知识四十四钙、磷、镁的检验教学目的：掌握血钙、血磷、血镁的测定方法、基本原理、方法学评价及临床意义。
重点：OCPC法测定血钙、比色法测定血镁的基本原理、方法学评价及临床意义。
难点：OCPC法测定血钙、比色法测定血镁的基本原理、方法学评价。
教学方法和手段：课堂讲授为主，多媒体教学为辅，课堂提问与讨论相结合。
授课时数：1学时教学内容及组织：一、钙的测定化学法①滴定法（氧化还原滴定，络合滴定）；②比色法（邻甲酚酞络合法，甲基麝香草酚蓝法）。
血钙测定物理法①火焰光度法；②ISE法；③原子吸收分光光度法；④同位素稀释质谱法。
1.EDTA-Na2络合滴定法在碱性溶液中，血清钙与钙红指示剂结合成可溶性的复合物，使溶液呈淡红色，EDTA-Na2对钙有很大的亲和力，能与复合物中的钙络合，使钙红指示剂重新游离，溶液变蓝色，根据EDTA-Na2滴定用量可计算出血清钙含量。
钙＋钙红————→钙-钙红复合物淡红色钙-钙红复合物＋EDTA-Na2————→EDTACa ＋钙红蓝色钙指示剂除钙红外，还有依地铬黑T（红→蓝），钙黄绿素（黄→绿），紫红酸铵（红→紫）。
钙红指示剂终点明显，不受血清镁干扰，血清镁在强碱性条件下生成Mg（OH）2↓，指示剂在强碱性条件下不稳定，加指示剂后应立即滴定。
操作简便，无需特殊仪器设备，适合于基层医院，但终点判断人为误差较大，溶血、黄疸影响终点判断。
2.邻甲酚酞络合酮法（O-CPC）邻甲酚酞络合酮是一种金属络合染料，也是一种酸碱指示剂，在碱性溶液中能与钙和镁螯合，生成紫红色螯合物（吸收峰575nm），作钙测定时，加入8-羟基喹啉消除镁的干扰。
Mg2+＋8-羟基喹啉————→可溶性络合物Ca2+＋邻甲酚酞络合酮————→紫红色螯合物灵敏度很高，试管、器皿如有微量的钙污染亦会引起误差，最好使用一次性试管，所有试剂置塑料瓶中保存。
3.甲基麝香草酚蓝法（MTB）血清钙在碱性溶液中与甲基麝香草酚蓝（MTB）结合，生成一种蓝色络合物，加入8-羟基喹啉消除镁干扰。
