实训二细菌性疾病的实验室诊断
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细菌感染的实验室诊断(一)实验室诊断主要包括以检测致病菌及其抗原、产物或核酸为目的的细菌学诊断,以及检测患者血清中特异性抗体为目的的血清学诊断。
一、细菌学诊断(一)标本采集细菌感染性疾病的实验室检查结果主要取决于临床标本的质量、采集时间及方法、实验人员的技术熟练程度及经验。
临床医生应该知道何时和怎样采取标本,需作哪些实验室检查,以及如何解释结果。
为提高致病菌检出率,避免诊断错误或漏检,标本采集与送检过程应遵循下列原则:1.严格执行无菌操作,尽量避免患者正常菌群或外界环境中杂菌污染标本。
采取局部病变标本处,不可用消毒剂,必要时宜以无菌生理盐水冲洗,拭干后再取材。
从呼吸道、消化道、泌尿生殖道、伤口或体表分离可疑致病菌时,应与其特定部位的正常菌群及临床表现一并加以考虑,因为目前内源性感染呈不断上升趋势。
2.根据致病菌在患者不同病期的体内分布和排出部位,采集不同的标本(表7-1)。
例如流行性脑膜炎患者取脑脊液、血液或出血瘀斑;伤寒患者在病程第1~2周内取血液,第2~3周时可取粪便。
尽可能采集病变明显部位的材料。
3.应在疾病早期和使用抗菌药物之前采集标本,否则可能需停药数天后采集,或者在分离培养时加入药物拮抗剂。
4.标本必须新鲜,采集后尽快送检,尤其是检测抵抗力弱的细菌。
若不能立即送检,应将标本置于特殊的转运培养基中,低温保存,以减缓致病菌的死亡,阻止杂菌的过度生长。
送检过程中,除不耐寒冷的脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等要保温外,多数菌可冷藏送运。
(二)致病菌的检验程序主要有直接涂片染色镜检、分离培养、生化试验、血清学试验等,有的尚需作动物试验等。
细菌学快速诊断新技术主要有核酸杂交(nucleic acid hybridization)和聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)等。
敏感性、特异性和检测效率是影响临床诊断程序选择的重要因素。
1.直接涂片染色镜检直接涂片染色镜检法可在显微镜下直接观察致病菌的形态、大小、排列方式和染色特点。
《动物微生物与免疫技术》课程标准课程名称:动物微生物与免疫技术课程类别:专业基础课程课程学时:81(含半周集中实习)课程学分:4一、课程性质与任务《动物微生物与免疫技术》是畜牧、兽医、兽药生产与营销、动物防疫与检疫等专业的专业基础课程,在畜牧生产和疾病防控方面具有重要的地位和作用,可为学生学习专业课打下良好的基础。
学好本课程不仅能让学生掌握够用、实用的理论知识和多种贴近生产实践的技能,能够达到技能熟练、知识丰富、解决问题到位、具有一定的自主学习能力和创新能力,具备相应岗位的知识、能力和职业素质。
而且,由于我们将德育教育有机融入课堂、贯穿学习的全过程,使学生树立了“欲做事,先做人”的思想,建立了正确的人生观,明显提高了学生的专业素养和可持续发展能力。
本课程具有基础性强、技术性强、应用性强三大特点。
课程中训练的动物微生物检验技术和免疫学技术都是直接应用于生产的技能,是畜牧生产、疫病防控的重要技术支撑,是学生毕业生产实习与顶岗训练的重要准备和演练,在生产中广泛应用于兽医化验室、兽医技术服务、养殖场生物安全等生产环节;训练内容为职业技能鉴定中动物疫病防治员、动物检疫检验工、兽医化验员等工种的鉴定项目。
通过本课程的学习,要求学生能够完成以下工作任务:能利用所学理论知识和技能正确诊断细菌病、病毒病等传染性疾病;能正确消毒与灭菌;能利用生物制品进行免疫预防和治疗。
二、课程教学目标通过本课程的学习,要求学生能够掌握高等畜禽疫病防治人员、动物检疫检验人员、兽药生产与营销人员、技术推广人员所必需的动物微生物检验和免疫的基本知识与技能。
(一)知识目标1.掌握细菌病的实验室诊断方法。
2.掌握病毒病的实验室诊断方法。
3.掌握消毒与灭菌的方法,了解物理因素、化学因素和生物因素对微生物的影响及其在生产上的应用。
4.掌握特异性和非特异性免疫的基本原理。
5.掌握免疫诊断的原理、方法和临床应用。
6.掌握常用生物制品的种类、用途及使用注意事项。
第二部分 细菌性疾病的微生物学诊断细菌性疾病的正确诊断及合理治疗(如通过细菌的药敏试验以选择敏感药物),常需进行微生物学检查。
微生物学检查包括细菌及其抗原的检测和抗体检测两方面。
检测细菌或其抗原是诊断细菌性疾病的重要依据,尤其是在正常情况下本应无菌的标本中检出病原菌时,则更有诊断意义。
细菌种类很多,其生物学性状各异,要鉴定某种细菌常需采用多种方法,这些方法主要有显微镜直接检查、分离培养、生化反应试验、抗原分析及动物实验等。
细菌各论的实验,就是要观察和掌握常见细菌的生物学特性及学会从临床标本中分离和鉴定常见细菌。
检测抗体也常可作为诊断细菌性疾病的重要辅助手段。
机体感染病原菌后.经一定时间产生抗体,抗体量随病程而增高,因此,用已知抗原测定病人体液中有无相应抗体及抗体量的动态变化可辅助诊断疾病,此对于病程较长,抗原性较强的细菌感染尤为重要,如诊断伤寒和副伤寒的肥达氏试验就是常用的诊断方法。
细菌培养标本的一般要求:各种临床标本作细菌学分离鉴定时,收集、送验标本都有其特殊要求,但一般都要注意如下几点。
1.送验标本必须用细菌检查室特备的无菌试管或其他无菌容器,标本采集后应尽速送检(培养厌氧菌常需采用特殊的厌氧收集瓶)。
2.采集标本时应严格执行无菌操作,防止杂菌污染,送检途中严防容器翻倒或破裂,以致标本溢出,导致污染及传播。
3.细菌培养标本不得任意加入防腐、抗菌药物或其他药品。
血液、脑脊液等标本,应在病人被使用抗菌药物治疗前采集,如已使用,在送检时应注明已使用过的抗菌药物名称,以便在培养时作适当处理。
4.对特殊细菌的检查应加注明,如厌氧菌、结核杆菌、脑膜炎球菌、真菌等。
须做药物敏感试验者,应注明抗菌药物的名称。
实验九 血液、骨髓的细菌学检查正常人的血流和骨髓内是无菌的。
当细菌侵入血流或骨髓生长繁殖,引起寒战、高热等症状时常可检出致病菌。
常见的致病菌为金黄色葡萄菌和大肠杆菌,其他尚有绿脓杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌、链球菌、沙门菌等。
《临床医学概论》课程标准一、课程基本信息(一)课程性质:必修课(二)课程类型:(理论+实践)课(B类)(三)课程类别:专业(技能)课程(四)开设学期:第二学年第三学期二、课程性质与任务《临床医学概论》是高等职业教育非临床医学专业的一门重要的专业核心技能课程,本课程根据高职非临床医学专业人才培养目标,依据岗位需求设置。
临床医学概论是建立在基础医学、临床医学和人文社会科学基础上,关于认识临床常见疾病的表现和治疗的课程。
其任务是以人的健康为中心,根据病人身心健康与社会家庭文化需求提供整体治疗,以切合临床的思维方式和工作方法,为服务对象提供减轻痛苦、促进康复、预防疾病、保持健康的服务。
教师在系统性教学和实践训练中注意培养学生的临床思维能力、职业道德素质以及人文关怀精神,使学生的各项能力达到各项要求。
本课程的先修课程包括医学基础课程等,同步课程包括康复医学、社区护理、急危重症护理学等,后续课程顶岗实习。
三、课程教学目标(一)知识目标1.掌握临床医学各系统常见病和多发病的临床表现和治疗的主要内容2.熟悉临床医学各系统常见病和多发病的诊断要点3.了解临床医学各系统常见病和多发病的辅助检查(二)能力目标1.学会临床常见疾病的诊疗方法,能初步运用所学知识进行观察,发现和解决问题2.学会临床医学常用技术,能进行临床常见病患者的专科操作3.能应急处理和配合抢救急重症患者4.能使用临床医学常用器械、仪器和设备5.能与患者及家属进行有效沟通,开展心理指导和健康教育;能进行医护团队内的专业交流(三)素质目标1.具有医疗人员必备的职业道德和伦理观念,自觉尊重服务对象的人格,保护其隐私2.具有良好的法律意识和医疗安全意识,自觉遵守有关医疗卫生的法律法规,依法实施护理任务3.具有医疗安全、医患交流、团队合作的职业意识及认真负责的职业态度4.具有健康的身体和心理,能给予服务对象以人文关怀四、参考学时108学时。
五、课程学分4学分。
实验鸡白痢的诊断实验一、实验目的会用病理剖检和血清学方法诊断鸡白痢。
二、实验内容与方法1、鸡白痢由于感染对象不同,病、死鸡剖检可见不同的病理剖检变化。
胆囊扩张,充满胆汁。
卵黄吸收不良,内容物有轻微的变化。
雏鸡白痢病死鸡呈败血症经过。
鸡只瘦小,羽毛污秽,肛门周围污染粪便、脱水、眼睛下陷及脚趾干枯,卵黄吸收不全,卵黄囊的内容物变成淡黄色并呈奶油样或干酪样黏稠物,心包增厚,心脏上常可见灰白色坏死小点或小结节,肝肿大,并可见点状出血或灰白色针尖状的灶性坏死点,胆囊扩张充满胆汁,脾肿大,质地脆弱,肺可见坏死或灰白色结节,肾充血或贫血,输尿管显著膨大。
有时在肾小管中有尿酸盐沉积,肠道呈卡他性炎症,特别是盲肠常可出现干干酷样栓子。
青年鸡白痢突出的病理变化是肝肿至正常的数倍,整个腹腔常被肝覆盖,肝的质度极脆,一触即破,腹腔充盈血水或血块,脾肿大、心包扩张,心包膜呈黄色不透明,心肌可见数量不一的苋色坏死灶,严重的心脏变形、变圆,整个心脏几乎被坏死组织代替。
肠道呈卡它性炎症,肌胃常见坏死。
成年鸡白痢主要病理变化在生殖系统,表现卵巢与卵泡变形、变色及变性,卵巢未发育或发育不全,输卵管细小,卵变形如呈梨形、三角形、不规则等等形状,卵变色如呈灰色、黄灰色、黄绿色及灰黑色等不正常色泽,卵泡或卵黄囊内的内容物变性,有的稀薄如水,有的呈米汤样,有的较黏稠成油脂样或干酪状。
有病理变化的卵泡或卵黄囊常可从卵巢上脱落下来,成为干硬的结块阻塞输卵管,有的卵破裂造呈卵黄性腹膜炎,肠道呈卡他性炎症。
2、鸡白痢全血平板凝集实验将鸡白痢全血平板凝集抗原充分振荡均匀,用滴管吸取抗原1滴(约0.05ml),垂直滴在玻板上,随即用针头刺破被检鸡的翅静脉,用铂耳环蘸取血液一满环(约0.05ml)放于抗原滴中,用铂耳环搅拌均匀,静置(20℃以上室温)判定结果。
(1)抗原与血液混合后,在2分钟内出现明显的颗粒凝集或块状凝集为阳性反应。
(2)在2分钟内不出现凝集或仅呈现均匀一致的微细颗粒或在边缘处由于临干前形成细絮状物等,均断为阴性。
第二部分 细菌性疾病的微生物学诊断细菌性疾病的正确诊断及合理治疗(如通过细菌的药敏试验以选择敏感药物),常需进行微生物学检查。
微生物学检查包括细菌及其抗原的检测和抗体检测两方面。
检测细菌或其抗原是诊断细菌性疾病的重要依据,尤其是在正常情况下本应无菌的标本中检出病原菌时,则更有诊断意义。
细菌种类很多,其生物学性状各异,要鉴定某种细菌常需采用多种方法,这些方法主要有显微镜直接检查、分离培养、生化反应试验、抗原分析及动物实验等。
细菌各论的实验,就是要观察和掌握常见细菌的生物学特性及学会从临床标本中分离和鉴定常见细菌。
检测抗体也常可作为诊断细菌性疾病的重要辅助手段。
机体感染病原菌后.经一定时间产生抗体,抗体量随病程而增高,因此,用已知抗原测定病人体液中有无相应抗体及抗体量的动态变化可辅助诊断疾病,此对于病程较长,抗原性较强的细菌感染尤为重要,如诊断伤寒和副伤寒的肥达氏试验就是常用的诊断方法。
细菌培养标本的一般要求:各种临床标本作细菌学分离鉴定时,收集、送验标本都有其特殊要求,但一般都要注意如下几点。
1.送验标本必须用细菌检查室特备的无菌试管或其他无菌容器,标本采集后应尽速送检(培养厌氧菌常需采用特殊的厌氧收集瓶)。
2.采集标本时应严格执行无菌操作,防止杂菌污染,送检途中严防容器翻倒或破裂,以致标本溢出,导致污染及传播。
3.细菌培养标本不得任意加入防腐、抗菌药物或其他药品。
血液、脑脊液等标本,应在病人被使用抗菌药物治疗前采集,如已使用,在送检时应注明已使用过的抗菌药物名称,以便在培养时作适当处理。
4.对特殊细菌的检查应加注明,如厌氧菌、结核杆菌、脑膜炎球菌、真菌等。
须做药物敏感试验者,应注明抗菌药物的名称。
实验九 血液、骨髓的细菌学检查正常人的血流和骨髓内是无菌的。
当细菌侵入血流或骨髓生长繁殖,引起寒战、高热等症状时常可检出致病菌。
常见的致病菌为金黄色葡萄菌和大肠杆菌,其他尚有绿脓杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌、链球菌、沙门菌等。