人CP检测试剂盒,人C多肽(CP)分析检测ELISA试剂盒使用说明书
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人谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中谷胱甘肽(GSH)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷胱甘肽(GSH)水平。
用纯化的人谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的谷胱甘肽(GSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人谷胱甘肽(GSH)的含量。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
Human IgE ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI479Human IgE ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IgE ELISA Kit (Human IgE Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人总免疫球蛋白E 酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆中的IgE 的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为14.3ng/ml ,本试剂盒采用特异性抗体识别人IgE ,与IgG 、IgA 没有交叉反应性,板内、板间变异系数均小于10%。
免疫球蛋白E (IgE)只能在哺乳动物身上发现。
IgE 存在于血液中,是免疫系统抵御细菌和病毒等外来物质入侵的重要工具。
IgE 是一类具有δ链的亲同种细胞抗体,是参与过敏性鼻炎、过敏性哮喘和湿疹等发病机制调节的主要抗体。
IgE 是组胺和白三烯等肥大细胞释放抗炎剂水平的主要调剂者。
尽管只有少量IgE 在血液中,但它还负责触发严重过敏反应。
IgE 在I 型超敏反应中起作用,I 型超敏反应表现为各种过敏性疾病,如过敏性哮喘、大多数类型的鼻窦炎、过敏性鼻炎、食物过敏,以及某些类型的慢性荨麻疹和特应性皮炎。
此外,有足够证据证明IgE 还参与免疫系统对寄生虫入侵的反应,并增加与癌症发病有关的白血细胞数量。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法(Sandwich ELISA)检测样品中人IgE 的浓度,其原理见图1。
人IgE 特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人IgE 会与捕获抗体结合。
当加入辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体后,辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体与人IgE 结合,形成夹心的免疫复合物。
最后加入显色剂TMB 溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
人C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书V7.0 即用10-1136-0196人份试剂由瑞典Mercodia AB制造用于标签上的标识的说明预期用途C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)提供了一种人血清、血浆、尿液样本中C肽的定量检测方法。
本试验综述和说明胰岛β细胞功能的定性与定量评估不仅用于糖尿病自然历史的诊前和诊后研究,也在临床上作为选择正确疗法的导向。
外周胰岛素不能用于评估β细胞功能,鉴于门静脉循环使得肝脏吸收的大量化和复杂化,并且胰岛素试验不能区分内源性胰岛素和外源性胰岛素。
胰岛β细胞内的胰岛素原可裂解为1分子的C肽和1分子的胰岛素,C肽以和胰岛素等摩尔浓度量释放到循环中,相比胰岛素而C肽最低限度被肝脏吸收,因此,外周C肽浓度更能反映β细胞的分泌量,比胰岛素更准确。
尿液中C肽含量与血浆中C肽含量相关,但个体内和人体间存在很高的差异性,所以测定β细胞功能不够精确。
检测程序的原理C肽检测试剂盒(酶联免疫法)是一种固相双表位酶联免疫试剂。
它基于双夹心技术,两单克隆抗体分别结合在C肽分子的抗原决定簇上。
在孵育过程中,样本中的C肽与结合在微孔(板)中的C肽抗体和酶标C肽抗体反应。
洗涤移去非结合的酶标抗体。
结合的偶联物(标记物)通过与3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)反应而被检测到。
加入酸后反应终止,然后通过分光光度计(酶标仪)读取反应的终点。
警告与注意事项●用于体外诊断。
●不能让反刍动物或猪接触到本试剂盒的内容物及其残余物。
●本试剂盒的终止溶液含有0.5M的硫酸。
按常规预防措施处理危险化学品。
●所有的患者样本都应按潜在传染物处理。
要求但未提供的材料●配备相应的移液管(重复移取加入酶结合物溶液、试验缓冲液、TMB底物和终止溶液)●用于试剂制备的试管、烧杯和量筒●重蒸水●磁力搅拌器●涡轮混合器●酶标仪(含450nm滤光片)●平板振荡器(建议速率700-900循环/分钟,轨道运动)●微孔板(酶标板)洗涤设备试剂各Mercodia胰岛素ELISA检测试剂盒(10-1128-01)都包含96孔的试剂,足够用于双份测试的42个样本、1个校准曲线。
Vero 细胞HCP(宿主细胞蛋白)Vero细胞宿主蛋白酶联免疫检测目录#F500预期用途该试剂盒用于检测用Vero 细胞.生产的制品中是否有宿主蛋白残留。
仅供研究和工业生产,不能用于人和动物的诊断。
总结与说明病毒疫苗或其他治疗用蛋白在Vero细胞中表达使商业用大量生产药物原料产品的经济简便方法。
生产和纯化这些产品的过程中会残留Vero细胞中的一些蛋白质(称为宿主细胞蛋白,HCPs)而造成污染。
这种污染可以减少药物的疗效,引发毒副反应和免疫学反应,因此最好在实际生产制品过程中将HCPs降低到最低水平。
一些利用抗体来除HCPs的免疫学方法,如Western Blot 和ELISA被广泛使用。
虽然Western blot是一种检测HCPs的有效方法,但它受到了一些限制。
因为它过程复杂且技术依赖性强,需要操作者对结果进行分析解释。
而且,它在本质上是一种定性检测,不能定量分析。
Western blot的敏感性易受被检测样品量的影响,也受目的产品浓度的干扰。
因此Western blot可用来检测纯化上游的蛋白质,而对纯化下游或终产品的检测灵敏度与特异性较低。
本试剂盒中用到的ELISA方法克服了Western Blot的缺点,将敏感度提高了100倍。
ELISA操作简单、客观、可获得半定量的结果,是纯化工艺,过程控制,常规质量检测的最佳选择。
这个试剂盒可与纯化过程中残留的可独立污染产品的所有HCPs反应,就这个意义上来说,这个试剂盒是通用的。
用Vero细胞轻度裂解物获得抗体并经亲和纯化,得到的最终抗体可以与用于生产各种病毒疫苗和蛋白质产品的四种商用细胞系反应。
这一分析表明,绝大多数HCP存在于各种Vero细胞系和纯化过程中。
如果你需要一个更为敏感和特异性的方法去检测样品中的HCP量,Cygnus Technologies公司为你推荐一个优于2D Western blot的方法,我们将这个方法称为2D HPLC-ELISA。
人P16ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人P16的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人P16水平。
用纯化的人P16抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入P16,再与HRP标记的P16抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的P16呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人P16浓度。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
人肿瘤特异性抗原(TSA)分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物专业供应:含量。
试验原理:TSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将TSA和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中TSA的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
人c-myc检测试剂盒,人c-myc癌基因产物(c-myc)分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物专业供应:使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本c-myc癌基因产物(c-myc)含量。
试验原理:c-myc试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知c-myc浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将c-myc和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中c-myc的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗c-myc抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
人和肽素(CPP)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于生物素双抗体夹心技术原理,来检测人和肽素(CPP)),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中和肽素(CPP)的测定。
工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人和肽素(CPP)的水平。
向预先包被了人和肽素(CPP)单克隆抗体的酶标孔中加入和肽素(CPP),温育;温育后,加入生物素标记的抗CPP抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人和肽素(CPP)的浓度呈正相关。
试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
3.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
4.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
5.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
6.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。
根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融操作程序1.标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比2复孔。
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫学实验方法,用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。
它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势,被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。
本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。
一、实验准备1.阅读检测项目的说明书:在使用试剂盒前,仔细阅读说明书,了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。
2.样本准备:根据实验要求,准备样本。
如果需要检测血清中的抗体水平,可以采集血液样本,离心分离血清;如果需要检测细胞培养上清中的分子,将上清收集,并使其清晰,避免细胞或杂质的污染。
3.样本预处理:根据实验需求,对样本进行必要的预处理。
例如,可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本,以改变样本组分和浓度。
4.准备品质控制样品:制备阳性和阴性控制样品,用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。
5.实验器材准备:准备所需实验器材,如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。
确保器材的干净和完整,并按照说明书要求对其进行预处理。
二、试剂使用步骤1.试剂准备:根据说明书要求,将试剂从冰箱中取出,并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。
确保试剂瓶盖紧闭,并避免暴露在直接阳光下。
2.实验操作:按照说明书的要求,将试剂加入到酶标板中,并根据实验设计进行标准曲线的设置。
标准曲线用于测量未知样品的数量,并计算出浓度。
3.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行孵育。
孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。
4.洗涤:使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。
洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。
5.补液:在洗涤完成后,加入辣根过氧化物酶标况稀释液,促进酶标物与特异性结合物的反应。
6.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。
7.反应停止:根据试剂盒的要求,加入相应的停止液,停止酶反应。
人CP检测试剂盒,人C多肽(CP)分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物专业供应:使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本C多肽(CP)含量。
试验原理:CP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将CP和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中CP的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗CP抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。
1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
稀释比例按下表中进行:80 ng/ml (6号标准原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
品)40 ng/ml (5号标准100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液品)20 ng/ml (4号标准100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液品)10 ng/ml (3号标准100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液品)5.0 ng/ml (2号标准100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液品)2.5 ng/ml (1号标准100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液品)0 ng/ml (空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。
避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A 80 80 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B 40 40 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C 20 20 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D 10 10 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E 5.0 5.0 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F 2.5 2.5 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G 0 0 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
C多肽(CP)ELISA试剂盒性能1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的CP标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的CP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1 ng/ml上海乔羽专业生产供应的试剂盒类产品有:双抗夹心ELISA检测、ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、酶联检测试剂盒、国产进口试剂、代测elisa试剂盒、ELISA 检测试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、凋亡相关因子试剂盒、白介素ELISA试剂盒、VIP ELISA kit等实验室产品,产品品质,质量保证。
The performance of kit:1 sensitivity: minimum detection concentration is less than 1 standard. Linearity of dilution. Sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is 0.990.2: no specific reaction with other cytokines.3 repeatability: plate, plate between the coefficients of variation were less than 10%.Human type III procollagen amino terminal peptide ELISA kit steps:1 before use, all reagents and mixing. Do not allow liquid to produce a large number of bubbles, so as to avoid adding a large number of bubbles, resulting in the addition of the error.2 according to determine the number of sample number plus standard strip number. Each standard and blank hole is recommended to do the hole. Each sample can be made according to its own quantity, and can be used as a hole in the hole.3 diluted after standard 50ul in reaction hole, added to the sample 50 UL in reaction hole to be measured. Immediately joined the 50 UL antibody biotin. Cover the membrane plate, gently oscillating mixing, 37 degrees Celsius for 45 minutes.4 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.5 per hole adding chain affinity enzyme -HRP 100ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 30 minutes incubation.6 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.7 per hole adding substrate A, B 50ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 5 minutes incubation. Avoid light.8 remove ELISA plate, quickly add 50ul terminated liquid, adding the stop solution immediately after the determination results.9 od determination of each hole at the wavelength of 450nm.The result of judgment and analysis:1, instrument value: Yu Bo 450nm ELISA od read the hole on the instrument2, to the OD value as a vertical coordinate (y), corresponding ot standard concentrations as a horizontal coordinate (x), do have corresponding curve, sample ot content can be according to the OD value by standard curve conversion out corresponding concentration, multiplied by the dilution multiple; or with the standard concentration and the OD value calculated the regression equation of the standard curve, the sample OD value in the equation to calculate the sample concentration, multiplied by the dilution factor is the actual concentration of the sample.3, detection range: 0-100ng/ml4, sensitivity: 0.39ng/ml。