③基因转移工具(“分子运输车”) ——运载体
1、限制酶
特点:一种限制酶只能识别DNA的一种 核苷酸序列,并在特定的位点切割DNA.
限制性内切酶
限制 酶
切割DNA分子两个脱 氧核苷酸之间的磷酸 二酯键。
把两种来源不同 的DNA用同一种限制 酶来切割,会产生相 同的黏性末端,两者 的黏性末端可以黏合 起来,成为重组的 DNA分子。
③将切下的目的基因片段插 入质粒的__切____口__处,再加入 适量__D___N__A___连___接__,形成了一 个重组酶DNA分子(重组质粒)
目的基因的表达和检测
将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落 中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的 菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。
G AA TT C C TT AA G
DNA连接酶连接 的是DNA骨架上 的缺口,不是碱基 间的氢键
3、运载体
作用:将目的基因导入受体细胞 常用运载体:①质粒、②动植物病毒、③噬菌体
运载体要满足的条件
①具有一到多个限制酶的酶切位点。 ②能进入受体细胞并在受体细胞内稳定存在,并能 复制、表达; ③具有标记基因,便于目的基因的筛选.
C 2.下列关于基因工程的叙述中,正确的是:
A.限制酶只用于提取目的基因 B.细菌体内的环状DNA均可作运载体 C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接
B D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成.
3.以下说法正确的是: A.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 D.只要受体细胞中含有目的基因,目的基因就一定
目的基因的检测与鉴定
青霉素 抗性基因