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电镜观察骨髓有核细胞对非霍奇金淋巴瘤的诊断价值

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电镜观察骨髓有核细胞对非霍奇金淋巴瘤的诊断价值茹永新1　赵轼轩1　刘津华1 [摘要]　目的:总结透射电子显微镜观察骨髓有核细胞形态结构对非霍奇金淋巴瘤(N HL)诊断和鉴别诊断的作用。

方法:电镜观察骨髓有核细胞形态结构,根据中幼稚细胞种类和分化程度对患者进行诊断,回顾分析48例N HL患者的电镜和临床诊断符合率。

结果:48例患者中,电镜发现41例患者骨髓液中存在幼稚淋巴细胞(85.4%),21例电镜诊断N HL,9例提示急性淋巴细胞白血病(ALL),2例提示毛细胞白血病(HCL),2例提示慢性淋巴细胞白血病(CLL),1例浆细胞白血病(PL),6例淋系增殖疾病(L PD)未进行分类。

7例患者电镜观察未发现或明确幼稚淋巴细胞,1例提示急性髓系白血病(AML),2例描述发现异常细胞,但未定性,2例提示病态造血;2例无提示。

48例N HL患者中,发现病态造血28例。

结论:电子显微镜观察骨髓有核细胞对N HL、尤其是原发部位不明的N HL具有重要诊断价值。

其次,电镜能够评价N HL诱导的骨髓病理反应。

[关键词]　电子显微镜;淋巴瘤;诊断与鉴别诊断 [中图分类号]　R733.1 [文献标志码]　A [文章编号]　100422806(2007)0120022203The role of electron microscopy in diagnosis of non2H odgkin lymphoma by observation of nucleated cell in bone marrow aspirateR U Yong x i n　Z H A O S hi x uan　L I U J i nhua(Instit ute of Hematology&Blood Diseases Ho spital,Chinese Academy of Medical Sciences& Peking U nion Medical College,Tianjin,300020,China) Abstract　Objective:To investigate the value of transmission electron microscopy(TEM)in non2Hodgkin lymphoma(N HL)diagnosis and differentiation by observation of nucleated cell in bone marrow aspirate(BMA). Method:Observing nucleated cells in BMA to make diagnosis according to cell classification and differentiation,an2 alyzing the diagnostic coincidence of TEM in48patients with N HL.R esult:Immature lymphocytes were found in 41out of48cases,21/41were diagnosed as N HL,9/41as acute lymphoblastic leukemia,2/41as hairy cell leuke2 mia,2/41as chronic lymphocytic leukemia,1/41as Plasma cell leukemia,6as lymphocyte proliferation disease without f urther classifications by TEM.In the7cases that had not found immature lymphocyte in BMA,1case was suggested as acute myeloid leukemia,2cases were demonstrated with abnormal cells but not unqualified,2 cases were with no suggestion,and2cases were indicated dyshaematopoiesis.On other hand,28out of48cases were illustrated dyshematopoiesis features by TEM.Conclusion:Investigating nucleated cells in BMA with TEM was significant in diagnosis of N HL,especially for the unknown origin N HL.Meanwhile,TEM was usef ul in e2 valuation of dyshaematopoiesis induced by N HL.K ey w ords　Electron microscopy;Non2Hodgkin lymphoma;Diagnosis 非霍奇金淋巴瘤(N HL)原发部位不明时,临床诊断常存在一定困难。

由于N HL发生骨髓浸润(bone marrow involvement,BM I)的比例很高〔1〕,部分N HL患者外周血含幼稚淋巴细胞,使得骨髓和外周血涂片检查在N HL诊断中受到重视〔2〕。

电镜观察骨髓有核细胞诊断N HL在国内虽有报道,但临床总结病例不多〔3〕,本文回顾性分析48例N HL患者的骨髓有核细胞电镜观察情况,报告如下。

1　资料与方法1.1　一般资料48例观察病例为本院初诊患者,男37例,女1中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院(天津,300020)通讯作者:茹永新,E2mail:ruyongxin@ 11例,年龄在172岁之间,主诉发热27例,乏力19例,无诱因出血8例,部分患者因贫血或血小板减少来本院就诊。

所有患者进行周围血常规、骨髓形态、骨髓病理、细胞流式仪、透射电镜检查,部分经淋巴结或脾脏病理活检,全部临床确诊为N HL。

1.2　电镜标本制备和观察方法根据文献〔4〕,骨髓穿刺液35ml,肝素或枸橼酸钠抗凝,淋巴细胞分离液分离有核细胞,部分细胞用2.5%戊二醛固定,用于观察细胞超微结构;其余部分用于电镜M PO组化染色标本制备,然后用1%锇酸后固定,常规脱水、浸透、包埋和超薄切片,前者铀、铅双染,组化切片不染色。

电镜观察骨髓有核细胞超微结构和M PO反应,根据分化程度低、形态不规则、核质比高、核不・22・Journal of Clinical Hematology,J an2007,Vol20No1转载规则、核仁显著、染色质多,以及线粒体肿胀、嵴断裂等特点识辨幼稚淋巴细胞〔5〕,计数幼稚淋巴细胞占有核细胞的百分比。

2　结果48例患者中,电镜观察发现41例骨髓含典型幼稚淋巴细胞(85%),其中21例电镜明确诊断为N HL;9例提示急性淋巴细胞白血病(ALL);2例提示毛细胞白血病(HCL);2例提示慢性淋巴细胞白血病(CLL);1例提示浆细胞白血病(PL);6例提示淋系增殖性疾病(L PD),未进一步分型。

其它7患者电镜未发现典型幼稚淋巴细胞(15%),1例提示急性髓性白血病(AML);2例发现异常细胞,但难以定性;2例提示粒/红病态增生;2例无诊断提示。

48例患者骨髓幼稚淋巴细胞占有核细胞百分比不同,电镜下41例患者幼稚淋巴细胞大于5%,7例患者的异常细胞少或未发现(表1)。

其次电镜发现48例患者中,28例存在不同程度病态造血,单纯粒系病态增生12例,红系病态增生10例,同时存在两系病理形态6例。

表1　48例患者骨髓异常淋巴细胞数目范围和电镜诊断例幼稚淋巴/%例数N HL ALL L PD HCL CLL PL N2L PD 0577620882150861151801043218110015353121合计4821962217 N2L PD,电镜不考虑或未提示淋系增殖疾病的7例患者。

3　讨论N HL原发部位广泛、涉及多种组织,临床表现不一〔6〕。

原发部位明确的患者经病理活检能直接诊断;原发部位不明的患者,早期诊断常存在困难。

国外报道初诊N HL患者合并骨髓浸润(BM I)的发生率在16%75%之间〔7〕,另外6%50%的N HL患者外周血存在幼稚淋巴细胞〔8〕。

所以骨髓和外周血细胞检查是常规检查手段。

骨髓活检结合免疫组化能根据浸润病灶确诊N HL及BM I,但抗体敏感性和活检组织是否含病灶有时干扰诊断;流式细胞分析异常淋巴细胞免疫表型能准确进行N HL分型诊断,但细胞数量少和/或髓系反应性增生常影响诊断。

电镜观察骨髓有核细胞在一定程度可以弥补这些检查的不足。

本院就诊的大部分N HL患者的临床表现特异性不强,涉及病种广泛。

N HL患者骨髓液不仅可能包括幼稚淋巴细胞,还包括正常和反应性淋巴细胞,光镜难以准确分辨这些细胞。

电镜可以清楚地观察幼稚淋巴细胞的体积、形状、核质比、细胞核和核仁,以及线粒体等细胞器的分化程度,从而区别幼稚淋巴、反应性淋巴和正常淋巴。

本组电镜检查的48例患者中,41例发现典型幼稚淋巴细胞(85%),其中21例明确诊断N HL,幼稚淋巴比例都在5%以上;7例未发现典型幼稚淋巴细胞(15%),其中2例由于异常细胞数量少未进行诊断。

说明通过电镜直接观察幼稚淋巴细胞首先能明确恶性淋系增生疾病,其次能对部分N HL直接诊断。

电镜发现幼稚淋巴细胞时,常常需要对N HL 和其它淋系增殖疾病进行诊断鉴别。

幼稚淋巴细胞比例很高时,容易诊断为ALL,本组9例N HL 电镜提示ALL,1例异常淋巴细胞在20%50%之间,8例在50%以上。

区别要点在于ALL细胞一般大小均匀,分化程度低,多为原始淋巴细胞;而多数N HL患者骨髓中常含部分正常淋巴细胞,加之N HL细胞分化不均,细胞形态与核轮廓差异显著,核质比差别大,有时能够发现特大淋巴细胞。

如果N HL患者的幼稚淋巴细胞比例高,且分化好,形态一致,需要与CLL或HCL鉴别,本组分别有2例N HL诊断为CLL和HCL。

CLL细胞外形与核轮廓非常规则,大小均匀,核仁小于N HL,很少有异常大细胞。

毛细胞脾淋巴瘤容易诊断为HCL,要点在于N HL细胞表面的突起或绒毛很细,多有弯曲,部分呈环状,光滑,分枝少;而HCL细胞表面绒毛粗而直,部分患者的细胞呈树枝样〔9〕。

本组1例N HL细胞因r ER高度发达,在细胞周边排列而诊断PL。

笔者发现两者细胞核形状仍然存在差别,浆细胞或骨髓瘤细胞常有典型的车轮样核;N HL 细胞的核折叠和切迹更加明显,这部分细胞应该属于浆细胞样幼稚淋巴细胞。

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细胞核形态学在诊断病理中意义

细胞核形态学在诊断病理中意义

11
编织状：平滑肌瘤
12
漩涡状：脑膜瘤
13
巢状：乳腺癌
14
筛状：乳腺癌
15
小梁状：类癌
16
栅栏状：间质瘤
17
菊形团: 室管膜瘤
18
第四脑室菊形团形成的胶质神经元肿瘤
19
车辐状：纤维组织细胞瘤
20
成角状：胆管癌
21核的形状
细胞核形状可分为单形、多形两类，单形指形态一致，多形则指核形的不一致。在英语里关 于细胞核的多形性有2个词：polymorphism和pleomorphism，其含义是相同，但中文里多形 性包含了两个意思：一是细胞核的大小不等，二是细胞核的形态不一。无论是细胞核的大小 不等还是形状不一，一般认为都是不典型增生的表现。但在内分泌腺的良性肿瘤中（如甲状 腺滤泡型肿瘤、肾上腺皮质腺瘤）常见到细胞核大小不等。细胞核的形态不一，往往是指出 现不圆或不呈卵圆形的核外形，这有时是由于胞浆内容物“挤压”细胞核所致，如脂肪母细 胞胞浆内的脂滴“压”在核上导致凹陷，以及印戒细胞胞浆中的黏液“压”在细胞核上出现 “印戒”状。
52
5.1核深染
指异染色质成份的增多，这是由于核内染色质合成增加所致，DNA功能并不活跃。此时应密 切观察有无核分裂象的增多，如核深染相伴有分裂象增多，才是细胞生长活跃的指征，而仅 见核深染则不一定是恶性肿瘤的指征。子宫内膜月经期时的小颗粒细胞、骨髓造血组织中的 有核红细胞、脂肪母细胞等在HE切片上表现为深染的核，此时不能将核膜与异染色质分开， 也是无核膜厚薄之分了。
• 层数：通常每个细胞只有一个核，层数增加是由于细胞核位置改变所致，并不是一个细胞内 出现多个细胞核的缘故。
• 极向：通常细胞核的长轴与细胞浆的长轴一致，具有特有的排列方向。 • 排列：上皮组织的排列容易辨认，间叶组织由于细胞膜界限不清，故不易看到整个细胞的排
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临床检验技师血液检验考试复习资料：急性髓性白血病分型1.急性粒细胞白血病未分化型（M1）：骨髓原始细胞（I型卡H型）占C的比例大于／等于90％，原始细胞过氧化酶或苏丹黑染色阳性率大于／等于3％，早幼粒及以下阶段粒细胞、单核细胞小于10％。

2.急性粒细胞白血病部分分化型（M2）：骨髓ＮＥＣ中，原始细胞（Ⅰ型＋Ⅱ型）30－89％，早幼粒及以下阶段粒细胞大于10％，单核细胞小于20％。

3.急性早幼粒细胞白血病（M3）：含大量的异常早幼粒细胞。

异常早幼粒细胞的特征是核常为肾形或双叶，胞浆完全被密集甚至融合的粗大颗粒占据，常掩盖胞核，用Romanowsky染色，这些颗粒为亮粉红色、红色或紫色。

有些异常早幼粒细胞的胞浆充满灰尘详细小颗粒。

典型的细胞含束状的ａｕｅｒ小体，散乱分布在胞浆。

变异型急性早幼粒细胞白血病（M3ｖ）：其特点是周围血几乎每一早幼粒细胞核均为双叶、多叶或肾形，大多数细胞无或仅含少许嗜天青颗粒，但至少部分细胞具典型M3的胞浆特征。

骨髓细胞形态更接近典型M3的特征。

与典型M3不同，M3V的白细胞计数常明显升高（可达200 X 109／L），而典型M3的白细胞计数常略高于正常或低于正常。

与典型M3一样，M3V易出现DIC并发症，染色体多有t（15：17）异常。

4.急性粒单核细胞白血病（M4）：符合下列条件之一：①骨髓NEC中，原始细胞大于／等于30％，骨髓原粒及原粒以下阶段的粒细胞大于／等于30％至小于80％；不同分化程度的单核细胞大于20％；周围血单核细胞大于／等于5 X 109／L。

②骨髓检查同上，血斗核细胞系小于SX10’／L，但血或尿溶菌酶高于正常值3倍以L，或单核细胞酯酶染色证实单核细胞系大于20％。

③骨髓细胞形态检查符合MZ，但有下列条件之一：a。

血单核细胞大于／等于sxlo’／L。

b。

血或尿溶菌酶大于正常值3倍。

b。

单核细胞酯酶染色证实骨髓NEC中，单核细胞大于20％。

伴嗜酸性粒细胞增多的粒单核细胞白血病（M4EO）：符合上述M4的条件，但骨髓异常嗜酸性粒细胞增多，常大于／等于5％（NEC）。

骨髓细胞学检查的临床意义

骨髓细胞学检查的临床意义

骨髓细胞学检查的临床意义
1.诊断造血系统疾病最有价值
①对各型白血病、恶性组织细胞病、(环球医学网提供骨髓细胞学
检查的临床意义知识点辅导)巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血、多发性
骨髓瘤、原发性血小板减少性紫癜、典型的缺铁性贫血等具有决定性
诊断意义。

②对增生性贫血(如溶血性贫血)、粒细胞缺乏症、骨髓增生异常
综合征(MDS)、骨髓增殖性疾病、类白血病反应等，具有辅助诊断价值。

2.诊断其他非造血系统疾病
骨髓细胞学检查对某些感染如疟疾、(环球医学网提供骨髓细胞学
检查的临床意义知识点辅导)黑热病、感染性心内膜炎、伤寒，某些代
谢疾病如戈谢(Gaucher)病、尼曼一匹克(Niemann-Pick)病，某些骨髓
转移癌(瘤)等，因在骨髓涂片中能查到相应的病原体或特殊细胞而可
以确诊。

3.鉴别诊断的应用
凡临床上遇到原因不明的发热、恶病质，原因不明的肝、脾、淋
巴结肿大，骨痛、关节痛等，周围血出现幼稚细胞、可疑细胞以及血
细胞的单项或多项原因不明的减少、增多时，均可做骨髓细胞学检查，有助于鉴别是否由造血系统疾病引起。

骨髓细胞病理学检查及诊断

骨髓细胞病理学检查及诊断

骨髓细胞病理学检查及诊断全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：骨髓细胞病理学检查及诊断是一种通过研究骨髓组织中的细胞形态学和功能特征来诊断和分析疾病的方法。

骨髓是人体重要的造血器官，其中含有各种类型的细胞，包括红细胞、白细胞和血小板前体细胞。

通过对骨髓细胞的形态、数量和功能进行检查，可以帮助医生确定患者是否患有骨髓疾病，从而制定合适的治疗方案。

骨髓细胞病理学检查包括骨髓细胞形态学检查、骨髓细胞免疫组织化学检查和分子遗传学检查。

骨髓细胞形态学检查是最常用的检查方法，通过显微镜观察骨髓细胞的形态、大小、核仁、染色质密度等特征，可以帮助医生确定病变的种类和程度。

骨髓细胞免疫组织化学检查则是通过使用特定抗体对骨髓细胞进行染色和分析，帮助鉴定细胞的来源和类型。

而分子遗传学检查则是通过对骨髓细胞中的遗传物质进行分析，寻找异常基因突变和染色体异常，帮助诊断疾病和评估预后。

除了在疾病诊断中的应用，骨髓细胞病理学检查还在预后评估和治疗监测中发挥作用。

通过定期检查骨髓细胞，可以跟踪疾病的进展和治疗效果，及时调整治疗方案，提高患者的生存率和生存质量。

对于骨髓疾病患者来说，及时接受骨髓细胞病理学检查是非常重要的。

第二篇示例：骨髓细胞病理学检查及诊断是一种非常重要的临床检验检查手段，通过检查骨髓细胞的形态结构和数量，可以帮助医生诊断各种疾病，包括感染性疾病、免疫性疾病、风湿性疾病、肿瘤等。

骨髓液是一种重要的造血器官，其中细胞成分非常复杂，包括造血干细胞、成熟的红细胞、白细胞和血小板前体细胞等。

骨髓细胞病理学检查是通过显微镜观察骨髓细胞的形态结构，发现其异常改变，从而对疾病进行诊断和评估。

骨髓细胞病理学检查主要包括骨髓液细胞形态学检查和骨髓组织学检查两种方法。

骨髓液细胞形态学检查是通过骨髓穿刺或抽吸获取骨髓液标本，然后在显微镜下观察各种细胞的形态结构，包括红细胞、白细胞、血小板和骨髓干细胞等。

通过观察这些细胞的数量、形态和颜色等特征，可以对疾病进行初步的诊断和鉴别。