急性毒性实验(实验课)

苏贝止咳颗粒小鼠急性毒性实验

【摘要】

苏贝止咳颗粒组方来自民间验方，该方在临床使用多年，疗效确切，安全可靠。具有散寒宣肺，祛痰、止咳、平喘之功，用于急性气管、支气管炎（风寒袭肺证）所致的咳嗽、咳痰稀薄、咽痒、气急等症状。根据该方的功能主治、各味药材的理化性质和验方汤剂的临床应用实践，我们对其进行了止咳、祛痰、抗炎、解热、抗病毒、抗菌等主要药效学实验和急性毒性实验研究。

苏贝止咳颗粒经国家食品药品监督管理总局药品审评中心技术审评，发补充资料通知（药审补字[2014]第1030号），其中药理毒理方面要求为：本品进行的急毒试验未提供剖检结果，建议补充。如果没有观察该方面的内容，建议补充规范的急性毒性试验。针对该问题，该项目研究在前期的申报材料中的确没有详述相关内容，因此按照中心老师的发文内容和相关规定对该品种的急性毒性实验重新进行规范性实验，对实验所有动物进行大体解剖、并对相关重要脏器进行病理形态学观察。

实验结果显示，苏贝止咳浸膏小鼠口服急性毒性实验测不出LD50，从而进行小鼠ig最大给药量实验，单次最大给药剂量164g生药/kg，单次最大给药容积为0.8mL/20g，24h内给药3次，连续观察13天，所观察的各项指标均正常，未见动物死亡，实验观察期结束时对所有动物大体解剖和相关重要脏器进行病理形态学观察，未见与药物相关性病变。

因此苏贝止咳浸膏小鼠一日口服最大给药剂量为492g生药/kg，相当于临床拟用量的424.1倍。表明苏贝止咳浸膏急性毒性较低，提示苏贝止咳浸膏在临床上急性用药具有一定的安全性。

【实验目的】观察苏贝止咳浸膏的小鼠急性毒性。

【供试品】

1.名称：苏贝止咳浸膏（本实验采用苏贝止咳颗粒为浸膏，实验代号：SB-补1），含量规格及配置：4.1g生药/每毫升浸膏，人用临床拟用剂量81g生药/d。采用小鼠灌胃给药，以最大给药剂量164g生药/kg，最大给药容积为0.8mL/20g，24h内给药3次。剂量、给药途径设置依据：参考临床拟用途径，中药、天然药物急

杜仲舒筋丸的急性毒性实验研究

杜仲舒筋丸是由牛膝、当归、肉桂、马钱子粉、煅自然铜、桂枝、防风、麻黄、陈皮、甘草、杜仲、醋乳香等组成,具有祛风除湿，舒筋活血之功效。临床应用于风寒湿痹，四肢麻木，筋骨疼痛，行步艰难等。为了对本品的安全性做出客观、科学的评价,进一步指导临床用药,故进行杜仲舒筋丸对小鼠的急性毒性实验研究。

1 实验材料

1.1动物:昆明种小鼠, spf级,雌雄各半,体重(20 ±2) g,由黑龙江肿瘤防治研究所提供,饲养温度: ( 24 ±2) ℃,相对湿度:

45% ～60% ,以颗粒饲料喂养,自由饮水。

1.2药物:杜仲舒筋丸,黑棕色的大蜜丸，味辛，微甜。用前以蒸馏水研磨成混悬液进行口服灌胃。

2. 试验方法

2.1半数致死量(ld50)预试验:在进行正式试验之前,首先做预试验。以便为正试实验提供依据，将12只小鼠随机分为两组，雌雄各半，灌胃前禁食不禁水16h。给药组：以可供灌胃的最大浓度（60％），小鼠灌胃可承受的最大体积（每10g体重0.4ml）一次灌胃杜肿舒筋丸沉溶液。给药后常规饲养，观察3d,空白组灌胃等量蒸馏水，方法同给药组，结果小鼠全部存活。处死后尸检观察各鼠主要脏器(肝、心、脾、肺、肾)未发现任何异常改变。因此,无法测出本品的半数致死量(ld50 ) ,提示该中药复方制剂药是安全的,故进行小鼠最大耐受量试验。

2.2.最大耐受量实验

预试验时,无法测出ld50 ,故做最大耐受量试验,以进一步评价其安全性。将40只小鼠随机分为空白组20只，杜仲舒筋丸组20只，每组雌雄各半。试验前禁食16h，正常饮水。药物组每只小鼠按0.4g/10g的剂量灌胃60%浓度的杜仲舒筋丸溶液（已达最高浓度，最大给药浓度），一日内连续灌服3次，间隔时间为4小时，空白组灌胃等体积的蒸馏水，给药后连续观察7日，每天称取其体重并观察动物反应。给药后常规饲养，室温（20～24℃）,湿度50%。试验第8天称取体重后，处死小鼠，解剖观察其心、肝、脾、肺、肾等主要器官的组织变化。

承　德　医　学　院　学　报　Ｊ０ＵＲＮＡＬ　０Ｆ　ＣＨＥＮＧＤＥ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥＧＥ　

赤雹果急性毒性实验研究　Ｖ０１．２７　Ｎｏ．３　２０ｌ０　

佟继铭　，李兰芳　（１．承德医学院中药研究所，河北承德０６７０００；２．河北省医学科学院药物研究所）　

【摘要】目的：观察灌胃给赤雹果水提取液和赤雹果粉末混悬液对小鼠的急性毒性反应，为临床安全用　

药和长期毒性研究提供实验依据。方法：昆明种小鼠６０只随机分为３组，赤雹果水提取液组、赤雹果粉末　

混悬液组和空白对照组，每组２０只，分别灌胃给予赤雹果水提取液１２０．Ｏｇ／ｋｇ（生药），赤雹果粉末混悬　

液３６．９３ｇ／ｋｇ（生药）和蒸馏水。观察给药后小鼠中毒反应及死亡情况，连续观察１４ｄ。结栗：各组小鼠均　

未出现明显毒性反应，无动物死亡。小鼠对赤雹果水提取液的ＭＴＤ＞１２０．Ｏｇ／ｋｇ（生药），对赤雹果粉的　

ＭＴＤ＞３６．９３ｇ／ｋｇ（生药）。结论：赤雹果水提取物及粉末经口给药毒性低，临床用药安全。　

【关键词】赤雹果；急性毒性；最大耐受剂量　［ｏｏ图分类号】Ｒ９６５．３　【文献标识码】Ａ　【文章编号】ｌ００４－６８７９（２０ｌ０）０３－０２３３－０２　

ＡＣＩ　ＩＴＥ　ＴｏＸＩＣＩＴＹ　ＳＴＵＤＹ　ｏＦ　ＦＲＵＩＴ　ｏＦ　Ｄ　Ⅳ　Ｈ＿Ａ　Ｄ　ｊ　ＢＵＮＧＥ　

Ｉ’ｏＮ　Ｇ　Ｊｉ—ｍｉｎｇ．ＬＩ　Ｌａｎ。ｆａｎｇ　

（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，Ｃｈｅｎｇｄｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｅｂｅｉ　Ｃｈｅｎｇｄｅ　０６７０００，Ｃｈｉｎａ　［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ａｃｕｔｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔ　ａｎｄ　ｆｉｎｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｏｆ　ｆｒｕｉｔ　ｏｆ　Ｔｈｌａｄｉａｎｔｈａ　ｄｕｂｉ　Ｂｕｎｇｅ（ＦＰＦＴＤ）ｉｎ　ｍｉｃｅ，ａｎｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓａｆｅ　ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄｌｏｎｇ—ｔｅｒｍ　

吉林化工学院

环境科学与工程专业设计性实验报告

环境生物学

学校：吉林化工学院

专业：环境科学与工程

姓名：刘永恒

学号:130338108 指导老师：邹继颖

鱼类急性毒性实验

作者:刘永恒 指导老师：邹继颖

摘要：本实验主要介绍鱼类对有毒环境的反应，通过对鱼类半致死数量的研究来观察鱼类的中毒反应。

关键词：鱼类；半致死；环境

Abstract：This experiment is mainly to introduce the fish of toxic reaction by the fish

semi lethal amount of research to observe the toxic reaction of fish.

Key words：fish；semilethal；Environmental Science

鱼类对水环境的变化十分灵敏，运用毒理实验方法，观察鱼类在含有化学污染物的水环境中的反应，可以比较不同化学物质的毒性高低。鱼类毒性实验方法可分为静态方法和动态方法两大类。静态实验方法操作简单，不需要特殊设备，适宜于受试化学物在水中相对稳定，在实验过程中耗氧量较低的短期实验。动态实验方法要求具备一定的设备，对于在水中不稳定、耗氧量较高的化学物需要进行较长时间的实验观察时，可采用动态实验方法。本实验介绍静态实验方法。

1 实验材料与试剂

本实验中所用到的材料有松花江野生土著小江鱼、8ml海飞丝牌子洗发水、2000ml大烧杯、1000ml容量瓶、移液管

8ml海飞丝牌洗发水成分：水、月桂醇硫酸酯纳、月桂醇聚醚硫酸酯纳、氯化钠、乙二醇二硬脂酸酯纳、聚二甲基硅氧烷、碳酸锌、香精、二甲苯磺酸钠、椰油酰胺丙级甜菜碱、盐酸、苯甲酸钠、碱式碳酸镁。

2 实验步骤

2.1 实验准备 参考有关资料初步估计5个浓度，每个浓度用10尾鱼，观察24～120h。进行预备实验的目的是确定实验浓度的范围（找出引起实验鱼全部死亡和不引起实验鱼死亡的浓度）；观察鱼中毒的表现和出现中毒的时间，为正式实验选择观察指标提供依据。同时还要做一些化学测定，以了解实验液的稳定性、pH值、溶解氧的变化情况，以便在正式实验时采取措施。