怎样培育天麻蜜环菌材
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天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术人工栽培天麻,在有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌两种共生菌。
笔者在生产实践中,摸索出两种共生菌都能生长的培养基及生产技术。
具体做法如下。
1培养基配制1.1液体培养基马铃薯(挖去芽眼、去皮、切片)100g,硬杂木屑、麦麸、玉米面各50g,自来水或天然水1300mL,在双重锅内煮沸30分钟后用双层纱布过滤。
取滤液补水至1000mL,加葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、蛋白胨0.5%、10mLVB1。
全部溶解摇均后,分装于500mL的三角瓶或罐头瓶内,每瓶装150mL左右,也可装于试管内,装入量为试管容积的1/4。
三角瓶和试管用棉花塞口,罐头瓶用2层牛皮纸或4层报纸上盖一层塑料布封口后,用皮筋扎口。
特点:技术含量高,繁殖快,长好即可应用,但不能长期保存。
1.2固体斜面培养基是食用菌生产中常用的培养基,按照“1.1”的操作程序制取滤液,在滤液中加入琼脂18g,加热溶化并补水至1000mL,趁热加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、蛋白胨5g、10mgVB1,全部溶解摇均,分装于试管内,装量为试管容量的1/4,然后用棉花塞口。
1.3木屑培养基硬杂木屑50%、玉米芯(粉碎成小颗粒状)25%、麦麸15%、玉米面10%,外加葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、石膏1%、石灰0.5%、磷酸二氢钾0.2%、硫酸镁0.1%、2%VB1。
将原料和石膏、石灰等干料拌均,再将上述可溶解的所有辅料溶于水中并拌入原料中,使之含水量为70%,充分拌均后装入试管,并适当压实。
装入量为试管容积的1/2,然后用棉花塞口。
特点:耐贮藏,便于邮寄。
2灭菌用手提式高压灭菌锅,也可用民用高压锅代替。
2.1液体和斜面固体培养基灭菌时,蒸汽压力为1.4kg/平方厘米时稳定保持30分钟,待锅内温度降到50~70℃时出锅。
液体培养基出锅后直接放入接种箱中,待温度降到25℃以下时接种;斜面固体培养基需趁液体状态时倾斜成斜面(斜面长度约占试管长的3/5),待培养基自然凝固后移入接种箱。
蜜环菌与天麻的伴栽,通常采用哪些方法?蜜环菌与天麻的伴栽,通常采用无性繁殖和有性繁殖这两种方式,具体介绍如下:(一)无性繁殖法:常用窖栽。
在山林中培育多用坑窖,地道培育多用堆窖,庭院培育用中窖。
窖宽一般为60~100厘米,深30~50厘米,长根据地形而定,结构基本与菌材窖相同。
天麻怕水淹,故坑窖深浅要考虑地下水位,水位低,可深些。
天麻窖内的填覆物有固定菌材与天麻位置,调节水分、空气,补充营养等作用。
山林培育可取用山林中含大量枯枝落叶的腐殖质土。
地道培育用体积1:1的黄沙、稻壳混合物。
种麻一般用中小型白麻及米麻作种麻,多数是用中小型白麻与米麻混合栽种的。
容内每平方米约用菌材10根。
通常用混合麻种0.5千克,小的0.4千克、大的0.75千克。
栽种期大体上有秋栽(11月份左右)、春栽(3月份左右)两期,山林培育常宜秋栽,地道培育多宜春栽。
栽种时,先在窖底铺3~5厘米填覆物,铺一层菌材,种麻置于菌材下侧及两端。
填平菌材间缝隙,再覆盖5厘米填覆物。
可按此法栽两层,上下层菌材位置应错开。
(二)有性繁殖法:选留健壮无损、顶芽完整的剑麻作留种母株。
收获后冬贮于木箱内含水量约25%的新黄沙中,在3℃左右越冬。
翌年春,地温上升到15℃前,将剑麻取出栽种在木箱、大型花盆或育种圃中,每盆1~2株。
地温上升到20℃左右,就抽出地上茎。
这时应保持沙土湿润,用竹竿固定花茎,遮蔽阳光直晒。
花蕾形成后,花朵每天开放1至几朵。
如果缺乏授粉昆虫,应予人工授粉,待花朵开放,用镊子拨开花冠,剔去花药帽盖,取出花粉块,置于柱头上。
授粉时间应在上午10时至下午4时,授粉成功,则子房膨大,花冠枯萎,子房缝线明显,一旦开裂会扬出大量种子。
当1个果实开裂,就将相邻3~5个果实剪下,登于皿中,待其自然开裂后取种。
散于皿内的种子应立即播种,不可放置。
将已培养好的菌床的上下两层菌材都掀起,在其上下各垫铺厚约1厘米的青枫栎等枯树叶,种子撒于树叶层闻,每平方米播种10到几十个果实的种子。
天麻蜜环菌培育实施方案天麻的块茎是我省较贵重而紧缺的常用中药材。
它是奇特的异养植物,不含叶绿体,故不能进行光合作用自己制造营养,而必须与大型真菌蜜环菌共生。
研究表明,寄生在腐木上的蜜环菌的菌丝体先把腐木中的纤维素、半纤维素、木质素等分解为糖类,除自养外,并通过其菌丝缠绕呈绳索状的菌索作“桥梁”,输送给天麻。
因此,在人工栽培天麻时,如何培育生长旺盛的优质蜜环菌菌材就成为成败的关键。
为了进一步加强中药材新品种引进试验示范,深入探讨中药材产业发展模式,切实解决中药材天麻种植过程中存在的技术难题,结合实际特制定本实施方案。
一、目的及意义天麻(学名:Gastrodia elata Bl.)是兰科、天麻属腐生草本植物,是名贵中药材之一。
是一种特殊的植物,无根、无绿色叶片。
本身没有吸收和制造养分营养物质的器官,不能自养,表皮组织只能简单吸收土壤种的水分和无机盐。
其生长繁殖所需的营养物质来源于蜜环菌,没有蜜环菌,天麻就不能生长,栽培天麻就更谈不上成功。
所以天麻是一种典型的异养类型的特殊植物。
为了提高栽培天麻的产量和质量,达到高产稳产,就必须了解天麻和蜜环菌共生的相互关系。
天麻本身不能从土壤和大气中吸收营养,必须依靠蜜环菌提供养分,栽天麻必须先培育蜜环菌。
蜜环菌也是美味的食用菌与药用菌。
蜜环菌的培育程序为:母种分离→母种培养→原种培养→栽培种培养→菌材繁殖→伴栽天麻。
目的在于:一是引进新品种、探索新模式,进行试验示范及推广,切实解决生产中的实际问题,进一步探讨药材产业发展模式;二是发展有机种植,提高药材品质,保证安全、优质和经济效益;三是理论联系实际,积极提升农技推广技术人员实践操作能力。
二、指导思想以科学发展观为指导,按照我县发展中药材产业的总体要求,因地制宜、突出特色,努力实现生产标准化、产品优质化;依靠科技进步,提高单产、改善品质,增加经济效益。
三、实施目标一期目标:制作蜜环菌菌种1000瓶。
四、实施内容方法一:蜜环菌麦粒菌种的培育技术蜜环菌麦粒菌种,具有易制作,耐保藏,接种后萌发旺盛的优点,现将培育技术介绍如下。
天麻用蜜环菌的培养1.纯菌种的分离天麻所用蜜环菌的菌种可以从子实体经孢子分离、从菌索经组织分离以及培育大麻、猪苓和天麻的旧菌材或野生蜜环菌获得。
在此仅介绍从菌索分离的方法。
培养基:1.纯菌种的分离天麻所用蜜环菌的菌种可以从子实体经孢子分离、从菌索经组织分离以及培育大麻、猪苓和天麻的旧菌材或野生蜜环菌获得。
在此仅介绍从菌索分离的方法。
培养基:①麦芽糖2.5克,蛋白胨、琼脂2克,20%大麦芽煮汁成100毫升,pH5~6.5;②去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,维生素B110毫克,水100毫升,pH5~6.5。
任选上述两种培养基中的一种。
配好后在121℃下灭菌半小时,摆成斜面。
选幼嫩而健壮的野生蜜环菌菌索切取尖端,用70%的酒精进行表面消毒5分钟,在无菌条件下,去掉皮鞘,取白色菌髓部分,切成长1厘米左右的小段接入试管斜面培养基上,每管取一段即可,在20~25℃的条件下培养,15天左右,蜜环菌菌丝就可以长满斜面。
如果严格按无菌要求操作,就可以得到纯蜜环菌的母种。
如果有杂菌污染,应及时转接。
转接时要注意不要将转接的蜜环菌菌丝污染上杂菌。
经几次转接纯化,就可以得到纯的蜜环菌母种。
2.蜜环菌原种的培养(2级菌种)培养基:①木屑60%,麦麸35%,石膏粉1%,米糖4%,含水量60%,pH5~6.5;②麦麸50%,米糖20%,木屑29%,石膏粉1%,含水量55%,pH5~6.5。
任选上述两种培养基配方中的一种,按量均匀混合后,装入广口瓶或塑料袋中压实,中间用木棍插一直径约2厘米的洞,包扎好后,常规灭菌。
接种与培养:灭菌冷却后的培养基就可以用来接种,按无菌要求将试管斜面的蜜环菌菌丝转接到广口瓶培养基的洞中间,用培养基盖好,包扎好后20~25℃条件下培养,约2个月,菌丝可布满全瓶。
通常,一试管斜面可转接8~10瓶原种培养基。
如果操作不熟练,每瓶在原种培养基中可以多转接一些母种菌丝,甚至1瓶母种转接1瓶原种都可。
天麻蜜环菌菌材的培养1.菌种来源一是采集野生蜜环菌作菌种;二是利用已经伴栽过天麻的旧菌材作菌种;三是从菌种场购买蜜环菌原种作菌种,然后进行扩大培养。
2.菌材的培养时期菌材一年四季均可培养。
过去多在春季3~4月培养菌材供冬季伴栽天麻用。
由于培养时间过长,木材已近腐1.菌种来源一是采集野生蜜环菌作菌种;二是利用已经伴栽过天麻的旧菌材作菌种;三是从菌种场购买蜜环菌原种作菌种,然后进行扩大培养。
2.菌材的培养时期菌材一年四季均可培养。
过去多在春季3~4月培养菌材供冬季伴栽天麻用。
由于培养时间过长,木材已近腐朽,伴栽天麻产量不高。
现四川南川药用植物研究所,利用专门培养的“菌棒”作菌种,可以在短时间内培养出大量的优质菌种,缩短了菌材培养的时间。
根据树种和气候条件的不同而异。
一般利用皮厚、皮坚的树种作菌材,接菌慢,宜于7月上、中旬培养菌材。
若利用皮薄质松的树种作菌材,接菌快,宜于7月下旬至8月上旬培养菌材。
低海拔地区可适当推迟。
总之,要与冬季伴栽天麻相衔接。
3.菌材的培养方法可分为活动窖和固定窖两种培养方法。
①选择菌材用作菌材的树木约有200多种的阔叶树树种。
常用的有麻栋、槲栎、栓皮栎、枫杨、法国梧桐、桃树、桦树、野樱桃等。
其中以甜、涩味,质硬耐腐的树种为好。
选径粗6~8厘米的新鲜树干、枝条、枝丫,锯成50~60厘米长的小段,不要剥皮,不要劈开,以免破坏蜜环菌的营养源。
然后,在整好的木材上,用利刀每隔6厘米左右,砍1鱼鳞口;或每隔10~12厘米砍1三角口,深达木质部3毫米左右,以供接种蜜环菌种,将来在此口处能长出蜜环菌菌索。
以三角口为好,接菌后可从口的三面皮层中长出菌素,种麻栽放在三角口中心,将来菌索包围住种麻,两者就能很快地建立良好的共生关系,有利增产。
②选地选择树阴下或排水良好、土质疏松的砂质土或砂壤土作培养场地。
透气、透水性能差的黏土地不宜选用。
③活动菌材培养方法即所培养的菌材,将来在栽天麻时能随用随取的,故称活动菌材法。
天麻培养蜜环菌需哪些工
具和设备
培菌是一项技术性很强而又非常细致的工作,必须具备相当的技术水平和必要的设备、工具等。
所需主要设备和工具有:
①无菌箱:无菌箱又叫接种箱,是一个用木板和玻璃做成的小箱子,可以密闭,便于用药物熏蒸,以防止杂菌感染。
无菌箱的前后装有启闭的玻璃窗,下边开两个洞口,洞口装有布套,双手可伸入箱内操作。
箱内顶部装有日光灯或紫外线灭菌灯。
②无菌室:它同无菌箱一样,关闭要严密,便于消毒。
由于面积较大,要求就更严格一些。
只有生产数量大时,才用接种室接种。
③灭菌锅:灭菌锅是可以密闭的锅,能提高锅内的蒸汽温度,杀死杂菌达到灭菌之目的。
根据规模及经济条件,采用高压灭菌锅或自动土蒸锅均可。
土蒸锅可由砖木结构建成,也可单用砖结构建造。
④孢子收集器:是用采收菌类孢子的装置,主要包括培养皿、有孔钟罩、三角架等。
⑤菌种瓶:菌种瓶最好是用有色玻璃瓶,既可遮光又可便于检查瓶内菌丝的生长情况和有无杂菌。
瓶子容量以750毫升左右为好,口径约3厘米,过大则杂菌容易侵入,保温困难;过小则装料困难,取种不便。
⑥消毒药品:有甲醛(福尔马林)、石碳酸、高锰酸钾、乙醇(酒精)、新洁尔灭(来苏尔)、升汞等。
⑦培养基用品:有马铃薯、琼脂(又名洋菜)、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁等。
⑧其他物品:有接种针、镊子、酒精灯、试管、三角瓶和紫外线
灯管等。
接种针等可用不锈钢条自制。
天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术菌种培养是微生物工程领域的重要课题。
本文将介绍天麻蜜环菌和萌发菌母种的生产技术。
天麻蜜环菌的生产技术天麻蜜环菌的概述天麻蜜环菌(Ophiocordyceps sinensis)是寄生于青藏高原特有的天麻上的真菌,是一种重要的药用菌。
天麻蜜环菌具有滋补强身、亢进元气、活血止痛等功效。
因其生长在青藏高原上,种植难度大,市场价格高昂。
天麻蜜环菌的生产技术目前,国内的天麻蜜环菌生产主要依靠菌株保藏和菌丝体发酵的方式。
因为菌体繁殖周期长,生长条件较苛刻,中间环节多,所以天麻蜜环菌的制备工艺比较复杂。
菌株的保藏为了确保天麻蜜环菌的品种质量,要进行菌丝株的保藏。
保藏分为以下两类:1.把天麻蜜环菌菌丝体保存在深冷存储箱中:将培养出的天麻蜜环菌菌丝体经过特殊处理之后,放入深冷存储箱中保存。
这种方法适用于长期保存。
2.把天麻蜜环菌直接保藏在天麻上:将天麻收获后,用纱布包裹好,将培养好的天麻蜜环菌菌丝体涂抹在天麻上。
这种方法适用于短期保存。
菌丝体发酵生产在这个过程中,需要按照固态培养的方式来进行,主要步骤如下:1.选择营养和含水量适宜的基质:天麻蜜环菌具备较好的耐受性,可以在多种质地的基质上生长发酵,如:大豆糖蜜/麸皮、食用菌庚二酸盐、玉米棒芯、稻草粉等。
2.检查基质水分含量:盐度过高,水分过少都会对菌丝体的生长发酵产生不利影响,因此在进行发酵之前一定要检查基质含水量的状态,并根据实际情况进行调整。
3.中种菌丝体:此处使用的是固体素、甘油、自来水组成的液态培养基,在选择好基质材料后,使用液态培养漿的方法进行预处理。
将微生物发酵完的发酵漿液挖出来,与基质材料混合在一起,又使之均匀铺开。
4.发酵过程:将芽胞菌杂菌加入;约在18℃附近为最佳生长温度下。
待繁殖至一定程度后,取出菌丝体,进行后续处理。
5.活性炭喷涂处理:为了去除细菌杂质以及其他的污染物,去掉附着物表面上的细菌、外物等杂质。
在菌丝体发酵完成后的表面,喷涂一定量的活性炭。
怎样培育天麻蜜环菌材栽培天麻除需要种子外,还需要蜜环菌。
这是因为天麻不能自己制造营养物质,必须与蜜环菌共生在一起才能得到营养而繁殖生产。
蜜环菌是一种兼性寄生菌,一般寄生在死树朽木上,活树根上也可寄生,但只有在通气良好,温、湿度适宜的条件下才能正常生长生育,所以,培养好天麻蜜环菌材非常重要。
那么,怎样培育呢?一、选择树种。
适宜培育天麻茵材的树种有:大叶泡、花果树、羊奶子树、栓栎木、板栗、锥栗、核桃等树,切忌选用含油脂类的树木。
二、合理取材。
在适宜生长蜜环菌的树木中,选择直径10厘米的树木,先将其锯成50厘米长的小段,并除去其皮表面的青苔、地衣等杂物,然后每隔5厘米用刀砍一鱼鳞口,每段砍3-4排,使其接菌快。
三、培育时间。
培育天麻蜜环菌材一年四季均可进行,但以夏、秋季最好,因为夏、秋季的温、湿度均较适宜蜜环菌的快速生长。
其他季节可采用塑料薄膜覆盖培育。
四、培育方法。
1坑培法:挖坑深40厘米,大小根据地形和培育菌材多少而定。
先在坑底铺一层锯好的树木,一般每坑不超过200段,用土填满空隙,第二层放蜜环菌种(在挖野生天麻时,同时拾回烂树蔸及木块即可作菌种用,也可在己栽天麻的地方找些旧木棒作菌种用)。
这样依次铺放三层与地面平,上面盖土10厘米,垒成“馒头”形即可。
2半坑法:挖坑深30厘米,方法与坑培法相同,只是有两层菌材高出地面。
3堆培法:不挖坑,直接在地面上按上述方法一层一层堆放,堆4-6层。
此法适合于在温度低、湿度大的地区采用。
五、注意事项。
培育蜜环菌时,不管采用哪种培育方法,都要用沙土或树叶填好菌材间的空隙,并封严实,以防杂菌感染。
冬、春季培育时,要用塑料薄膜覆盖。
在高温季节般30天左右即可培育成。
怎样培育天麻蜜环菌材
栽培天麻除需要种子外,还需要蜜环菌。
这是因为天麻不能自己制造营养物质,必须与蜜环菌共生在一起才能得到营养而繁殖生产。
蜜环菌是一种兼性寄生菌,一般寄生在死树朽木上,活树根上也可寄生,但只有在通气良好,温、湿度适宜的条件下才能正常生长生育,所以,培养好天麻蜜环菌材非常重要。
那么,怎样培育呢?
一、选择树种。
适宜培育天麻茵材的树种有:大叶泡、花果树、羊奶子树、栓栎木、板栗、锥栗、核桃等树,切忌选用含油脂类的树木。
二、合理取材。
在适宜生长蜜环菌的树木中,选择直径10厘米的树木,先将其锯成50厘米长的小段,并除去其皮表面的青苔、地衣等杂物,然后每隔5厘米用刀砍一鱼鳞口,每段砍3-4排,使其接菌快。
三、培育时间。
培育天麻蜜环菌材一年四季均可进行,但以夏、秋季最好,因为夏、秋季的温、湿度均较适宜蜜环菌的快速生长。
其他季节可采用塑料薄膜覆盖培育。
四、培育方法。
1坑培法:挖坑深40厘米,大小根据地形和培育菌材多少而定。
先
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