生理学实验报告
实验题目：
蛙的体循环血压、心肌收缩和心电图（ECG）的同步记录与分析
课程名称：生理学实验
专业：10级生物技术及应用（基地班）
教室：A414
学生姓名：徐棒夏凡女
学号：10350083 10350081
指导老师：龙天澄张碧鱼陈笑霞
日期：2012年5月15日
一．实验目的
1.学习并掌握蛙的体循环血压、心肌收缩和心电图（ECG）的同步记录
2.记录和分析植物神经系统和重要神经递质对血压、心电（心肌的电生理特性）和心搏（心肌的收缩特性）的影响。
二．动物与器械
青蛙；蛙心插管、常用手术器械、计算机采集系统、蛙心夹、YP100压力换能器、三通管、注射器、保护电极、露丝电极、一维位移微调器、固定针、蜡盘、培养皿、污物缸、棉线、纱布、滴管、小烧杯；任氏液、石蜡油、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液、肝素溶液；
三．实验原理
神经与体液因素对心血管功能的调节可通过心肌收缩力、心电图和血压的变化反映出来。尤其是血压的指标直接反映了心输出量和外周阻力的变化，可以较好的评价整体的心血管功能。
本实验用青蛙主动脉插管法，直接测量血压，并同步记录心搏和心电图。记录和分析植物神经系统和重要神经递质对血压、心电（心肌的电生理特性）和心搏（心肌的收缩特性）的影响。
四．实验步骤
1. 分离迷走交感混合神经干
按常规方法用探针刺毁蟾蜍的脑和脊髓，将动物背位放在蛙板上。把左侧下颌角与前肢间的皮肤纵向剪开，用镊子紧贴下颌角分离皮下组织。找到体轴走向的提肩胛肌，小心地将提肩胛肌横向剪断，即可见到其下方的血管神经束（皮动脉，颈静脉和迷走-交感混合干）。在迷走—交感混合干下方穿一线，用玻璃分针分离开神经，用湿生理棉球暂将神经覆盖，以避免神经干燥。
2. 暴露心脏
在胸骨柄后方的皮肤上先剪开一小的切口，再自切口处向左右两侧锁骨外侧方向剪开皮肤，切口成V形，把切开的皮肤掀向头端。在胸骨柄后方的腹肌上也剪一小切口，沿身体正中方向剪开剑突和胸骨（剪子尖向上翘以免损伤血管和心脏），剪断左右乌喙骨和锁骨及提臂肌，使胸部创口也呈V形。可见到心包和心脏。用眼科剪剪开心包膜，在心脏舒张时夹上蛙心夹。蛙心夹拴线的另一端与张力换能器相连（换能器的输出端与生理信号采集处理系统的一个输入通道相连）。
3. 主动脉插管
YP100压力换能器的直端和侧端管上加装三通管。从侧管注入液体石蜡，将系统内气泡赶净。用装有50%柠檬酸钠溶液（肝素-任氏液）的注射器连接于侧端管上，直端管上连接心脏插管。
用线结扎动脉的远心端，在左主动脉分叉处穿线备用。用手术剪在结扎处与穿线处剪一V形口，将插管经V形口插入动脉圆锥适当深度。穿线结扎并固定于插管上。
4. 暴露腹主静脉
剪开下腹部有皮肤和肌肉找出腹主静脉，暂加保护，以备静脉注射用。
5.实验观察
打开计算机采集系统，将保护电极放在迷走交感神经干上，连接压力换能器，将心脏微微拉起，并将一露丝电极放于心室部位。调整3个通道分别为压力，张力和生物电，并调节相关参数和刺激参数。进行以下实验：
（1）同步描记正常的心搏、心电和血压曲线
（2）用波宽1ms，强度1~2V，频率5Hz刺激迷走交感混合神经干，记录现象。（3）用1ml注射器向腹主静脉注射Adr（0.0001）0.1ml，观察并记录曲线变化情况。
（4）用1ml注射器向腹主静脉注射ACh（0.0001）0.1ml，观察并记录曲线变化情况。
五．实验结果与讨论
（一）同步描记心搏、心电和血压曲线
从上到下分别为血压、心搏曲线、心电图。
（二）刺激迷走-交感混合干
1．低强度刺激混合神经干
用波宽1ms，强度1～2V，频率5Hz刺激迷走交感混合干，描记刺激引起的心搏减弱，血压降低的现象。见到现象后应立即停止刺激。
刺激混合神经干后，马上出现心迷走效应，血压急剧下降；心搏几乎停止，收缩压消失；心电也同样减弱至消失，心率减慢但不明显。稍后可以观察到微弱的心交感效应，特别是血压可以看到有一小段时间内上升超过了刺激前的水平。刺激的电信号通过肌肉和溶液传导，干扰了刺激期间的心电波形。
通过此图可以看出，血压的指标更能直接反映了心输出量和外周阻力的变化，从血压变化，即使是在低强度刺激混合神经干时，也可以清楚地看到交感效益的作用，而以此同时，心搏和心电的变化并不明显。
2．高强度刺激混合神经干
用波宽1ms，强度5V，频率10Hz刺激迷走交感混合干，描记心搏先减弱后增强、血压先降低后升高的现象。见到现象后应立即停止刺激。待心搏和血压恢复到对照水平后，保存图形。
高强度刺激混合神经干时，心迷走效应如故，刺激后血压明显急剧下降，血压周期变化消失，心搏和心电减弱至停止，心率减慢。而后，血压、心搏、心电逐渐恢复，并出现更为明显的心交感效应。从心电图的变化中最能清楚地看到心交感效应的作用。
在此图中，血压的变化不及心电的变化明显，但从血压和心搏中依然能够看出微弱的交感效应，而相对于低强度刺激来说，交感效应更加明显，再一次证明了交感-迷走神经干在高强度刺激下，更能使心脏表现出交感效应。
（三）Adr对心搏和血压的影响
用1ml注射器向腹主静脉注射Adr（10-4）0.1ml，观察并记录血压和心搏变化
往静脉中加入肾上腺素后，由于药剂从静脉回到心脏需要一定的时间，因而从加入试剂到发生反应有一定的时间差。血压整体上升，心搏虽然变化不如血压明显，但也能观察到其基线上升的现象。心电则无明显变化。
（四）Ach对心脏和血压的影响
用1ml注射器向腹主静脉注射Ach（10-4）0.1ml，观察并记录血压和心搏变化
注入乙酰胆碱后，心脏立即停搏，血压急剧下降并失去周期性的变化，心搏消失，心电信号明显减弱，心率大大减慢。一段时间后，心脏缓慢恢复跳动，血压上升，心肌收缩力增强，心电各项渐渐恢复到原来水平，但不是很平稳，有少许波动。
讨论：
实验中遇到的问题及解决方案：
1.由于压力换能器放在右边，注射药品时，右臂常碰到铁架台，可能移动了张
力换能器，影响到心搏曲线。
解决方案：通过滑轮连接传感器，使传感器能够放在左边。
2.血管较软，注射器针头很难插入
解决方案：沿着血管通向心脏的方向缓慢插入，直到针头全部进入血管，再将药品推入。注意尽量先从远离心脏的地方开始，下一次则要在此处前方，以免药品由针孔处漏出无法作用于心脏。
3.注入药品后无明显反应
解决方案：这可能是药品漏出或剂量本来就不足的缘故，需加大剂量再次注射。
六．注意事项
（1）注意用湿生理棉球保护神经，避免干燥。
（2）保持心脏表面的湿润，每一步骤的前后都应有对照曲线。
（3）药品注射量要适度，不可过量，避免造成心脏停跳。
（4）打开胸腔暴露心脏时，先剪开皮肤，观察腹主静脉的位置，注意切口不要
