不同茶树品种组培快繁技术研究
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$ 讨
论
用茶树腋芽进行芽的诱导分化实验发现, G 8 的加入可明显促进芽的诱导, 但细胞分裂素 N 对 ! 促进芽分化效果不如 @ 这可能是 N A, ! 在芽的分化 上活性与 @ A 有差异。在增殖阶段用无生长素的培 养基都可得到较好的增殖倍数, 激素 : A或 6 8对 茶树丛生芽的增殖效果不明显, 这或许是该激素浓 度选择不适所致, 有待进一步研究。
子叶、 叶柄、 花等进行过研究, 但主要是针对单一品 种的实验且尚未实现规模化。本研究力图以不同茶 树品种为研究对象, 对其整个组织培养技术体系进 行探索, 为茶树良种组培快繁规模化生产提供可靠 的技术措施。
8 材料与方法
8 9 8 供试材料 茶树品种为福鼎大白茶 (1) 、 蒙山 ’ 号 (0) 、 蒙
: ’ , 4 5 2 " ( ) . " ? K ; < O J 8 I S ; P P I B K T A 5 K C N O J 8 U I B ; C A K O 8 I I K 8 S P I < O K O J 8 ; < 5 A L O ; C <I < 5: B C I I O ; C <C N I 5 U 8 < O ; O ; C A KT A 5 KV I K L C < 5 A L O 8 5 + 6 J 8 = H : : = , / O J 8 ! & .M 8 5 ; A MI 5 5 ; < & M0 1, ! + * M2 1 1I < 5 * " " M3 4I K O J 8 B ; M I B 8 5 ; A M B 8 K A P O K K J C V 8 5 O J I O I M C < K 8 U 8 B I PM 8 5 ; A M K = : : : : : : : HM = , V I K A K 8 N A P N C B O J 8 O 8 K O ; < I B ; 8 O W 6 J 8.M 8 5 ; A MI 5 5 ; < & M0 1L C A P 5T 8 A K 8 5 I K O C O J 8 K A T L A P O A B 8M 8 5 ; A MI < 5 O J 8 ; < L B 8 I K ; < L C 8 N N ; 9 =U H = : : = L ; 8 < O ; <$ *5 I I K ( + & ! + HV : ; ; 6 & ( $ 2 O 8 I U I B ; 8 O O ; K K A 8 L A P O A B 8 B I ; 5: B C I I O ; C < H : : = %7
启动率 (; ) : % / 1 . 0 " * . , 0
& B & L & B & &
I I J F
J J E K F K E & F H L F E F
为& , 培养基 5 。以上培养基中激素浓度 8 为J B2 E H 无特殊说明的单位都为 1 / 9。 3
其芽的增殖倍数不同, 无生长素的 " 号培养基平均 增殖倍数最高, 达到M 且一瓶苗中, 苗的最高 E B &倍, 增殖倍数达到 F 只是苗相对 E F 倍。芽条长度适中, 纤细; 当细胞分裂素与生长素按一定比例搭配时, 差异不显著, 这说明 : : A或 6 8 的加入, A或 6 8 对茶树芽的增殖作用不大。从表B也可得知在相同 培养基条件下, 品种之间增殖与生长存在明显的差 异。对培养基#而言, A 和 @ 品种所得的芽短且叶 片卷曲、 玻璃化, G 和 ? 叶片正常。表 B 同时表明, 生长素与细胞分裂素的比例适中时才适合茶树芽的 增殖, 当比例低时有利于芽的增值, 而当比例过高, 增殖的芽少且部分基部出现愈伤组织。
茶树是一种常绿木本植物, 有性繁殖得到的种 子遗传性状混杂, 品质不稳定, 故生产上常用无性的 扦插繁殖。组织培养由于具有快速繁殖、 去除病毒 等 优 点 而 在 茶 树 繁 殖 上 得 以 利 用。% "年代
[ ] X J A Y I <& 最早用茶树茎节作为外植体进行了培养, [ ] [ ] [ ] * 后来 1 成浩 、 黄亚 B A P B I I K I M( 、 I Y I M A B I$ 、 : = [ ] [ ] 辉,、 刘德华 ) 等先后用茶树的茎尖、 腋芽、 茎段、
山! (3 ) 和名山! (D) 。 !号 ( ! 8 9 : 方法 ! + & + ! 外植体的预处理 当腋芽膨大并已伸长到
取带芽茎段, 剪除叶片, 用水冲 ! ! ! + * L M 时采样, 洗干净, , ) "Z 乙醇浸 ! * ! ( " K " + !Z 升汞消毒 %! , 无菌水冲洗 * 次, 然后剥出腋芽尖, 接种在 ! &M ; < 培养基上。 ! + & + & 芽的诱导分化 将消毒后的外植体接种在 加有不同激素和浓度的 ! /& 进 . 启动培养基上, 行芽的诱导分化, 其中激素组合与配比为: : I 0 1 & / : : 2 1 1 ! + */ 3 4 * " "T 0 1 &/2 1 1 ! + *L 0 1 " + */ : 。 [ 6 ! + * / 2 1 1 ! + * /3 4 * " "5 0 1 & /7 1 1 " + * ! + & + ( 丛生芽的继代增殖 将含有& ! (个芽的小 丛芽换于 通过正交设计的前期实 . 增殖培养基, 验, 筛选出 , 个不同的激素组合, 分别为: "0 1 !/ , ,$ 0 #0 1 &/ 7 1 1 " + !/ @ 1 ! 1 &/ 7 1 1 " + * , , 7 1 1 " + !/ \ 4 ! %0 1 &/ 7 1 1 " + * &0 1 &/ , 。 7 1 1 " + ! ’0 1 & ! + & + $ 培养条件 茶树快繁的整个过程中温度均 控制在& 光照 为! 光照时间 * ] &^, * " " ! & " " " G F,
" 结果与分析
" # ! 诱导芽分化培养基对启动率的影响 B E & E & 不同培养基对茶树启动率的影响 在合适
然 的培养基上, 部分腋芽尖培养 & H- 后开始膨大, 后生长点伸长, K!I 周后茎部周围形成一些小芽 体。 结果见表 & 。从表 & 得 B 月后统计其诱导率, 知, 不同的培养基对芽的诱导及丛芽出现的影响不 同。对品种 ? 而言, @ A B C D A A & E F CG 8 F H H 启动率 最高达到J , 与其他培养基差异较大, 而@ J E K; A B CO A A H E F启动效果最差。从该表也可知在细胞分 裂素相同的条件下, 生长素用 D A A比 O A A 对茶树 芽的诱导效果好; 而当生长素与细胞分裂素都相同 时, G 8 的添加使其启动率有所提高。 B E & E B 相同培养基对不同茶树品种启动率的影响 当对不同茶树品种进行芽的诱导分化实验时, 在合适的培养条件下 B H- 左右有芽冒出。统计 B 个月时启动率的情况, 其结果见图 & 。图中反映相 同培养基对不同茶树品种启动率影响的差异十分明 显。在L种培养基中, 品种 A 的启动率为 B H; ! 品种 @ 的启动率也为B 品种 G 为 L H;, H;! L H;, 品种 ? 为 L M H;!J H ;, H ; !K H ;。由此可看 出, 不同培养基对茶树品种影响明显不同。在本研 究中, 品种 ? 对培养基的适应性强, 在不同的培养 基上均能获得较好的芽的诱导分化。 " # " 激素对增殖率的影响 当将小丛芽接种到不同的增殖培养基时, 在合 适的培养条件下& H -左右就陆续有增殖芽出现, L F -左右就几乎停止增殖。 L F-时统计的增殖率情况 见表B 。由表B 可知, 对品种 ? 而言, 培养基不同,
! " # $ ’( ) + $* ( & ) ) " + & ’ " . / ’ & 0 & 1 " + 2 2 # . # 0 " # ( 1 & ( 3 ) ( + & # 2 " ) 2 %& * * , , %&
! & & & 6 1 74 8 9 ; < > ?@ A ; 9 B C < D ?E 8 < 9 ; < F ?G ; 9 A I < : =, =, : =, H ( , , ; ! + 3 J ; < 8 K 81 L 8 5 8 M N8 I K A B 8 M 8 < O I < 56 8 K O ; < 8 L J < C P C 3 J 8 < 5 A, ! " " & ! 3 J ; < I & + 2 < K O ; O A O 8 C N0 ; C O 8 L J < C P C A L P 8 I B HC =6 = H = = HQ 7 , , , ) . ; L J A I <1 L I 5 8 M N1 B ; L A P O A B 8. L ; 8 < L 8 K 3 J 8 < 5 A, ! " " , , 3 J ; < I 6 8 L J < ; A 8 K HC = = R