高效液相色谱测定构树叶中辅酶Q_10_含量
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反相高效液相色谱法测定厚朴树叶中的厚朴酚作者:刘存芳来源:《江苏农业科学》2015年第08期摘要:超声辅助法提取秦巴山区野生厚朴树叶中的厚朴酚,用显色法和薄层色谱法对厚朴酚进行定性鉴定,反相高效液相色谱法测定厚朴树叶中厚朴酚的含量。
采用高效液相色谱仪测定,以 C18为固定相,选择不同的流动相,检测波长为294 nm,流速为1 mL/min,进样量20 μL。
试验结果表明,厚朴树叶中含有厚朴酚,且厚朴酚的含量为075%,以体积比78 ∶ 22的甲醇∶水为流动相,测得厚朴酚的保留时间为4 528 min,分离效果好、简单、灵敏、重现性好、结果满意,适合于厚朴树叶中厚朴酚含量的测定。
关键词:厚朴树叶;厚朴酚;含量;高效液相色谱法;测定中图分类号: O657 7+2;R284 2 文献标志码: A文章编号:1002-1302(2015)08-0311-03厚朴(Magnolia officinalia)是木兰科木兰属的一种高大落叶植物 [1],别名川朴、紫油厚朴,树高15~20 m,广泛地分布于湖北西部、四川西南部、陕西南部、甘肃南部、江西、安徽、浙江、福建、湖南等地 [2],厚朴树皮是我国传统中药材,称为中药厚朴,始载于《神农本草经》,列为中品,其后历代本草均有记载,厚朴的树皮、根皮、花、籽及嫩芽均能入药[3],有燥湿消痰、化湿导滞、消除腹胀便秘、治疗痰饮喘咳、驱风镇痛等功效,还具有抗菌、抗病毒、抗过敏、影响胃肠活动、松弛肌肉和中枢抑制等作用,以厚朴树皮为主,将其作为中药材或深加工的原料使用。
厚朴酚是厚朴中的活性物质之一 [4],有抗菌、镇静中枢神经、松弛肌肉、抗溃疡、抗氧化、预防龋齿等药理作用 [5],最近研究表明厚朴酚还有抑制癌细胞的作用 [6],厚朴酚应用广泛,是一些中成药如保和丸、藿香正气水等的主要成分。
目前,厚朴酚主要是从厚朴树皮提取,厚朴树皮资源有限,厚朴树一般要生长15年才能符合药用需要,挖根剥皮,一次性使用,而厚朴树叶资源却非常丰富 [7]。
高效液相色谱法测定楤木及其提取物中齐墩果酸的含量引言齐墩果酸是一种天然单萜类化合物,广泛存在于植物中,具有抗炎、抗菌等药理活性。
楤木是一种常用的中药材,主要用于通气化痰、止咳化痰、消肿解毒等功效。
本文旨在利用高效液相色谱法对楤木及其提取物中齐墩果酸的含量进行测定,并探讨该方法的操作流程和结果分析。
实验方法样品准备本实验分为两组样品:楤木和楤木提取物。
楤木样品为通过观察、鉴别、簸箕等工艺处理获得的天然药材,选取新鲜且质量良好的样品。
楤木提取物样品为采用乙醇提取法得到的楤木提取物,按照提取物质量比例制备。
样品处理1.楤木样品的制备:将楤木洗净,晾干后破碎成粉,过筛备用。
2.楤木提取物样品的制备:称取一定量的楤木提取物样品,用甲醇将其完全溶解,备用。
试剂准备1.齐墩果酸标准物质(purity>98%)。
2.甲醇。
仪器设备1.液相色谱仪(HPLC)。
2.反相色谱柱(C18)。
3.二波长检测器。
色谱条件•流动相:甲醇-0.1%磷酸水溶液(30:70)。
•流速:1 mL/min。
•柱温:35℃。
•检测波长:210 nm。
•进样量:10 μL。
实验操作流程1.准备齐墩果酸标准曲线:取齐墩果酸标准物质适量,用甲醇进行稀释,最终浓度分别为0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 μmol/L。
2.取10 mg的楤木样品粉末或楤木提取物样品,加入5 mL甲醇中,用超声波法进行提取。
过滤所得稀释液,取适量过滤液进行检测。
3.将样品适量注入HPLC系统,进行分析。
4.根据标准曲线计算齐墩果酸含量。
结果分析标准曲线见下表:浓度(μmol/L)峰面积(mV*s)0.05 3502.480.1 6992.410.2 13594.880.4 26811.220.8 54805.63样品处理结果见下表:样品齐墩果酸含量(mg/g)楤木样品0.825楤木提取物样品 4.321结论本文采用高效液相色谱法对楤木及其提取物中齐墩果酸的含量进行了测定,测定结果表明,楤木提取物中齐墩果酸的含量明显高于楤木样品,在该方法下得到了较好的检测效果。
收稿日期:!""#$"%$&"作者简介:王小淳(#’("$),女,硕士,工程师,电话:("!#)%)"’*"""$!""),+$,-./:01-2!345/.1672-6892618。
高效液相色谱!质谱联用分析无患子中的表面活性物质王小淳(上海白猫有限公司,上海!""!&#)摘要:应用高效液相色谱和大气压电离质谱联用技术,分离分析了无患子果皮中的表面活性成分。
根据质谱结果确定其相对分子质量,根据源内的碰撞诱导解离(:;<)技术产生的碎片初步推测表面活性物质的结构,发现了数个未见文献报道的组分。
关键词:高效液相色谱;大气压电离质谱;无患子;皂甙;倍半萜糖甙中图分类号:=>%*文献标识码:?文章编号:#"""$*(#&(!""#)">$"%!’$"&"前言无患子是一种野生落叶乔木,广泛分布于长江流域以南地区,其果实外壳是化痰中药,也是一种天然表面活性剂的原料。
无患子果皮中表面活性成分主要为萜类皂甙(如常春藤皂甙)和倍半萜糖甙(见图#)[#]。
这些天然表面活性物质具有很强的降低表面张力的作用,有良好的去污及洗涤性能,对人体温和、无刺激。
分离无患子果皮中表面活性成分时,常采用萃取、大孔树脂分离、反复进行硅胶柱色谱和反相柱色谱等方法,最后用制备型高效液相色谱分离得到单一组分。
利用化学水解法和核磁共振等仪器分析方法可确定组分的化学结构[!]。
第#’卷第>期!""#年##月色谱:F ;Y +J +Z =[@Y ?H=M:F @=I ?\=]@?G F ^W E /6#’Y E 6>Y E _6!""#!结果与讨论!"#液相色谱分离皂甙类物质的紫外吸收弱,紫外扫描显示最大吸收为!"#$%,经示差折光检测器和二极管阵列检测器同时检测对照发现,检测波长为!"#$%时可保证样品中主要组分被检出。
药学论文-高效液相色谱法测定复方银杏叶片中银杏总黄酮的含量【摘要】目的建立复方银杏叶片中银杏总黄酮含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法,用Symmetry C18色谱柱( 250 mm×4.6 mm,5 μm ),以甲醇0.4%磷酸溶液(52∶48)为流动相,流速为1.0 ml·min-1,检测波长360 nm ,柱温35℃。
结果该法线性关系良好,平均加样回收率为98.35 % ,RSD为1.17 % ( n = 5 )。
结论该法操作简便,分离效果好,结果准确,专属性强,可作为复方银杏叶片的质量控制方法。
【关键词】复方银杏叶片;黄酮;槲皮素;山柰素;异鼠李素;高效液相色谱法Abstract:ObjectiveTo establish the determination method of flavonoids in compound Ginkgo biloba Leaves Tablets .MethodsThe analysis was performed on aSymmetry C18 column(4.6 mm ×250 mm,5 μm) with methanol 0.4% phosphoric acid( 52:48 ) as mobile phase at a flow rate of 1.0 ml ·min-1, and at a column temperature of 35℃. The detection wavelength was 360nm.ResultsThe linearity of this method was good.The average recovery of added samples was 98.35 % with RSD 1.17 %. (n=5 ) .ConclusionThe method is convient with a good separating degree for the determination of flavonoids and can be used to evaluate the quality of compound Ginkgo biloba Leaves Tablets.Key words:Compound Ginkgo biloba LeavesTablets; Flavonoid; Quercetin ; Kaempferol; Isorhamnetin; HPLC复方银杏叶片是由银杏叶提取物和广西野葛根提取物等制成的复方制剂,具有活血化淤,降低血脂,清除自由基和抗衰老等功效和作用[1]。
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910209782.2(22)申请日 2019.03.19(71)申请人 云南农业大学地址 650201 云南省昆明市盘龙区沣源路452号云南农业大学(72)发明人 田洋 周露 盛军 宋爽 陶亮 彭磊 解静 (74)专利代理机构 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350代理人 汤东凤(51)Int.Cl.A61K 8/9789(2017.01)A61Q 19/00(2006.01)A61Q 19/08(2006.01)A61P 17/00(2006.01)A61P 29/00(2006.01)(54)发明名称一种构树叶活性成分提取方法及提取物的应用(57)摘要本发明公开一种构树叶活性成分提取方法及提取物的应用,涉及植物提取物、植物化学技术领域。
本发明的构树叶活性成分提取方法,具体包括活性成分水提和活性成分醇提,通过水提取法和醇提法提取构树叶中的活性成分,之后用石油醚除去杂质,用活性炭脱色;提取工艺也较简单,提取周期明显缩短,可以工业化生产;同时将获得的活性成分提取物制备构树叶活性成分提取物补水面霜以及日常护肤品,可以改善肌肤衰老状况,对皮肤炎症也有较好抑制作用;为构树叶的开发利用提供新思路。
权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 109758397 A 2019.05.17C N 109758397A权 利 要 求 书1/1页CN 109758397 A1.构树叶活性成分提取物在日化产品制备中的应用。
2.如权利要求1所述的构树叶活性成分提取物在面霜、乳液、面膜制备中的应用。
3.如权利要求1或2任意一项所述的构树叶活性成分提取物的应用,其特征在于:所述构树叶活性成分提取方法,包括活性成分水提和活性成分醇提,之后用石油醚除去杂质,用活性炭脱色。
4.如权利要求3所述的构树叶活性成分提取物的应用,其特征在于:所述构树叶活性成分水提的提取方法,包括以下步骤:将构树叶切碎,30-50℃加热后用水浸泡叶1-2小时。
高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷含量宋唯唯;刘芬芬;刘彩红【摘要】目的建立银杏叶提取物中总黄酮醇苷的HPLC含量测定方法.方法采用Hypersil ODS2色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45)为流动相,检测波长360 nm,流速1.0 ml/min,柱温35℃.结果槲皮素、山奈酚、异鼠李素进样量分别在10.0~60.0 μg/ml、10.0~60.0 μg/ml、1.0~ 30.0 μg/ml范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.42%、99.92%、98.11%.结论本方法简单、准确,可以用于银杏叶提取物中总黄酮醇苷的定量分析.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2016(037)001【总页数】3页(P33-35)【关键词】高效液相色谱法;银杏叶提取物;总黄酮醇苷【作者】宋唯唯;刘芬芬;刘彩红【作者单位】泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016【正文语种】中文【中图分类】R917银杏叶提取物(GBE)是银杏科植物银杏 Ginkgo biloba.L.的干燥叶经加工制成的提取物[1],具有扩张冠状动脉血管、改善脑循环及明显的抗血小板活化因子等独特的药理作用,主要活性成分为黄酮类和萜类内酯[2],它们是制定银杏叶提取物和制剂质量标准的重要依据。
国内外制药行业所用的GBE的含量标准为:银杏黄酮质量分数 24%、银杏萜内酯质量分数 6%。
不论是为衡量提取工艺的优劣和控制GBE的质量,还是为后续药理药效的实验研究提供可靠的数据,建立一种能稳定、可靠的定量分析其主要药效物质黄酮类化合物的方法是十分必要的。
银杏叶提取物含有 20多种黄酮类化合物,通常都以糖苷的形式存在,测定每一种黄酮成分的含量十分复杂,这些成分的苷元部分为槲皮素、山萘酚、异鼠李素,通过测定样品酸水解后三种主要甙元含量,再乘以一定的因子换算成总黄酮的含量[3],是国际上公认的衡量银杏叶提取物内在品质的依据。
银杏叶中莽草酸含量高效液相色谱测定方法研究本研究旨在建立一种高效液相色谱法测定银杏叶中莽草酸含量的方法。
通过优化色谱条件,包括流动相的选择、流速、进样量等,以及建立莽草酸的标准曲线,本方法具有较高的灵敏度、准确性和重复性。
该研究结果对于银杏叶中莽草酸的定量分析提供了一种快速、可靠的方法,并有助于银杏叶的质量控制。
引言:银杏(Ginkgo biloba)是一种古老的中药材,广泛应用于健康保健领域。
银杏叶是银杏的主要药用部位,其中含有丰富的活性成分,如黄酮类化合物和莽草酸等。
莽草酸是一种重要的生物活性成分,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用。
因此,准确测定银杏叶中莽草酸的含量对于银杏叶的质量控制和临床应用具有重要意义。
方法与实验:1.仪器与试剂本实验所使用的仪器为高效液相色谱仪(HPLC),色谱柱为C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。
流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(70:30,体积比),流速为1.0 mL/min。
采用紫外检测器,检测波长为276 nm。
实验所使用的莽草酸标准品由X公司购买。
2.样品处理将银杏叶样品研磨成粉末,称取0.5 g样品加入50 mL乙醇,回流提取2小时,过滤得到浸出液。
取适量浸出液用1% NaOH溶液进行提取,得到莽草酸提取液。
提取液经过浓缩,加入丙酮沉淀,经旋转蒸发浓缩后,用甲醇溶解,得到待测样品溶液。
3.构建标准曲线取适量莽草酸标准品,用甲醇稀释至不同浓度,分别进样测定得到峰面积值。
以浓度为横坐标,峰面积值为纵坐标,绘制标准曲线。
结果与讨论:本实验建立的高效液相色谱法成功测定了银杏叶中莽草酸的含量。
通过优化色谱条件,包括流动相的选择、流速、进样量等,优化后的方法能够快速、准确地测定样品中莽草酸的含量。
标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.9998,表明该方法的可靠性较高。
结论:本研究成功建立了一种高效液相色谱法测定银杏叶中莽草酸含量的方法。
高效液相色谱法分离蒲公英的活性成分研究蒲公英(Taraxacum officinale),是一种常见的野生植物,又名蒲公英、柳瓢。
在中药学中,蒲公英根、叶、花等部位都有一定的药用价值,具有清热消暑、利尿解毒、消炎止痛等多种功效。
然而,目前已经发现蒲公英中的活性成分研究较少,因此本文就以高效液相色谱法分离蒲公英的活性成分研究为主要内容展开讨论。
一、高效液相色谱法基本原理高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种现代分离及分析技术,主要用于分离化学物质中的混合物,可分离的化合物种类广泛,灵敏度高,分离效果良好。
其基本原理是在特定的液相检测器实现对样品分离、鉴定、测定和纯化的一种分析技术。
HPLC分离的基本原理是物质在液相层流条件下通过固定在柱内的分离相,因其分配系数不同,进一步实现分离。
具体来说,样品在进入柱前与移动相进行混合后,经过柱子分离时部分组分先于其他成分流出,并最后被检测器检测到,从而实现对不同组分的分离检测。
二、蒲公英的活性成分蒲公英的主要成分包括多种类物质,如黄酮类化合物、烷基乙酸类化合物、多种有机酸、菸酸、多糖、蛋白质、维生素等,其中,黄酮类化合物和烷基乙酸类化合物是蒲公英的主要活性成分。
黄酮类化合物具有显著的抗氧化、抗菌、抗炎、降血脂、降血糖等保健功效。
其中,蒲公英中含有丰富的反垩癣酸、异鼠李糖苷、欧洲李糖苷等黄酮类化合物,这些化合物不仅能提高人体免疫力,而且对高血压、肥胖症等疾病有较好的预防和治疗作用。
烷基乙酸类化合物则具有明显的抗炎、止痛和保肝作用,其中,蒲公英中主要有乙酸异戊酯、乙酸己酯、乙酸辛酯等成分,能够提高人体抵抗力,缓解疲劳。
三、高效液相色谱分离蒲公英活性成分方法研究HPLC方法是目前分离黄酮类和烷基乙酸类化合物的主要方法之一,其高分离效果和灵敏度使其成为评价药物活性的重要工具。
样品前处理首先将蒲公英进行加工、研磨,过筛后进行醇提成的浸膏。
应用超高效液相色谱质谱联用技术测定汉桃叶不同部位中有三种机酸的含量超高效液相色谱质谱联用技术(UHPLC-MS/MS)是一种高灵敏度、高分辨率、高效率的分析技术,广泛应用于食品、药品、环境等领域。
汉桃是一种具有丰富营养和药用价值的果树,其叶片中含有多种生物活性成分,包括多酚类化合物和有机酸等。
有机酸是叶片中的重要成分之一,对汉桃叶中不同部位的有机酸含量进行测定,有利于了解汉桃叶的化学成分特征,为进一步研究其药用价值提供重要信息。
本研究旨在利用UHPLC-MS/MS技术对汉桃叶不同部位中的有机酸含量进行测定,特别关注三种常见的有机酸:苹果酸、柠檬酸和葡萄糖酸。
通过本研究,可以全面了解汉桃叶中不同部位的有机酸含量差异,为汉桃叶的进一步开发利用提供理论基础和技术支持。
本研究还将探讨不同生长环境和季节变化对汉桃叶有机酸含量的影响,为汉桃叶的规范栽培和采摘提供科学依据。
1. 实验材料与方法1.1 实验材料本实验选取了汉桃叶的不同部位(包括顶部嫩叶、中部成熟叶和基部老叶)作为研究对象,分别采集自多个种植基地,确保样品的代表性。
采集后的叶片样品进行冷冻干燥处理,研磨成粉末状备用。
1.2 UHPLC-MS/MS分析条件本次实验采用UHPLC-MS/MS技术进行有机酸的检测和分析。
具体的分析条件如下:色谱柱为C18柱(100 mm × 2.1 mm,1.8 μm),流动相A为0.1%冰乙酸水溶液,流动相B 为乙腈,梯度洗脱;流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,进样量为5 μL;质谱条件为电喷雾离子源(ESI),正/负离子模式切换,多反应监测模式(MRM),离子扫描范围为50-1000 m/z;其他质谱参数如碎裂电压、气溶剂流量等根据不同化合物进行调整。
1.3 样品制备取粉末样品0.5 g,加入80%甲醇溶液10 mL,超声提取30 min,离心后取上清液,定容至10 mL。
1.4 含量测定取少量提取液尽快过滤,取上清液进样进行UHPLC-MS/MS分析。
应用超高效液相色谱质谱联用技术测定汉桃叶不同部位中有三种机酸的含量超高效液相色谱-质谱联用技术(UHPLC-MS/MS)是一种高效的分析方法,可以用于测定植物中的化学成分。
在本研究中,我们使用了UHPLC-MS/MS技术来测定了汉桃叶不同部位中三种机酸的含量。
通过这项研究,我们希望能够了解汉桃叶不同部位的化学成分,并为该植物的利用和开发提供参考。
汉桃(Carya cathayensis Sarg.)是一种重要的果树和药用植物,在中医药和食品工业中具有重要的应用价值。
其叶子作为传统中药材,在中医药中有着广泛的应用,被认为具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等药理作用。
机酸是汉桃叶中的重要成分之一,对其药理活性起着重要作用。
为了更好地了解汉桃叶的药用价值,有必要对其中的机酸进行深入的研究。
在本研究中,我们选择了汉桃叶的不同部位(如新梢叶、老叶等)作为研究对象,使用UHPLC-MS/MS技术对其中的三种机酸进行了分析。
我们选取了丁酸、橄榄酸和肉桂酸作为研究对象,这三种机酸在植物中具有重要的生物活性,并且在汉桃叶中含量较高。
我们采集了汉桃不同部位的叶片样品,并经过粉碎和提取得到样品提取物。
接下来,我们使用UHPLC-MS/MS技术对这些提取物进行分析,并利用内标法来定量分析其中的丁酸、橄榄酸和肉桂酸的含量。
在实验条件优化和方法验证后,我们成功地建立了UHPLC-MS/MS分析方法,并对汉桃叶不同部位中的机酸进行了定量分析。
通过我们的研究,我们发现汉桃叶不同部位中的丁酸、橄榄酸和肉桂酸的含量存在一定的差异。
新梢叶中的丁酸含量最高,老叶中的橄榄酸含量最高,而肉桂酸的含量在不同部位中并无明显规律。
这些结果为汉桃叶的合理开发利用提供了重要的参考依据。
可以根据不同部位的机酸含量特点,合理地提取和利用汉桃叶的有效成分,从而更好地发挥其药用价值。
本研究利用UHPLC-MS/MS技术成功测定了汉桃叶不同部位中三种机酸的含量,为汉桃叶的深入研究和开发利用提供了重要的数据支持。
高效液相色谱法同时测定功劳木药材中9种化学成分含量黄洋【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2022(31)4【摘要】目的建立同时测定功劳木药材中9种化学成分含量的高效液相色谱法。
方法色谱柱为Waters XBridge C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。
结果氯化木兰花碱、绿原酸、小檗胺、四氢药根碱、非洲防己碱、盐酸药根碱、粉防己碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱质量浓度分别在0.04~81.06μg/mL(r=0.9999)、0.06~60.05μg/mL(r=0.9976)、0.02~10.44μg/mL(r=0.9985)、0.008~10.44μg/mL(r=0.9998)、0.05~49.67μg/mL(r=0.9999)、0.12~248.03μg/mL(r=0.9999)、0.42~39.18μg/mL(r=0.9999)、0.34~353.08μg/mL(r=0.9997)、0.29~295.53μg/mL(r=0.9999)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3.0%(n=6);平均回收率分别为99.38%,99.17%,106.60%,99.58%,99.59%,99.72%,100.00%,99.58%,99.55%,RS D分别为0.28%,0.44%,1.86%,1.47%,0.68%,0.39%,0.87%,0.37%,0.32%(n=6)。
结论该方法操作简便,专属性和重复性均良好,结果准确可靠,可用于同时测定功劳木药材中9种化学成分的含量。
【总页数】4页(P79-82)【作者】黄洋【作者单位】广州医科大学药学院·广东省分子靶标与临床药理学重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R932;R284.1【相关文献】1.高效液相色谱法测定功劳木中3种生物碱含量2.高效液相色谱法同时测定广陈皮药材中的11种化学成分3.钩藤药材中异钩藤碱含量的超高效液相色谱和高效液相色谱法的测定4.高效液相色谱法测定功劳木中盐酸小檗碱的含量5.儿茶药材化学成分分析——反相高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定蒲公英提取物中10种活性物质
李健华;黄锦波
【期刊名称】《化学分析计量》
【年(卷),期】2022(31)10
【摘要】建立高效液相色谱法测定蒲公英提取物中10种活性物质含量。
样品经甲醇超声提取,用0.22μm有机滤膜过滤,以SCION-C色谱柱(250 mm×4.6
mm,0.45μm)为分离柱,流动相A为甲醇,流动相B为质量分数为0.2%的甲酸溶液,采取梯度淋洗方式使10种活性物质完全分离,采用二极管阵列检测器测定。
阿魏酸、槲皮素、山奈酚的质量浓度在1.0~100μg/mL范围内,去二甲愈创木果酸、甘草酸铵的质量浓度在2.5~100μg/mL范围内,红景天苷、绿原酸、α-红没药醇、甘草次酸的质量浓度在5.0~100μg/mL范围内,儿茶素的质量浓度在10.0~100μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均不小于0.995,检出限为
1.87~15.9μg/g。
样品加标回收率为86.2%~104.3%,测定结果的相对标准偏差为0.2%~5.2%(n=6)。
【总页数】5页(P49-53)
【作者】李健华;黄锦波
【作者单位】广东省江门生态环境监测站;吉姆斯(广州)实验技术有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7
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4.高效液相色谱法测定蒲公英提取物中咖啡酸含量
5.高效液相色谱法同时测定烟用甘草提取物中14种活性成分
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营养学报2008年第30卷第4期 417高效液相色谱测定构树叶中辅酶Q10含量李万仓,郑宏燕1,张惠娟,张 浩2,曹玉广(华中科技大学同济公共卫生学院流行病与卫生统计系,武汉 430030;1华中科技大学同济公共卫生学院环境与健康研究平台,武汉430030;2深圳市华士康科技有限公司,深圳518000)【摘 要】目的 建立一种测定构树叶辅酶Q10含量的方法。
方法 构树叶用75%乙醇提取,萃取,蒸馏,浓缩。
色谱柱为C18 250mm×4.6mm i.d 10μm,流动相为无水乙醇-甲醇(65:35),流速为1 ml/min,检测器波长275nm。
结果 辅酶Q10在4~64μg/ml(r=0.9997)范围内具有良好的线性关系。
平均加样回收率为98.66%,RSD为0.97%(n=6)。
构树叶中辅酶Q10的最低检测限为10 ng/ml(S/N =3)。
结论 该法快速,简便,准确。
适宜于构树叶辅酶Q10含量的检测。
[营养学报,200 8,(4):417-419 ]关键词:构树叶; 辅酶Q10(CoQ10); 高效液相色谱中图分类号:R151.2 文献标识码: A 文章编号:0512-7955(2008)04-0417-03DETERMINATION OF COENZYME Q10IN BROUSSONETIA PAPYRIFERA BY HIGHPERFORMANCE CHROMATOGRAPHYLI Wan-cang, ZHENG Hong-yan1, ZHANG Hui-juan, ZHANG Hao2, CAO Yu-guang(Department of Epidemiology and Health Statistics, Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030;1 Department of Research Platform of Environment and Health, Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, 430030;2Huashikang Technology Co. Ltd, Shenzhen 518000, China)【Abstract】Objective A simple and rapid high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of coenzyme Q l0 (CoQ10) in Broussonetia paryifera was developed. Method The sample of Broussonetia paryifera leares was extracted by 75% ethanol, extraction, distillation, concentration. Hypersil C18 (250mm× 4.6 mm i.d 10 µm) was selected as the analytical column, ethanol-methanol (65:35 by volume) as the mobile phase with flow-rate of 1 ml/min and UV 275 nm as the detection wavelength. Results The1inear range of the calibration curve of concentration vs. peak height was 4-64 µg/ ml with a coefficient of determination was 0.9997. The average recovery rate was 98.66% and the RSD was 0.97% (n=6). The detection limit of CoQ10 in Broussonetia paryifera was 10ng/ml (S/N=3). Conclusion This method was rapid, simple and suitable for the determination of CoQ l0 in Broussonetia paryifera.[ACTA NUTRIMENTA SINICA, 2008, 30(4):417-419]Key words:Broussonetia paryifera leaves; coenzyme Q10 (CoQ10); HPLC辅酶Q10(CoQ10)是一种脂溶性类维生素物质,广泛地存在于动植物细胞内。
CoQ10对缺血性心脏病,高血压症及风湿性充血性心力衰竭所引起的症状有效[1]。
CoQ10是细胞代谢和细胞呼吸的激活剂,有天然抗氧化活性,并增强人体非特异性免疫功能[2,3]。
它能有效地保持膜脂流动性,防止皮肤过早老化,同时提供细胞代谢和呼吸能量,从而激活肌肤细胞,促进皮肤再生[4]。
所以CoQ10已被广泛地应用于临床疾病治疗和化妆品生产。
但CoQ10原料来源困难,我们首次发现构树叶中含有CoQ10并建立了反相高效液相色谱测定法。
收稿日期2007-09-30作者简介李万仓(1980-),男,硕士,E-mail:wancangli@;通讯作者曹玉广,教授,E-mail:caoyg@418 Acta Nutrimenta Sinica,Aug.,2008, V ol.30 No.41 材 料 与 方 法1.1 仪器与试剂Waters 515 高效液相色谱仪;Waters紫外可见光波长检测器(2487);Empower工作站,柱温箱,手动进样阀;色谱柱(大连分析仪器厂);旋转蒸发仪(SHZ-Ⅲ型巩义市英峪仪器有限公司);超声清洗仪(上海);CoQ10标准品(sigma公司);构树叶(湖北);甲醇,色谱纯;无水乙醇,无水硫酸钠,氢氧化钠,石油醚,乙醚,焦性没食子酸,均为分析纯;硅胶(100~200目)。
1.2 CoQ10 制备1.2.1 前处理: 构树叶用75%乙醇提取得浸膏液。
1.2.2 醇碱皂化:称取5g构树提取液,加入10 g 的焦性没食子酸,搅拌均匀,再缓慢加入100 g/l 的氢氧化钠-乙醇溶液50ml搅拌,组织材料将变成黑色稠糊状,置90℃水浴加热回流30 min。
1.2.3 萃取:加入0.5倍体积的石油醚,多次萃取,至石油醚颜色变清亮。
萃取液用双蒸水洗至中性。
然后用无水硫酸钠除去水分(约6g)。
1.2.4 减压浓缩:以旋转蒸发器和循环水式真空泵联合,在35℃减压蒸馏除去石油醚至原体积5%。
1.2.5 层析分离:以石油醚、硅胶装柱,将澄清浓缩液体引入硅胶层析柱,先用石油醚洗脱,除去杂质,再用乙醚-石油醚(5:95)混合液洗脱,收集黄色带部分洗脱液,多次反复洗脱至无色。
1.2.6 浓缩结晶:将洗脱液再同法减压蒸馏除去石油醚至小体积,再蒸馏,去除溶剂,得黄色油状物。
加入无水乙醇,温热,使之完全溶解,趁热过滤,滤液置于-4℃冰箱中冷却结晶,得CoQ10产品。
1.3 对照品与样品溶液的制备精密称CoQ10对照品及构树叶提取物样品10 mg,置25ml容量瓶中,加无水乙醇适量,振摇溶解,并稀释至刻度,摇匀,作为对照品和构树叶提取物的储备液,置棕色容量瓶中,当天用完。
1.4 色谱条件依利特色谱柱,250 mm×4.6 mm不锈钢色谱柱,填料为十八烷基硅烷键合硅胶,直径为10 µm;甲醇:无水乙醇(35:65);流速l ml/min;检测波长275 nm,温度30℃,进样量20 µl。
2 结 果2.1 线性关系及灵敏度考察(图1)精密量取对照品储备液0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 ml分别置10 ml容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,进样分析。
以对照品峰面积(Y)对对照品浓度(X)用最小二乘法线性回归,得回归方程为:Y=1.27×107X+1.43×105, r=0.9997(n=5)。
CoQ10在4-64μg/ml范围内与积分面积呈良好的线性关系。
最低检测限为10 ng/ml(S/N =3)。
Fig. 1 Standard curve of CoQ102.2 精密度及其重复性试验(表1)Table 1 Repeatability test of CoQ10 from Broussonetiaparyifera leaves1 2 3 4 5 6 RSD%Weight 1.024 1.015 1.006 1.013 1.007 1.002Content0.0680.0650.066 0.069 0.0670.0652.45取CoQ10浓度为10 µg/ml对照品溶液及称取构树叶样品6份,按前述方法制备。
按色谱条件,重复测定6次,测得CoQ10峰面积分别为:33746.91,33584.18,33619.46,33889.03,32980.96,33402.71。
其相对标准偏差(relative standard deviation)为0.95%,表明本法的精密度和重复性都很好。
2.3 加样回收率试验(表2)精密称构树叶提取物样品1g,共6份,3份加入0.5 mg,3份加1.0 mg CoQ10对照品,按供试品溶液制备项操作,进样,计算。
结果表明,回收率良好。
Table 2 Recovery rate of CoQ10 from Broussonetiaparyifer a leavesWeight(g)ContentsampleAdded(mg)Determi-nationReco(%)Avg rate(%)RSD(%)1.026 0.0680.5020.55998.071.012 0.0670.5100.56297.401.006 0.0640.5160.57498.971.028 0.0681.009 1.07099.351.010 0.0671.013 1.07399.351.003 0.0661.005 1.05898.7998.66 0.97reco is denote recovery; avg rate is average recovery rate and unit is percent(%); content sample unit is (mg)2.4 稳定性试验(表3)称构树叶提取物粉末1.0 g,按供试品溶液制备方法制备,以液相色谱条件分别在1,3,6,9,12 h吸取20 µl进样,记录 CoQ10的峰面积,结营养学报2008年第30卷第4期 419果表明,供试品溶液在制备后12 h内稳定。