红芪有效部位对肺间质纤维化模型大鼠肺组织胶原面积、
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黄芪及其药效成分干预肺纤维化相关作用机制的实验研究进展
黄芪及其药效成分干预肺纤维化相关作用机制的实验研究进展顾志荣;李芳;葛斌【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2018(030)001【摘要】黄芪含有皂苷类、黄酮类、多糖类、微量元素等多种药效成分.黄芪多糖(APS)、黄芪甲苷(AST)、环黄芪醇(CAG)、黄芪总皂苷(TSA)、黄芪黄酮(TFA)、黄芪水提物(WEA)等药效成分干预肺纤维化(PF)相关实验研究是黄芪研究的热点之一.大量国内外研究从调节多种信号传导通路,调节细胞分化关键因子及基因的表达,调节氧化应激(OS)反应,调节炎症反应,改善组织形态学,端粒酶激活作用,调节细胞外基质(ECM)及基质金属蛋白酶等多个方面,试图揭示黄芪及其药效成分干预PF的作用机制.但多数研究均探讨了单一因子或信号通路,而对于多种作用机制的网络调控关系缺少关注.基于多层次、多角度及系统生物学的思路研究黄芪及其药效成分干预PF的作用机制及治疗靶标应成为后续研究的重点.%Astragali Radix had abundant nedicinal compositions of saponins,flavonoids,polysaccharides and trace elements.A present hotspot was experiment mechanism study of Astragali Radix and its medicinal compositions on pulmonary fibrosis (PF),including astragalus polysaccharide (APS),astragaloside Ⅳ (AST),cycloastragenol (CAG),total saponins of astragalus (TSA),total flavonoids of astragalus (TFA),and watery extract of astragalus (WEA).A large number of domestic and foreign studies focused on revealling the intervention mechanism of Astragali Radix and its medicinal compositions on PF from the perspective of regulating signal transductionpathways,regulating key factors and gene expression of cell differentiation,regulating oxidative stress (OS) response,regulating inflammatory response,improving histomorphology,activating telomerase,and regulating extracellular matrix (ECM) and matrixmetalloproteinases.However,most studies of them only investigated the single factor or signal pathway,and lacked of attention to network regulation relationship of multiple mechanisms.Based on multi-level,multi-angle and systematic biology,the study of intervention mechanism and treatment target of Astragali Radix and its medicinal compositions on PF should be the research emphasis in follow-up study.【总页数】7页(P161-167)【作者】顾志荣;李芳;葛斌【作者单位】甘肃省人民医院药剂科;甘肃中医药大学,兰州730000;甘肃省人民医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R259【相关文献】1.肺纤维化模型大鼠肺组织中转化生长因子β1及转化生长因子β1 mRNA的表达及黄芪莪术合剂的干预效应 [J], 孙增涛;廉富;李小娟;刘恩顺;封继宏2.黄芪糖蛋白对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用及机制 [J], 栾智华;柴智;任晋宏;魏砚明;薛慧清;王瑞;方颖茵;武平3.中医药干预肺纤维化相关信号通路研究进展 [J], 冀会鸽; 李亚; 余学庆4.内质网应激在代谢相关疾病发生中的作用机制及干预治疗作用研究进展 [J], 赵玄烨; 秦洁5.黄芪总皂苷对特发性肺纤维化小鼠上皮间质转分化的干预作用 [J], 韩佳;徐昌君;黄霂晗;欧江琴;林昶;丁倩;杨长福因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
红芪黄酮气溶胶给药与灌胃给药对COPD大鼠的影响
红芪黄酮气溶胶给药与灌胃给药对COPD大鼠的影响蔺兴遥;张艳霞;李雪燕;樊秦;张毅;马平川;程晓丽【摘要】目的:比较红芪黄酮灌胃给药及气溶胶给药两种不同的给药方法对大鼠慢性阻塞性肺病模型(COPD)的治疗作用.方法:选取40只SPF级雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、模型对照组、红芪黄酮灌胃给药组及红芪黄酮气溶胶给药组,每组10只.空白对照组正常饮食喂养,不加任何处理措施.其余3组每天于小动物烟雾气溶胶染毒暴露系统吸入新鲜的香烟烟雾染毒造模,每天染毒30分钟,造模28天.造模后第7天开始给药,共21天.红芪黄酮灌胃给药组每日灌胃1 mL/100 g,37.41 mg/kg,给药,红芪黄酮气溶胶给药组气溶胶给药,气溶胶浓度保持在3.5～4.0mg/m3,给药时间约40分钟.实验结束后,检测清醒及麻醉状态下各组动物肺功能,观察肺组织切片病理形态.结果:清醒状态及麻醉状态下造模组动物肺功能指标与空白对照组比较,均有显著性变化,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,各给药组显著改善肺功能相关指标,且气溶胶给药组作用更为显著.病理切片结果显示,与空白对照组比较,造模组出现不同程度的异常改变;与模型对照组比较,各给药组病理形态有显著改善,且气溶胶给药组作用更为显著.结论:气溶胶给药与灌胃给药相比,对COPD模型大鼠的治疗作用更为显著,气溶胶给药技术对于COPD的治疗具有重要意义.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2019(032)006【总页数】4页(P15-18)【关键词】小动物烟雾气溶胶染毒系统;COPD大鼠;红芪黄酮;气溶胶给药【作者】蔺兴遥;张艳霞;李雪燕;樊秦;张毅;马平川;程晓丽【作者单位】甘肃中医药大学,甘肃兰州 730000;敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室;甘肃省中药质量与标准研究重点实验室;甘肃省中药药理与毒理学重点实验室;甘肃中医药大学,甘肃兰州 730000;敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室;甘肃中医药大学,甘肃兰州 730000;甘肃中医药大学,甘肃兰州 730000;敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室;甘肃中医药大学,甘肃兰州 730000;敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室;甘肃中医药大学,甘肃兰州 730000;甘肃中医药大学,甘肃兰州 730000【正文语种】中文【中图分类】R563流行病学调查显示，慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)已成为全球第四位死因，且随着社会发展和人们生活习惯的变化，其发病率呈现增长趋势，预测到2030年COPD将成为全球第三位死因［1］。
红芪胶囊对60Co-γ射线辐射后大鼠脑、肺、血清SOD活性和MDA含量的影响
红芪胶囊对60Co-γ射线辐射后大鼠脑、肺、血清SOD活性和MDA含量的影响李予蓉;谭娟;王晋;徐胜龙;郭军【期刊名称】《陕西中医》【年(卷),期】2010(031)003【摘要】目的:观察中药红芪胶囊(HQJN)对60Co-γ射线损伤后大鼠脑、肺、血清中SOD和MDA含量的变化.方法:将大鼠进行60Co-γ全身性照射.按不同剂量连续灌胃给药5d,采用羟胺法(NBT)测定组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,用硫代巴比妥酸(TBA)法测定组织中丙二醛(MDA)含量的变化.结果:①受照大鼠脑、肺和血清中MDA 的含量均较正常对照组明显升高(P < 0. 01),SOD活性降低(P<0.05);②照射后给药,大鼠脑组织中SOD活性明显升高,MDA含量有降低趋势(均P<0.05,与对照组相比),肺组织SOD的活性升高,MDA的含量有降低趋势(P<0.05与正常对照相比),结论:①红芪胶囊具有提高受辐照大鼠抗氧化能力,有利于受辐照后机体损伤的恢复.②红芪胶囊可提高机体氧化和还原反应的比值,清除体内过剩的自由基.③红芪胶囊可治疗由电离辐射引起的大鼠脑组织中自由基代谢的紊乱,提高受辐照大鼠抗氧化能力,减轻辐射对机体的损伤.【总页数】2页(P363-364)【作者】李予蓉;谭娟;王晋;徐胜龙;郭军【作者单位】第四军医大学放射医学教研室,西安710032;第四军医大学放射医学教研室,西安710032;第四军医大学放射医学教研室,西安710032;第四军医大学放射医学教研室,西安710032;第四军医大学口腔显像室,西安710032【正文语种】中文【中图分类】R979.6【相关文献】1.60Co-γ射线辐射对红掌几种酶活性及MDA含量的影响2.琼玉口服液对衰老小鼠脑组织SOD活性及血清中SOD和MDA含量的影响3.抗衰益智胶囊对实验性老年痴呆病大鼠脑组织中SOD、CAT活性及MDA含量的影响4.胃炎灵胶囊对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清SOD活性和MDA含量及胃黏膜组织形态的影响5.敦煌石室大宝胶囊对衰老大鼠血清MDA含量、SOD和脑组织GSH-Px活性的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
红芪多糖、红芪黄酮和红芪皂苷抗博来霉素致大鼠肺间质纤维化的作用
红芪多糖、红芪黄酮和红芪皂苷抗博来霉素致大鼠肺间质纤维化的作用王艺;张毅;李娟;李雪燕;刘永琦;苏韫;蔺兴遥;李金田【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2022(44)2【摘要】目的研究红芪不同提取分离部位抗肺间质纤维化的作用。
方法提取分离红芪各有效部位,采用喉镜引导下气管插管注入博来霉素法复制肺间质纤维化大鼠模型并随机分组,各组大鼠给予相应药物进行干预,检测大鼠一般状况、体质量、肺系数、脾脏及胸腺指数,肺组织中HA、LN、HYP水平,T细胞亚群及肺组织病理形态学。
结果红芪有效部位均可一定程度改善模型大鼠的精神状态、食量、活动量、皮毛光泽等;与模型组比较,红芪黄酮低、中剂量组和红芪皂苷高剂量组大鼠肺系数均降低(P<0.01),红芪多糖高剂量组大鼠在7 d和14 d的体质量均增加(P<0.01),红芪黄酮低剂量组可同时降低肺组织中HA、LN的水平(P<0.01),红芪黄酮各剂量组可降低HYP水平(P<0.01),红芪黄酮低剂量组大鼠CD3^(+)CD4^(+)CD8^(-)细胞占比升高(P<0.01),红芪黄酮各剂量组大鼠CD4^(+)/CD8^(+)细胞比值升高(P<0.05)。
与模型组比较,HE染色发现各治疗组中肺泡炎及肺纤维化程度均减轻,其中红芪黄酮低剂量效果最好;Masson染色发现各治疗组肺纤维化程度均减轻,肺间隔略增宽,间质内可见小灶状胶原纤维沉积,病变范围较小,其中红芪黄酮中剂量组大鼠肺组织胶原纤维沉积减少。
结论红芪提取物多糖、黄酮及皂苷均可不同程度改善大鼠肺间质纤维化,其中红芪黄酮效果最佳。
【总页数】6页(P573-578)【关键词】红芪多糖;红芪黄酮;红芪皂苷;肺间质纤维化【作者】王艺;张毅;李娟;李雪燕;刘永琦;苏韫;蔺兴遥;李金田【作者单位】甘肃中医药大学;敦煌医学与转化教育部重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.红芪黄酮对肺间质纤维化模型大鼠微血管密度的影响2.黄芪黄酮与红芪黄酮对肺间质纤维化模型大鼠肺功能影响的对比研究3.红芪多糖对D-半乳糖致衰老小鼠抗免疫衰老作用的研究4.红芪总黄酮对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用5.红芪总黄酮对高糖致脐静脉内皮细胞损伤保护作用的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中药芪红合剂对肺间质纤维化模型大鼠干预治疗的实验研究的开题报告
中药芪红合剂对肺间质纤维化模型大鼠干预治疗的实验研
究的开题报告
研究背景：
肺间质纤维化是一种致命的慢性肺部疾病，其发病原因不明，目前缺乏有效治疗方法。
中药芪红合剂是一种中药复方，其主要成分为黄芪、红枣和肉桂，具有免疫调节、抗
氧化和抗纤维化等作用。
前期研究表明，芪红合剂可以显著改善肺间质纤维化患者的
症状和肺功能，但其作用机制尚未完全阐明。
研究目的：
本研究旨在探究芪红合剂对肺间质纤维化模型大鼠的干预治疗作用及其可能的作用机制。
研究内容：
1. 构建肺间质纤维化模型大鼠。
2. 将大鼠随机分为对照组、模型组和芪红合剂组。
3. 对照组和模型组分别给予生理盐水灌胃，芪红合剂组给予芪红合剂灌胃，每天一次，连续4周。
4. 每周测定大鼠呼吸系统功能和肺纤维化指标。
5. 分别采用光镜、电镜和免疫组织化学等技术观察各组大鼠肺组织的结构和炎症、纤
维化程度，并检测各组大鼠肺组织中的相关分子表达水平。
研究意义：
本研究有望为探索肺间质纤维化的病理机制和药物治疗提供新思路，并为芪红合剂的
临床应用提供科学依据和理论支持。
甘肃特产药材红芪actin基因片段的克隆及序列分析
２ 方法
２１ 红芪总 ＲＮＡ的提取和 ｃＤＮＡ的合成 取生长 ７周的红芪幼苗 １００～１５０ｍｇ，置于液氮
中迅速研磨成细粉末，按照植物总 ＲＮＡ小量抽提试 剂盒说明书步骤提取总 ＲＮＡ，吸取 ＲＮＡ１５μＬ在 超微量分光光度计上检测其质量分数和纯度，将剩 余的 ＲＮＡ分 装 置 于 ２００μＬ的 无 酶 离 心 管 中，置 于 －８０℃冰箱保存。取 ＲＮＡ５μＬ用 １％ 非变性琼 脂糖凝胶电泳鉴定其完整性。ｃＤＮＡ模板的合成参照 说明书步骤进行，产物在 －２０℃保存。
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红芪胶囊对60Co-γ射线辐射后大鼠脑、肺、血清SOD活性和MDA含量的影响
１ ４ 统 计 学 方 法 采 用 Ｓ Ｓ ｌ ． ． Ｐ Ｓ １０软 件 进 行 多 因 素 的 方 差分析 ， Ｐ＜ ０ ０ ． ５为 统 计 学 差 异 显 著 ； Ｏ Ｏ Ｐ＜ ． １为 差 异 非 常 显
著 ； 果 以均 数 ±标 准 差 （ ） 示 。 结 ± ） 表
２ 结 果 ２ １ 红 芪 胶 囊 对 大 鼠 脑 组 织 Ｓ ． ０Ｄ 活 性 、 Ｍ ＤＡ 含 量 的 变化 见 表 ｌ 。
１３ ２ 样 品制 备 ： 照 后 第 ６ ． ． 辐 ｄ活杀 大 鼠 ， 脑 、 、 清 取 肺 血
组 织 ， 生 理 盐水 配 制 成 １ 的 匀 浆液 ， 心 ３ ０ ｒ ｍ， ５ ｎ 用 ０ 离 ０ ０ｐ １ ｍｉ ，
态 结 构 的变 化 ， 使 机 体 通 过 酶 系 统 与 非 酶 系 统 产 生 氧 自 由 可
ｉ １ ２红 芪胶 囊 ： 用 红 景 天 、 芪 、 五 加 浸 膏 、 棘 ４味 ．． 采 黄 刺 沙 中药 材 组 成 复 方 ， 申 请 中 国发 明专 利 （０ ９ ０２ ３９ ６已公 已 ２０ １０ １ ５ ．
究选 用成 年雄性 Ｓ 大 鼠 （ Ｄ 由第 四 军 医 大 学 实 验 动 物 中 心 提
供 ） 体 重 为 ２ ０ ± ９ ５ ，动 物 在 安 静 、 暖 的 环 境 下 分 笼 饲 ， ２ｇ ．ｇ 温 养 ， 予充 足 的清 洁 饮 水 及 摄 食 。 给
表 １
红 芪胶 囊对大 鼠脑组 织 Ｓ Ｄ Ｏ
主 题 词 复 方 ／ 理 学 超 氧 化 物 歧 化 酶 ／ 谢 丙 二 醛 ／ 谢 大 鼠 药 代 代 【 图 分 类 号 】 Ｒ９ ９ ６ 【 献 标 识 码 】 Ａ 中 ７． 文 【 章 编 号 】 １ ０ —３ ９ ２ １ ） ３ ０ ６ — ２ 文 ０ ０７ ６ （０ Ｏ ０ — ３ ３０
黄芪多糖对肺纤维化大鼠细胞因子及肺组织病理结构的影响
黄芪多糖对肺纤维化大鼠细胞因子及肺组织病理结构的影响李娟;张毅;刘永琦;李金田;魏舒畅;苏韫;聂蕾【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2011(22)7【摘要】目的观察肺纤维化大鼠血清中IFN-γ、IL-4、TNF-α的含量、肺组织病理结构变化,进一步探讨黄芪多糖干预治疗肺纤维化的作用机理。
方法 Wistar大鼠60只随机分为5组:空白组、博莱霉素(BLM)组、地塞米松组、黄芪多糖组、黄芪水提物组。
采用气管内注入BLM复制肺纤维化模型,造模后第2天开始各药物组开始干预治疗,14d采用酶联免疫吸附法测定血清IFN-γ、IL-4、TNF-α的含量,14 d、28 d采用HE染色观察肺组织病理结构的变化。
结果与空白组相比较,BLM组大鼠血清IFN-γ含量降低,IL-4、TNF-α的含量升高(均P<0.05),肺组织的肺泡炎及纤维化程度升高(均P<0.05);与BLM组比较,黄芪多糖组、黄芪水提物组、地塞米松组大鼠血清IFN-γ含量升高,IL-4、TNF-α含量降低(均P<0.05);肺组织的肺泡炎及纤维化程度降低(P<0.05)。
结论应用黄芪多糖可以明显减轻大鼠肺纤维化进程,不仅降低Ⅱ型细胞因子(IL-4)含量,而且升高Ⅰ型细胞因子(IFN-γ)及TNF-α含量,从而调整Ⅰ型/Ⅱ型细胞因子平衡及及TNF-α表达达到抗纤维化作用。
【总页数】2页(P1684-1685)【关键词】肺纤维化;黄芪多糖;细胞因子;病理结构【作者】李娟;张毅;刘永琦;李金田;魏舒畅;苏韫;聂蕾【作者单位】甘肃中医学院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.抗纤益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织病理变化及纤维4项的影响 [J], 赵勤萍;王洋;薛晓明;关炜2.转录活化子1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织中细胞因子和胶原表达的影响[J], 郭燕妮;朱晨;曾鸣;王文军;李晶;范贤明3.抗纤益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织病理变化及血清TGF-β1、TNF-α的影响[J], 赵勤萍;王洋;薛晓明;关炜4.通肺饮及其拆方对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织透明质酸含量及病理形态的影响 [J], 王浩;方朝义;王杰鹏;王少贤;方芳;旷湘楠;宫志强;刘娜;鲁晨希;张千一5.瓜蒌薤白汤对平阳霉素所致大鼠肺纤维化肺组织中细胞因子PDGF-BB表达的影响 [J], 李瑞琴;肖红;张瑞;李伟;宋建平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
红芪黄酮气溶胶给药与灌胃给药对肺纤维化大鼠的影响
红芪黄酮气溶胶给药与灌胃给药对肺纤维化大鼠的影响*蔺兴遥1，2，3，4，张艳霞1，张毅1，2，李雪燕1，樊秦1，胡蓉1，马平川1，程晓丽11甘肃中医药大学，甘肃兰州730000；2敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室；3甘肃省中药质量与标准研究重点实验室；4甘肃省中药药理与毒理学重点实验室［摘要］目的：比较红芪黄酮灌胃给药及红芪黄酮气溶胶给药2种给药方法对大鼠肺纤维化模型(idiopathic pulmonary fibrosis ，IPF)的治疗作用。
方法：选取40只SPF 级雄性SD 大鼠，随机分为空白组、模型组、红芪黄酮灌胃给药组及红芪黄酮气溶胶给药组，每组10只。
空白组正常饮食喂养，不施加任何处理措施。
其余3组大鼠使用博莱霉素气溶胶量化造模。
造模后第2天开始给药，红芪黄酮灌胃给药组大鼠灌胃给药(37.41mg/kg)，红芪黄酮气溶胶给药组动物气溶胶给药(气溶胶浓度3.5耀4.0mg/m 3，给药时间40min)，其余2组给予蒸馏水，每日1次，共计28天。
实验结束，分别检测清醒及麻醉状态下动物肺功能；处死各组大鼠，取部分肺组织，制备匀浆，检测肺脏组织中透明质酸(hyaluronic acid ，HA)和层黏连蛋白含量(laminin ，LN)；另取部分肺组织，分别使用HE 染色及Masson 染色方法，观察肺组织病理形态。
结果：清醒状态及麻醉状态下造模组动物肺功能指标与空白组比较，差异具有统计学意义(P ＜0.05)；与模型组比较，各给药组肺功能相关指标均得到显著改善，且气溶胶给药组改善更为明显。
病理切片结果显示，与空白组比较，造模组出现不同程度的异常改变；与造模组比较，各给药组病理形态有显著的改善，且气溶胶给药组作用更为明显。
HA 、LN 含量测定结果显示，与空白组比较，模型组HA 、LN 含量显著升高，差异均有统计学意义(P ＜0.05)；气溶胶给药组与灌胃组比较，气溶胶给药组HA 、LN 含量均明显下降，差异有统计学意义(P ＜0.05)。
黄芪多糖对肺纤维化大鼠肺上皮细胞超微结构及自由基代谢的影响
关键词：肺纤维化；黄芪多糖；自由基；一氧化氮；超微结构 基金资助：国家教育部春晖计划基金资助项目（No.Z2004-1-620039）
Effect of astragalus polysaccharides on bleomycin-induced pulmonary fibrosis rats
LI Jin-tian, WEI Shu-chang, LIU Yong-qi, ZHANG Yi, LI Juan, SU Yun, NIE Lei
Key words: Pulmonary fibrosis; Astragalus polysaccharides; Free radical; Nitric oxide; Ultrastructure Fund assistance: Chunhui Plan of Ministry of Education Foundation（No.Z2004-1-620039）
摘要：目的：研究黄芪多糖对博莱霉素（BLM）所致肺纤维化大鼠超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛 （MDA）、一氧化氮（NO）及肺上皮细胞超微结构的影响，探索黄芪阻抑肺纤维化的效应机制。方法：Wistar 大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、黄芪多糖组、黄芪水提物组；采用气管内注入BLM制作大鼠肺纤 维化模型，造模后第2d开始药物干预，14、28d各取6只大鼠，分别检测肺组织SOD、MDA水平，血清NO的含 量，透射电镜观察肺上皮细胞超微结构变化情况。结果：与空白组比较，模型组大鼠SOD含量降低，MDA、NO 的含量明显升高（均P<0.05）；与模型组比较，黄芪多糖28d组、黄芪水提物组、地塞米松组大鼠SOD含量明显 升高，NO、MDA含量明显降低（均P<0.05）；超微结构观察，模型组肺泡Ⅱ型上皮细胞数量减少，细胞微绒毛 稀少，核不规则，核染色质凝集粗块状，板层小体减少空泡样变，线粒体明显肿胀，肺泡间隔明显，纤维细胞 增生明显，胞质内胶原纤维增多；各治疗组均可改善肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的异常改变。结论：黄芪多糖 对肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构具有保护作用，调节NO代谢，提高抗氧化能力可能是其阻抑晚期肺 纤维化发生的机制之一。
Effect of astragalus polysaccharides on bleomycin-induced pulmonary fibrosis rats
LI Jin-tian, WEI Shu-chang, LIU Yong-qi, ZHANG Yi, LI Juan, SU Yun, NIE Lei
Key words: Pulmonary fibrosis; Astragalus polysaccharides; Free radical; Nitric oxide; Ultrastructure Fund assistance: Chunhui Plan of Ministry of Education Foundation（No.Z2004-1-620039）
摘要：目的：研究黄芪多糖对博莱霉素（BLM）所致肺纤维化大鼠超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛 （MDA）、一氧化氮（NO）及肺上皮细胞超微结构的影响，探索黄芪阻抑肺纤维化的效应机制。方法：Wistar 大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、黄芪多糖组、黄芪水提物组；采用气管内注入BLM制作大鼠肺纤 维化模型，造模后第2d开始药物干预，14、28d各取6只大鼠，分别检测肺组织SOD、MDA水平，血清NO的含 量，透射电镜观察肺上皮细胞超微结构变化情况。结果：与空白组比较，模型组大鼠SOD含量降低，MDA、NO 的含量明显升高（均P<0.05）；与模型组比较，黄芪多糖28d组、黄芪水提物组、地塞米松组大鼠SOD含量明显 升高，NO、MDA含量明显降低（均P<0.05）；超微结构观察，模型组肺泡Ⅱ型上皮细胞数量减少，细胞微绒毛 稀少，核不规则，核染色质凝集粗块状，板层小体减少空泡样变，线粒体明显肿胀，肺泡间隔明显，纤维细胞 增生明显，胞质内胶原纤维增多；各治疗组均可改善肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的异常改变。结论：黄芪多糖 对肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构具有保护作用，调节NO代谢，提高抗氧化能力可能是其阻抑晚期肺 纤维化发生的机制之一。
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红芪有效部位对肺间质纤维化模型大鼠肺组织胶原面积、目的观察红芪对肺间质纤维化模型大鼠肺组织胶原面积、透明质酸（HA）及层黏连蛋白（LN）表达的影响，探讨其作用机制，并筛选红芪最佳有效部位。
方法将144只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组，以及红芪多糖、黄酮、皂苷的高、中、低剂量组。
采用气管滴注博莱霉素法建立肺纤维化模型，从造模后第2日起，各药物组分别给予相应剂量药物，每日1次，共28 d。
Masson染色观察肺组织胶原纤维的变化，放射免疫法检测各组大鼠肺组织匀浆中HA、LN含量。
结果与模型组比较，红芪黄酮各剂量组、红芪多糖低剂量组肺泡炎明显减轻。
红芪黄酮低剂量组、红芪多糖中剂量组、红芪皂苷低剂量组肺组织胶原面积明显减小。
与模型组比较，红芪多糖高剂量组、红芪黄酮各剂量组、红芪皂苷高剂量组HA含量明显下降。
红芪多糖高剂量组，红芪黄酮中、低剂量组，红芪皂苷中、低剂量组LN含量明显下降。
结论红芪多糖、黄酮、皂苷在适宜剂量下均能减轻肺泡炎症，抑制胶原纤维增生、沉积，降低肺组织中HA、LN含量，其中红芪黄酮效果较佳。
Abstract：Objective To observe the effects of Radix Hedysari on collagen area，hyaluronic acid （HA）and laminin （LN）of lung tissues in rat with pulmonary interstitial fibrosis；To investigate the mechanism and screen the best active ingredients in Radix Hedysari. Methods Totally 144 SPF Wistar rats were randomly divided into control group，model group，metacortandracin group，and Radix Hedysari polysaccharide，flavone and saponin groups were set as high-，medium-，and low-dose groups. Pulmonary interstitial fibrosis models were set up by dropping bleomycin into air tube of rats. All groups were taken corresponding medicine with appropriate dose daily on day 2 after models were established for 28 days. Collagen fibrils in lung tissue were observed by Masson dying and contents of HA and LN in lung tissue of rats in each group were detected by radioimmunoassay. Results Compared with the model group，pulmonary alveoli in Radix Hedysari flavone high-，medium-，and low-dose groups and Radix Hedysari polysaccharide low-dose group were relieved obviously；collagenous fiber area in Radix Hedysari flavone low-dose group，Radix Hedysari polysaccharide medium-dose group，and Radix Hedysari saponin low-dose group decreased obviously. Compared with the model group，the content of HA in Radix Hedysari polysaccharide high-dose group，Radix Hedysari flavone high-，medium-，and low-dose groups，and Radix Hedysari saponin high-dose group decreased obviously；the content of LN in Radix Hedysari polysaccharide high-dose group，Radix Hedysari flavonemedium- and low-dose groups，and Radix Hedysari saponin medium- and low-dose groups decreased obviously. Conclusion Polysaccharide，flavone and saponin of Radix Hedysari have the abilities to alleviate inflammation of pulmonary alveoli，inhibit proliferation and deposition of collagen fibrils，and reduce the contents of HA and LA in lung tissue. Among these active ingredients，flavone has the best effect.Key words：pulmonary fibrosis；active ingredients in Radix Hedysari；collagen area；HA；LN；rats肺纤维化病理改变以大量的成纤维细胞聚集、细胞外基质沉积并伴有炎症和损伤所致组织结构破坏为特征。
透明质酸（HA）是间质中的一种主要的糖胺聚糖，也是细胞外基质的一种主要成分。
肺泡间质中HA积累提示HA很可能在肺纤维化早期肺泡炎阶段的肺间质水肿中起重要作用[1-2]。
层黏连蛋白（LN）属于细胞基质中的非胶原糖蛋白，广泛分布于基底膜的透明层，与胶原一起构成基底膜骨架，近年许多研究表明，其参与了内皮细胞损伤过程，特别在肺纤维化过程中发挥了重要作用，成为监测肺纤维化病变的一个较敏感指标[3]。
本实验以博莱霉素诱导肺纤维化模型，以醋酸泼尼松片为阳性对照药，通过对肺组织病理形态学、胶原面积的影响及HA、LN含量的观察，探讨红芪有效部位对肺间质纤维化的防治作用及其机制，筛选红芪最佳有效部位，为临床防治肺纤维化提供实验依据。
1 实验材料1.1 动物SPF级Wistar大鼠144只，雌雄各半，体质量（200±20）g，2月龄，甘肃中医药大学科研实验中心，动物合格证号SCXK（甘）2011-0001。
1.2 药物选用甘肃地道药材红芪，经甘肃中医学院科研实验中心药物制剂实验室提取、分离、鉴定，得到红芪多糖、黄酮、皂苷（纯度>50%）。
注射用盐酸平阳霉素（哈尔滨博莱霉素有限公司，批号110424），醋酸泼尼松片（浙江仙琚制药股份有限公司，批号110810）。
1.3 主要试剂与仪器羧甲基纤维素钠（天津市大茂化学试剂厂，批号110311），戊巴比妥钠（北京化学试剂公司，批号101021），HA放免试剂盒（北京北方生物技术研究所，111220），LN放免试剂盒（北京北方生物技术研究所111220）。
GC-9111型放射免疫γ计数器（科大创新股份有限公司中佳分公司），KDC-2044低速冷冻离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司），RM2135石蜡切片机（德国），TEC-VEM-J2石蜡包埋机（日本），VIP-5JR-J2石蜡脱水机（日本），SFC-182型生物显微镜（麦克奥迪实业集团有限公司），Image-Pro Plus专业图像分析软件（美国Media Cybemetics公司）。
2 实验方法2.1 分组与造模144只SPF级Wistar用随机数字表法分为空白组、模型组、强的松组及红芪多糖、黄酮、皂苷的低、中、高剂量组，共12组，每组12只，SPF级常规饲养，充足饲料喂养（北京科奥协力饲料有限公司），自由饮水经MF-RO-10型实验动物饮用水处理器（甘肃中医学院SPF级实验动物中心提供）。
适应性喂养3 d后，采用气管内一次性注入博莱霉素（5 mg/kg）复制肺纤维化模型[4-5]。
注药后，立即将动物直立旋转，使药物在肺内分布均匀。
2.2 给药各给药组给药剂量按体表面积和人与动物临床剂量倍数直接换算法并参考相关文献[6-8]，结合可比性原则确定本实验给药剂量为红芪多糖、皂苷高剂量（60 mg/kg）、中剂量（30 mg/kg）、低剂量（15 mg/kg），红芪黄酮高剂量（22.5 mg/kg）、中剂量（15 mg/kg）、低剂量（7.5 mg/kg）。
造模后第2日起，每日上午灌胃1次，连续28 d。
强的松组给予醋酸泼尼松片，给药剂量为3 mg/kg。
各药物临用前以0.5%羧甲基纤维素钠溶液配制成相应浓度的溶液。
模型组和空白组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃。
给药体积1 mL/100 g。
2.3 取样各组大鼠均于实验第28日腹腔注射麻醉处死取样。
末次给药后，各组大鼠禁食不禁水24 h，腹腔注射麻醉，剪开胸腔，小心分离肺组织，剪取左肺下叶组织制备匀浆，检测HA、LN。
剪取右肺中叶，行HE、Masson染色，观察肺组织形态结构的改变。
2.4 图像分析按Szapiel等[9]方法评价肺泡炎程度，将肺泡炎分为4级：0级：无肺泡炎；1级：轻度肺泡炎，受累面积少于全肺20%；2级：中度肺泡炎，受累面积为全肺20%～50%；3级：重度肺泡炎，受累面积大于全肺50%，呈弥漫性分布。
Masson染色后，用ONLYMPUS AX80全自动荧光显微镜采集图像，在40倍视野下每张切片选定10个视野，采用Image-Pro Plus图像分析软件测量肺组织胶原纤维平均面积。
胶原纤维平均面积=肺间质绿染面积÷视野总面积×100%。
2.5 统计学方法采用SPSS 17.0统计软件进行分析。
实验数据用—x±s表示，组间比较采用方差分析。
P＜0.05表示差异有统计学意义。
3 结果3.1 红芪对肺间质纤维化大鼠肺组织结构的影响模型组肺泡结构紊乱，多数肺泡闭锁、裂隙、萎陷，部分融合成大泡状，肺泡腔及间质内有炎性细胞渗出，肺间隔明显增宽增厚。