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粪便隐血试验采用双联法检测的临床应用粪便隐血试验对消化道出血的诊断有重要价值，现常作为消化道恶性肿瘤早期诊断的一个筛选指标。
正常人24h的胃肠道生理性失血量约0.6ml，用高灵敏度的隐血试验一般也难以检出，故正常人呈阴性。
在消化道溃疡性出血时呈间断性阳性；而消化道癌症时呈持续性阳性。
因此可作为良、恶性出血的一种鉴别。
阳性还见于肠结核、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病等。
临床常用免疫法和化学法两种方法检测粪便隐血。
免疫法特异性地检测人的血红蛋白，特异性和敏感度都很高。
但在上消化道少量出血时，血中的红细胞往往会被胃酸或胃液中的酵素分解成血基质，而以血基质状态存在于粪便中，免疫法对血红蛋白具有特异性，对血基质则没有，故单独做免疫法检测时可能因此产生假阴性而漏检。
化学法主要检测血红蛋白中的亚铁血红素，粪便标本可能受被检测者所吃食物中的动物血或某些药物的影响而产生假阳性；而当粪便隐血极微少时化学法有可能产生假阴性。
一般而言，上消化道出血时化学法比免疫法阳性检出率高，下消化道出血时免疫法比化学法灵敏度高，而且单独化学法或免疫法都可能因其方法学的某些缺陷而产生一定的漏检或假阴（阳）性结果。
采用双联法检测，可以弥补其各自方法学的不足，为临床提供病人的更多信息。
以下为双联法检测结果的分析：检查前注意事项：1、做检测前一天，饮食应该避免猪肝、鸭血、菠菜等含铁质丰富的可致化学法假阳性的食物。
2、摄入引起胃肠出血的药物，如阿司匹林、皮质类固醇、非类固醇抗炎药，可造成化学法隐血试验假阳性。
而摄入大量维生素C，则可造成隐血试验化学法假阴性。
3、女性做粪便检查也最好避开经期，以免血丝混入导致阳性结果。
4、口鼻腔出血可以导致检测出现阳性结果。
5、一次检测可能受标本中某些物质干扰，消化道也可能就间歇性的，建议临床对符合条件的患者连续检测便隐血，以提高阳性检出率。
粪便隐血试验原理(一)粪便隐血试验1. 简介粪便隐血试验是一种常用的检测技术，用于检测粪便中的潜在的出血迹象。
这项检测对早期胃肠道病变的筛查起着重要作用。
2. 检测原理粪便隐血试验基于人体消化道出血时红细胞在肠道中的分解产物。
红细胞在肠道内被分解成血红蛋白，如果存在出血情况，血红蛋白会通过肠壁进入粪便。
3. 试剂粪便隐血试验主要使用两种试剂：酮基胆红素和过氧化物。
这两种试剂在接触粪便中的血红蛋白时会发生化学反应，产生显色反应。
酮基胆红素试剂酮基胆红素试剂可以通过氧化反应来检测粪便中的血红蛋白。
当血红蛋白与酮基胆红素试剂反应时，试剂的颜色将从红色变成绿色。
过氧化物试剂过氧化物试剂可以在粪便中检测到血红蛋白的过氧化物酶活性。
血红蛋白过氧化物酶会与过氧化物试剂反应并显色，将试剂颜色从无色变成蓝色。
4. 检测操作步骤进行粪便隐血试验时，一般会按照以下步骤进行操作：1.收集新鲜粪便样本。
2.取少量粪便样本，将其与试剂混合。
3.等待一定时间，观察试剂颜色变化。
4.通过比较试剂颜色与标准色板进行判断。
5. 结果解读在粪便隐血试验中，观察试剂颜色变化的程度可以判断出血便的程度。
较浅的颜色变化通常表示低度出血，而较深的颜色变化则可能暗示高度出血。
6. 注意事项在进行粪便隐血试验时，需要注意以下事项：•收集新鲜粪便样本能够提高测试的准确性。
•避免在检测前食用红肉、维生素C等可能影响结果的食物。
•严格按照操作步骤进行，以避免误差的发生。
通过粪便隐血试验可以及早发现消化道出血的迹象，有助于预防和治疗消化道疾病。
这项检测技术的简便性和准确性使其成为一种常用的筛查方法。
7. 应用范围粪便隐血试验在临床上有广泛的应用范围。
它可以用于早期胃肠道疾病的筛查，如胃溃疡、结肠炎和结肠癌等。
此外，该试验还可以用于监测患者治疗过程中出血情况的变化。
8. 优势和局限性粪便隐血试验有其优势和局限性：优势：•粪便收集简便、无创伤，适合于大规模筛查。
通过粪便隐血试验（FOBT）的实验操作，了解粪便隐血试验的基本原理、操作步骤和结果判断，掌握粪便隐血试验在消化道出血诊断中的应用价值。
二、实验原理粪便隐血试验是一种检测粪便中微量血红蛋白的方法，主要用于消化道出血的诊断。
当消化道出血时，血液中的红细胞被破坏，释放出血红蛋白。
血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶活性，能催化过氧化氢放出新生态的氧，将邻-甲苯胺氧化为邻-甲偶氮苯，呈现蓝色。
通过观察颜色变化，可以判断粪便中是否存在血红蛋白，从而判断是否存在消化道出血。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠2. 试剂：邻-甲苯胺冰乙酸溶液、1mol/L过氧化氢溶液、粪便隐血试纸3. 仪器：白瓷板、玻片、滤纸、竹签、滴管四、实验步骤1. 实验动物准备：取健康小鼠一只，禁食12小时，以便粪便中的食物残渣被排出。
2. 粪便采集：将小鼠放入代谢笼中，收集其新鲜粪便。
3. 粪便处理：用竹签挑取少许粪便，涂于白瓷板、玻片或滤纸上。
4. 检测步骤：a. 向粪便样本滴加邻-甲苯胺冰乙酸溶液2-3滴。
b. 再滴加1mol/L过氧化氢溶液2-3滴。
c. 混匀后立即观察结果。
5. 结果判断：根据颜色变化判断粪便中是否存在血红蛋白。
若出现蓝色，则表示阳性；若未出现蓝色，则表示阴性。
五、实验结果本次实验中，小鼠粪便隐血试验结果均为阴性。
本次实验中，小鼠粪便隐血试验结果均为阴性，说明小鼠消化道无出血。
粪便隐血试验是一种简便、快捷、经济的检测方法，对消化道出血的诊断具有重要的临床价值。
七、实验讨论1. 粪便隐血试验的原理和操作步骤：粪便隐血试验是基于血红蛋白中的亚铁血红素具有过氧化物酶活性的原理进行的。
实验操作主要包括粪便采集、粪便处理和检测步骤。
在检测过程中，需要注意试剂的配制和观察时间，以确保实验结果的准确性。
2. 粪便隐血试验的临床意义：粪便隐血试验是一种重要的消化道出血诊断方法。
通过检测粪便中的微量血红蛋白，可以早期发现消化道出血，有助于消化道疾病的诊断和治疗。
粪便隐血试验（OBT）及临床意义一、概述粪（大）便隐血是指上消化道出血小于5 ml，粪便中无可见的血液，且红细胞被消化破坏，显微镜检查不能发现红细胞的微量出血。
检查粪便隐血采用粪便隐血试验（occult blood test，OBT）。
二、检测方法目前，粪便隐血试验常用化学法或免疫法测定类中血红蛋白，也可联合测定类中转铁蛋白。
其中，免疫法粪便隐血试验是一种高灵敏度的测定方法，有胶乳凝集法、EIA 法、胶体金法和免疫层析法等。
此外，还有半自动、全自动的粪便隐血试验仪器。
化学法一、原理血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化H202作为电子受体使色原（如邻联甲苯胺）氧化而显色（如邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氨苯显蓝色）。
二、试剂1、10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液2、3%过氧化氢液。
三、操作1、用小木棍挑取少量粪便，涂在消毒棉签或白瓷板上。
2、滴加10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液2～3滴于粪便上。
3、滴加3%过氧化氢液2～3滴。
4、立即观察结果，在2分钟内显蓝色为阳性。
四、结果判定1、阴性：加人试剂2分钟后仍不显色。
2、阳性+：加人试剂10秒后，由浅蓝色渐变蓝色。
3、阳性2+：加人试剂后初显浅蓝褐色，逐渐呈明显蓝褐色。
4、阳性3+：加人试剂后立即呈现蓝褐色。
5、阳性4+：加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。
五、注意事项1、3%过氧化氢液易变质失效，须进行阳性对照试验，将过氧化氢滴在血片上，应产生大量泡沫。
2、齿龈出血、鼻出血、月经血等可导致阳性反应。
3、用具应加热处理（如试管、玻片、滴管等）以破坏污染的过氧化物酶。
4、也可选用中等敏感（0.3～1mg Hb/g粪便）的愈创木酯法，但必须选购质量优良的愈创木酯，配制成20g/L愈创木酯乙醇溶液，代替10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液，操作同上。
免疫法一、原理采用抗人血红蛋白的单克隆抗体或多克隆抗体，与粪便样品中的人血红蛋白特异性结合以检测类便中有无血液。
本试验不受动物血红蛋白的干扰，试验前不须禁食肉类。
粪便隐血试验（胶体金法）原理：应用胶体金免疫检测技术，双抗体夹心法。
在检验试纸条的检测线包被有抗人血红蛋白抗体，质控线包被有羊抗鼠IgG抗体，在检测试纸条加样的一端固定有另一抗人血红蛋白单克隆抗体标记的胶体金颗粒。
经收集处理的标本与胶体金颗粒混合后，如存在人血红蛋白时，样品有Hb 会与和胶体金上的抗体结合，可在检测线上出现红色色带。
标本要求：新鲜粪便标本。
标本应取自粪便的不同部位。
标本须 1 小时内测定完毕，因为标本留取时间较长血红蛋白会被细胞分解。
检测后的标本不保存。
试剂：粪便隐血试纸条。
蒸馏水使用万华普曼生物工程有限公司生产的“消康保”牌便隐血胶体金检测试纸。
规格：条型：1 人份/条×100 条/盒批准文号：国药准字S1******* 储.存条件和有效期原包装应储存于4-30 摄氏度，阴凉干燥处，有效期24 个月。
切忌冷冻或在已过有效期后使用。
试剂应在铝箔袋撕口后 1 小时内尽快使用。
操作步骤：待测样品、检测试纸或其他检测用材料等均在室温10 摄氏度~30 摄氏度平衡后取出。
.1 取一次性小样品杯，将样品杯标记后放在样品架上；.2 用采样棒取火柴头大小标本放于杯内，并置装有蒸馏水的小试管中，搅拌均匀。
.3 混匀后折断采便器尖端滴加于样品杯内即可；.4 将试纸条箭头所指的一端浸入标本溶液中，标本液面不要超过MAX标记线，等待紫红色条带出现。
测试结果应在 5 分钟时读取，10 分钟后判断结果无效。
结果判读：阳性：控制线（C）及反应线（T）位置各出现一条色带，表明标本中有隐性出血。
阴性：仅控制线（C）出现一条色带, 表明标本中无隐性出血。
无效：控制线（C）及反应线（T）或仅在反应线（T）出现一条色带，表明试验无效。
请用新检测试纸重试。
参考值：能检测出人血红蛋白不低于100mg/ml 的样本临床意义：适用于消化道的溃疡病、恶性肿瘤、结核、寄生虫病、炎症、痔疮等的早期发现和诊断。
操作性能：1.灵敏度：本品灵敏度0.2ug/ml。
粪便潜血试验就是筛查消化道肿瘤得有效手段,过去一直使用化学法检测粪便潜血,其中邻甲苯胺法为1983年中华医学会全国临床检验方法学术讨论会推荐得方法,经多年来临床检验应用,认为易出现假阳性结果。
近年来沿用胶体金法,但粪便中血红蛋白含量较高时会出现假阴性结果、目得:比较单克隆胶体金法与化学法测定粪便与胃引流物隐血。
方法:将38例临床确诊为上消化道出血患者得”柏油”样粪便与16份经镜检证实含红细胞得胃引流物标本分别用胶体金试纸、邻联甲苯胺与四甲基联苯胺尿隐血试纸测试其就是否含有隐血、结果:测试３8例”柏油＂样粪便标本,胶体金试纸阳性率为60。
5%,邻联甲苯胺与尿隐血试纸均为100％;测试1６份含红细胞得胃引流物标本,胶体金试纸阳性率为68。
8％,邻联甲苯胺为１0０％,尿隐血试为81。
3%、结论:高浓度血红蛋白以及血红蛋白被酸、碱化得标本与痰液等含大分子蛋白标本使胶体金法测定隐血得灵敏度下降,不适宜得pH可使该法特异性降低,而化学法所受影响较小、化学法与免疫胶体金法检测粪潜血得比较文章来自:＜a ｔａrget=’_blａnk'ｈrｅｆ＝’'〉全刊杂志赏析网(qｋｚz、ｎe t)〈/a〉原文地址:/8aｄ08aｆ7—1ｆf4—4a9a-9c36-818a9１7b６d31。
ｈｔm 【关键词】,大便潜血;邻联甲苯胺法;免疫胶体金［摘要］目得:探讨粪潜血二种检测方法得优劣与应用、方法:用邻联甲苯胺与便隐血胶体金检测试纸分别检测200例粪标本进行对照实验并分析。
结果:二者一致性符合率为90%。
结论:化学法灵敏度、特异性较胶体金法低,受饮食影响因素大,胶体金法有假阴性,故建议二者结合判断、［关键词］大便潜血;邻联甲苯胺法;免疫胶体金thｅcｏmparｉson between thｅｃhemiｃal method and immuｎogold method i ｎdｅtectｉng ｓeｄｏccuｌt ｂｌoodｗu zｉan,hｕjun,huａｎg li ying,et aｌ(１.ｆａngcun brａnch of ｇuaｎｇdｏng provｉncｅtcm,gｕanｇｚhou, ｇuang dｏng 5１03７0,ｃhina;2。
hospital oｆｔraditional cｈinesｅmｅｄｉcｉｎe,guaｎgzｈou, gｕangdｏng ５1021０,china)abｓtｒact:oｂｊectｉｖe ｔo explorｅthe cｏmparａbilitｙbeｔweｅｎｔhe c heｍｉcal ｍethｏd and imｍunogolｄmｅthod ｉｎｄetｅｃting sed ｏcculｔbloｏd、ｍethods tｏｄetecｔtｈe sｅd occulｔblooｄof ２0０ｓpecimｅns witｈboth o rtho toliｄine mｅｔhoｄａnd immunogold method、then analｙｓｅthｅrｅｓulｔs、r ｅsultｓthe coincｉdenｃe of ｔhe detectｉng results betweｅn tｈe two methｏdsｉｓ９0%.conclｕsiｏn fooｄａnｄｄrink impaｃｔthｅresulｔs of chｅｍicaｌm etｈod very mｕch.so ｃｈeｍiｃal mｅtｈｏd iｓlesssenｓｉｔｉｖe ａnd ｓpｅcific t ｈan imｍuｎｏgolｄｍｅthod。
ｂut immｕnogold metｈod also has falｓe positiｖereac tｉon,ｔherｅforｅwe suｇgeｓt detｅcting sed ocｃuｌt bloｏd wｉthｔhe both t ｗo metｈoｄｓ.ｋｅy woｒds:ｓed occult bloｏd;ortho toliｄine metｈｏd;mｍｕnｏｇoｌd m ethoｄ粪便潜血试验(ｆecaｌocculｔｂiｏoｄtｅｓt)就是诊断与监测消化道出血性疾病得有效常规检查,也就是发现消化道肿瘤得重要手段之一、目前最常用得方法有化学法(包括邻联甲苯胺法、潜血粉法、愈创木脂法)与免疫学方法(胶体金标记夹心免疫法)。
传统化学法成本低,但假阳性多、灵敏度低,对操作人员有致癌性;新兴得免疫胶体金法成本略高,但因其特异性好而越来越广泛使用,本文仅以邻联甲苯胺法与免疫胶体金法相比较,探讨二者在临床使用上得价值。
1 材料与方法1.1试剂便隐血胶体金检测试纸,北京万华普曼生物工程有限公司提供,批号;３％h２o２自配,邻联甲苯胺由上海远航试剂厂生产,冰乙酸及无水乙醇由广州东红化工厂生产,均为ar 级。
称取邻联甲苯胺1 g溶于冰乙酸及无水乙醇各５0 ｍl中,棕色瓶保存(4 ℃保存8周～１２周)。
1.2标本本院20０份无重复住院患者新鲜大便,均为成年人,女8９例,非月经期,男111例(均排除痔肛裂出血)。
1.3 方法每份标本均做邻联甲苯胺法与便隐血胶体金试纸检测、邻联甲苯胺法按全国操作规程,便隐血胶体金试纸法按说明书操作。
2 结果见表１。
表1 两种方法粪潜血结果邻联甲苯胺法(略)2。
１４例邻联甲苯胺法(阳性)胶体金法(阴性)中1例肺癌,大便墨绿色、性软;1例异位妊娠、2例cｏｐｄ,大便外观均为黄软。
2。
２16例邻联甲苯胺法(阴性)胶体金法(阳性)中１例黄色黏液便,cａd患者;3例大便黄、烂,分别就是ｃad、npｃ、ｃopd患者,余1２例外观均黄、软,其中呕吐查因1例、消化道出血4例、肺癌2例、肺部感染、copd、肝硬化、腹部肿物各1例,且16例胶体金法皆为弱阳性。
3讨论邻联甲苯胺法利用血红蛋白中得亚铁血红素具过氧化物酶活性,催化过氧化氢放出新生态氧,把受体邻联甲苯胺氧化成联甲偶氮苯而显蓝绿色。
任何有类似氧化物酶活性得物质都可影响此实验,如动物得血红蛋白,另外维生素ｃ、铁剂、绿色蔬菜均会造成假阴性［1］。
邻联甲苯胺法灵敏性低于胶体金法［１],故极少量得出血会造成邻联甲苯胺法(阴性)胶体金法(阳性)得结果、此时粪便外观通常无明显异常,如本文结果(2)外观均为黄色。
但如果血红蛋白在消化道停留时间过长,或受细菌分解等因素而降解,其与胶体金试纸上包被得抗体得相应抗原受到破坏时就会出现假阴性,若此时出血量在邻联甲苯胺法检测限上就会出现邻联甲苯胺法阳性而胶体金法阴性得结果,邻联甲苯胺法假阳性也会导致此模式。
另外当出血量大于胶体金法检测范围,随着血红蛋白含量增加,抗原抗体复合物反而减少,产生后带现象,免疫胶体金法出现假阴性,上述两种情况大便外观通常会有明显改变,只需将粪便溶液调配成一定浓度后检测,免疫胶体金法可获阳性结果。
由于免疫胶体金法只特异地针对人血红蛋白抗原表位,基本排除饮食与药物干扰,灵敏度与特异性均优于传统化学法,迄今尚未有假阳性得案例报道[2],故被wｈo与世界胃肠镜检查协会推荐做粪便隐血试验得一种较为确认得方法［3],且对操作者无损害,但其成本较化学法高、鉴于两种方法各有优缺点,笔者认为如果有条件得实验室应同时开展两种方法:二者皆为阳性判断为真阳性;化学法阳性而免疫胶体金法阴性者,若外观无改变者建议禁肉食、大量绿色蔬菜、某些已知有影响得药物2d～３d后复查,若外观有所改变者稀释重测免疫胶体金法;若化学法阴性而免疫胶体金法阳性者建议连续复查2次及做进一步检查、参考文献:［１]王建洲,陆希明.三种便潜血试验测定方法得比较［ｊ]。
哈尔滨医药,２005,２5(2): 13 14。
[２]陈高远,周文良,王惟,等、单克隆抗体金标法与“ａb液法”检测粪便隐血得比较［j].贵州医药,2０05,2９(5):466。
［３］youｎg gp,st john dｊ,winawｅｒsj,eｔａｌ。
choisｅof feｃal occu ｌt blood testｓfoｒcｏlorectalｃaｎｃeｒcsreening:recoｍmendatｉons baｓｅｄon peｒforｍanｃe cｈaracｔeｒistｉｃsｉn ｐopｕlatｉon studies:ａwｈo worlｄheal ｔh ｏrｇanizａｔion)aｎｄoｍｅd(woｒld organｉzａtion fｏｒdigestiｖe endosｃoｐy) report［j］。
aｍj ｇａstroeｎｔeｒol,2０0２,97(10):2４9９2507.1、广东省中医院芳村分院,广东广州5１０３70;２、广东省中医院,广东广州５１０120文章来自:＜a ｔarget='＿bｌａnk＇href＝＇’〉全刊杂志赏析网(ｑkzz、nｅt)</ａ＞原文地址:/8ａｄ０8ａf7—1ff4—４a9a—9c36-818a91７b6d３1、hｔm单克隆胶体金法与化学法测定隐血比较文章来自:＜a ｔａrgｅｔ=＇＿ｂｌank' ｈｒeｆ='＇＞全刊杂志赏析网(qkzz。
nｅt)＜/ａ＞原文地址:／7ｄｆ61ｅａe－ab8c-498a－ｂb33—326１1eｄaｃc７1.htm作者单位:广州医学院荔湾医院,广东广州５１0170【摘要】目得:比较单克隆胶体金法与化学法测定粪便与胃引流物隐血。
方法:将3８例临床确诊为上消化道出血患者得“柏油”样粪便与１6份经镜检证实含红细胞得胃引流物标本分别用胶体金试纸、邻联甲苯胺与四甲基联苯胺尿隐血试纸测试其就是否含有隐血。
结果:测试38例“柏油”样粪便标本,胶体金试纸阳性率为60、5%,邻联甲苯胺与尿隐血试纸均为1０0％;测试16份含红细胞得胃引流物标本,胶体金试纸阳性率为６8、8％,邻联甲苯胺为100%,尿隐血试为81。
3％。
结论:高浓度血红蛋白以及血红蛋白被酸、碱化得标本与痰液等含大分子蛋白标本使胶体金法测定隐血得灵敏度下降,不适宜得ph可使该法特异性降低,而化学法所受影响较小。
【关键词】单克隆胶体金隐血试验ｃomparison oｆmoｎocloｎal collｏｉdａl gold mｅｔｈｏd and cｈemical mｅtｈoｄin detecｔinｇocｃult bloodlｉu ｍeiｌing,huｏjiａn(ｔhe afｆｉｌiated liwaｎhospital oｆguanｇzｈou mｅdiｃal collｅge,gｕangzｈｏu,guangdｏng 510170,ｃｈiｎa)ａbｓｔrａcｔ:oｂjective ｔo ｃompare tｈe methoｄdｅｔeｒmｉning ｔhe ｏｃｃuｌt blood from stool and ｓtomaｃｈstｒａｉns bｙmonoclonaｌcｏlloiｄaｌgold metｈod aｎd chｅmical meｔhｏd。
