符合率为4.12%(4/97);X pe r t MT B /R I F 与A F P 检测结果的总符合率为74.47(105/141),阳性符合率为100.00%(44/44),阴性符合率为62.89%(61/91)㊂结论 在结核病诊断中,X pe r t MT B /R I F 和A F B 的特异度高于I G R A ,而I G R A 和X pe r t MT B /R I F 的灵敏度高于A F B ,临床可根据3种方法各自的优势应用于结核病的诊断,以此来提高结核病的临床诊治效率㊂关键词:结核病; γ-干扰素释放试验; 实时荧光定量核酸扩增检测技术; 涂片抗酸染色镜检; 阳性检出率中图法分类号:R 522文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)09-1259-04C o m p a r i s o n o f t h e e f f i c a c y o f t h r e e t e s t s f o r t h e d i a gn o s i s o f t u b e r c u l o s i s WA N G R u i 1,2,L I Y a n 2,Y A N G J i a n 2,WA N G P a n t i n g 2,Z HA N G M e n g 2,C H E N Y a n j i o n g 1ә1.D e p a r t m e n t o f P a t h o g e n i c B i o l o g y a n d I mm u n o l o g y ,X i 'a n J i a o t o n g U n i v e r s i t y He a l t h S c i e n c e C e n t e r ,X i 'a n ,S h a a n x i 710061,C h i n a ;2.T u b e r c u l o s i s R ef e r e n c e L a b o r a t o r y ,S h a a n x i P r o v i n c i a l I n s t i t u t e fo r T u b e r c u l o s i s C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n ,X i 'a n ,S h a a n x i 710048,C h i n a A b s t r a c t :O b je c t i v e T o e v a l u a t e t h e v a l u e of i n t e r f e r o n -γr e l e a s e a s s a y (I G R A ),a c i d f a s t s t a i n i ng (A F B )a n d r e a l -t i m e f l u o r e s c e n c e q u a n t i t a t i v e n u c l e i c a c i d a m p l i f i c a t i o n d e t e c t i o n t e ch n o l o g y (X pe r t MT B /R I F )f o r t h e d i ag n o s i s o f t u b e r c u l o s i s .M e th o d s A t o t a l o f 397p a ti e n t s w i t h s u s pe c t e d t u b e r c u l o s i s w h o a t t e n d e d t o t h e S h a a n x i P r o v i n c i a l I n s t i t u t ef o r T u b e r c u l o s i s C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n f r o m J u n e 2019t o J u n e 2023w e r e s e -l e c t e d a s t h e s t u d y s u b j e c t s ,a l l t h e s t u d y s u b j e c t s u n d e r w e n t I G R A ,A F B a n d X pe r t MT B /R I F t e s t s s i m u l t a -n e o u s l y ,a n d t h e t e s t r e s u l t s a n d c a s e d a t a of t h e p a t i e n t s w e r e c o l l e c t e d .E x c l u d i ng 39p a t i e n t s i n w h o m t u b e r -c u l o s i s c o u l d n o t b e d i a g n o s e d ,f i n a l l y 358c o n f i r m e d c a s e s w e r e i n c l u d e d a n d d i v i d e d i n t o 141c a s e s w i t h t u -b e r c u l o s i s a n d 217c a s e s w i t h o u t t u b e r c u l o s i s a c c o r d i n g t o t h e c l i n i c a l d i a g n o s i s .T h e p o s i t i v e d e t e c t i o n a n d d i -a g n o s t i c e f f i c a c y f o r t u b e r c u l o s i s o f I G R A ,A F B a n d X p e r t MT B /R I F w e r e c o m p a r e d .R e s u l t s T h e s e n s i t i v i t yo f I G R A ,A F B a n d X p e r t MT B /R I F a s s a y s w a s 95.74%,31.21%a n d 56.74%,r e s p e c t i v e l y,w h i l e t h e s e n s i -t i v i t y o f I G R A w a s h i g h e r t h a n t h a t o f A F B a n d X pe r t MT B /R I F (χ2=126.66,P <0.01;χ2=59.22,P <0.01),a n d t h e s e n s i t i v i t y of X p e r t MT B /R I F w a s h igh e r t h a n t h a t o f A F B (χ2=18.65,P <0.01).T h e s pe c i -f i c i t y o f I G R A ,A F B a n d X p e r t MT B /R I F a s s a y s w a s 60.37%,99.54%a n d 100.00%,r e s p e c t i v e l y,a n d t h e s p e c i f i c i t y o f A F B a n d X p e r t MT B /R I F w a s h i gh e r t h a n t h a t o f I G R A (χ2=103.86,P <0.01;χ2=107.25,㊃9521㊃检验医学与临床2024年5月第21卷第9期 L a b M e d C l i n ,M a y 2024,V o l .21,N o .9P<0.01),b u t t h e d i f f e r e n c e o f s p e c i f i t y o f b e t w e e n A F B a n d X p e r t MT B/R I F h a d n o s t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e (χ2=1.00,P=0.32).T h e a c c u r a c y o f I G R A,A F B a n d X p e r t MT B/R I F a s s a y s w a s74.30%,72.63%a n d 82.96%,r e s p e c t i v e l y,a n d X p e r t MT B/R I F h a d t h e h i g h e s t a c c u r a c y,t h e d i f f e r e n c e o f a c c u r a c y a m o n g t h e t h r e e m e t h o d s w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(χ2=12.30,P<0.01).T h e t o t a l c o n s i s t e n t r a t e b e t w e e n I G R A a n d A F P t e s t r e s u l t s w a s31.21%(44/141),w i t h p o s i t i v e c o n s i s t e n t r a t e o f95.45%(42/44)a n d n e g a t i v ec o n s i s t e n t r a t e o f4.12%(4/97);t h e t o t a l c o n s i s t e n t r a t e b e t w e e n X p e r t MT B/R I F a nd A F P te s t r e s u l t s w a s74.47(105/141),w i t h p o s i t i v e c o n s i s t e n t r a t e o f100.00%(44/44)a n d c o n s i s t e n t c o m p l i a n c e r a t e o f62.89%(61/91).C o n c l u s i o n I n t h e d i a g n o s i s o f t u b e r c u l o s i s,t h e s p e c i f i c i t y o f X p e r t MT B/R I F a n d A F B i sh i g h e r t h a n t h a t o f I G R A,w h i l e t h e s e n s i t i v i t y o f I G R A a n d X p e r t MT B/R I F i s h i g h e r t h a n t h a t o f A F B.T h e c l i n i c c a n a p p l y t h e t h r e e m e t h o d s t o t h e d i a g n o s i s o f t u b e r c u l o s i s a c c o r d i n g t o t h e i r r e s p e c t i v e a d v a n t a g e s,s o a s t o i m p r o v e t h e e f f i c i e n c y o f c l i n i c a l d i a g n o s i s a n d t r e a t m e n t o f t u b e r c u l o s i s.K e y w o r d s:t u b e r c u l o s i s;i n t e r f e r o n-γr e l e a s e a s s a y; X p e r t MT B/R I F;a c i d f a s t s t a i n i n g;p o s i t i v e d e t e c t i o n结核病是仅次于新型冠状病毒感染(C O V I D-19)的第2大传染性疾病,目前我国仍是第3大结核病高负担国家[1]㊂早期诊断是治疗结核病的关键环节,而实验室检查是诊断结核病必不可少的方法之一,目前,实验室检查方法主要包括涂片抗酸染色镜检(A F B)㊁结核分枝杆菌(MT B)培养㊁γ-干扰素(I F N-γ)释放试验(I G R A)㊁实时荧光定量核酸扩增检测技术(X p e r t MT B/R I F)等[2]㊂A F B是最常用的确诊结核病的方法,而I G R A和X p e r t MT B/R I F是近年来结核病检测的新技术[3-5],X p e r t MT B/R I F更是被纳入肺结核的诊断标准(W S288-2017)[6]㊂本研究回顾性分析了同时采用I G R A㊁A F B㊁X p e r t MT B/R I F3种方法检测结核病患者的检测结果及病例资料,以评价3种检测方法对结核病的诊断价值㊂现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料选取2019年6月至2023年6月在陕西省结核病防治研究所就诊的疑似结核病患者397例作为研究对象㊂所有研究对象均同时进行I G R A㊁A F B㊁X p e r t MT B/R I F3种检测方法,收集患者的检测结果及病历资料,排除无法诊断是否为结核病的患者39例,最终纳入358例,根据结核病诊断标准,将其分为结核患者141例和非结核患者217例㊂结核患者中男87例(61.70%)㊁女54例(38.30%),平均年龄(49.50ʃ7.90)岁;非结核患者中男125例(57. 60%)㊁女92例(42.40%),平均年龄(50.61ʃ9.14)岁㊂两组研究对象性别㊁年龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性㊂所有研究对象均知晓本研究,并签署知情同意书㊂纳入标准:年龄18~80岁;临床症状提示结核病,如咳嗽㊁咳痰㊁发热㊁接触过结核病患者等㊂排除标准:X p e r t MT B/R I F检测结果无效;患者病例资料不完整㊂本研究经过陕西省结核病防治研究所医学伦理委员会审批通过(伦理审批号:2019J Y03)1.2仪器与试剂I G R A相关试剂和仪器均购自北京万泰生物药业公司;A F B染色液购自珠海贝索生物技术有限公司;X p e r t MT B/R I F相关试剂盒和仪器均购自美国C e p h e i d公司㊂严格按照使用说明步骤进行操作㊂1.3方法1.3.1I G R A 采集所有研究对象6m L肝素锂抗凝的静脉血,在2h之内,以1m L/管分装到 N T P 3种培养管中,颠倒混匀后置于37ħ环境中培养22~24h;以3000~5000r/m i n离心10m i n,取3种培养血浆各100μL与100μL样本稀释液分别进行1ʒ1稀释混匀;取稀释后样本70μL加至测试卡加样口㊂加样后15m i n置于荧光扫描仪判读结果㊂1.3.2 A F B取适量痰液在玻片上涂抹成1c mˑ2c m的卵圆形,自然干燥,置于染色架上,玻片间至少留有1c m的距离;加热固定;滴加苯酚复红盖满玻片,加热至产生蒸汽,5m i n后,流水轻缓冲洗;加酸性酒精,保持1~2m i n,流水轻缓冲洗,必要时重复脱色,至无红色为止;加亚甲蓝染液染色30~60s;流水轻缓冲洗,沥干㊂在油镜下观察㊂依照‘结核病实验室检验规程“[7]判定结果㊂1.3.3 X p e r t MT B/R I F先吸取痰液1m L置于一次性无菌试管内,然后加入2倍量前处理液并旋紧瓶盖,利用涡旋振荡器振荡30s,直至样品溶解无凝块;常温下静置15m i n,无菌吸管吸出2m L处理液,从加样孔慢慢添加到试剂盒中,盖上试剂盒盖,上机检测㊂1.4统计学处理采用S P S S18.0统计软件进行数据分析㊂符合正态分布的计量资料以xʃs表示,两组间比较采用t检验;计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1I G R A㊁A F B㊁X p e r t MT B/R I F对结核病的诊断结果比较在结核患者中,I G R A㊁A F B和X p e r t MT B/R I F的阳性检出率分别为95.74%(135/141)㊁31.21%(44/141)和56.74%(80/141);在非结核患者中,I G R A㊁A F B和X p e r t MT B/R I F的阳性检出率分㊃0621㊃检验医学与临床2024年5月第21卷第9期 L a b M e d C l i n,M a y2024,V o l.21,N o.9别为39.63%(86/217)㊁0.46%(1/217)和0.00%(0/217)㊂3种方法对结核的阳性检出率比较,差异有统计学意义(χ2=125.50,P <0.01)㊂见表1㊂2.2 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 对结核病的诊断效能比较 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的灵敏度分别为95.74%㊁31.21%㊁56.74%,其中I G R A 的灵敏度均高于A F B 和X pe r t MT B /R I F (χ2=126.66,P <0.01;χ2=59.22,P <0.01),且X pe r t MT B /R I F 的灵敏度高于A F B (χ2=18.65,P <0.01);I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的特异度分别为60.37%㊁99.54%㊁100.00%,其中A F B 和X p e r t MT B /R I F 的特异度均高于I G R A (χ2=103.86,P <0.01;χ2=107.25,P <0.01),但A F B 和X pe r t MT B /R I F 的特异度比较,差异无统计学意义(χ2=1.00,P =0.32)㊂I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的准确率分别为74.30%㊁72.63%㊁82.96%,其中X pe r t MT B /R I F 的准确率最高,且3种检测方法的准确率比较,差异有统计学意义(χ2=12.30,P <0.01)㊂见表2㊂表1 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t M T B /R I F 检测结果比较(n )检测方法临床诊断结核非结核合计I G R A阳性13586221 阴性6131137 合计141217358A F B阳性44145阴性97216313 合计141217358X p e r t M T B /R I F 阳性80080阴性61217278 合计141217358表2 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t M T B /R I F 检测方法对结核病的诊断效能(%)检测方法灵敏度特异度阳性预测值阴性预测值准确率I G R A95.7460.3761.0996.6274.30A F B31.21a99.54a 97.7869.0172.63X pe r t MT B /R I F 56.74a b100.00a100.0078.0682.96注:与I G R A 比较,aP <0.05;与A F B 比较,bP <0.05㊂2.3 结核病患者中A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结果与A F B 检测结果比较 I G R A 与A F P 检测结果的总符合率为31.21%(44/141),阳性符合率为95.45%(42/44),阴性符合率为4.12%(4/97);X pe r t MT B /R I F 与A F P 检测结果的总符合率为74.47(105/141),阳性符合率为100.00%(44/44),阴性符合率为62.89%(61/91)㊂见表3㊂表3 结核病患者中A F B ㊁X pe r t M T B /R I F 检测结果 与A F B 检测结果比较(n )检测方法A F P 诊断阳性阴性合计I G R A阳性4293135 阴性246合计4497141X p e r t M T B /R I F 阳性443680 阴性06161 合计44971413 讨 论I G R A 采用MT B 特异性抗原刺激培养血液中的特异性T 细胞产生免疫应答并释放I F N -γ,通过检测I F N -γ的水平来判断患者是否感染了MT B ,其结果不受非结核分枝杆菌和卡介苗的影响[8-9]㊂I G R A 阳性说明患者存在结核感染,但并不表明结核是否处于活动期[10],因此,I G R A 不能独立诊断结核病[11]㊂本研究I G R A 检测结核病的灵敏度最高(95.74%)㊁阴性预测值最高(95.62%),提示I G R A 阴性可作为排除结核病的诊断指标㊂I G R A 与A F P 检测结果的阴性符合率为4.12%(4/97),说明I G R A 可用于痰涂片阴性患者的进一步检测㊂病原学诊断中,A F B 操作简单㊁费用低㊁耗时短,是应用最广泛的实验室检查方法,但是标本中的细菌数至少在每毫升5000~10000条时才能检测出阳性,且阳性率低,仅为14%~47%[12-14]㊂本研究中A F B 的敏感度为31.21%,与I G R A 和X pe r t MT B /R I F 相比,灵敏度最低,说明了A F B 易造成临床漏诊㊂本研究中A F B 的特异度为99.54%,共检测出阳性45例,其中44例诊断为结核病,剩余1例涂片阳性经对硝基苯甲酸(P N B )/噻吩-2-羧酸肼(T C H )选择培养基鉴定为非结核分枝杆菌(N T M )㊂这表明A F B 无法区分MT B 和N T M ,容易导致临床误诊㊂X pe r t MT B /R I F 是近年来快速发展应用的MT B 分子生物学检测技术,不仅可以检测MT B ,还可以检测利福平的耐药性,其整个检测过程只需要2h [15]㊂本研究的X pe r t MT B /R I F 灵敏度为56.74%,这与邹远妩等[16]研究的灵敏度63.8%接㊃1621㊃检验医学与临床2024年5月第21卷第9期 L a b M e d C l i n ,M a y 2024,V o l .21,N o .9近㊂X p e r t MT B/R I F的灵敏度显著高于A F B(χ2= 18.65,P<0.01),与既往研究相符[17-19]㊂X p e r t MT B/R I F与A F P检测结果的阳性符合率为95.45%(42/44),这提示临床非必要可不对A F B阴性患者进行X p e r t MT B/R I F检测,尤其对经济欠发达地区;X p e r t MT B/R I F与A F P检测结果的阴性符合率为62.89%(61/91),表明X p e r t MT B/R I F在A F B阴性患者中有进一步检测的价值㊂X p e r t MT B/ R I F特异度为100.00%,3种检测方法中最高㊂在1例N T M感染病例中,A F B检测呈阳性,而X p e r t MT B/R I F检测呈阴性,因此,当A F B呈阳性而X p e r t MT B/R I F呈阴性时,临床应高度怀疑N T M感染㊂I G R A㊁A F B㊁X p e r t M T B/R I F检测方法各有利弊㊂X p e r t M T B/R I F的灵敏度和特异度都很高[20-21],但它对实验室人员和环境的要求很高,而且价格昂贵,这就意味着一些患者会选择价格低廉的A F B检测,排菌量少的患者就无法被检测出来㊂I G R A检测还受到患者免疫水平的限制,一些免疫力低下的患者无法被检测出来[9,22]㊂因此,为患者找到合适的检测方法并进行最佳组合,为临床医生提供准确㊁快速的临床证据尤为重要[23]㊂综上所述,在结核病诊断中,X p e r t MT B/R I F和A F B的特异度均高于I G R A,而I G R A和X p e r t MT B/R I F的灵敏度高于A F B,故临床上可用I G R A 阴性作为排除结核病的指标,X p e r t MT B/R I F可作为病原学检测的首选方法,并可联合A F B辅助诊断N T M感染,以此来提高结核病的临床诊治效率㊂只有充分利用这3种检查方法的优势,并根据患者的实际情况适当应用,才能以尽可能低的成本尽快确诊结核病㊂参考文献[1]W o r l d H e a l t h O r g a n i z a t i o n.G l o b a l t u b e r c u l o s i s r e p o r t2022[R].G e n e v a:W o r l d H e a l t h O r g a n i z a t i o n,2022.[2]G O N G W P,WU 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结核感染T细胞检测在结核病诊断中的临床意义吴小平;叶芬芳【摘要】目的分析结核感染T细胞检测在结核病诊断中的临床意义.方法选取我院2015年3月~2016年4月收治的250例疑似结核病患者,患者均给予结核感染T细胞检测、聚合酶链式反应(PCR)荧光探针检测及涂片抗酸染色检测,比较三种检测方法检出结核病的阳性率.结果 165例患者最后确认为结核病,结核感染T细胞检出的阳性率分别显著高于PCR荧光探针检测和涂片抗酸染色检测(P<0.05),且PCR 荧光探针检测的阳性率显著高于涂片抗酸染色检测(P<0.05).结论应用结核感染T 细胞检测来诊断结核病,能有效提高临床检测阳性率,其具备了临床推广的价值.【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2017(028)005【总页数】3页(P808-810)【关键词】结核感染T细胞检测;结核病;诊断;临床意义;阳性率【作者】吴小平;叶芬芳【作者单位】新丰县人民医院呼吸内科,广东新丰 511100;新丰县人民医院重症医学科,广东新丰 511100【正文语种】中文【中图分类】R446.8结核病是因为结核分枝杆菌感染所导致的传染性疾病，结核分枝杆菌主要通过空气传播，感染后可能对全身各个器官造成累及［1，2］。

目前控制结核病工作的重点就是及时诊断和治疗。

随着科技的进步，传统检测方法的缺点越来越突出，例如结核菌涂片抗酸染色检测的检出率不高，需要较长时间才能培养出结核菌［3］；结核菌素试验（PPD）在卡介苗普遍接种的地方，存在较高的假阳性［4］；聚合酶链式反应（PCR）技术操作简单方便，检测快速，然而对实验人员的技术和实验室条件要求较高，不适合应用于基层医院，另外还存在较高的假阳性率［5］。

所以寻找准确、灵敏和快速的结核菌感染检测方式就显得尤为关键。

结核感染T细胞检测是新发展起来的一种结核病检测方法，小规模研究发现［6］，其对肺结核临床辅助诊断价值较高。

本研究扩大样本量，进一步分析其在疑似结核病患者中的筛查作用。

结核酶联免疫斑点试验、结核分枝杆菌DNA测定和痰涂片检测在肺结核诊断中的比较研究目的比较结核酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌DNA （TB-DNA）测定和痰涂片检测在肺结核诊断中的意义。

方法选取2010年5月～2013年1月在本院做结核检测的患者，其中确诊肺结核的患者95例进行T-SPOT.TB、TB-DNA测定和痰涂片检测。

结果T-SPOT.TB、痰涂片和TB-DNA 测定的敏感性分别为92.22%、24.44%、67.78%，痰涂片的敏感性最低，T-SPOT.TB 最高（P＜0.05）。

结论T-SPOT.TB 较痰涂片、TB-DNA检测对结核病诊断有较高的敏感性。

标签：结核酶联免疫斑点试验；痰涂片；结核分枝杆菌DNA测定；肺结核结核病（tuberculosis，TB）被列为国内重大传染病之一，是目前传染病中的头号杀手，是严重危害人类健康的呼吸道传染病，同时也是单因素致死率最高的传染性疾病[1-2]。

近年来，随着人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染、艾滋病的流行、移民增加、人口流动性增大以及结核菌耐药性的加重，TB的发病率有上升趋势。

中国是TB高负担国家之一，2010年第五次全国结核病流行病学调查显示，活动性TB患者459/10万，菌阳患者66/10万，提示TB的诊治仍然是国家TB控制策略中的重要措施。

目前临床诊断TB的金标准只有结核菌培养，但其缺乏敏感性，易漏诊。

本研究选取2010年5月～2013年1月在本院做结核检测的患者，采用结核酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）测定和痰涂片方法分别检测，探讨其诊断肺结核的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选取2010年5月～2013年1月在本院做结核检测的患者，其中确诊肺结核的患者95例，男60例，女35例，年龄25～70岁，平均（50.17±11.41）岁。