EDTA脱钙液

介绍一种改良的Neutral EDTA脱钙液
马恒辉;章如松;周航波;周晓军
【期刊名称】《诊断病理学杂志》
【年(卷),期】2005(12)5
【总页数】2页(P391-391)
【关键词】Neutral脱钙液;改良;免疫组化
【作者】马恒辉;章如松;周航波;周晓军
【作者单位】南京军区南京总医院病理科
【正文语种】中文
【中图分类】R361.2
【相关文献】
1.一种改良脱钙液的配置与脱钙方法 [J], 李晓未;朱雪明
2.改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察 [J], 翁丹枫;张声;李国平;王鹏程;黎三艳
3.介绍一种改良脱钙液在骨组织制片中的应用 [J], 陈世梁;卢志承;董玉英
4.混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析 [J], 吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣
5.介绍一种改良的Plank·Rycho脱钙液 [J], 胥维勇;杨红;李科;杨群
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电解脱钙液(甲酸法)货号：G2672规格：500ml保存：室温避光，12个月。

产品说明：在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。

这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。

对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。

然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。

用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。

在有机酸中，甲酸、乙酸比较适合于骨髓组织脱钙。

电解脱钙液的优点：①脱钙速度快；②适用于大多数组织的脱钙。

其缺点：①对组织有一定的损害；②脱钙后需要硫酸钠溶液进行碱处理。

操作步骤(仅供参考)：1、骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。

2、组织固定后，用PBS清洗3次。

3、组织用蒸馏水洗清洗3次。

4、安装电解装置：取铂金丝一根，将标本用铂金丝一端缠绕数圈，置于容器底部一侧，铂金丝另一端连接电源正极。

在容器的另一侧将一只钢片或炭精棒的下端插入容器内，上段与电源负极相连。

5、加入电解脱钙液，置于恒温水浴箱中。

一般采用直流电源6V，如有整流器可调至8～10V。

6、用流水冲洗数小时。

7、入5%硫酸钠溶液进行碱处理。

8、常规脱水、包埋。

注意事项：1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10min～3h即可。

第1页，共2页2、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。

脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。

3、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。

4、每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录：脱钙终点的测定(物理法)：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。

物理检测法会对组织结构有一定的损害，尽量避免用力过大或反复检测。

混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣【摘要】目的比较不同脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响.方法选取16例大鼠胫骨标本,运用两种常用的脱钙液(混合脱钙液和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响.结果两种脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别.结论混合脱钙液时间最短,但切片和染色效果最差;EDTA脱钙液对骨组织损伤小,HE染色效果最好,但用时较长.【期刊名称】《医学信息》【年(卷),期】2017(030)026【总页数】2页(P180-181)【关键词】混合脱钙液;EDTA脱钙液;HE染色【作者】吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣【作者单位】第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;中国人民解放军天津疗养院,天津 300381;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032【正文语种】中文【中图分类】R361骨组织是一种坚硬的结缔组织，由骨细胞和骨基质组成。

骨基质内含大量无机盐，质地坚硬，不能直接进行石蜡或冷冻切片，因此在制作病理切片过程中，常常需要经过脱钙处理，才能进行切染色[1]。

试验中脱钙过度或不足会影响染色效果，严重影响结果的判读，因此，脱钙时间和脱钙液的选择十分重要。

为了更好地了解脱钙技术对骨组织切片HE染色结果的影响，本文重点对比SD大鼠胫骨上段骨组织通过两种不同脱钙液的脱钙以及HE染色效果进行对比，现报告如下。

标本为第四军医大学西京医院骨科动物实验中心提供的大鼠8只。

取双侧胫骨上端16例标本，长约0.8 cm，用纱布包好随机标记为A组和B组，在10%中性福尔马林固定3 d，投入脱钙液中，A组为EDTA脱钙液，B组为混合脱钙液。

EDTA脱钙液产品简介：在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。

这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。

对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。

然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。

用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及电解脱钙。

EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类，经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。

但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。

Jimei EDTA脱钙液主要由EDTA、磷酸盐等组成，pH值为7.2。

其优点是：①经EDTA 脱钙的组织染色结果好；②对组织的结构损害小。

其缺点是：①脱钙速度很慢，不适合常规标本脱钙使用；②脱钙后组织会稍微变硬；③不宜用化学方法确定脱钙终点。

产品组成：自备材料：1、PBS2、蒸馏水3、加热装置或微波炉操作步骤（仅供参考）1、骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。

2、组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。

3、组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。

4、组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中，脱钙10~30天或更长时间。

如果想加快脱钙速度，可以置于37。

C进行脱钙。

如果必要，更换新的EDTA脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2周~3个月即可，每周更换一次直至终点。

亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3~5min，中间间隔3~5min。

5、用蒸馏水冲洗数次。

6、常规脱水、包埋。

注意事项：1、厚度5 mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可，大多数在14~60天即可。

2、适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37~40。

C，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60。

C。

3、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。

方法选择12例骨组织，随机分为3组。

A组用14%硝酸脱钙液进行处理，B、C组分别用EDTA 脱钙液、PLANK脱钙液进行处理，同时对CD3、CD68、Ki—67 和TTF—1染色。

结果室温条件下，硝酸脱钙液的脱钙时间最短，但对组织损伤最大。

PLANK 脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好，组织结构完整，形态清晰，免疫组化染色较好。

结论室温条件下，三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。

但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长，PLANK 脱钙液脱钙均匀，速度快，更适合用于临床病理检查。

硝酸脱钙液脱钙最快，但是免疫组化染色效果较差。

标签：脱钙液；骨组织；免疫组化染色骨组织内含有大量无机钙盐，结缔组织坚硬，难以直接制片[1]。

如果强制切片，在蓝色钙盐背景下，往往无法看清细胞结构，所以需要选择一种能保持骨组织形态结构和染色后有利于保持细胞结构清晰度和对比度的脱钙液。

本文研究14%（体积分数）硝酸脱钙液、EDTA脱钙液、PLANK脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响，以期寻找一种效果比较理想的脱钙液，对病理诊断工作提供帮助。

1 材料与方法1.1 标本选择12例骨组织标本均来源于我院，切成1 cm×1 cm×0.3 cm的骨块，在福尔马林中性液内固定24 h，用于脱钙及免疫组化染色实验。

1.2 三种脱钙液①脱钙液Ⅰ：14%（体积分数）硝酸脱钙液，配制方法为14 mL浓硝酸加入86 mL蒸馏水；②脱钙液Ⅱ：EDTA脱钙液，配制方法为EDTA10 g，蒸馏水100 mL，加NaOH充分搅拌溶解，在用10 mol/L的HCl调pH为8.0，最后加入4%甲醛15 mL。

③脱钙液Ⅲ：PLANK脱钙液，配制方法为氯化铝10 g，甲酸50 mL，10%福尔马林10 mL，冰乙酸1.5 mL，加蒸馏水至总体积100 mL。

骨组织脱钙液介绍骨组织脱钙液概述在病理实验制作切片时，我们会经常碰到一些含钙组织，而且钙十分坚硬。

由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同，含钙的组织一般不能直接制作切片。

骨组织含钙量最多。

除了骨组织之外其它组织也可发生钙化，在组织中形成钙化区，所以需要经过脱钙过程。

脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织的抗原不受破坏，需要对含钙的织固定之后再进行脱钙或采用固定兼有脱钙的液体处理，固定并脱钙。

然后再行常规制片。

用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（ethylenediamine tetraacetic acid EDTA）除此之外还有电解脱钙法。

强有机酸，如硝酸和盐酸可用于密皮质骨的脱钙，在短时间内可除去大量的钙。

令人遗憾的是这些强酸对组织形态会产生不良影响，脱钙作用强对组织破坏性大。

细小的组织，例如，骨髓组织不推荐用强酸脱钙。

虽然可以使用各种附加剂，如缓冲液具有保护组织的作用，但也降低了脱钙速度。

因此，各种脱钙液的配方都围绕着脱钙速度和消除对组织的不良影响而设计。

在酸类脱钙液中醋酸和甲酸比较适合于骨髓组织脱钙。

甲酸是一种使用范围较广的脱钙剂。

甲酸脱钙 10% 浓度比较合适。

醋酸和甲酸的作用比较弱，脱钙速度比较慢，它们不适合密皮质骨的脱钙。

EDTA 是一种比较温和的脱钙剂（EDTA 不是酸）。

对组织的渗透性差，作用慢。

大剂量使用价格较贵。

电解脱钙对组织损害最小，因为它的脱钙速度太慢，所以，不适合常规使用。

不同的脱钙液对骨组织的脱钙作用不同，脱钙效果也不完全相同。

为了达到良好的脱钙效果，建议使用EDTA脱钙液，该脱钙液对组织损伤较小，缺点就是脱钙时间会比较长些，但脱钙时间也要根据组织块大小而定。

目前国内生产EDTA脱钙液的公司也很少，个人感觉上海舜百生物的EDTA脱钙液使用效果还不错，脱钙脱的比较彻底，而且对组织损伤很小，就是周期长了些。

edta脱钙液配制方法EDTA脱钙液是一种常用的化学试剂，适用于在生化、分子生物学以及细胞生物学实验中，去除镁和钙离子的干扰。

本文将介绍一种EDTA脱钙液配制方法。

1.原料准备：1) 乙二胺四乙酸(EDTA)：分子式为C10H16N2O8，化学纯，实验室常备品，一定要质量优良。

2) 纯水：经过蒸馏或离子交换处理的自来水。

3) 氢氧化钠(NaOH)：实验室常备品，化学纯。

4) 氯化钙(CaCl2)：实验室常备品，纯度要求95%以上。

2. 配制方法：1) 取EDTA 10克，加入100毫升蒸馏水中，并充分搅拌至完全溶解。

2) 用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0，溶液会变成无色透明。

3) 用蒸馏水将溶液加至总体积200毫升，均匀混合。

4) 氯化钙和氯化镁分别加入到50毫升蒸馏水中，若有残留颗粒，则需过滤至溶液无颗粒为止。

5) 将氯化钙和氯化镁溶液缓慢滴加到EDTA水溶液中，同时用磁力搅拌器搅拌，注意滴加时不要加的过快，需滴加至完全反应。

6) 倒入500毫升容量瓶中，并用蒸馏水加至刻度处，摇匀。

3. 注意事项：1) 在配制EDTA脱钙液时，应严谨操作，确保实验的准确性。

2) 水溶液的pH值应被精确地测量，并调节至8.0，以确保溶液的准确性与稳定性。

3) 在溶液调节和滴加氯化钙和氯化镁的过程中，应缓慢平稳，反应完全，避免产生沉淀和反应失误。

4) 为了得到稳定的EDTA脱钙液，应将其保存在阴凉、避光的环境中，并尽量降低其与大气中的CO2接触的机会。

总结：以上就是制备EDTA脱钙液的方法，这是适用于实验室的一种方法。

在添加脱钙剂到实验中时，确保您了解反应的机理和适用于您实验的最佳体系。

edta脱钙原理
EDTA（乙二胺四乙酸）是一种有效的螯合剂，常用于蛋白质分离与纯化、酶活性的测定等生化实验中，其脱钙原理是通过与钙离子形成稳定的络合物，从而将钙离子与溶液中的其他离子分离。

EDTA脱钙原理的具体步骤如下：
1.EDTA与钙离子的络合反应：
EDTA分子中包含有四个羧酸基（-COOH），这些羧酸基通过它们的羧基与钙离子形成很强的配位键。

EDTA与钙离子形成的络合物非常稳定，可阻止钙离子在溶液中的沉淀和结晶。

2.离子交换：
EDTA在溶液中存在时，会释放出四价的H4Y-离子，并与其他金属离子形成络合物。

通过与其他金属离子形成络合物，EDTA将钙离子拦截在其中，从而实现了脱钙的效果。

3.配位作用：
EDTA通过与钙离子的配位作用，可以形成稳定的络合物，抑制钙离子的沉淀和结晶。

EDTA的配位数为6，即一个EDTA分子可以同时与一个钙离子形成6个配位键，形成六角形的层状结构。

这种结构对钙离子有很强的亲和力，使其离开溶液中的其他离子，而被EDTA固定。

4.温度和pH的影响：
EDTA脱钙反应的效果受温度和pH值的影响。

通常情况下，EDTA的脱钙效果在较高的温度下更好。

而pH值的增加会使EDTA与钙离子形成的络合物的溶解度增加，进而增强脱钙的效果。

总结起来，EDTA脱钙的原理是通过EDTA与钙离子的配位作用形成稳定的络合物，从而将钙离子与溶液中的其他离子进行分离。

EDTA的脱钙效果受温度和pH值的影响，通常在较高温度和碱性条件下效果更好。

EDTA脱钙技术广泛应用于蛋白质分离与纯化、酶活性的测定等生化实验中，对实验的准确性和可靠性具有重要作用。

edta脱钙原理
EDTA脱钙原理
EDTA（乙二胺四乙酸）是一种强螯合剂，可以与金属离子形成稳定的络合物。

在医学和生物化学领域，EDTA被广泛应用于脱钙和螯合金属离子的过程中。

EDTA脱钙是指通过EDTA与钙离子形成络合物，使钙离子从溶液中被螯合并去除的过程。

这种过程可以应用于许多领域，如水处理、食品加工、医学和生物化学等。

在水处理中，EDTA脱钙可以用于去除水中的钙和镁离子，从而减少水垢的形成。

水垢是由于水中的钙和镁离子与碳酸盐或硫酸盐结合而形成的。

这些水垢会在管道、锅炉和其他设备中积累，导致设备的损坏和效率降低。

通过EDTA脱钙，可以有效地去除水中的钙和镁离子，从而减少水垢的形成。

在食品加工中，EDTA脱钙可以用于去除食品中的钙和镁离子，从而改善食品的质量和口感。

例如，在某些奶制品中，钙离子会与蛋白质结合，导致蛋白质凝固和奶制品变得粘稠。

通过EDTA脱钙，可以去除奶制品中的钙离子，从而改善其质量和口感。

在医学和生物化学中，EDTA脱钙可以用于分离和纯化蛋白质和其他生物分子。

许多生物分子需要与钙离子结合才能发挥其功能。

通过EDTA脱钙，可以去除这些钙离子，从而分离和纯化这些生物分
子。

EDTA脱钙是一种广泛应用的技术，可以用于去除水中的钙和镁离子、改善食品的质量和口感、以及分离和纯化生物分子。

这种技术的应用范围非常广泛，对于许多领域都具有重要的意义。

大鼠关节组织硝酸＼EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较标签：大鼠关节组织;硝酸脱钙;EDTA脱钙;石蜡制片骨组织脱钙技术是病理实验室常用技术之一。

它的应用,使难以切片或不能完整制片的骨或软骨组织达到完整制片的目的。

适用组织化学、免疫组化等技术的染色。

大鼠关节组织制片的关键步骤是脱钙,其直接影响到制片的成败。

现在大鼠关节组织石蜡制片实验中,分别用10%硝酸和乙二胺四乙酸二钠(EDTA)复合液进行脱钙处理后,石蜡包埋、制片、染色。

对用两种方法脱钙处理的大鼠关节组织石蜡制片后染色,镜下观察形态及着色效果。

1 材料与方法1.1 材料大鼠30只、出生10周,平均体质量400 g(购自中山大学动物实验)。

雌雄不限,随机分组。

在麻醉状态下经心脏注射生理盐水及1%多聚甲醛处死动物,取关节组织、标本置10%甲醛固定液中固定24 h。

10%的硝酸脱钙液。

EDTA脱钙液,微波炉。

1.2 方法10%硝酸脱钙液的配制及脱钙方法将1份的硝酸溶液加入到9份的蒸馏水中搅拌均匀即可。

将大鼠关节组织放入是组织体积20倍量的10%硝酸溶液中,浸泡16～18 h,浸泡中无需更换脱钙液,用针能刺入即可。

取出组织置流水中冲洗碱化2 h。

取材,入脱水机石蜡包埋、切片、染色。

1.3 EDTA脱钙液的配制及脱钙方法用PBS缓冲液(pH7.2)100 ml、加NaOH 搅拌溶解至饱合状态,再加入EDTA10 g溶解后用1 mol/L Hcl调节pH值至7.2,加甲醛15 ml即可。

把脱钙液装入小烧杯中,将大鼠关节组织放置其中,脱钙液需充足。

放入微波炉中调节微波功率50℃,微波照射50 s即可达到脱钙的目的。

取出无需流水冲洗、直接取材、入脱水机、石蜡包埋、切片、染色。

2 结果10%硝酸脱钙处理的大鼠关节组织切片组织结构尚完整,组织块也能顺利连续切片,镜下:细胞形态、结构尚清,HE着色较淡,有时细胞核仁及膜边界不太清晰,分界不清,对比度不强。

在特殊染色和免疫组化染色中,着色较困难,效果欠佳。

OSTEOSENS脱钙液使用说明书组织学中用于敏感脆弱组织脱钙产品编号：OS-OT-1L (1000 ml) OS-OT-2.5L (2500 mL)产品介绍硬组织脱钙是显微分析的必要在标准组织学方法里，把样品完全浸入到脱钙液中。

脱钙的时间主要由样品的大小和密度决定。

该试剂含有EDTA，在组织脱钙期间可以结合钙离子。

使组织变软以便于进一步处理。

测试样品敏感硬组织髂骨嵴(Latin Crista iliaca)和角化组织（血管）。

产品描述OSTEOSENS脱钙液—在组织学中用于敏感脆弱组织的脱钙液，含有EDTA.需准备的材料：固定液：4%中性甲醛固定液、10%中性甲醛固定液脱水/返水试剂：70%酒精 80%酒精 95%酒精 100%酒精透明试剂：二甲苯或者二甲苯替代物（脂肪族烃）包埋石蜡：BioWax Plus, BioWax 56/68, BioWax Blue, BioWax Micro封片剂： BioMount, BioMount High, BioMount M, BioMount New, BioMount New Low, BioMount DPX, BioMount DPX High, BioMount DPX Low, BioMount DPX Low Eco, BioMount C, BioMount Aqua, 加拿大树胶高品质载玻片：防脱载玻片、病理级载玻片高品质盖玻片：标准级别尺寸范围 18×18mm -24×60mm浸镜油：分为A, C, FF, 37组织染色液样品脱钙准备：①组织样品首先需要被固定②组织样品要被完全浸入到OSTEOFAST 脱钙液，使其完全脱钙脱钙步骤髂骨嵴(Latin Crista iliaca)和其他硬组织脱钙的时间和脱钙液的使用量依据处理样品的尺寸，类型，密度。

15 x 9 x 3 mm 的髂骨嵴浸入50 ml OsteoSens 脱钙液 18-24小时紧密的钙化组织一块紧密的钙化组织1.5 x 1 x 0.3 cm)需花费 48-72 小时脱钙注意：如果组织不要求用组织学方法处理，可以用OSTEOFAST 1脱钙液加快对骨硬组织的脱钙和固定结束例如：当髂骨嵴组织飘在脱钙液上脱钙即可结束。

《中国癌症杂志》2019年第29卷第7期 CHINA ONCOLOGY 2019 Vol.29 No.7514·论　著·欢迎关注本刊公众号改良EDTA脱钙法和酸脱钙法在乳腺癌骨转移免疫组织化学中的比较研究孙　静1，袁俊清2，杨梦迪1，王智煜1，姚光宇1，周亦一1，赵　晖11.上海交通大学附属第六人民医院肿瘤内科，上海 200233；2.上海交通大学附属第六人民医院病理科，上海 200233［摘要］ 背景与目的：晚期乳腺癌骨转移发生率大于70%，对骨组织进行脱钙处理是一大技术难点。

探索乳腺癌骨转移的临床特点及更适合对骨组织进行脱钙的方法。

方法：收集2012年1月—2018年1月期间病理学诊断为乳腺癌骨转移患者的临床资料，分析临床特征；分析改良乙二胺四乙酸二钠（ethylenediaminetetraacetic acid ，EDTA ）脱钙法及酸脱钙法对骨转移组织进行处理后，骨组织形态、结构的差异；比较两组原发灶与转移灶免疫组织化学检查结果中雌激素受体（estrogen receptor ，ER ）、孕激素受体（progesterone receptor ，PR ）的一致性；分析两组骨转移组织ER 、PR 、Ki-67的阳性率；分析乳腺癌骨转移患者ER 、PR 阳性和阴性的生存差异。

结果：116例乳腺癌骨转移患者中91.4%为溶骨性骨转移，80.1%骨转移的数量为4~20，81.9%发生骨相关事件（skeletal-related event ，SRE ）。

41例为改良EDTA 脱钙，75例为酸脱钙，两组骨组织的形态结构无明显差异。

改良EDTA 脱钙组ER 一致性为95.1%，明显高于酸脱钙组（69.3%）（P <0.05）；改良EDTA 脱钙组骨组织ER 的阳性率为90.2%，明显高于酸脱钙组（73.3%）（P <0.05）；改良EDTA 组PR 的阳性率（58.5%）明显高于酸脱钙组（36.0%）（P <0.05），Ki-67增殖指数明显高于酸脱钙组（P <0.05）；骨转移组织ER +患者的平均生存时间为（41.09±4.26）个月，明显优于ER -患者［（25.81±5.71）个月］（P <0.05）。

Bouin's脱钙液货号：G2530规格：100mL/500mL保存：4℃保存，12个月有效。

产品说明：在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。

这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。

对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。

然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。

用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。

EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类，经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。

但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。

Bouin's脱钙液可用于固定，亦可用于脱钙。

该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

自备材料：1、PBS2、蒸馏水3、加热装置或微波炉注意事项：1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可，大多数在14～60天即可。

2、适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。

3、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。

脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。

4、脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。

第1页，共2页5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。

6、每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。

7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

第2页，共2页。