Allen B-15固定液使用说明

标准阿利新蓝染色液试剂盒货号：G1560规格：3×50ml/3×100ml保存：室温，避光，6个月。

产品说明：阿利新蓝（Alcian）又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。

这种阳离子染料与酸性基团结合，即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。

阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。

该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。

利用染液的不同pH值可判定粘液物质的类属。

在pH=1时，羧基不能离子化因而不能着染，但硫酸基可以被显示。

在pH=2.5的时候，带羧基的粘液质（如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）着色良好而硫酸化粘液质着染不佳。

中性黏液质如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白不能与阿利新蓝反应着色。

常用于粘液性上皮肿瘤的鉴别和肿瘤中是否含有粘液物质的证明。

产品组成：货号名称G15603×50mlG15603×100ml储存试剂(A):Alcian酸化液50ml100ml RT 试剂(B):Alcian染色液50ml100ml RT，避光试剂(C):核固红染色液50ml100ml RT，避光操作说明：（仅供参考）1、对于切片脱蜡至水，对于细胞爬片或者细胞悬液则直接用多聚甲醛固定。

2、入Alcian酸化液浸泡3min。

3、入Alcian染色液染色30min。

4、流水冲洗。

第1页，共2页5、入核固红染色液复染5min。

6、流水冲洗1min。

7、梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

硫酸化粘液质（硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白）蓝色羧酸化粘液质（蛋白多糖，透明质酸）蓝色细胞核红色注意事项：1、固定液采用10%中性福尔马林。

2、若要选择性鉴别硫酸化粘液质和羧酸化粘液质，应使用pH=1.0的阿利新蓝，即调pH值为1.0。

染色时间可根据染色深度做相应调整。

3、本试剂仅适用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

Heidenhain（海登汉）固定液Heidenhain（海登汉）Fixative Solution编号名称规格单位北京华越洋WG04763Heidenhain（海登汉）固定液100ml，500ml瓶Heidenhain（海登汉）固定液用途：Heidenhain（海登汉）固定液含有三氯醋酸和氯化钠，对较硬的组织有软化作用，如皮肤、蛔虫卵、昆虫幼虫等角质层较厚的组织，食道、胃均能适用。

它具有渗透快、收缩小的优点。

小块组织固定3—5小时；大块组织，如皮肤固定12—24小时。

固定后可直接入95％酒精洗涤，勿入水或低度酒精，否则易使胶原纤维膨胀。

切片在染色前，用碘去汞。

Heidenhain（海登汉）固定液固定时的注意事项：(1)固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。

(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。

(3)固定的时间要合适：与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。

经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃冰箱内可保存半年。

经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。

Heidenhain（海登汉）固定液固定的条件：(1)迅速渗入组织，杀死原生质。

在杀死的短时期中，细胞形态不致有所变化。

(2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。

(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。

(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。

(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。

(6)增加媒染作用和染色能力。

(7)使组织变硬，具有一定的硬度。

(8)固定以后能起到保存的作用。

(9)在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。

华越洋Heidenhain（海登汉）固定液其他相关固定液：通用组织细胞固定液Champy固定液Helly固定液AAF固定液Bouin固定液戊二醛固定液Zetterqvist固定液Heidenhain（海登汉）固定液Brasil固定液Dafano固定液Gendre固定液Methacarn固定液A-F固定液。

一些固定液及方法介绍前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。

在此，简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂，以供读者选用。

1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）试剂：多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）使粉末完全溶解，通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮，最后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。

该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。

另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较长期保存。

2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂：A液：多聚甲醛40g蒸馏水400mlB液：Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水300mlC液：NaOH 3.86g蒸馏水200m配制方法：A液最好在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。

注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。

B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1N NaOH或1N HCl 将pH调至7.2～7.4，最后，补充蒸馏水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。

该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，最好加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为0.5%～1%。

该固定剂较温和，适于组织的长期保存。

组织标本于该固定液中，4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。

3．Bouin's液及改良Bouin's液试剂：饱和苦味酸40%甲醛250ml冰醋酸50ml配制方法：先将饱苦味酸过滤，加入甲醛（有沉淀者禁用），最后加入冰醋酸，混合后存于4℃冰箱中备用。

移液枪的使用维护调养之有琴礁磷创作1.1 样品提前从冰箱拿出室温放置，使温度与室温平衡。

✧液体温度＞吸头的移取的液体体积会偏大✧液体温度＜吸头的移取的液体体积会偏小1.2 若溶剂瓶中液体太少，请到入EP管(微量离心管)中，方便吸取。

2. 设定体积✧大体积→小体积逆时针✧小体积→大体积顺时针超出设定刻度，再回调。

包管最佳的精确度。

3. 装枪头✧将移液枪端垂直拔出吸头，左右微微转动，上紧即可4. 吸液4.1 垂直吸液，枪头尖端需浸入液面2-4mm以下。

4.2 枪头预润湿（3次）✧吸头内壁会吸附一层液体，使概况吸附达到饱和，然后再吸入样液，最后打出液体的体积会很精确。

✧一是前进移液法(一般液体)，正向吸液（一档→二档）用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。

接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残存的液体。

最后松开按钮。

✧二是反向移液法（二档→一档）。

此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不必吹出残存的液体。

先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。

接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续坚持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。

正向吸液反向吸液4.3 慢吸慢放，控制好弹簧的伸缩速度。

✧吸液速度太快会发生反冲和气泡，导致移液体积禁绝确。

4.4 将移液枪提离液面，停约一秒钟。

✧观察是否有液滴缓慢的流出。

若有流出，说明有漏气现象。

✧原因：1、移液枪内部气密性欠好。

✧ 2、枪头未上紧，枪头是否匹配；✧ 3、弹簧活塞是否正常；✧4、如果是易挥发的液体（许多有机溶剂都如此），则可能是饱和蒸汽压的问题。

可以先吸放几次液体，然后再移液。

4.5 外壁残留用滤纸蘸檫移液嘴外面附著的液滴5. 放液1)将吸嘴口贴到容器内壁并坚持10-40°倾斜。

2)平稳地把按钮压到一档，停约一秒钟后压到二档，排出剩余液体。

标本组织固定液的选择和方法病理组织学常用制备技术组织的固定（一）固定的概念应用各种方法使病理标本尽量保持其离体前状态的过程称为固定（fixation）。

病理标本（样本）离体后，由于微环境的变化将发生自溶和（或）***，使其结构破坏。

固定的目的和机制是：①使蛋白质凝固，终止或减少分解酶的作用，防止自溶，保存组织、细胞的离体前结构状态，包括保存组织或细胞的抗原性，使抗原不失活，不发生弥散。

②保存组织、细胞内的蛋白质、脂肪、糖原、某些维生素及病理性蓄积物，维持病变的特异性特征。

③使上述物质转为不溶解状态，防止和尽量减少制片过程中人为的溶解和丢失。

④起助染作用。

固定方法有：①物理学方法，如低温冷冻，干冰（dry ice，即固态无水碳酸）冰冻真空脱水，石蜡渗入法。

②化学方法，采用各种化学溶液作固定液，使组织细胞进入固定状态。

这是国内最常用的方法。

固定应在标本离体后尽快进行，小标本可在取材后直接放入固定液内，大标本应在手术结束前或结束后迅速放入固定液内。

固定液与标本的比例不得少于标本体积得5倍。

有特殊要求者应事先选定相应得固定液，如欲查糖原，应选择无水乙醇作固定液等。

固定得时间应适当，微小标本（如胃粘膜等）2～4h即可，大标本应置放12～24h，但亦不要过久，以免影响抗原性，造成免疫组化操作中得困难。

（二）常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。

1甲醛（formaldehyde）是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。

易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formalin）。

用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。

10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。

对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。

经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。

2 乙醇无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。

阿利新蓝染色液(pH2.5,细胞涂片专用)简介：阿利新蓝(Alcian)又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。

这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。

阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成，该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。

pH值为2.5时，组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的酸性黏液物质(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。

Leagene阿利新蓝染色液(pH2.5,细胞涂片专用)采用改良Lison法，利用染液的不同pH 值可区分粘液物质的类属，pH为1时，羧基(COOH)不着色，硫酸基(OSO3H)着色，pH为2.5 时，羧基染色良好而硫酸粘液着色不佳，使硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白着色。

中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白)不能与阿利新蓝反应。

本试剂仅适用于科研领域，特别适用于细胞涂片染色，不适用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、甲醇2、蒸馏水操作步骤(仅供参考)：1、制备新鲜涂片，用甲醇固定。

2、水洗、晾干。

3、滴加Alcian染色液染色。

4、充分水洗、晾干。

5、滴加Alcian复染液复染。

6、水洗、晾干、镜检。

染色结果: 编号名称DG00472×20mlDG00472×50mlStorage试剂(A): Alcian染色液20ml 50ml 4℃避光试剂(B): Alcian复染液20ml 50ml RT 避光使用说明书1份酸性黏多糖蓝色细胞核红色注意事项：1、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低(pH=1.0)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。

染色程序与pH=2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。

2、Alcian染色液呈酸性，染色时应与普通染色分开，否则影响细胞着色。

3、Alcian染色液染色后，涂片应充分水洗，否则影响复染效果。

组织固定液说明书【产品名称】通用名称：组织固定液商品名称：10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。

【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂，使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置，并尽量保存组织中的抗原，使其不被破坏或扩散。

醛类固定液是一种交联性组织固定剂，主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用，中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性，能最大限度地保护组织抗原，固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液，是生物组织最常用的固定液。

【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠，磷酸二氢钾组成。

【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存，储存条件下有效期24个月。

【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。

【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等；2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1：4，将离体组织及时浸入组织固定液中，一般不超过5分钟，固定时间为2至12小时。

【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。

2、不能固定尿酸和糖类物质。

3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。

【产品性能指标】1、PH值：6.8～7.5，且瓶间差异不大于0.2，批间差异不大于0.2。

2、甲醛含量：4%～4.2%。

3、常温下，经固定液固定3h后的组织，经切片后在显微镜下观察，应细胞核清晰，无收缩现象。

【注意事项】1、注意使用时通风；2、忌新旧液混合使用；3、避免使用时接触皮肤、粘膜；4、本品仅用于体外诊断。

Highly戴维生的说明书
操作步骤：
1.将组织标本放入Davidson's fixative中，固定液的体积至少是标本体积的15～20倍。

2.对于后续做免疫组化实验的组织固定标本不超过24小时，常规组织病理学实验的组织固定不超过48小时。

3.从Davidson's fixative中取出组织标本，并用自来水短暂冲洗。

4.织固定后暂时不用，可置于70%乙醇中保存。

注意事项：
1.Davidson's fixative有刺激性气味，请小心操作。

2.组织取材的厚度不同，固定时间也不同。

3.温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。

4.取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。

5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：
12个月有效。

谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布：2013—01-11当前，应用于固定试剂的种类较多,它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能,才能合理的固定组织。

根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型:Ⅰ类:醛类，甲醛，戊二醛,多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等.Ⅱ类:氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾,重铬酸钾等。

Ⅲ类：蛋白变性类,甲醇，乙醇，醋酸等.Ⅳ类：其他,氯化汞，苦味酸等.上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。

下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。

(1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37-40%，由甲醛气体饱和于水而成,比重为1。

12。

它也可以稳定的固体形式存在,它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。

甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中，能使酶钝化,影响其反应。

甲酸,它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。

甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。

参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环.甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。

甲醛有这种交联的功能,也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中,需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色.甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法,就是取10ml甲醛液，加水90ml，这就是10％的福尔马林。

当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少，保存固有物质好。

改良贝林(Balling)固定液简介：Leagene 改良贝林(Balling)固定液又称为改良拉瓦兴固定液，为改良的铬酸-醋酸-福尔马林固定液(又称拉瓦兴固定液，Navaschin 固定液)，主要由铬酸、醋酸、甲醛等组成，该固定液多用于一般植物组织的固定，尤其适用于固定植物细胞学、胚胎学样本以及植物根尖、花药、子房等。

该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 临用前，按试剂(A)：(B)=1：1混匀，即为Balling Fluid (改良贝林固定液)。

2、 取适量组织完全浸没于Balling Fluid ，固定时间大多数控制在，大标本应适当延长固定时间。

3、 70%乙醇洗涤数次。

4、 脱水、透明、封固。

注意事项：1、 Leagene Balling Fluid 有一定刺激性和腐蚀性，请在通风环境下小心操作。

2、 组织取材的厚度不同，固定时间也不同。

3、 固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

如果容积不够大，可以在固定期间更换1～3次固定液。

4、 温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。

5、 取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。

有效期： 12个月有效。

相关：编号 名称DF03072×100ml DF03072×500ml Storage试剂(A): Balling A Fluid 100ml 500ml RT 避光 试剂(B): Balling B Fluid 100ml500mlRT 避光使用说明书1份编号名称CC0022D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红)CC0130 胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DC0032 Masson三色染色液NR0003 Lezol(总RNA提取试剂)TC0699 植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。

固定液和保存液用固定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等，能保存组织内细胞的形态、结构及其组成，尽量使它近于生活状态。

固定液一般有防腐和保存的作用，分为单纯固定液和混合固定液。

单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、升汞等，前两种固定液是中学生物实验室常用的。

单纯固定液的优点是简便，缺点是有一定的局限性，不易达到理想的固定要求。

混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成，使各自的优缺点相互补充，成为较完美的固定液。

这种固定液的制备虽比较麻烦，但是效果比较好。

常用的混合固定液是醋酸-酒精混合液、福尔马林-醋酸-酒精液、包因氏固定液等。

常用的保存液大致跟固定液相同，主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。

有时按特殊保存的需要，再保存液中增加某些药品（如原生标本的保存液）。

1、福尔马林福尔马林在固定组织标本时杀菌能力强，所以防腐性强，渗透力大，固定得快。

永福尔马林固定精细的解剖标本时，要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。

固定液常用的浓度是5～10%（根据材料的大小、性质和数量而定）。

保存液常用的浓度是5～10%。

用福尔马林作保存液，效果好且价格低廉。

在配制福尔马林溶液（固定液或保存液）时，应将37～40%的甲醛作为整个溶质来配。

例如配制5%福尔马林是取市售37～40%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。

实际上甲醛含量只有1.9～2%，这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。

注意事项：（1）福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸，可适量的加入碳酸钙或碳酸镁等碱性物质进行中和。

（2）福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低，并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛，使浸液变浊，影响观察。

所以，根据一定保存期的情况，可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液，以防标本变坏。

其中如有白色沉淀物，加热后可使它溶解。

（3）市售的福尔马林液常带有酸性，能腐蚀石灰质，因此，最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。

常用固定液的配制常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。

幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。

若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。

若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。

久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。

此液又可作保存液。

固定时间最多10h。

如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。

3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ：甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。

固定时间不宜过久。

4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。

通常固定24h，亦可长久保存。

5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。

6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。

固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。

经常使用细胞固定剂及其优缺点比较之樊仲川亿创作1、95%酒精：最经常使用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有需要经过水洗。

此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色。

固定时间根据标本的分歧，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间。

经过95%酒精固定的标本，细胞核保管较好，结构清晰，颜色鲜艳。

如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以呵护细胞免受空气干燥后的人工假象。

2、乙醚酒精液（1：1）：其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应。

长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂。

所以现在已经逐渐被95%酒精所代替。

3、甲醇：固定时间快，细胞收缩小，细胞核保管较好，结构清晰，染色鲜艳。

常作为穿刺细胞涂片的固定液。

对抗原保管较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液。

缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害。

甲醇的毒性与其代谢产品甲醛和甲酸的蓄积有关。

以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不克不及合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩。

近年研究标明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相关。

4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用。

不克不及沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白。

渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用。

5、无水酒精：对糖原保管较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定。

6、丙酮：为易挥发的无色液体，有刺激性气体。

可使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差。

很少用于惯例细胞学的固定。

广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保管，作为细胞涂片免疫组化的固定液。

第1页，共1页ZF 固定液(10%)使用说明书
货号:G2145
规格:500ml
保存:室温避光，有效期12个月。

产品简介：
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。

固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。

ZF 固定液(10%)主要由醛类、硫酸锌、去离子水组成，该固定液适合于绝大多数免疫组化染色的组织固定。

使用说明(仅供参考)：
1、一般标本固定时间控制在1～4h/mm，大标本应适当延长固定时间。

注意事项：
1.
该固定液有一定刺激性和腐蚀性，请在通风较好的环境下小心操作，避免吸入。

2.组织取材的厚度不同，固定时间也不同。

常规活检组织比较适合的厚度为2～4mm，一般不超过6mm。

对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。

3.
温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。

4.取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。

移液枪的使用维护保养1.样品准备1.1 样品提前从冰箱拿出室温放置，使温度与室温平衡。

✧液体温度＞吸头的移取的液体体积会偏大✧液体温度＜吸头的移取的液体体积会偏小1.2 若溶剂瓶中液体太少，请到入EP管(微量离心管)中，方便吸取。

2. 设定体积✧大体积→小体积逆时针✧小体积→大体积顺时针超过设定刻度，再回调。

保证最佳的精确度。

3. 装枪头✧将移液枪端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可4. 吸液4.1 垂直吸液，枪头尖端需浸入液面2-4mm以下。

4.2 枪头预润湿（3次）✧吸头内壁会吸附一层液体，使表面吸附达到饱和，然后再吸入样液，最后打出液体的体积会很精确。

✧一是前进移液法(一般液体)，正向吸液（一档→二档）用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。

接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。

最后松开按钮。

✧二是反向移液法（二档→一档）。

此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。

先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。

接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。

正向吸液反向吸液4.3 慢吸慢放，控制好弹簧的伸缩速度。

✧吸液速度太快会产生反冲和气泡，导致移液体积不准确。

4.4 将移液枪提离液面，停约一秒钟。

✧观察是否有液滴缓慢的流出。

若有流出，说明有漏气现象。

✧原因：1、移液枪内部气密性不好。

✧ 2、枪头未上紧，枪头是否匹配；✧ 3、弹簧活塞是否正常；✧4、如果是易挥发的液体（许多有机溶剂都如此），则可能是饱和蒸汽压的问题。

可以先吸放几次液体，然后再移液。

4.5 外壁残留用滤纸蘸檫移液嘴外面附著的液滴5. 放液1)将吸嘴口贴到容器内壁并保持10-40°倾斜。

2)平稳地把按钮压到一档，停约一秒钟后压到二档，排出剩余液体。

磷酸缓冲中性福尔马林固定液济南百博生物技术股份有限公司【预期用途】磷酸缓冲中性福尔马林固定液主要用于适用于常规标本的组织固定。

福尔马林固定液作为一种样本处理液，主要是通过对组织标本的固定，以方便医院检验人员进行后续的染色、免疫组化等操作。

该固定液主要是用于对病人进行治疗的初步阶段，用于固定组织切片标本。

由于该种固定液是用于固定病理组织标本使用的，所以该种固定液的目标用户是各医院的手术室、病理科以及肿瘤医院等。

【检验原理】甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此可做为检验时的组织固定剂。

【主要组成成份】甲醛、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。

【适用范围】用于大多数组织标本的固定，能较好地保存组织的抗原性和细微结构，具有较强的渗透力和较好的固定效果，能满足常规HE及免疫组化、原位杂交等检测工作。

【使用方法】根据组织类型及试验目的选择合适的固定液浓度，按标本的5—10的用量将组织标本在室温条件下浸泡固定2-72h，（固定时间依组织块大小和实验目的而定）,自来水或缓冲液充分漂洗后即可用于组织切片。

【固定的作用】固定的作用，从组织学的角度讲是，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构，而从免疫组化技术的角度，固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应；防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质；以保持组织的固有形态和结构；更重要的是保持组织或细胞的抗原性，不但要使抗原不导致失活，而且不使抗原发生弥散的现象，才能在免疫组化染色时，不产生过深的背景，影响对阳性物的判断。

【成分特点】1 .采用优质进口原料配制，确保产品质量优良2 .添加独特增固剂，增强组织固定效果3 .添加复合磷酸盐，形成一个中性缓冲环境（pH：7.0±0.2）4 .添加挥发抑制剂，减少甲醛挥发，气味小且安全5 .添加独特抗聚合反应成分，防止有效成分聚合【固定特点效果】1. 固定效果均匀，穿透力强，完整保存细胞组织形态结构2. 增进组织弹性，利于切片3. 完整保存组织细胞形态结构，特别适用于免疫组化染色的组织，能最大程度保存组织细胞的蛋白抗原和核酸分子，使抗原定位更加清晰，利于特殊染色、免疫组化染色及分子生物学检验4. 有效保存脂肪及脂类物质，使免疫组化的染色与鉴定效果更佳5. 适用于血红素与含铁血红素的固定，抑制福尔马林色素的生成6. 特別适用于黏多糖染色与鉴定。

经常使用细胞固定剂及其优缺点比较之吉白夕凡创作1、95%酒精：最经常使用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有需要经过水洗。

此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色。

固定时间根据标本的分歧，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间。

经过95%酒精固定的标本，细胞核保管较好，结构清晰，颜色鲜艳。

如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以呵护细胞免受空气干燥后的人工假象。

2、乙醚酒精液（1：1）：其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应。

长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂。

所以现在已经逐渐被95%酒精所代替。

3、甲醇：固定时间快，细胞收缩小，细胞核保管较好，结构清晰，染色鲜艳。

常作为穿刺细胞涂片的固定液。

对抗原保管较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液。

缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害。

甲醇的毒性与其代谢产品甲醛和甲酸的蓄积有关。

以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不克不及合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩。

近年研究标明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相关。

4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用。

不克不及沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白。

渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用。

5、无水酒精：对糖原保管较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定。

6、丙酮：为易挥发的无色液体，有刺激性气体。

可使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差。

很少用于惯例细胞学的固定。

广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保管，作为细胞涂片免疫组化的固定液。