曹亚萍论文的封面

基于图形图像合成技术的植物建模与风中模拟曹阳【摘要】在建模过程中根据植物枝干和叶片的不同特征,采用分形图形学的方法绘制植物的枝干,并通过控制函数调整每个分枝的生长方向、长度和粗细程度等参数,可以生成不同种类、形态各异的植物分支结构,改变了原有分形方法生成结果过于规则的特点;采用图像方法绘制叶片,利用Alpha测试技术去掉图片中叶子的背景,保留复杂的边缘信息和颜色信息,通过旋转缩放等方法,可以生成各种逼真的植物叶片,并且方法简单,计算速度较快.另外,从形态学角度出发,根据枝条在风力影响下的不同形变,近似地模拟出植物在风中摇曳的过程.%According to the different features between plant trunks and leaves, fractal method was adopted to draw the branches during simulation process. Through controlling functions to adjust parameters, such as branching growth direction,length, and radius, all kinds of branch structures were created to change the original fractal method in generating results of too regular characteristics. Image method was adopted to draw blades and Alpha test technology was utilized to filter the background of the leaf picture and retain the complex edge and color information. Through the rotating and scaling method,various lifelike leaves were generated. This image-based method was simpler and faster than the graph method. Besides, the process of plant flickering in the wind was approximately simulated according to the branches of different deformation under the influence of wind from morphology point of view.【期刊名称】《计算机应用》【年(卷),期】2011(031)005【总页数】4页(P1252-1254,1257)【关键词】植物建模;分形;Alpha测试;形态学;风中模拟【作者】曹阳【作者单位】辽东学院信息技术学院,辽宁丹东118003【正文语种】中文【中图分类】TP751.1;TP391.410 引言植物建模是虚拟现实、计算机游戏、园林设计等系统中不可缺少的组成部分，但由于植物本身结构的复杂性以及自然形态的多样性，对其进行重建具有一定的挑战性。

毕 业 论 文题 目： 浅析《小妇人》中的女性主义学 院： 外国语学院专 业： 英语 班 级： 0901 学号 200904010122 学生姓名： 易 燕 导师姓名： 曹 丽 英 完成日期： 2013年6月ANALYSIS OF FEMINISM IN LITTLE WOMENTHESISSubmitted in partial fulfillment of the requirements forThe degree of Bachelor of ArtsIn Hunan Institute of EngineeringBy Yi YanSupervisor: Cao LiyingCollege of Foreign LanguagesHunan Institute of EngineeringJune 2013诚信声明本人声明：1、本人所呈交的毕业设计（论文）是在老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果；2、据查证，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，毕业设计（论文）中不包含其他人已经公开发表过的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位而使用过的材料；3、我承诺，本人提交的毕业设计（论文）中的所有内容均真实、可信。

作者签名：日期：年月日毕业设计（论文）任务书题目：浅析《小妇人》中的女性主义姓名易燕院外国语学院专业英语班级0901 学号200904010122指导老师曹丽英职称副教授教研室主任王荣富一、基本任务及要求：培养学生独立检索中外文资料的能力，初步具备搜集、整理、筛选信息资料的能力，初步掌握科学研究的基本方法，了解科学研究论文的写作技巧与规范化要求。

阅读并充分理解《小妇人》的原著。

在较多地查阅关于路易莎·梅·奥尔科特的女性主义观，女性主义理论及用此理论分析本部小说与相关小说的评论著作后，撰写出2500字的文献综述；进一步搜集、整理与论文有关的文献资料，扩充查阅范围。

投稿邮箱：sjzxyx88@·临床监护·人文关怀在重症监护室护理中的应用价值探析曹哲梅（保定市蠡县医院，河北 保定 071400）0　引言人文关怀护理强调对患者生命安全及身心健康方面更为全面、深入的护理，在护理中坚持以人为本，所有护理行为均以患者为中心。

在给予专业医疗技术指导的同时，还需给予患者情感上的呵护。

这就要求护理人员，不仅要了解医疗技术，同时还要学会倾听患者心声，将情感融入日常护理工作之中，让患者感受到医护人员的善意，进而更加信任医护人员。

既往临床实践证明，将人文关怀护理模式应用于重症监护室护理中，可有效改善患者心理状态，提高患者睡眠质量[2]。

为进一步证实此结论，本文特抽取本院收治的重症监护室患者共74例，实施对照性研究，现总结分析如下。

1　资料与方法1.1　一般资料。

抽取本院于2016年2月到2017年9月收治的重症监护室患者共74例，数字随机分组法随机分为研究组与对照组，各37例。

研究组37例中男17例，女20例，年龄31-66岁，平均（42.1±5.2）岁；对照组37例中男19例，女18例，年龄30-68岁，平均（43.6±7.2）岁。

患者均因手术原因导致其身体免疫力有所下降。

对比2组患者身体状况、性别及年龄，差异无统计学意义（P>0.05），可进行临床对比研究。

1.2　方法。

给予对照组常规护理模式，在对照组基础上，给予研究组人文关怀护理模式，具体措施如下：1.2.1　常规护理模式：检测患者各项生命体征时，均需在无菌室内进行。

给予基本排痰、吸氧护理。

控制好监护室内温湿度，确保室内空气流通，定期进行消毒。

护理人员需每天监测患者临床症状及生命指标，将其稳定在可控范围之内。

1.2.2　人文关怀护理模式：①人文心理护理：重症监护室患者通常会认为自己病情严重，因此常会产生焦虑等负面情绪，日常治疗中患者甚至会出现消极抵触行为。

因此，护理人员需善于倾听患者心声，及时解答其心中疑惑。

1引言随着经济全球化的进程和企业间竞争的加剧，外包已成为现代企业获取竞争优势的重要战略管理工具[1]。

近年来，软件外包呈现急剧增长的趋势，但实践中相当大比例的软件外包交易被认为是失败的或遭遇了严重的问题，引发了研究者们对外包成功和外包影响因素的广泛研究[2]。

这些研究大多从客户方角度，例如研究客户如何通过科学的决策获得外包成功，而缺乏从接包方的角度研究外包决策和外包成功。

但外包的成功需要双方都从中获益，研究者已认识到承包商决策对项目成功的重要作用，如Madhuchhanda等指出承包商不当的投标决策是导致外包项目失败的主要原因之一[3]。

随着越来越多的软件供应商在新兴经济体进入外包的竞争，接包方迫切需要从理论研究中获得管理的见解来指导其决策。

因此，从接包方角度研究外包决策具有重要的理论和实践价值。

如何选择供应商是客户外包决策中的一个经典问题，Li等认为公司科学地选择合适的外包供应商对于提高外包成功率非常重要[4]。

研究者已提出很多通过评估承包商的特点和能力来帮助企业选择合适的承包商的软件外包项目的解析证据推理评价模型张剑1，曹萍2ZHANG Jian1,CAO Ping21.上海工程技术大学航空学院，上海2016202.上海应用技术大学经济与管理学院，上海2014181.School of Air Transportation,Shanghai University of Engineering Science,Shanghai201620,China2.College of Economic and Management,Shanghai Institute of Technology,Shanghai201418,ChinaZHANG Jian,CAO Ping.Analytical evidence-reasoning evaluation model of software outsourcing -puter Engineering and Applications,2018,54（8）：236-241.Abstract：Evaluating the software project to be accepted by the contractor can effectively improve the project success and contractor’s outsourcing performance.This paper constructs the evaluation index system of a software project from the perspective of contractors,which includes four indicators：Project’s characteristics,enterprise interior ability,customer status and the contractor network capability.In order to solve the problem that some indicators have the characteristics of uncertainty and unknown information,evaluation model of software project is proposed based on Evidential Reasoning （ER）.Finally,the validation of model is verified through a case study.The result shows that the model is effective to solve the synthesis problem of fuzzy and uncertain information,which overcomes the subjectivity of evaluation,and canprovide the basis for software contractor selection software project.Key words：software outsourcing project;evidence reasoning;evaluation;contractor’s perspective摘要：软件承包商对拟承接的软件项目进行评估可以有效地提高项目的成功率和外包绩效。

我国小麦抗BYDV遗传育种研究进展
曹亚萍
【期刊名称】《西北农业学报》
【年(卷),期】2005(014)001
【摘要】本文论证了小麦抗BYDV育种的重要性,阐明了自50年代发现BYDV以后,科学家们首先将抗BYDV基因由小麦近缘种导入普通小麦,育成双二倍体,再作为中间材料培育成异附加系和异代换系,进而利用Ph突变体、组织培养、分子原位杂交等途径,育成易位系材料,最终应用于抗病育种的过程;明确了不同偃麦草与不同小麦杂交,导入的抗BYDV基因位点不同,从而扩大了抗源的多样性,同时也引起了遗传规律的差异;提出了现阶段抗病育种中存在的问题.
【总页数】4页(P111-114)
【作者】曹亚萍
【作者单位】山西省农科院小麦研究所,临汾,041000
【正文语种】中文
【中图分类】S435.121.4+9
【相关文献】
1.冬小麦抗BYDV材料粒重性状的配合力分析 [J], 曹亚萍;范绍强;张娟
2.小麦抗黄矮病遗传育种研究进展 [J], 范绍强;谢咸升;郑王义;李峰
3.抗小麦黄矮病相关蛋白激酶TiDPK1与BYDV外壳蛋白的互作 [J], 汪信东;陈亮;张增艳
4.抗BYDV小麦材料的产量性状遗传分析 [J], 范绍强;曹亚萍
5.小麦抗赤霉病遗传育种研究进展及思考 [J], 高德荣;胡文静;张勇;别同德;吕国峰;蒋正宁;程顺和
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Android平台人脸识别方法研究
曹萍萍;刘升
【期刊名称】《牡丹江师范学院学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2018(000)004
【摘要】研究直接系统编程实现人脸识别、基于组件技术的人脸识别和基于云计算的人脸识别三种算法.直接系统编程算法可实现基于肤色的人脸检测;基于组件方式应用OpenCV库可实现人脸的检测和特征比较;云计算方式可实现人脸识别、情感计算等功能.研究人员可根据设计要求选择算法,满足识别系统的需求.
【总页数】4页(P27-30)
【作者】曹萍萍;刘升
【作者单位】淮北师范大学计算机科学与技术学院 ,安徽淮北 235000;淮北师范大学计算机科学与技术学院 ,安徽淮北 235000
【正文语种】中文
【中图分类】TP391.4
【相关文献】
1.基于Android平台的快速人脸识别系统设计 [J], 赵凯凯
2.基于Android平台的人脸识别中间件的设计与实现简 [J], 马嘉赛;
3.基于Android平台的人脸识别中间件的设计与实现 [J], 马嘉赛;
4.基于Android平台人脸识别算法的应用 [J], 王冉
5.人脸识别在Android平台下的研究与实现 [J], 钱柯桥
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第31卷 第4期V o l .31 No .4草 地 学 报A C T A A G R E S T I A S I N I C A2023年 4月A pr . 2023d o i :10.11733/j.i s s n .1007-0435.2023.04.015引用格式:李红玉,王雅聪,夏方山,等.燕麦种胚细胞和线粒体A s A -G S H 循环对外源H 2O 2引发的响应[J ].草地学报,2023,31(4):1067-1070L IH o n g -y u ,WA N G Y a -c o n g ,X I AF a n g -s h a n ,e t a l .R e s p o n s e o fA s A -G S H C y c l e s t oE x o g e n o u sH 2O 2Pr i m i n g i n t h eE m b r y o n i cC e l l s a n d M i t o c h o n d r i a o fO a t S e e d s [J ].A c t aA gr e s t i aS i n i c a ,2023,31(4):1067-1070燕麦种胚细胞和线粒体A s A -G S H 循环对外源H 2O 2引发的响应李红玉,王雅聪,夏方山*,王 勃,李尹琳,张杰敏(山西农业大学草业学院,山西太谷030801)收稿日期:2022-11-08;修回日期:2022-12-13基金项目:山西农业大学 十四五 生物育种工程项目(Y Z G C 134);国家自然基金项目(31702171);山西省重点研发计划项目(201903D 221091,202102140601006);内蒙古大学 省部共建草原家畜生殖调控与繁育 国家重点实验室开放课题(2021K F 0303)资助作者简介:李红玉(1973-),女,汉族,山西太谷人,硕士,高级实验师,主要从事草种子科学研究,E -m a i l :l i h o n g yu 289@126.c o m ;*通信作者A u t h o r f o r c o r r e s p o n d e n c e ,E -m a i l :d ql x f s 8583@163.c o m 摘要:本研究探讨了外源H 2O 2引发后,燕麦(A v e n a s a t i v a )种胚细胞和线粒体抗坏血酸(A s c o r b i c a c i d ,A s A )-谷胱甘肽(G l u t a t h i o n e ,G S H )循环的抗氧化性能的变化规律,以期为植物种子的长期贮藏技术研究提供理论依据㊂试验以燕麦种子为材料,用浓度为0,0.96,1.92,3.84和7.68m o l ㊃L -1的H 2O 2引发12h 后,分析其种胚细胞和线粒体脂质过氧化水平㊁A s A -G S H 循环中酶促和非酶促抗氧化物质的变化规律㊂结果表明:燕麦种胚细胞和线粒体内A s A 和G S H 含量会随外源H 2O 2浓度的增加而显著降低(P <0.05),其A s A -G S H 循环的酶活性㊁脱氢抗坏血酸和氧化型谷胱甘肽含量均呈先升后降的趋势,其H 2O 2和丙二醛含量显著升高(P <0.05),燕麦种子发芽率则显著降低(P <0.05)㊂燕麦种胚细胞和线粒体A s A -G S H 循环的抗氧化功能变化对H 2O 2浓度升高的响应具有协同性,其抗氧化能力下降导致高浓度(ȡ1.92m o l ㊃L -1)外源H 2O 2引发下燕麦种子发芽率降低,而其A s A 含量及再生能力的降低是造成这一现象的主要原因㊂关键词:抗坏血酸-谷胱甘肽循环;线粒体;过氧化氢;燕麦;种子引发中图分类号:S 512.6 文献标识码:A 文章编号:1007-0435(2023)04-1064-07R e s p o n s e o fA s A -G S HC y c l e s t oE x o g e n o u sH 2O 2P r i m i n g i n t h eE m b r yo n i c C e l l s a n dM i t o c h o n d r i a o fO a t S e e d sL IH o n g -y u ,WA N G Y a -c o n g ,X I AF a n g-s h a n *,WA N GB o ,L IY i n -l i n ,Z H A N GJ i e -m i n (C o l l e g e o fG r a s s l a n dS c i e n c e ,S h a n x iA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y ,T a i gu ,S h a n x i P r o v i n c e 030801,C h i n a )A b s t r a c t :I n t h i s s t u d y ,t h e c h a n g e s i n t h e a n t i o x i d a n t p r o p e r t i e s o f a s c o r b i c a c i d (A s A )-gl u t a t h i o n e (G S H )c y c l e sw e r e e x p l o r e d a s a r e s p o n s e t o e x o g e n o u sH 2O 2pr i m i n g i n t h e e m b r y o n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i ao f o a t (A v e n a s a t i v a )s e e d s ,w h i c h p r o v i d e d a t h e o r e t i c a l b a s i s f o r t h e l o n g -t e r ms t o r a geo f p l a n t s e e d s .O a t s e e d sw e r e p r i m e dw i t h0,0.96,1.92,3.84a n d 7.68m o l ㊃L -1H 2O 2fo r 12ha s t h e e x p e r i m e n t a lm a t e r i -a l s ,a n d t h e c h a n g e s i n l i p i d p e r o x i d a t i o n a n d e n z y m a t i c a n d n o n -e n z y m a t i c a n t i o x i d a n t s i nA s A -G S Hc y c l e s w e r e a n a l y z e d i nb o t h t h e i r e m b r yo n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i a .T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h eA s Aa n dG S H c o n t e n t sw e r e s i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d i n t h e e m b r y o n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i a (P <0.05),a n d e n z ym a t i c a c -t i v i t i e s o fA s A -G S Hc y c l e s a n d c o n t e n t s o f d e h y d r o a s c o r b a t e a n do x i d i z e d g l u t a t h i o n ew e r e a l lw i t ha p a t -t e r no f i n c r e a s i n g f i r s t l y a n d t h e nd e c r e a s i n g .H 2O 2an dm a l o n d i a l d e h y d ec o n t e n t sw e r ea l s os i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d (P <0.05),a n dt h u st h e g e r m i n a t i o n p e r c e n t a g eo fo a ts e e d sw a sr e d u c e ds i g n i f i c a n t l y (P <0.05).E m b r y o n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i a s h o w e d s i m i l a r r e s u l t s o f c h a n g e s o fA s A -G S Hc y c l e s i n r e s po n s e t o t h e i n c r e a s e o fH 2O 2co n c e n t r a t i o n ,a n d t h e d a m a g e o n t h e i r a n t i o x i d a n t c a p a c i t y r e s u l t e d i n t h e d e c r e a s e o f s e e d g e r m i n a t i o nu n d e r p r i m i n g w i t hh i g hc o n c e n t r a t i o n (ȡ1.92m o l ㊃L -1)o fe x o g e n o u s H 2O 2.I t m i g h t b e c a u s e d l a r g e l y b y th e d e c r e a s e o fA s Ac o n t e n t a n d i t s c o n t i n u o u s p r o d u c t i o n .K e y wo r d s :A s c o r b i c a c i d -g l u t a t h i o n e c y c l e s ;M i t o c h o n d r i a ;H y d r o g e n p e r o x i d e ;O a t ;S e e d p r i m i n g Copyright ©博看网. All Rights Reserved.第4期李红玉等:燕麦种胚细胞和线粒体A s A-G S H循环对外源H2O2引发的响应种业是决定国家稳定发展的基础性和战略性核心产业,已成为推动我国农牧业高质量发展的重要引擎[1]㊂种子活力水平是直接决定着民族种业高质量发展的关键因素,其在储藏中会因为活性氧(R e-a c t i v eo x y g e ns p e c i e s,R O S)的不断积累而逐步降低[2]㊂H2O2的产生与清除是植物维持细胞内R O S 动态平衡的关键环节,其过量积累成为引起贮藏种子活力不断下降的关键原因[3-4]㊂线粒体是种胚细胞内最主要的细胞器,其既是种胚细胞内R O S产生的最主要来源,又是种胚细胞内R O S攻击的首要目标,因而是对种子劣变最敏感的细胞器[5]㊂抗坏血酸(A s c o r b i ca c i d,A s A)-谷胱甘肽(G l u t a t h i o n e, G S H)循环是种子内维持其寿命的诸多系统中最为活跃的核心环节,因而是种胚细胞和线粒体内维持R O S稳态的重要渠道[6-7]㊂研究发现,轻度老化会诱导植物种胚细胞和线粒体内A s A-G S H循环中抗坏血酸过氧化物酶(A s c o r b a t e p e r o x i d a s e,A P X),谷胱甘肽还原酶(G l u t a t h i o n e r e d u c t a s e,G R),超氧化物歧化酶(S u p e r o x i d ed i s m u t a s e,S O D),脱氢抗坏血酸还原酶(D e h y d r o a s c o r b a t e r e d u c t a s e, D H A R)和单脱氢抗坏血酸还原酶(M o n o d e h y d r o a-s o r b a t e r e d u c t a s e,M D H A R)活性升高,其H2O2和丙二醛(M a l o n d i a l d e h y d e,M D A)含量维持一个相对较低的水平,因而其种子活力也基本未降低,但重度老化时则出现完全相反的现象[8-11]㊂外源H2O2引发下燕麦种胚细胞和线粒体中也发现了相似的变化规律[12-13]㊂老化燕麦种子的种胚细胞与线粒体在引发过程中会协同发挥作用,且线粒体是其发挥清除R O S作用的最主要部位[14]㊂然而,植物种胚细胞及线粒体A s A-G S H循环如何协同响应外源H2O2引发处理尚未见报道,其是否与老化种子的引发处理具有相同的规律也仍然不清楚㊂所以本试验旨在探讨燕麦种胚细胞和线粒体A s A-G S H循环对不同浓度外源H2O2引发的响应,以验证内源H2O2含量变化与种子活力水平的内在关系,从而为精确揭示种子老化的内在抗氧化机制提供理论依据㊂1材料与方法1.1H2O2引发处理将均匀饱满的 太阳神 燕麦种子(具体来源及详细信息见文献[12-13])分为约10g每份,并参照文献[15]的方法将其含水量调整至鲜重基础约10%,然后用200m L浓度分别为0,0.96,1.92,3.84和7.68 m o l㊃L-1的H2O2在室温黑暗条件下浸泡12h后,快速用蒸馏水冲洗3次,用滤纸吸掉其表层水分后,于室温黑暗环境中风干至含水量10%(鲜重基础)左右时进行密封,并于4ħ下保存备用㊂以未引发处理的燕麦种子作为对照(C K)㊂每个处理重复4次㊂1.2发芽试验按照国际种子检验协会发布的种子检验规程(2017)[16]规定的条件进行,具体操作方法参照文献[17]进行,并按照公式G p=(G10/N)ˑ100%来计算其发芽率,式中G p代表种子发芽率,G10代表末次计数第10天时的正常发芽种子数,N代表供试发芽种子的总数[16]㊂1.3生理指标的测定提取种胚细胞粗酶液参考K i b i n z a等[18]的方法,具体操作参照文献[12]进行;提取与纯化种胚线粒体则参照Y i n等[19]的方法,具体操作参照文献[13]进行㊂测定可溶性蛋白和H2O2含量采用了建成生物工程研究所的试剂盒,测定MD A含量参考B a i l l y等[20]的方法,测定S O D活性参考R a o等[21]的方法,测定A P X和D HA R活性参考N a k a n o等[22]的方法,测定MD HA R活性参考A r r i g o n i等[23]的方法,测定G R活性参考E s t e r-b a u e r等[24]的方法,测定A s A和脱氢抗坏血酸(D e h y d r o a s c o r b i c a c i d,D HA)含量参照K a m p f e n-k e l等[25]的方法,测定G S H和氧化型谷胱甘肽(O x i d i z e d g l u t a t h i o n e,G S S G)含量参照G r i f f i t h[26]的方法㊂1.4数据分析采用S P S S21.0和E x c e l2010统计软件整理试验数据,并进行方差分析,多重比较则用D u n-c a n s法(P<0.05),以 平均值ʃ标准误 表示最后结果㊂2结果与分析2.1燕麦种子发芽率的变化由图1可知,燕麦种子的发芽率在H2O2浓度为0m o l㊃L-1时与C K无显著性差异,但在H2O2浓度ȡ0.96m o l㊃L-1时显著低于C K(P<0.05),且在H2O2浓度为7.68m o l㊃L-1时为0㊂5601Copyright©博看网. All Rights Reserved.草 地 学 报第31卷图1 H 2O 2引发下燕麦种子发芽率的变化F i g .1 C h a n g e s i n g e r m i n a t i o n p e r c e n t a ge of o a t s e e d su n d e rH 2O 2pr i m i n g 注:不同字母表示存在显著性差异(P <0.05)㊂下同N o t e :D i f f e r e n t l e t t e r s i n d i c a t e s i gn i f i c a n t d i f f e r e n c e s a t t h e 0.05l e v e l .S i m i l a r l y f o r t h e o f l o w i n g f i gu r e s 2.2 燕麦种胚细胞和线粒体内H 2O 2和MD A 含量变化燕麦种胚细胞和线粒体内M D A 和H 2O 2含量随H 2O 2浓度的增大呈不断上升趋势(图2)㊂0m o l ㊃L -1H 2O 2引发时,燕麦种胚细胞和线粒体内M D A ,H 2O 2含量均与C K 无显著性差异,但0.96~7.68m o l㊃L -1H 2O 2引发时,燕麦种胚细胞和线粒体内M D A 和H 2O 2含量呈显著升高趋势(P <0.05),且均显著高于C K (P <0.05)㊂H 2O 2浓度为0~1.92m o l ㊃L -1时,燕麦种胚细胞内H 2O 2含量低于线粒体内,但H 2O 2浓度为3.84m o l ㊃L -1和7.68m o l㊃L -1时,燕麦种胚细胞内H 2O 2含量则高于线粒体内;H 2O 2浓度为0和0.96m o l ㊃L -1时,燕麦种胚细胞内M D A 含量低于线粒体内,但H 2O 2浓度为1.92~7.68m o l ㊃L -1时,燕麦种胚细胞内M D A 含量则高于线粒体内㊂图2 H 2O 2引发下燕麦种胚细胞和线粒体内H 2O 2(A )和M D A (B )含量的变化F i g .2C h a n g e s i nH 2O 2(A )a n d MD A (B )c o n t e n t s o f e m b r y o n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i a i no a t s e e d su n d e rH 2O 2pr i m i n g 2.3 燕麦种胚细胞和线粒体内抗氧化酶活性变化燕麦种胚细胞和线粒体内S O D ,A P X ,G R ,M D H A R 和D H A R 活性随H 2O 2浓度的增大呈先升后降趋势(图3)㊂H 2O 2浓度为0m o l ㊃L -1时,燕麦种胚细胞和线粒体内S O D ,A P X ,G R ,M D H A R 和D H A R 活性都与C K 无显著性差异㊂种胚细胞S O D和G R 活性在H 2O 2浓度为1.92m o l ㊃L -1时显著高于其他浓度时(P <0.05),但其种胚线粒体S O D 和G R 活性在0.96m o l ㊃L -1H 2O 2引发时显著高于其他浓度时(P <0.05);种胚细胞及线粒体S O D 活性在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时仍均显著高于C K (P <0.05),种胚细胞G R 活性在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时也仍显著高于C K (P <0.05),但其种胚线粒体G R 活性在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时则显著低于C K (P <0.05)㊂种胚细胞A P X 活性在H 2O 2浓度为0.96m o l ㊃L -1时显著高于其他浓度时(P <0.05),其种胚线粒体A P X 活性在1.92m o l㊃L -1H 2O 2引发时显著高于其他浓度时(P <0.05);种胚细胞A P X 活性在H 2O 2浓度为3.84m o l ㊃L -1时已显著低于C K (P <0.05),但其种胚线粒体A P X活性在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时才显著低于C K (P <0.05)㊂种胚细胞和线粒体M D H A R 和D HA R 活性在0.96m o l ㊃L -1H 2O 2引发时均显著高于其他浓度时(P <0.05);种胚细胞M D H A R 和D HA R 活性在H 2O 2浓度为3.84m o l ㊃L -1时均已显著低于C K (P <0.05),其种胚线粒体M D H A R 活性则在H 2O 2浓度为1.92m o l ㊃L -1时就已显著低于C K (P <0.05),而种胚线粒体D H A R 活性则在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时才显著低于C K (P <0.05)㊂6601Copyright ©博看网. All Rights Reserved.第4期李红玉等:燕麦种胚细胞和线粒体A s A -G S H 循环对外源H 2O 2引发的响应图3 H 2O 2引发下燕麦种胚细胞和线粒体内As A -G S H 循环抗氧化酶的活性变化F i g .3 C h a n g e s i n t h e a n t i o x i d a n t e n z y m e s a c t i v i t i e s o f i nA s A -G S Hc y c l e s i ne m b r yo n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i a o f o a t s e e d su n d e rH 2O 2pr i m i n g 2.4 燕麦种胚细胞和线粒体内A s A 含量变化随着H 2O 2引发浓度的增加,燕麦种胚细胞和线粒体内A s A 含量均呈现逐渐下降趋势,而两者D H A 含量则均呈现先升高后降低的趋势(图4)㊂H 2O 2浓度为0m o l ㊃L -1时,燕麦种胚细胞内A s A 含量显著高于C K (P <0.05),但其种胚线粒体内A s A 含量则与C K 无显著性差异,燕麦种胚细胞和线粒体内D H A 含量均与C K 无显著性差异㊂燕麦种胚细胞和线粒体A s A 含量均在H 2O 2浓度为0.96m o l ㊃L -1时就显著低于C K (P <0.05),在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时显著低于其他浓度(P <0.05);燕麦种胚细胞D H A 含量在H 2O 2浓度为0.96m o l㊃L -1时快速上升,并显著高于其他浓度时(P <0.05),而其种胚线粒体D H A 含量在1.92m o l ㊃L -1H 2O 2引发时仍显著高于其他浓度时(P <0.05),且其种胚细胞和线粒体D H A 含量均在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时仍显著高于C K (P <0.05)㊂7601Copyright ©博看网. All Rights Reserved.草 地 学 报第31卷图4 H 2O 2引发下燕麦种胚细胞和线粒体内As A (A )及D H A (B )的含量变化F i g .4 C h a n g e s i n t h eA s A (A )a n dD HA (B )c o n t e n t s o f e m b r yo n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i a i no a t s e e d s u n d e rH 2O 2pr i m i n g 2.5 燕麦种胚细胞和线粒体内G S H 含量变化随着H 2O 2引发浓度的增加,燕麦种胚细胞和线粒体内G S H 含量均呈现逐渐下降趋势,而其种胚细胞和线粒体内G S S G 含量则均呈现先升高后降低的趋势(图5)㊂H 2O 2浓度为0mo l ㊃L -1时,燕麦种胚细胞内G S H 和G S S G 含量均与C K 无显著差异㊂燕麦种胚细胞和线粒体G S H 含量均在H 2O 2浓度为0.96m o l ㊃L -1时已显著低于C K (P <0.05),在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时显著低于其他浓度(P <0.05);燕麦种胚细胞和线粒体G S S G 含量在H 2O 2浓度为0.96m o l㊃L -1时均显著高于其他浓度时(P <0.05),而在7.68m o l ㊃L -1H 2O 2引发时均显著低于其他浓度时(P <0.05);但燕麦种胚细胞G S S G 含量在H 2O 2浓度为3.84m o l ㊃L -1时已显著低于C K (P <0.05),而其种胚线粒体G S S G 含量则在H 2O 2浓度为7.68m o l ㊃L -1时才显著低于C K (P <0.05)㊂图5 H 2O 2引发下燕麦种胚细胞和线粒体内GS H (A )及G S S G (B )的含量变化F i g .5 C h a n g e s i nG S H (A )a n dG S S G (B )c o n t e n t s o f e m b r y o n i c c e l l s a n dm i t o c h o n d r i a i no a t s e e d su n d e rH 2O 2pr i m i n g 3 讨论H 2O 2在植物体内所发挥的生理生化作用具有明显的浓度效应,低浓度时是植物细胞内抵御各种非生物胁迫的小分子信号物质,但高浓度时则会引起植物细胞的程序性死亡[27-28]㊂因此,外源H 2O 2引发处理对种子萌发的影响与其浓度具有密切关系[17]㊂本试验发现,低浓度(0.96m o l ㊃L -1)H 2O 2引发处理时,燕麦种子发芽率与浓度为0m o l ㊃L -1及C K 间无显著性差异,说明低浓度的H 2O 2引发能使高活力(发芽率可达100%)燕麦种子的发芽率保持较高水平,这与前人在水稻(O r y z a s a t i v a )[29]㊁臭椿(A i l a n t h u sa l t i s s i m a )[30]及茎瘤芥(B r a s s i c aju n c e a )[31]等植物种子的研究中存在差异,主要是因为前人所有种子的发芽率几乎都不高于80%,而低活力种子需要一定的H 2O 2诱导才能激活其萌发代谢及相关免疫反应[17]㊂高浓度(ȡ1.92m o l ㊃L -1)H 2O 2引发处理时,燕麦种子发芽率显著降低(P <0.05),浓度为7.68m o l㊃L -1时已基本丧失活力,这与在水稻[29]㊁臭椿[30]及茎瘤芥[31]等植物种子中的研究结论相似㊂这可能是高浓度H 2O 2处理使其在植物种子内迅速积累而导致了细胞膜系统的损伤,从而造成种子内电解质和大量代谢物质的外渗,最终表现为种子丧失活力[32]㊂燕麦种子内H 2O 2的过量积累会使其抗氧化酶活性大幅度降低,并导致其种胚细胞和线粒体发生脂质过氧化损伤,表现为两者M D A 含量大量增8601Copyright ©博看网. All Rights Reserved.第4期李红玉等:燕麦种胚细胞和线粒体A s A-G S H循环对外源H2O2引发的响应加[9-10]㊂因此,高浓度H2O2引发处理引起的脂质过氧化损伤可能是导致燕麦种子活力逐渐丧失的主要原因[17]㊂试验中,燕麦种胚细胞和线粒体S O D, A P X,G R,M D H A R和D H A R活性,以及两者内M D A,H2O2,A s A,G S H,D H A和G S S G含量变化均具有相同的规律,说明燕麦种胚细胞和线粒体A s A-G S H循环对于外源H2O2引发的响应具有协同性,这与P E G引发下老化燕麦种子的响应一致[14]㊂低浓度(0.96m o l㊃L-1)H2O2引发处理时,燕麦种胚细胞和线粒体内H2O2含量已均显著高于浓度为0m o l㊃L-1及C K(P<0.05),这说明已经造成了燕麦种胚细胞和线粒体内H2O2积累,因而其M D A含量也显著高于C K(P<0.05),表明发生了脂质过氧化损伤㊂此时,燕麦种胚细胞和线粒体内S O D,A P X,G R,M D H A R和D HA R活性也均显著高于浓度为0m o l㊃L-1及C K(P<0.05),这说明此时燕麦种胚细胞和线粒体A s A-G S H循环的关键酶仍具有较高的清除R O S的能力,因而其A s A 和G S H含量会显著低于浓度为0m o l㊃L-1及C K (P<0.05),且其D H A和G S S G含量则均显著高于浓度为0m o l㊃L-1及C K(P<0.05),这说明A s A和G S H被作为A s A-G S H循环的底物而大量用于清除种胚细胞及线粒体内R O S[33]㊂然而H2O2浓度为1.92m o l㊃L-1时,尽管燕麦种胚细胞和线粒体A s A-G S H循环的关键酶的活性仍保持较高水平,但其抗氧化能力已经开始逐渐减弱,表现为其种胚细胞和线粒体M D H A R和D H A R活性显著低于H2O2浓度为0.96m o l㊃L-1时(P<0.05),其A s A和G S H含量也继续显著降低(P<0.05),因而其H2O2和M D A含量也继续显著增加(P< 0.05),燕麦种子的发芽率也显著降低(P<0.05)㊂种子内A s A-G S H循环中M D H A R,D H A R及G S H的主要功能是使循环中A s A能够再生[33],因而高浓度H2O2造成A s A含量及其再生功能降低是导致燕麦种子活力丧失的主要原因,这是因为燕麦种子内M D H A R和D H A R对于A s A的再生具有更重要的催化作用[15,34]㊂4结论燕麦种子发芽率在高浓度外源H2O2引发下降低是其种胚细胞和线粒体A s A-G S H循环的抗氧化功能降低造成的,二者对H2O2浓度升高的响应具有协同性,而种胚细胞和线粒体内A s A含量及其再生功能降低是高浓度H2O2造成燕麦种子活力逐渐丧失的主要原因㊂参考文献[1]郑怀国,赵静娟,秦晓婧,等.全球作物种业发展概况及对我国种业发展的战略思考[J].中国工程科学,2021,23(4):45-55[2] E B O N E L A,C A V E R Z A N A,C H A V A R R I A G.P h y s i o l o g i ca l t e r a t i o n si n o r t h o d o xs e e d sd u et od e t e r i o r a t i o n p r o c e s s e s[J].P l a n t P h y s i o l o g y a n dB i o c h e m i s t r y,2019(145):34-42 [3] L IY,WA N G Y,X U E H,e t a l.C h a n g e s i nt h em i t o c h o n d r i a lp r o t e i n p r o f i l e d u e t oR O Se r u p t i o nd u r i n g a g e i n g o f e l m(U l-m u s p u m i l a L.)s e e d s[J].P l a n tP h y s i o l o g y a n dB i o c h e m i s-t r y,2017(114):72-87[4] X I AFS,C H E N G H,C H E NLL,e t a l.I n f l u e n c e o f e x o g e n o u sa s c o rb ic a c i da nd g l u t a t h i o ne p r i m i n g o n m i t o c h o n d r i a l s t r u c-t u r a l a n df u n c t i o n a l s y s t e m st oa l l e v i a t ea g i n g d a m a g e i no a t s e e d s[J].B M CP l a n tB i o l o g y,2020(20):104[5] L I B E R A T O R E K L,D U K OW I C-S C HU L Z E S,M I L L E R ME,e ta l.T h er o l eo fm i t o c h o n d r i ai n p l a n td e v e l o p m e n ta n d s t r e s s t o l e r a n c e[J].F r e eR a d i c a lB i o l o g y a n d M e d i c i n e,2016 (100):238-256[6] MA R TíA M C,F L O R E Z-S A R A S AI,C AM E J O AD,e t a l.R e-s p o n s eo f m i t o c h o n d r i a la n t i o x i d a n ts y s t e m a n d r e s p i r a t o r y p a t h w a y s t o r e a c t i v e n i t r o g e n s p e c i e s i n p e a l e a v e s[J].P h y s-i o l o g i aP l a n t a r u m,2013,147(2):194-206[7] WA N G Y,L IY,X U E H,e t a l.R e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s-p r o-v o k e dm i t o c h o n d r i a-d e p e n d e n t c e l l d e a t hd u r i n g a g e i n g o f e l m (U l m u s p u m i l a L.)s e e d s[J].T h eP l a n tJ o u r n a l,2015,81(3):438-452[8] X I N X,T I A N Q,Y I N G K,e t a l.R e d u c e dm i t o c h o n d r i a l a n da s c o rb a t e-g l u t a t h i o n e ac t i v i t y a f t e ra r t i f i c i a l a g e i n g i ns o y b e a ns e e d[J].J o u r n a l o f P l a n tP h y s i o l o g y,2014,171(2):140-147 [9] X I AF,C H E N L,S U N Y,e t a l.R e l a t i o n s h i p sb e t w e e nu l t r a-s t r u c t u r eo fe m b r y oc e l l sa n d b i o c h e m i c a lv a r i a t i o n sd u r i n ga g e i n g o f o a t(A v e n a s a t i v a L.)s e e d sw i t hd i f f e r e n tm o i s t u r ec o n t e n t[J].A c t aP h y s i o l o g i a eP l a n t a r u m,2015(37):1-11[10]X I A F,WA N G X,L I M,e ta l.M i t o c h o n d r i a l s t r u c t u r a l a n da n t i o x i d a n t s y s t e mr e s p o n s e s t o a g i n g i n o a t(A v e n a s a t i v a L.)s e e d sw i t hd i f f e r e n tm o i s t u r ec o n t e n t s[J].P l a n tP h y s i o l o g ya n dB i o c h e m i s t r y,2015,94:122-129[11]唐嘉,毛培胜,毛春力,等.不同活力水平老芒麦种胚线粒体的抗氧化生理变化[J].中国草地学报,2021,43(5):1-7[12]李红玉,王雅聪,曾佳,等.外源H2O2引发对燕麦种胚细胞A s A-G S H循环的影响[J].草地学报,2022,30(7):1668-1674[13]李红玉,王雅聪,夏方山,等.外源H2O2引发对燕麦种胚线粒体A s A-G S H循环的影响[J].草地学报,2022,30(9):86-94 [14]夏方山,董秋丽,毛培胜,等.P E G引发对老化燕麦种胚细胞与线粒体结构及抗氧化性能的影响[J].草业学报,2018,27(5): 170-177[15]夏方山.不同老化处理对燕麦种子线粒体结构及抗氧化系统的影响[D].北京:中国农业大学,2015:20-219601Copyright©博看网. All Rights Reserved.草地学报第31卷[16]A N O N.I n t e r n a t i o n a l r u l e s f o rs e e dt e s t i n g:T h e g e r m i n a t i o nt e s t[M].Z u r i c h:I n t e r n a t i o n a lS e e d T e s t i n g A s s o c i a t i o n, 2017:25[17]夏方山,王婷婷,董秋丽,等.外源H2O2处理对燕麦种子活力的影响[J].草业学报,2018,27(3):201-207[18]K I B I N Z AS,V I N E LD,CÔM ED,e t a l.S u n f l o w e r s e e d d e t e r i-o r a t i o na sr e l a t e dt o m o i s t u r ec o n t e n td u r i n g a g e i n g,e n e r g y m e t a b o l i s ma n d a c t i v e o x y g e n s p e c i e s s c a v e n g i n g[J].P h y s i o l-o g y a n dP l a n t,2006,128(3):496-506[19]Y I N G,S U N H,X I N X,e ta l.M i t o c h o n d r i a ld a m a g e i nt h es o y b e a ns e e da x i sd u r i n g i m b i b i t i o na tc h i l l i n g t e m p e r a t u r e s [J].P l a n t a n dC e l l P h y s i o l o g y,2009,50(7):1305-1318 [20]B A I L L YC,B E N AMA R A,C O R B I N E A UF,e t a l.C h a n g e s i nm a l o n d i a l d e h y d ec o n t e n ta n d s u p e r o x i d e d i s m u t a s e,c a t a l a s ea n d g l u t a t h i o n e r e d u c t a s e a c t i v i t i e s i n s u n f l o w e r s e e d s a s r e l a t-e d t od e t e r i o r a t i o nd u r i n g a c c e l e r a t e da g i n g[J].P h y s i o l o g i aP l a n t a r u m,1996(97):104-111[21]R A O K V,S R E S T Y T V S.A n t i o x i d a t i v e p a r a m e t e r s i nt h es e e d l i n g s o f p i g e o n p e a(C a j a n u s c a j a n(L.)M i l l s p a u g h)i n r e s p o n s e t oZ na n d N i s t r e s s e s[J].P l a n tS c i e n c e,2000,157(1):11328[22]N A K A N O Y,A S A D A K.H y d r o g e n p e r o x i d e s c a v e n g e db y a-s c o r b a t e-s p e c i f i c p e r o x i d a s e i ns p i n a c hc h l o r o p l a s t[J].P l a n ta n dC e l l P h y s i o l o g y,1981,22(5):867-880[23]A R R I G O N IO,D I P I E R OS,B O R R A C I N O G.A s c o r b a t e f r e er a d i c a l r e d u c t a s e:ak e y e n z y m eo ft h ea s c o r b i ca c i ds y s t e m [J].F E B SL e t t e r s,1981,125(2):242-244[24]E S T E R B A U E R H,G R I L L D.S e a s o n a l v a r i a t i o no f g l u t a t h i-o n e a n d g l u t a t h i o n er e d u c t a s e i nn e e d l e so f P i c e aa b i e s[J].P l a n t P h y s i o l o g y,1978,61(1):11921[25]K AM P F E N K E LK,V A NM O N T A G U M,I N Z ED.E x t r a c t i o na n d d e t e r m i n a t i o n o fa s c o rb a t e a n d d e h y d r o a sc o r b a t ef r o mp l a n t t i s s u e[J].A n a l y t i c a lB i o c h e m i s t r y,1995,225(1):165-167[26]G R I F F I T H O W.D e t e r m i n a t i o no f g l u t a t h i o n ea n d g l u t a t h i-o n ed i s u l f i d eu s i n gg l u t a t h i o n er e d u c t a s ea n d2-v i n y l p y r i d i n e [J].A n a l y t i c a l B i o c h e m i s t r y,1980,106(1):207-212 [27]任艳芳,何俊瑜,杨军,等.外源H2O2对盐胁迫下小白菜种子萌发和幼苗生理特性的影响[J].生态学报,2019,39(20): 7745-7756[28]李俊周,李梦琪,刘磊,等.水稻种子H2O2流速和种子活力的关系研究[J].华北农学报,2017,32(4):189-194 [29]谭志军,黄逸强,王桂元,等.过氧化氢对多胚水稻种子萌发和生长的影响[J].中国水稻科学,1991,5(1):41-44 [30]宋丽华,陶利刚,许扬.双氧水对臭椿㊁刺槐种子发芽的影响[J].宁夏农学院学报,2004,25(1):40-42[31]何士敏,李昌满,于文博.过氧化氢浸种对茎瘤芥种子萌发的影响[J].长江蔬菜,2012(1):22-26[32]P A S Q U I N I S,M I Z Z A U M,P E T R U S S AE,e t a l.S e e d s t o r a g ei n p o l y e t h y l e n e b a g s o f a r e c a l c i t r a n t s p e c i e s(Q u e r c u s i l e x):a-n a l y s i so fs o m eb i o-e n e r g e t i ca n do x i d a t i v e p a r a m e t e r s[J].A c t aP h y s i o l o g i a eP l a n t a r u m,2012(34):1963-1974[33]T U L L I O M CD,A R R I G O N IO.T h e a s c o r b i c a c i ds y s t e mi ns e e d s:t o p r o t e c t a n d t o s e r v e[J].S e e dS c i e n c eR e s e a r c h,2003(13):249-260[34]刘备,宋玉梅,孙铭,等.燕麦劣变种子吸胀过程中线粒体A s A-G S H循环的生理响应[J].草地学报,2021,29(2):211-219(责任编辑闵芝智)0701Copyright©博看网. 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ＥＭＳ诱变技术在小麦上的应用曹亚萍∗ꎬ武银玉ꎬ范绍强ꎬ张凤琴ꎬ连㊀晋ꎬ高㊀炜(山西省农业科学院小麦研究所ꎬ临汾０４１０００)摘㊀要:小麦遗传基础日趋狭窄成为小麦遗传改良的瓶颈ꎮ甲基磺酸乙酯(ＥＭＳ)是一种高效稳定的烷化类诱变剂ꎬ能诱发产生高密度系列等位基因点突变ꎬ可在创造作物新品种㊁新种质㊁遗传材料以及解决育种工作中某些特殊问题等方面取得突破ꎮ本文从ＥＭＳ诱变的原理和特点着手ꎬ简述了小麦ＥＭＳ诱变及突变体鉴选方法ꎬ绘制了ＥＭＳ诱变研究备选方案图ꎬ为小麦科研工作者提供研究思路和参考依据ꎮ同时对ＥＭＳ诱变技术在抗病基因克隆㊁品质性状改良㊁叶片持绿机制研究㊁农艺性状解析㊁突变体库构建等方面的研究进展进行了前沿报道ꎬ分析了ＥＭＳ诱变在小麦研究中存在的问题及应对方法ꎬ并在此基础上对ＥＭＳ诱变技术在小麦上的发展前景进行展望ꎮ这对于丰富小麦遗传资源㊁加快育种进程和开展基因功能研究具有重要意义ꎮ关键词:小麦ꎻ甲基磺酸乙酯ꎻ化学诱变ꎻ突变体中图分类号:Ｓ５１２ꎻＱ８１３.５文献标志码:ＡＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００７￣７１４６.２０１９.０５.００２ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＩｎｄｕｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗｉｔｈＥＭＳｏｎＷｈｅａｔＣＡＯＹａｐｉｎｇ∗ꎬＷＵＹｉｎｙｕꎬＦＡＮＳｈａｏｑｉａｎｇꎬＺＨＡＮＧＦｅｎｇｑｉｎꎬＬＩＡＮＪｉｎꎬＧＡＯＷｅｉ(ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＷｈｅａｔＲｅｓｅａｒｃｈꎬＳｈａｎｘｉＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅꎬＬｉｎｆｅｎ０４１０００ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｎｅｏｆｔｈｅｂｏｔｔｌｅｎｅｃｋｓｆｏｒｗｈｅａｔｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｉｓｔｈｅｎａｒｒｏｗｉｎｇｏｆｗｈｅａｔｇｅｎｅｔｉｃｂａｓｉｓ.Ｅｔｈｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎａｔｅ(ＥＭＳ)ｉｓａｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔａｎｄｓｔａｂｌｅａｌｋｙｌａｔｉｏｎｍｕｔａｇｅｎｓꎬｗｈｉｃｈｃａｎｉｎｄｕｃｅａｓｅｒｉｅｓｏｆａｌｌｅｌｅｍｕｔａｔｉｏｎｓｗｉｔｈｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙꎬａｎｄｍａｋｅｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈｓｉｎｃｒｅａｔｉｎｇｏｆｎｅｗｖａｒｉｅｔｉｅｓꎬｎｅｗｇｅｒｍｐｌａｓｍꎬｇｅｎｅｔｉｃｍａｔｅｒｉａｌｓａｎｄｓｏｌｖｉｎｇｓｏｍｅｓｐｅｃｉａｌｐｒｏｂ￣ｌｅｍｓｉｎｂｒｅｅｄｉｎｇ.ＢａｓｅｄｏｎｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＥＭＳｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓꎬｔｈｉｓｐａｐｅｒｂｒｉｅｆｌｙｄｅｓｃｒｉｂｅｓｔｈｅｍｅｔｈ￣ｏｄｏｆＥＭＳｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓｓｅｌｅｃｔｉｏｎｆｏｒｗｈｅａｔꎬａｎｄｄｒａｗｓａｎａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｓｃｈｅｍｅｏｆＥＭＳｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓｒｅ￣ｓｅａｒｃｈꎬｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｓｒｅｓｅａｒｃｈｉｄｅａｓａｎｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｗｈｅａｔｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ.ＡｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅꎬｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆＥＭＳｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｉｎｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅｃｌｏｎｉｎｇꎬｑｕａｌｉｔｙｔｒａｉｔｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔꎬｌｅａｆｇｒｅｅｎｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅ￣ｓｅａｒｃｈꎬａｇｒｏｎｏｍｉｃｔｒａｉｔａｎａｌｙｓｉｓꎬａｎｄｍｕｔａｎｔｌｉｂｒａｒｙｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｗａｓｒｅｐｏｒｔｅｄ.ＴｈｅｐｒｏｂｌｅｍｓａｎｄｃｏｕｎｔｅｒｍｅａｓｕｒｅｓｏｆＥＭＳｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓｉｎｗｈｅａｔｒｅｓｅａｒｃｈｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ.ＴｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｐｒｏｓｐｅｃｔｏｆＥＭＳｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｉｎｗｈｅａｔｗａｓｐｒｏｓｐｅｃｔｅｄ.Ｔｈｉｓｉｓｏｆｇｒｅａｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｆｏｒｅｎｒｉｃｈｉｎｇｗｈｅａｔｇｅｎｅｔｉｃｒｅｓｏｕｒｃｅｓꎬａｃｃｅｌｅｒａｔｉｎｇｂｒｅｅｄｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｅｓａｎｄｓｔｕｄｙｉｎｇｇｅｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｗｈｅａｔꎻｅｔｈｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎａｔｅꎻｃｈｅｍｉｃａｌｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓꎻｍｕｔａｎｔ第２８卷第５期２０１９年１０月激㊀光㊀生㊀物㊀学㊀报ＡＣＴＡ㊀ＬＡＳＥＲ㊀ＢＩＯＬＯＧＹ㊀ＳＩＮＩＣＡＶｏｌ.２８Ｎｏ.５Ｏｃｔ.２０１９收稿日期:２０１９￣０４￣２４ꎻ修回日期:２０１９￣０５￣２８ꎮ基金项目:山西省农业科学院农业科技创新研究课题项目(ＹＣＸ２０１８４１２)ꎻ山西省重点研发计划项目(２０１７０３Ｄ２１１００７￣４)ꎮ∗通讯作者:曹亚萍ꎬ研究员ꎬ主要从事小麦种质创新与遗传育种研究ꎮＥ￣ｍａｉｌ:ｃｙｐｉｎｇ１８０＠１６３.ｃｏｍꎮ㊀㊀小麦在长期演变过程中ꎬ由于人工选择和自然进化ꎬ导致遗传基础日趋狭窄ꎬ遗传脆弱性逐渐增加ꎮ绿色革命期间ꎬ半矮秆表型的选择减少了小麦遗传多样性[１]ꎻ近年来ꎬ随着小麦集约化生产和商品性经营ꎬ小麦育种以市场需求为导向ꎬ比较集中地利用少数遗传资源ꎬ许多抗逆㊁抗病虫㊁优质等优异基因逐渐丢失ꎬ育成品种的遗传基础更加狭窄ꎬ对于生物和环境胁迫愈加脆弱ꎬ致使育种进程缓慢ꎬ难以适应农业生产快速发展的需要ꎬ成为小麦遗传改良的瓶颈ꎮ丰富的遗传性状和基因资源是达到品种选育目标的重要基础ꎬ由于小麦属内遗传基因有限ꎬ而常规杂交育种所依据的主要遗传学原理是基因自由组合ꎬ只能利用已有基因进行重组ꎬ不能产生新的基因ꎬ难以解决小麦基因资源狭窄问题ꎮ刘志勇等[２]分析小麦育种现状ꎬ提出未来需大力加强种质资源的原始创新ꎮ长期实践证明ꎬ改变这种现状最基本㊁快速㊁有效的途径之一是诱变育种方法ꎬ诱发突变技术是创造作物新种质㊁丰富遗传多样性和培育优良新品种的一种重要技术手段ꎮ小麦诱变技术是人为利用物理诱变因素(如紫外线㊁Ｘ射线㊁γ射线㊁β射线㊁快中子㊁激光㊁离子束等)和化学诱变剂(如烷化剂㊁叠氮化物㊁碱基类似物㊁亚硝基化合物㊁抗生素等)诱发小麦基因组产生变异ꎬ从而创制出自然界原来没有的或一般常规方法难以获得的新类型㊁新性状㊁新基因ꎮ物理诱变因高能射线引起ꎬ染色体畸变率高㊁结构变异广泛ꎬ染色体组紊乱ꎬ后代不育率高ꎬ分离类型广ꎬ纯合世代长ꎻ化学诱变是化学药剂与遗传物质发生生化反应ꎬ结果多是基因的点突变ꎬ纯合世代较短ꎮ甲基磺酸乙酯(ｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅꎬＥＭＳ)是一种高效稳定的烷化类化学诱变剂ꎬ能诱发产生高密度系列等位基因点突变ꎬ获得丰富的遗传材料ꎬ解决小麦育种中种质资源匮乏的问题ꎬ也为相关基因的精细定位㊁克隆及功能分析等提供了研究平台ꎬ在作物诱变技术中应用最广泛㊁效果最好ꎮ１㊀ＥＭＳ诱变原理及特点ＥＭＳ属于烷化剂ꎬ线性分子式为ＣＨ３ＳＯ２ＯＣ２Ｈ５ꎬ分子量为１２４.１６ꎬ能与醇混溶ꎬ微溶于水ꎮＥＭＳ诱发的突变主要通过两个步骤来完成ꎬ首先鸟嘌呤(Ｇ)的Ｎ￣７位置被烷基化ꎬ成为一个带正电荷的季铵基团ꎬ从而发生两种遗传效应:一是转换型突变ꎬ烷化的鸟嘌呤(Ｇ)不再与胞嘧啶(Ｃ)配对ꎬ从而造成ＧʉＣ碱基对变成Ｔ＝Ａ碱基对ꎻ二是颠换型突变ꎬ鸟嘌呤的Ｎ￣７位置烷基化后ꎬ糖苷键断裂ꎬ造成脱嘌呤ꎬ该位置缺失ꎬ在随后的ＤＮＡ分子复制过程中ꎬ４种碱基都有可能进入到其互补位置ꎬ发生置换现象ꎮ如碱基置换发生于编码多肽区域ꎬ则因可影响密码子而使转录㊁翻译遗传信息发生变化ꎬ以一种氨基酸取代原有的另一种氨基酸ꎻ也可能出现终止密码使多肽链合成中断ꎬ不能形成原有蛋白质而完全失去某种生物学活性ꎮ此外ꎬ诱变剂也可与核苷结构的磷酸反应ꎬ形成酯类而将核苷酸从磷酸与糖分子之间切断ꎬ产生染色体缺失ꎮＳｉｄｈｕ等[３]采用生物信息学分析方法ꎬ在小麦品种ＩｎｄｉａｎＥＭＳ诱变群体中ꎬ共检测到１４１３０个点突变ꎬ突变频率为每５ｋｂ一个ꎬ其中７０％转换㊁３０％颠换ꎬ并发现存在于染色体远端区域的基因与近端区域中存在的基因相比更容易发生突变ꎮ这些ＤＮＡ结构上的变化一方面可能改变遗传信息ꎬ引起基因功能丧失ꎬ如抗锈病基因成为敏感型基因ꎻ另一方面可能促使不表达的基因或区段被激活ꎬ而表现出被掩盖的性状ꎮＥＭＳ作为化学诱变剂能够引起单一碱基对改变而形成点突变ꎬ染色体畸变相对较少ꎬ不需要进行遗传转化ꎬ可以在短时间内获得大量功能基因的点突变ꎬ引起不同基因的等位变异ꎮ与其它诱变剂相比ꎬＥＭＳ诱变后产生的突变频率高ꎬ且多为显性突变体ꎬ易于突变体的筛选ꎻ与常规杂交育种相比ꎬＥＭＳ诱变具有随机性ꎬ诱变后可获得丰富的种质遗传材料ꎬ具有种质创新频率高㊁遗传变异谱宽㊁基因纯合周期短等特性ꎬ可解决小麦遗传基础狭窄问题ꎬ有效弥补小麦常规育种方法短时间难以获得新性状和新基因的不足ꎮ２㊀小麦ＥＭＳ诱变研究现状近年来ꎬＥＭＳ诱变技术在国内外得到大规模研究与应用ꎬ在水稻[４ꎬ５]㊁玉米[６]㊁大豆[７ꎬ８]㊁高梁[９]㊁烟草[１０]㊁苜蓿[１１]㊁蓖麻[１２]㊁谷类[１３ꎬ１４]㊁油料作物[１５￣１７]㊁果蔬[１８￣２３]㊁木本植物[２４￣２６]㊁小麦近缘物种[２７ꎬ２８]等植物上均取得显著成就ꎮ由于普通小麦是异源六倍体ꎬ基因组庞大ꎬ高达１７Ｇｂ[２９]ꎬ应用ＥＭＳ进行诱变育种的研究远远落后于模式植物拟南芥[３０￣３２]和水稻[３３ꎬ３４]等ꎬ但也在诸多方面取得一定进展ꎮ２.１㊀在抗病基因研究方面利用ＥＭＳ诱变获得抗病基因突变体在研究抗病５９３第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曹亚萍等:ＥＭＳ诱变技术在小麦上的应用㊀㊀㊀基因结构㊁功能等方面具有独特优势ꎬ寻找抗病基因区段序列发生变异的突变体是阐释基因功能最直接最有效的方法ꎮ锈病是小麦生产上危害较重也是研究较多的病害之一ꎬ张维宏等[３５]用ＥＭＳ处理小麦抗叶锈病近等基因系ＴｃＬｒ１９的种子ꎬ于诱变３代(Ｍ３)获得６个感病突变材料ꎬ遗传稳定率达７０％以上ꎻＨｕｓｓａｉｎ等[３６]用ＥＭＳ诱导中抗叶锈小麦品种ＮＮ￣Ｇａｎｄｕｍ￣１ꎬ得到９个高抗和２个高感突变体ꎬＳＮＰ分析将抗性突变体变异位点定位于１Ｂ染色体短臂(１ＢＳ)ꎬ该位点的谷氨酸被丙氨酸取代ꎬ导致蛋白质结构改变ꎻＭａｇｏ等[３７]报道ꎬ利用ＥＭＳ诱导获得抗锈病基因敏感型突变体ꎬ已有几个抗锈病基因从小麦中克隆ꎮ此外ꎬ李韬等[３８]用ＥＭＳ诱变抗赤霉病小麦地方品种黄方柱和海盐种ꎬ得到病小穗率均显著高于相应野生型的６个突变系ꎬ是研究赤霉病扩展抗性的理想材料ꎮ陈洋等[３９]用ＥＭＳ处理抗黄矮病小麦－中间偃麦草易位系ＹＷ６４２的种子ꎬ筛选出１８个黄矮病抗性丧失程度不等的突变体ꎬ分子标记检测结果表明这些突变体分别在１~４个分子标记位点上发生变异ꎬ说明这些突变体中抗黄矮病基因Ｂｄｖ２及其附近区域有不同碱基位点发生突变ꎬ为小麦抗黄矮病基因克隆和功能基因组学研究奠定了坚实的材料基础ꎮ耿皆飞[４０]以ＥＭＳ诱变花培品系Ｈ２６１ꎬ获得小麦类病斑突变体ＬＦ２０１０ꎬ并将其突变基因ｌｍ３定位到小麦６ＢＬ染色体上６Ｂ０３和６Ｂ４０之间２.３６Ｍ物理距离之中ꎬ同时找到５８个候选基因ꎮ２.２㊀在品质性状改良方面随着人民生活水平的提高ꎬ小麦多样化食材成为适应市场经济的必然ꎬ因而对小麦籽粒最终用途要求也不尽相同ꎬ小麦品质改良成为科研工作者关注的焦点ꎮ研究较多的是糯性小麦ꎬＳｌａｄｅ等[４１]创建了普通小麦和硬粒小麦突变体库ꎬ将ＥＭＳ化学诱变技术与定向诱导基因组局部突变技术(ｔａｒｇｅｔｉｎｇｉｎ￣ｄｕｃｅｄｌｏｃａｌｌｅｓｉｏｎｓＩＮｇｅｎｏｍｅｓꎬＴＩＬＬＩＮＧ)相结合ꎬ筛选到２４６个等位变异位点ꎬ获得丰富的遗传信息和糯性小麦突变体ꎬ并育成糯性较好的小麦新品种ꎻ李晓等[４２]用ＥＭＳ诱变京４１１ꎬ以Ｗｘ￣Ａ１为候选基因ꎬ用ＴＩＬＬＩＮＧ技术检测所创建的突变群体ꎬ获得Ｗｘ￣Ａ１基因的７个点突变ꎬ突变密度为１/６７ｋｂꎬ其中有功能变异的４个错义突变系均可稳定遗传至下一代ꎬ其直链淀粉含量降低２.８％~７.４％ꎮ张纪元等[４３]利用ＥＭＳ诱变创制软质小麦宁麦９号高分子量谷蛋白亚基突变体ꎬ获得Ａｘ１㊁Ｄｘ２㊁Ｂｘ７㊁Ｂｙ８㊁Ｄｙ１２㊁Ａｘ１＋Ｂｙ８缺失突变系ꎬ其谷蛋白大聚体和谷蛋白/醇溶蛋白比值均有不同程度降低ꎬ为小麦品质研究奠定了良好的材料基础ꎮ淀粉占小麦籽粒胚乳的７０％左右ꎬ是决定小麦磨粉㊁加工品质的重要因素ꎬ高直链淀粉被认为是抗性淀粉(ｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔａｒｃｈꎬ简称ＲＳ)ꎬ又称抗酶解淀粉和难消化淀粉ꎬ其性质类似溶解性纤维ꎬ对于维持肠道健康具有良好作用ꎬ同时具有一定的瘦身效果和保健意义ꎮ薛芳等[４４]用ＥＭＳ处理新春１１小麦种子ꎬ筛选出７个抗性淀粉含量高且综合性状优良的Ｍ２突变家系ꎮ张贞彩等[４５]用ＥＭＳ处理济麦２０和济麦２２ꎬ分别得到糊化粘度变异程度不同的突变体ꎬ可形成不同品质㊁不同功能的淀粉材料ꎮＭｉｓｈｒａ等[４６]鉴定了一组包含１０１个ＥＭＳ诱导的突变系(Ｍ４)群体ꎬ分别在约８９％和３８％的突变体系中观察到直链淀粉和抗性淀粉含量明显区别于野生型ꎬ群体中直链淀粉含量变化范围为３％~７６％ꎬ抗性淀粉含量的变化范围为１％~４１％ꎻ并用两种不同的直链淀粉含量突变体系研究了２０种淀粉代谢途径基因的定量表达模式ꎬ鉴定出直链淀粉生物合成候选基因ꎮ２.３㊀在叶片持绿机制研究方面ＥＭＳ诱变技术为小麦植株及叶片功能期研究提供了便利ꎮＤｅｒｋｘ等[４７]采用ＥＭＳ诱变方法得到小麦扬花期相同而后期冠层快速和慢速衰老突变体ꎬ通过研究突变体对产量和氮分配的影响ꎬ发现延迟衰老仅在较高氮供应时才显现ꎬ低氮供应增加了所有品系的衰老速率ꎬ并用田间试验证实了两种衰老模式ꎮ此外ꎬ通过对小麦叶片早熟突变体ｍ６８研究发现ꎬ叶片衰老表型受单个隐性核基因控制ꎬ转录因子和蛋白质转运基因在叶片衰老开始时起作用ꎬ尤其是ＷＲＫＹ家族和锌指转录因子ꎬ叶绿素和碳代谢相关的基因在后期发挥作用[４８]ꎮ２.４㊀在农艺性状解析方面株高和分蘖是影响小麦产量的两个主要农艺性状ꎬＸｕ等[４９]用ＥＭＳ处理普通小麦望水白ꎬ获得一个高分蘖矮秆突变体ＮＡＵＨ１６７ꎬ随后用ＮＡＵＨ１６７/Ｓｕ￣ｍａｉ３的ＲＩＬ２:６群体构建了基于分子标记的遗传图谱ꎬ并将控制两种性状的主效ＱＴＬ(ＱＨｔ.ｎａｕ￣２Ｄ)定位于２ＤＳꎬ其侧翼标记为Ｘｃｆｄ１１和Ｘｇｐｗ３６１ꎬ最后用２０１１Ｉ￣７８/ＮＡＵＨ１６７群体对ＱＨｔ.ｎａｕ￣２Ｄ进行了物理定位ꎮ赵天祥等[５０]采用ＥＭＳ突变技术构建了小麦６９３㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀激㊀光㊀生㊀物㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第２８卷品种偃展４１１０的突变体库ꎬ并且对其进行形态学分析和鉴定ꎬ得到株高在１０~１５ｃｍ左右的特矮变异类型ꎮＷ９８是用ＥＭＳ处理小麦品种偃展１号获得的突变体ꎬ其矮秆与圆粒性状呈显著相关ꎬ用Ｗ９８与高秆长粒的墨西哥品种１０ｔｈ１２配制杂交组合ꎬ对Ｆ２ʒ３分离群体进行遗传分析发现ꎬ圆粒性状由１对不完全显性基因控制ꎻ激素敏感性试验表明ꎬ该突变体与野生型都对赤霉素处理不敏感ꎬ但野生型对油菜素内酯不敏感而突变体Ｗ９８则表现敏感[５１]ꎮＭｏ等[５２]利用外显子捕捉技术ꎬ结合一个ＥＭＳ分离群体ꎬ对小麦４ＢＳ染色体上的一个矮秆基因区域进行了鉴定ꎬ发现在高秆突变体后代中大约存在一个１.９Ｍｂ的缺失ꎬ该缺失区间包含９个基因ꎬ其中之一为Ｒｈｔ￣Ｂ１基因ꎮ为了研究分蘖的潜在遗传变异ꎬＫｕｒａｐａｒｔｈｙ等[５３]用ＥＭＳ诱变二倍体小麦ꎬ得到分蘖能力受到损害的突变体ꎬ将分蘖抑制基因ｔｉｎ３定位在染色体３ＡＬ远端１０％位置ꎬ并开发出一个与ｔｉｎ３共分离的ＲＦＬＰ标记Ｘｐｓｒ１２０５ꎬ促进了小麦有效分蘖的改良ꎮ抽穗期作为普通小麦重要农艺性状之一ꎬ对适应不同生态环境条件具有至关重要的作用ꎬ通过调节小麦抽穗期ꎬ使其与光㊁温等环境因子变化密切协调ꎬ从而提高小麦适应性和稳产性ꎮ刘国祥[５４]对偃展４１１０ＥＭＳ突变体库６０份抽穗期突变体研究发现ꎬ光周期对突变体抽穗期的影响极为显著ꎬ通过对光周期基因Ｐｐｄ￣Ｄｌ的克隆测序与比对ꎬ发现突变体有单碱基突变㊁Ｃ缺失㊁Ｃ/Ｔ转换㊁Ｇ插入和Ｔ插入多种类型ꎬ这些点突变造成启动子区碱基转换㊁氨基酸改变以及内含子调控序列变化ꎬ从而导致抽穗期发生变异ꎮＺｈａｎｇ等[５５]用ＥＭＳ处理ＹＺ４１１０ꎬ获得晚抽穗期突变体ｍ６０５ꎬ这种晚期抽穗性状由一个名为ＴａＨｄｍ６０５的隐性基因控制ꎬ采用遗传作图方法将ＴａＨｄｍ６０５基因定位在３ＤＬ分子标记ｃｆｄ１５２和ｂａｒｃ４２之间ꎬ而后进一步将该基因座定位到包含２６个预测基因的１.８６Ｍｂ物理基因组区域ꎬ为ＴａＨｄｍ６０５克隆以及改变小麦抽穗期奠定了遗传基础ꎬ并且该突变体可在秋季播种时至少延迟７天ꎮＷｕ等[５６]从ＥＭＳ处理普通小麦品种望水白的突变体文库中获得突变体Ｍｅｈ０２３９ꎬ通过对其进行形态学㊁生理学㊁解剖学和遗传学的研究ꎬ鉴定出一个与产量性状相关的多效性基因Ｙｔ１ꎬ该突变体为小麦染色体７ＤＳ上Ｘｗｍｃ５０６远端约３.１ｃＭ处单个隐性突变ꎮ２.５㊀在突变体库构建方面据Ｋｒａｓｉｌｅｖａ等[５７]报道ꎬ用ＥＭＳ处理四倍体小麦Ｋｒｏｎｏｓ和六倍体小麦Ｃａｄｅｎｚ种子ꎬ提取Ｍ２植株ＤＮＡ进行外显子捕捉测序ꎬ在１５３５份Ｋｒｏｎｏｓ和１２００份Ｃａｄｅｎｚａ的ＥＭＳ群体中ꎬ在基因水平上鉴定出超过一千万个突变位点ꎬ平均每个单株存在２７０５(四倍体)和５３５１(六倍体)个位点ꎬ突变频率大约在３５~４０个ＳＮＰ/ｋｂꎮ对于单个基因来说ꎬ大约有２３~２４个突变位点造成了错义或提前终止ꎮ由于单个突变单株在整个基因组水平上均含有大量突变位点ꎬ将突变体与野生型材料进行杂交并连续回交ꎬ可以纯化遗传背景以消除其它突变位点对目标性状造成的影响ꎮ该突变体库包含四倍体小麦Ｋｒｏｎｏｓ和六倍体小麦Ｃａｄｅｎｚꎬ可以用作改善小麦营养品质㊁籽粒大小㊁鉴定等位基因等方面的研究ꎬ也是小麦功能基因组学研究的宝贵遗传资源ꎬ同时也为解析在人工或自然选择中被忽略掉的隐性突变提供帮助ꎮ在鉴定突变位点的基础上ꎬ作者又对突变位点进行了注释ꎬ相关突变信息可以通过ｗｗｗ.ｄｕｂｃｏｖｓｋｙｌａｂ.ｕｃ￣ｄａｖｉｓ.ｅｄｕ/ｗｈｅａｔ￣ｔｉｌｌｉｎｇ网站进行查询ꎬ山东农业大学付道林组有四倍体Ｋｒｏｎｏｓ的突变体库ꎬ国内感兴趣的研究人员可以向他们申请(信息来源于小麦研究联盟)ꎮ３㊀小麦ＥＭＳ诱变突变体选择３.１㊀小麦ＥＭＳ诱变及突变体表型选择诱变材料需选用待处理品种(系)的纯系ꎮ育种研究需要根据育种目标选用具有较好综合性状㊁只需进行少数性状改进的当地推广品种或高代品系ꎻ遗传研究需要选择目标性状突出的亲本材料ꎮ小麦ＥＭＳ诱变处理宜采用种子处理方式ꎬ具体操作如下:首先ꎬ将待处理种子在室温下用蒸馏水浸种１０ｈ左右ꎬ使种子充分膨胀或萌动ꎬ随后放在吸水纸上晾干ꎬ将种子含水量控制在２０％以下ꎻ其次ꎬ以磷酸缓冲液(ｐＨ＝７)为溶剂ꎬ配制０.５％~０.８％的ＥＭＳ化学诱变剂ꎬ将晾干的种子在室温下浸种８~１０ｈꎻ最后ꎬ将诱变后的种子装入小网袋中ꎬ在自来水下反复冲洗１ｈꎬ除去种子胚上残留的ＥＭＳꎬ风干备用ꎬ５天内播种ꎮ值得注意的是ꎬ不同基因型材料对ＥＭＳ敏感程度不同ꎬ不同处理时间㊁不同ＥＭＳ浓度及不同浓度与时间组合对突变频率影响也具有较大差异ꎮ首次应用时需谨慎对待ꎬ最好设不同剂量ＥＭＳ浓度来处理种子ꎬ以达到理想效果ꎻ另外ꎬＥＭＳ具有强烈的致癌性和挥发性ꎬ常用５％硫代硫酸钠作为解毒剂ꎬ因此在操作过程中要注意安全防护ꎬ严格遵守试验７９３第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曹亚萍等:ＥＭＳ诱变技术在小麦上的应用㊀㊀㊀规则ꎮ诱变Ｍ１表型不分离ꎬ一般按单株或单穗(每株１穗)收获ꎻＭ２是变异最大的世代ꎬ也是选择的关键时期ꎬ可根据育种目标及性状遗传特点选择各种表型突变体(图１)ꎬ如株高㊁株型㊁穗型㊁叶色㊁分蘖㊁生育期㊁育性等性状ꎻＭ３代及以后ꎬ随着世代的增加ꎬ性状分离减少ꎬ有些性状一经获得即可迅速稳定ꎮ图２和图３为笔者采用ＥＭＳ诱变得到的表型稳定突变体ꎬ目前已用于突变基因遗传和功能研究ꎮ图１㊀ＥＭＳ诱变Ｍ２代表型突变体Ｆｉｇ.１㊀ＰｈｅｎｏｔｙｐｉｃｍｕｔａｎｔｓｏｆＥＭＳｉｎｄｕｃｔｉｏｎｉｎＭ２ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ(ａ)良星９９色泽突变ꎻ(ｂ)济麦２２分蘖力突变ꎻ(ｃ)晋麦４７号生育期突变ꎻ(ｄ)冀麦３２５株型突变(ａ)ＭｕｔａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｏｒｏｆＬｉａｎｇｘｉｎｇ９９ꎻ(ｂ)ＭｕｔａｔｉｏｎｏｆｔｉｌｌｅｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙｏｆＪｉｍａｉ２２ꎻ(ｃ)ＭｕｔａｔｉｏｎｏｆｇｒｏｗｔｈｓｔａｇｅｏｆＪｉｎｍａｉ４７ꎻ(ｄ)ＭｕｔａｔｉｏｎｏｆｐｌａｎｔｔｙｐｅｏｆＪｉｍａｉ３２５图２㊀晋麦４７号(ａ)及其抗白粉病突变体(ｂ)Ｆｉｇ.２㊀Ｊｉｎｍａｉ４７(ａ)ａｎｄｉｔｓｐｏｗｄｅｒｙｍｉｌｄｅｗｒｅｓｉｓｔａｎｔｍｕｔａｎｔ(ｂ)３.２㊀利用ＴＩＬＬＩＮＧ技术定向筛选突变体尽管ＥＭＳ在表型选择方面依旧被广泛利用ꎬ但存在ＥＭＳ诱发产生的点突变难以鉴定的问题ꎮＴＩＬＬＩＮＧ是由美国ＦｒｅｄＨｕｔｃｈｉｎｓｏｎ癌症研究中心ＳｔｅｖｅｎＨｅｎｉｋｏｆｆ领导的研究小组发展建立的一种反向遗传学研究方法ꎬ它将诱发产生高频率点突变的化学诱变方法与ＰＣＲ筛选技术和高通量检测方法有效结合ꎬ以发现分析目标区域点突变ꎬ是一种全新的高通量㊁低成本的反向遗传学研究方法ꎮＴＩＬＬＩＮＧ作为一种定向点突变筛选技术ꎬ对目标突变体的筛选不受遗传背景㊁基因互作㊁表型特征㊁生长环境等因素影响ꎬ鉴定准确性高ꎬ能够实现高通量㊁大群体㊁多基因㊁多性状的快速高效鉴定ꎬ提高突变体鉴选效率ꎮＴＩＬＬＩＮＧ提供了从分子水平上定向规模化筛选突变体的技术平台ꎬ尤其对品质和营养成分等无法从植株表型上加以选择的性状筛选尤为有利ꎮ其技术原理是将传统的酶切技术与ＰＣＲ技术相结合后采用红外双色荧光系统进行结果鉴定ꎬ从而筛选出相应的突变体ꎮ首先ꎬ提取具有性状分离的Ｍ２植株的基因组ＤＮＡꎬ将多个不同样品的ＤＮＡ进行等量混合ꎬ构建ＤＮＡ池ꎻ其次ꎬ以此ＤＮＡ池为模板进行ＰＣＲ扩增ꎬ并将扩增片段进行退火形成ＤＮＡ片段的异源双链分子ꎬ采用ＣＥＬＩ进行酶切后ꎬ利用红外双色荧８９３㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀激㊀光㊀生㊀物㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第２８卷图３㊀长６８７８及其黄叶突变体Ｆｉｇ.３㊀Ｃｈａｎｇ６８７８ａｎｄｉｔｓｙｅｌｌｏｗｌｅａｆｍｕｔａｎｔ(ａ)苗期ꎻ(ｂ)抽穗期ꎻ(ｃ)灌浆期ꎻ(ｄ)子粒(ａ)Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓｔａｇｅꎻ(ｂ)Ｈｅａｄｉｎｇｓｔａｇｅꎻ(ｃ)Ｆｉｌｌｉｎｇｓｔａｇｅꎻ(ｄ)Ｇｒａｉｎ注:每张图片左或上为野生型(长６８７８)ꎬ右或下为突变体Ｎｏｔｅ:Ｔｈｅｌｅｆｔｏｒｕｐｐｅｒｐａｒｔｏｆｅａｃｈｐｉｃｔｕｒｅｉｓｗｉｌｄｔｙｐｅ(Ｃｈａｎｇ６８７８)ꎬｗｈｉｌｅｔｈｅｒｉｇｈｔｏｒｌｏｗｅｒｐａｒｔｉｓｍｕｔａｎｔ光电泳分析技术进行电泳ꎻ再次ꎬ对检测到突变的ＤＮＡ池中每个单株的ＤＮＡ样品进行筛选ꎬ找出相应的突变体ꎻ最后ꎬ从对应的突变体植株中筛选出有变化的表型ꎮ详细操作方法见参考文献[５８]和[５９]ꎮ值得注意的是ꎬ按目标基因序列设计引物ꎬ是ＴＩＬＬ￣ＩＮＧ技术的一个重要步骤ꎬ设计的好坏直接影响ＴＩＬＬＩＮＧ的筛选效果ꎮ３.３㊀突变体真实性检测虽然普通小麦为自花授粉植物ꎬ但也存在１％~４％的天然异交率ꎬ如果诱变后代不能严格套袋自交ꎬ必须确认突变体的变异来源ꎬ才能对诱变后代进行遗传变异评价和基因功能研究ꎮ利用表型鉴定通常难以鉴定诱变后代突变体的真实性ꎬ而利用分子标记分析可以有效排除诱发突变体中的假突变体ꎮ耿皆飞等[６０]在小麦ＥＭＳ突变体真实性检测方面进行了首次报道:ＬＦ２０１０㊁ＬＦ２０９９和ＬＦ２１００是小麦品系Ｈ２６１经ＥＭＳ诱变后遗传稳定的突变体ꎬ用分别位于小麦２１条染色体上特异性和稳定性均好的２１对ＳＳＲ引物对突变体及其亲本进行检测ꎬＨ２６１与ＬＦ２０１０和ＬＦ２０９９的差异ＳＳＲ标记为０个ꎬ但与ＬＦ２１００的差异ＳＳＲ标记为１０个ꎻＳＮＰ芯片分析结果表明ꎬＨ２６１与ＬＦ２０１０和ＬＦ２０９９之间的差异位点分别为６６和１２个ꎬ与ＬＦ２１００之间的差异位点为２８４６个ꎮ证明ＬＦ２０１０和ＬＦ２０９９突变体与亲本Ｈ２６１的遗传背景高度一致ꎬ是Ｈ２６１经过ＥＭＳ诱变的后代ꎬ而ＬＦ２１００是天然异交或机械混杂产生的假突变体ꎮＳＳＲ标记和ＳＮＰ芯片２种方法均可有效鉴定ＥＭＳ突变体的真实性ꎬ由于ＳＮＰ芯片可以进行高通量和全基因组水平分析ꎬ在小麦突变体真实性鉴定方面具有更大应用潜力ꎮ４㊀ＥＭＳ诱变存在问题及解决方案ＥＭＳ诱变原理是进行ＤＮＡ碱基配对的干扰ꎬ使其发生碱基置换从而形成点突变ꎮ这种方法以诱发基因突变为目的ꎬ实质上主要依赖于物种在诱变条件下所发生的基因随机突变ꎬ其突变机理是在诱变条件下ＤＮＡ复制过程中所产生的一个或几个碱基的变化ꎬ这一过程是随机突变的过程ꎬ具有突变位点不确定性㊁突变方向偶然性的特点ꎮ由于碱基变化是随机的ꎬ整个变异过程无目的性ꎬ即使是用ＥＭＳ处理相同品种并且重复同样诱变条件ꎬ也无法预知必然可以出现某一特殊性状尤其是目标性状改良的突变ꎮ由表１可知ꎬ不同材料ＥＭＳ诱变结果具有较大差异ꎬ同一部位突变率差异较大且具随机性ꎬ多项报道也进一步证实了这一点ꎮＤｈａｌｉｗａｌ等[１]报道了一个用ＥＭＳ处理春小麦品种Ｉｎｄｉａｎ生成的突变体群体ꎬ在Ｍ４代观察到的表型稳定群体中ꎬ植物高度的变化最常见ꎬ其次是叶形态ꎮ许云峰等[６１]用ＥＭＳ对小麦品种烟农１５进行诱变处理ꎬ在Ｍ３代得到１１个农艺性状发生明显变异的突变系ꎬ以籽粒大小和株高２个性状的变异幅度最大ꎬ并且均有复合性状突变出现ꎮＧｕｏ等[６２]采用０.５％㊁１.０％和１.５％三种ＥＭＳ浓度处理京４１１种子ꎬ表型鉴定结果表明ꎬ除生育期外ꎬ其余性状的突变频率均随着ＥＭＳ浓度的增加而增加ꎮ９９３第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曹亚萍等:ＥＭＳ诱变技术在小麦上的应用㊀㊀㊀表１㊀小麦ＥＭＳ诱变群体中不同性状类型突变率(％)Ｔａｂ.１㊀ＭｕｔａｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒａｉｔｔｙｐｅｓｉｎｗｈｅａｔＥＭＳｉｎｄｕｃｅｄｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ(％)ＷｉｌｄｔｙｐｅＥＭＳＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ＋ＴｉｍｅＭｕｔａｔｉｏｎｔｙｐｅＳｐｉｋｅＬｅａｆＳｔｅｍＦｅｒｔｉｌｉｔｙＭａｔｕｒｉｔｙＯｔｈｅｒｓＴｏｔａｌｍｕｔａｔｉｏｎｒａｔｅＲｅｆｅｒｅｎｃｅｓＳｈｅｎｇｎｏｎｇ１０.４％＋１６ｈ０.７１０.８９０.４９０.２２０.０４１.５１３.８６[６３]Ｙｕｎｏｎｇ２０１０.８％＋１２ｈ０.６０２.２０３.４９５.１５１１.４４[６４]Ｙａｎｚｈａｎ４１１０１.２％０.２６０.６３１.０６３.３４１.５９１.２２８.１０[５０]Ｙａｎｚｈａｎ４１１００.７％０.２００.９３０.８０２.２２１.１２０.４３５.７０[５０]Ｘｉｎｏｎｇ９９１.０％＋１０ｈ５.１２２.０９３.９６０.０８２.１４０.２０１３.５９[６５]Ｘｉｎｏｎｇ９７９１.０％＋８ｈ１.６００.６４４.０００.０００.１６０.００６.４０[６５]Ｘｉｎｏｎｇ９７７１.０％＋１２ｈ３.２４１.３９３.７００.０００.６９０.２３９.２５[６５]Ｘｉａｏｙａｎ２２１.０％＋１２ｈ３.６０１.２７５.０８０.００１.６９０.２１１１.８６[６５]㊀㊀应用小麦ＥＭＳ诱变技术ꎬ除构建突变体库外ꎬ还需要针对性地创制新基因和新材料ꎬ尤其是应用于育种研究时需要对少数不利性状进行改良ꎬ实现定向诱变ꎮ为了解决ＥＭＳ诱变的随机性和研究目标的定向性这一矛盾ꎬ需要在诱变群体中有效添加选择压ꎬ以提高目标突变体选择准确性和利用效率ꎬ进而实现对小麦某一特殊性状进行遗传改良ꎮ如对诱变群体Ｍ２进行干旱㊁低温㊁高温㊁盐碱等环境胁迫ꎬ可以鉴定出各种抗逆性强的突变体ꎻ对Ｍ２进行病㊁虫㊁菌接种鉴定或土壤带菌操作等试验ꎬ可鉴定出抗各种病害突变体ꎻ对Ｍ２籽粒进行蛋白电泳分析ꎬ可检测品质性状相关基因突变体ꎻ提取Ｍ２植株基因组ＤＮＡꎬ按目标基因序列设计引物ꎬ用ＴＩＬＬＩＮＧ技术定向筛选ꎬ可鉴定更多相关基因突变ꎮ图４给出了小麦ＥＭＳ诱变研究备选方案ꎬ旨在为科研工作者提供一种研究方法和策略ꎬ以便根据研究目标选择性借鉴ꎮ５㊀小麦ＥＭＳ诱变技术发展前景５.１㊀培育小麦新品种近年来ꎬ我国小麦生产上大面积种植品种的产量㊁品质㊁抗性大多取得了明显改进ꎬ但由于生态环境等因素影响ꎬ对于各地育种家来说ꎬ如能改进某个品种的某１~２个性状ꎬ即可产生良好的社会和经济效益ꎮ小麦ＥＭＳ诱变育种的主要特点是对少数不利性状进行改良ꎬ在小麦育种实践中发挥不可替代的作用ꎮ基于ＴＩＬＬＩＮＧ的诱变技术ꎬ将是一种高效定向性育种技术ꎬ它不但继承了诱变育种稳定快㊁只改变原亲本单个目标性状的传统优点ꎬ而且无须耗时的转基因和连续的杂交㊁回交过程ꎮ由ＴＩＬＬＩＮＧ分析所鉴定的大量目标突变体分别含有不同的或新的等位变异ꎬ通过与常规育种技术有效结合ꎬ能够实现目标性状优良等位变异的基因聚合ꎬ从而创制综合性状优良的育种新材料ꎬ促进小麦耐逆㊁高产㊁优质新品种的培育ꎮＥＭＳ诱变创造出有利性状的变异ꎬ可以作为优良育种亲本或自交纯合作为品种推广应用ꎬ也可从育种材料转为基因组学研究的重要基础材料ꎮ５.２㊀诱生小麦新基因在当前小麦种质资源库新基因极度缺乏㊁遗传资源日益枯竭的状况下ꎬＥＭＳ高效诱导点突变和不易造成染色体畸变的优势ꎬ被广泛应用于小麦研究中ꎬ能够在短时间获得新性状和新基因ꎬ极大程度丰富了小麦种质资源ꎮ这些资源源于人工诱变ꎬ控制这些性状的基因或等位基因与来自自然变异的基因或等位基因通常是不相同的ꎬ是一种新的基因资源ꎮ这些表型性状变异是由人工诱变获得的新型等位基因变异ꎬ可以与传统品种进行杂交ꎬ增加小麦育种的创新性ꎬ丰富自然界种质资源ꎻ部分优异资源将成为分子设计育种的理想材料ꎮ５.３㊀图位克隆基因选择具特定变异的稳定突变株ꎬ与其野生型或同种性状中表型差别较大的品种配制杂交组合ꎬ培育大分离群体ꎬ可以对控制该性状的基因进行精细定位㊁图位克隆ꎬ并为了解变异产生的分子遗传机制提供基础材料ꎮＥＭＳ诱变丰富了图位克隆的数量与资源ꎬ随着分子生物学研究的深入和技术的更新ꎬ这种方法思路在小麦功能基因的发掘与利用方面会越来越深入ꎮ００４㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀激㊀光㊀生㊀物㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第２８卷。

外被体蛋白Ⅰ结构与功能的研究进展
张光亚
【期刊名称】《医学综述》
【年(卷),期】2016(22)1
【摘要】外被体蛋白Ⅰ (COPⅠ)是一个七聚体复合物,在酵母及真核细胞生物体中广泛表达并发挥着不可或缺的作用.COP Ⅰ参与形成逆向转运囊泡(即COP Ⅰ囊泡),介导囊泡的逆向转运功能,将细胞中含双赖氨酸基序的蛋白、高尔基体糖基转移酶类、KDEL蛋白等逆向运输到细胞内的特定区域,在保持内质网和高尔基体的完整性、调节细胞内脂质代谢、维持细胞稳态及机体的生长发育中发挥重要作用.COPⅠ功
能缺陷会导致脂质代谢异常、肿瘤以及神经系统疾病的发生.
【总页数】5页(P5-9)
【作者】张光亚
【作者单位】上海交通大学医学院附属第三人民医院内分泌科,上海201900
【正文语种】中文
【中图分类】Q244
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JIEHE HULI2024 年 1 月第 10 卷第 1 期1例前庭神经炎伴延髓梗死患者的中西医结合护理体会…………………………………………………………………………………………………………白丽（90）手指点穴联合中药膏摩治疗胃脘部胀痛1例的护理体会…………………………………………………………………………逯小芳，刁欣悦，李可，刘海洋（95）艾条灸联合耳穴贴压治疗1例肺癌术后脾肾亏虚患者失眠的护理体会…………………………………………………………………………严秋波，章甜，张利元，侯爱华（100）中药塌渍联合蜡疗治疗1例项痹病患者的护理体会………………………………………………………………李莹莹，刘佳环，金春伶，于婉君，王丽莎（105）肿瘤化疗相关性呃逆的中医治疗进展…………………………………………………………………………高娟，程誌，唐晴晴，张凤娟（108）耳穴揿针疗法在急重症患者镇痛管理中的研究进展………………………………………………………………………………………………李欢，吕健（114）耳穴埋豆缓解化疗所致恶心呕吐的研究进展……………………………………………………………………………………杨鸽，黄俊衡，王小莉（120）艾灸治疗老年尿失禁研究进展………………………………………………………………靳文丽，张元春，韩京晶，刘继宁，范红雪（125）五行音乐疗法在围手术期患者中的应用进展………………………………………………………………………………………………邱静怡，戎明梅（129）艾灸缓解肿瘤化疗相关不良反应的研究进展………………………………………………………………………………………………严柳，高雅倩（136）调查研究广西壮族自治区ICU护士实施身体约束知信行的现状调查及影响因素分析…………………………………………马强，李高叶，廖婷婷，玉琴，黄晓波，韦秀，谢海娟（140）技术与方法改良单腿截石位牵引体位在股骨近端抗旋转髓内钉内固定手术中的应用………………………………………………………………………………………………王晅晅，徐静（148）专科护理基于市场营销4C理论在首发脑卒中后吞咽障碍患者饮食指导中的应用效果…………………………………………谭碧海，吴世芳，邓颖秀，邓美杰，陆兰岚，袁昌杰，黄艳应（153）护理教育护理专业学生实习前后健康商数状况的对比研究……………………………………………………………………………………王慧颖，周芳，李茹（159）叙事医学融入《中医护理学》课程思政教学实践探讨……………………张惠玲，余爽，施慧，夏哲远，孟亚慧，郝书婕，袁亚美，李一芳，王晓妹（164）案例分享1例共聚焦激光显微内镜检查术患者的护理配合体会……………………………………………………………………………………张荣旺，王爽，彭丹（169）1例脑卒中后遗症期肢体运动功能障碍伴麻木患者三方协同病程管理及护理体会…………………………………………………………………………梁丹丹，陈秀丽，刘利梅，陈佳（173）ZHONGXIYI JIEHE HULI2024 年 1 月第 10 卷第 1 期穴位注射疗法联合静脉滴注止吐药治疗紫杉醇脂质体化疗后恶心呕吐1例的护理体会……………………………………………………………………………………刘菲，刘书红，赵亚楠（178）1例感染鼠伤寒沙门菌伴呕吐患者的护理体会…………………………………………………………………………………………………………闫静雯（182）SpyGlass TM DS直视下激光碎石治疗胆总管巨大结石伴急性胆管炎1例的护理体会……………………………………………………………………………………张春双，彭丹，许冰（185）综述类风湿性关节炎患者发病风险感知的研究进展……………………………………………………………………………………尹凌瑶，周华群，范欣欣（189）中青年慢性病患者重返工作自我效能的研究进展……………………………………………………………………………………雷宏，孙新雨，尹安春（194）正念减压疗法在抑郁障碍患者中的应用进展………………………………………………………………丁圣楠，唐世明，张林，王岩，陈奇（202）老年慢性病患者衰弱运动干预研究进展……………………………………………………………………………………张建花，黄山，邓颖（209）移动医疗在孕产妇体质量管理中的应用现状…………………………………………………………………………张佳宇，陶月仙，周琪，张娜（217）老年慢性病患者延续性护理的研究进展………………………………………………………………………………………………毕晓露，邓颖（223）Contents Volume 10 Number 1 January 2024Advancing the quality of nursing through technologies in oral medicine …………………………WU Xuan （1）Research hotspots and trends in the field of quality of life of oral cancer patients ： A visual analysis based on CiteSpace ………………………………………YANG Ting ， CHEN Siyi ， ZHENG Xiaodan ， YANG Yi （3）A survey on the implementation of health education among nurses in the stomatology clinic in Guangdong Province …………………………SHEN Fang ， YE Ziwen ， FENG Xiaowen ， SU Wanying ， XIAO Wei （12）Application of rubber dam isolation technique in chairside CAD/CAM porcelain inlay restoration………………………………………………………………LI Zhaoyang ， DUAN Younan ， MA TAO （18）Effect of systematic oral nursing interventions on dental plaque control and oral health care behavior in patients with periodontal disease ……………CAI Shuang ， LIU Xuewei ， WANG Meng ， CUI Yue ， WANG Wei （22）A comparative study on disinfection effect of three different disinfectants for oral dental chair water lines………………………………………WANG Wenjuan ， LI Yajuan ， LI Pei ， KONG Li ， WANG Ting （27）Application of list management mode in nosocomial infection prevention in the prosthodontics clinic ……………WANG Meng ， LIU Xuewei ， GAN Ling ， YAN Tong ， CUI Yue ， CAI Shuang ， WANG Wei （33）Nursing cooperation in implant -supported immediate restoration of edentulous jaws under dynamic navigation……………………MA Yu ， YU Donghui ， ZONG Jianting ， CHEN Hongmei ， SUN Feng ， MA Feifei （38）Implementation of the scenario simulation teaching method in the clinical teaching practice of oral medicine for nursing students ………………………MA Yuan ， MA Tao ， MAO Yaxun ， WANG Xiaoyan ， LIU Sha （44）Effect of thunder -fire moxibustion combined with nursing intervention on functional recovery after surgery for fractures around the knee …………………………………………LI Wumei ， LIU Lanying ， LI Zhou （50）Application of modified standard operation procedure in bowel preparation before colonoscopy……………………………………………SHI Jiaying ， WANG Meitang ， LIU Baiqiu ， JIA Shoumei （56）A qualitative study on the experience of nurses participating in new media health science popularization………………LI Ting ， XU Jianwen ， QIANG Hong ， WEI Xiaoxiao ， WANG Juan ， WANG Jingting （61）Effect of modified Traditional Chinese Medicine external application in the treatment of pruritus in patients with chronic cholestatic liver disease …………………LI Xue ， ZHAO Haiqin ， BAI Lirong ， LIU Xiaojing （66）Effect of Traditional Chinese Medicine umbilical moxibustion combined with diet nursing in the treatment of diarrhea of spleen and stomach Qi deficiency type in children……………………………………………………………………………WU Qiaoling ， GUO Huijuan （71）Integrated Traditional Chinese and western medicine nursing for a patient with diabetic retinopathy complicated with traction retinal detachment…JIANG Ying ， WANG Luxia ， LI Yajing ， JIA Shaohong ， NIE Guiyun ， LIU Honghong ， NI Chunxia （75）Nursing of a patient with post -stroke constipation of Qi -deficiency type treated by Baliao acupoints moxibustion and acupuncture combined with oral administration of Yiqi Runchang decoction………………………………………………………………………LI Juan ， FENG Ruiping ， LI Ling （80）Traditional Chinese Medicine nursing of a patient with lymphoedema of the lower limbs after radical hysterectomy for cervical cancer ……………SU Heng ， WANG Xiaoyin ， CHEN Lei ， ZHANG Hanlu ， SU Shuzhen （85）Integrated traditional Chinese and western medicine nursing of a patient with vestibular neuritis accompanied by medullary infarction ………………………………………………………………………………BAI Li （90）Nursing of a patient with epigastric pain treated by acupoint finger -pressing combined with Traditional Chinese Medicine ointment rubbing therapy ………………LU Xiaofang ， DIAO Xinyue ， LI Ke ， LIU Haiyang （95）Volume 10Number 1January 2024Moxa stick moxibustion combined with auricular acupoint pressure in the treatment of insomnia in a patient with syndrome of spleen and kidney deficiency after lung cancer surgery……………………………………………YAN Qiubo， ZHANG Tian， ZHANG Liyuan， HOU Aihua （100）Nursing of a patient with cervical spondylopathy treated by Traditional Chinese Medicine collapse combined with wax therapy……………LI Yingying， LIU Jiahuan， JIN Chunling， YU Wanjun， WANG Lisha （105）Progress of Traditional Chinese Medicine in the treatment of chemotherapy-induced hiccup………………………………………GAO Juan， CHENG Zhi， TANG Qingqing， ZHANG Fengjuan （108）Research progress of auricular acupuncture with thumbtack needle in the pain management in critically ill patients……………………………………………………………………………LI Huan， LYU Jian （114）Research progress of auricular bean embedding in the treatment of chemotherapy-induced nausea and vomiting …………………………………………………………YANG Ge， HUANG Junheng， WANG Xiaoli （120）Research progress on moxibustion in the treatment of urinary incontinence in the elderly…………………………JIN Wenli， ZHANG Yuanchun， HAN Jingjing， LIU Jining， FAN Hongxue （125）Research progress on application of five-element music therapy in perioperative patients……………………………………………………………………………QIU Jingyi， RONG Mingmei （129）Research progress on moxibustion for relieving chemotherapy-induced adverse drug reactions in cancer patients ……………………………………………………………………………………YA Liu， GAO Yaqian （136）A study on the status quo and influencing factors of ICU nurses’knowledge，attitude and practice towardsphysical restraints in general hospitals in Guangxi…………MA Qiang， LI Gaoye， LIAO Tingting， YU Qin， HUANG Xiaobo， WEI Xiu， XIE Haijuan （140）Application of modified hemilithotomy position in the proximal femoral nail anti-rotation internal fixation ……………………………………………………………………………WANG Xuanxuan， XU Jing （148）Application effect of marketing theory of 4Cs of dietary guidance in patients with dysphagia after first-ever stroke ……………TAN Bihai， WU Shifang， DENG Yingxiu， DENG Meijie， LU Lanlan， HUANG Yanying （153）A comparative study on health quotient of nursing students before and after the clinical internship…………………………………………………………………WANG Huiying， ZHOU Fang， LI Ru （159）Practice of integrating narrative medicine into the ideological and political education of Traditional Chinese Medicine Nursing courses…………………………………………………………………………………ZHANG Huiling， YU Shuang，SHI Hui， XIA Zheyuan， MENG Yahui， HAO Shujie， YUAN Yamei， LI Yifang， WANG Xiaomei （164）Nursing of a patient undergoing confocal laser endomicroscopy……………………………………………………ZHANG Rongwang， WANG Shuang， PENG Dan （169）Practice of tripartite coordination course management model for a patient with limb motor dysfunction and numbness in sequela stage of stroke…………LIANG Dandan， CHEN Xiuli， LIU Limei， CHEN Jia （173）Nursing of acupoint injection therapy combined with intravenous administration of antiemetics in the treatment of nausea and vomiting in a patient with paclitaxel liposome chemotherapy…………………………………………………………………LIU Fei， LIU Shuhong， ZHAO Yanan （178）Nursing of a patient with Salmonella enterica serovar Typhimurium infection complicated by vomiting ……………………………………………………………………………………………YAN Jingwen （182）Laser lithotripsy guided by SpyGlass TM DS direct visualization system and nursing care of a patient with giant common bile duct stones and acute cholangitis………ZHANG Chunshuang， PENG Dan， XU Bing （185）Research progress on perceived risk of patients with rheumatoid arthritis……………………………………………………………YIN Lingyao， ZHOU Huaqun， FAN Xinxin （189）Volume 10Number 1January 2024Research progress on return-to-work self-efficacy of young and middle-aged chronic disease patients …………………………………………………………………LEI Hong， SUN Xinyu， YIN Anchun （194）Application progress of mindfulness-based stress reduction therapy in patients with depressive disorders ……………………………DING Shengnan， TANG Shiming， ZHANG Lin， WANG Yan， CHEN Qi （202）Research progress of exercise interventions on frailty in elderly patients with chronic diseases …………………………………………………………ZHANG Jianhua， HUANG Shan， DENG Ying （209）Research progress on the application of mobile health in weight management of pregnant and postpartum women ………………………………………………ZHANG Jiayu， TAO Yuexian， ZHOU Qi， ZHANG Na （217）Research progress of extended care in elderly patients with chronic diseases……BI Xiaolu， DENG Ying （223）。

核农学报2023，37（11）：2158~2165Journal of Nuclear Agricultural Sciences非生物胁迫诱导的棉花酵母双杂交文库构建及GhJAZ1互作蛋白筛选蔡肖李兴河王海涛刘存敬唐丽媛张素君张建宏*（河北省农林科学院棉花研究所/农业农村部黄淮海半干旱区生物学与遗传育种重点实验室/国家棉花改良中心河北分中心，河北石家庄050051）摘要：非生物胁迫导致棉花生长发育受到抑制，严重影响棉花的产量和品质。

为了深入探究棉花非生物逆境响应的分子作用机制并鉴定GhJAZ1的互作蛋白，本研究以陆地棉标准系TM-1为材料，采用Gateway重组技术构建了非生物胁迫诱导的陆地棉酵母双杂交cDNA文库，获得的初级文库总克隆数为1.2×107 CFU，次级文库总克隆数为1.6×107 CFU，重组阳性率100%，酵母文库滴度为5.0×107 cells·mL-1，酵母克隆平均插入片段>1 000 bp，符合建库标准，可用于后续酵母双杂交筛选。

以GhJAZ1为诱饵，构建pGBKT7-GhJAZ1诱饵蛋白表达载体，经毒性检测及自激活活性检测，明确了诱饵质粒在酵母系统中无毒性和自激活活性，可直接用于酵母文库筛选。

利用酵母双杂交筛选构建的非生物胁迫诱导的酵母cDNA文库，得到72个初筛阳性克隆，经测序、序列比对和酵母回转验证，获得11个与GhJAZ1相互作用的候选蛋白。

选取其中4个候选蛋白，利用酵母双杂交进一步确认了GhJAZ1与候选蛋白的相互作用关系。

本研究结果为深入分析棉花非生物胁迫响应的调控网络奠定了良好的基础，为解析GhJAZ1低温应答分子机理提供了重要参考。

关键词：棉花；互作蛋白；酵母双杂交；非生物胁迫；GhJAZ1DOI：10.11869/j.issn.1000‑8551.2023.11.2158JAZ（Jasmonate ZIM-domain）蛋白作为E3泛素连接蛋白降解复合体SCF COI1的靶蛋白，是茉莉素（jasmonic acid，JA）信号转导途径中重要的转录抑制因子之一［1-2］。

谈名人档案的征集和利用
曹丽萍
【期刊名称】《兰台内外》
【年(卷),期】2005(000)002
【摘要】名人档案具有私人档案性质，从不同侧面，综合反映一定历史时期的社
会面貌。

名人档案集多门类、多载体档案为一体，即名人档案集人事或干部、文书、科技、专业档案等为一体，同时又把纸张、声像、实物档案融合在一起，因此，在整理、保管、利用时，要考虑各自档案与载体自身特点与要求。

名人档案具有较强的动态性，时间跨度大，材料需不断补充，因此，在立卷归档时要留有余地。

【总页数】2页(P50-51)
【作者】曹丽萍
【作者单位】浙江大学
【正文语种】中文
【中图分类】G275.2
【相关文献】
1.谈名人档案的征集
2.探讨县级档案馆对名人档案的征集和利用
3.地方档案馆名人档案征集及利用研究
4.名人档案资源征集方法思考与探讨——以体育界出彩河南
人档案资源征集工作为例5.艺术名人档案的征集和利用
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《中国文学》英文版对中国形象的传播——以1980年代为
例
孔小彬
【期刊名称】《青年记者》
【年(卷),期】2017(0)35
【摘要】《中国文学》英文版创刊于1951年，先后由外文局、中国作协等机构主办，2000年停刊，历时50年，即便是“文革”时期也不曾中断，是中国官方唯一的一本持续向海外译介中国文学的杂志。

《中国文学》英文版跨越了中国当代不同的历史时期，它的办刊经验值得认真总结。

【总页数】2页(P34-35)
【作者】孔小彬
【作者单位】九江学院文学与传媒学院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.《中国文学》（英文版）对鲁迅形象的经典化重构 [J], 曹培会;滕梅
2.中国文化在他者语境中的传播——以英文版《中国文学》为例 [J], 林文艺
3.跨文化传播视角下英文版《中国文学》女性作家及其作品译介探究——以《人到中年》译介为例 [J], 林文艺;
4.1951-1966《中国文学》(英文版)短篇小说中进步青年形象重塑研究 [J], 童悦;韩江洪
5.英文版《中国文学》杂志生产传播机制中的译者群体与人文精神\r——王明杰先生访谈录 [J], 胡牧;朱云会
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