苯丙氨酸氨解酶基因

拟南芥苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因的研究进展孙海燕;全雪丽;付爽;吴松权【摘要】苯丙氨酸解氨酶(PAL)是催化苯丙烷代谢途径第1步反应的限速酶,广泛地参与植物生长发育过程中的各种生理活动.本文概述了拟南芥PAL基因的分子生物学和生理学研究进展,主要包括PAL基因的结构、表达特性、调控机制及其参与的植物生理学的意义,为进一步阐明PAL基因的功能提供参考依据.【期刊名称】《延边大学农学学报》【年(卷),期】2016(038)001【总页数】5页(P88-92)【关键词】拟南芥;苯丙氨酸解氨酶;表达;生理作用【作者】孙海燕;全雪丽;付爽;吴松权【作者单位】延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002【正文语种】中文【中图分类】Q943苯丙烷代谢途径是陆生植物生长和发育所必需的，是植物长期适应自然环境的结果[1-2]。

苯丙氨酸解氨酶(EC 4.3.1 5, PAL)催化L-苯丙氨酸(L-Phe)的非氧化脱氨基作用，生成肉桂酸，是生物合成苯丙烷类天然产物的第1步[3-4]，也是第1个被鉴定的植物“防御基因”[5]。

也是苯丙烷类代谢途径中研究最多的酶[6]。

肉桂酸是植物生长、发育和环境适应所必需的各种苯丙烷类物质的合成起始物[7]。

苯丙烷类化合物是植物中大量酚类化合物的前体，包括木质素、黄酮类、异黄酮类、香豆素、芪类和水杨酸等，它们在维持植物结构、抵御紫外线、形成花青素和植保素、保持花粉活力、信号转导与交流等方面发挥着重要作用 [1,5,8]。

自1961年Koukol和Conn首次描述PAL以来，苯丙氨酸解氨酶得到了广泛的研究[9]，它是控制苯丙烷途径生物合成去向的关键酶和限速酶[7,10]。

拟南芥是一种十字花科植物，广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究，已成为一种典型的模式植物，该植物具有个体小、生长周期快、形态特征简单、生命力强、基因组小、遗传操作简单等优点[11-12]。

苯丙氨酸解氨酶(PAL)检测试剂盒(苯丙氨酸比色法)简介：苯丙氨酸解氨酶(L－phenylalanine ammonia-lyase，PAL)是催化直接脱掉L-苯丙氨酸上的氨而生成反式桂皮酸的酶。

该酶多存在于高等植物、酵母、菌类可溶性部分物质，是1961年J.Koukol在大麦中发现的，推测其分子量约为，这是一个可把苯丙氨酸用于酚类化合物合成的酶。

在组织中的活性可随外界因素而发生显著变化，用光照、病伤害、植物激素处理等会使活性显著增加。

在多数情况下，在组织中活性增加时，酶发生失活作用，这时组织中具有活性酶的量很快就会减少，据认为这种失活是与类蛋白质物质作用有关。

测定细胞木质素合成途径中间代谢物及关键酶活性，可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。

Leagene苯丙氨酸解氨酶(PAL)检测试剂盒(苯丙氨酸比色法)检测原理是以苯丙氨酸作为底物，在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法，于分光光度计检测吸光度，以吸光度变化所需酶量进行计算。

该试剂盒主要用于植物组织的裂解液或匀浆液、血清等样品中内源性的苯丙氨酸解氨酶活性，尤其适用于检测水果中苯丙氨酸解氨酶活性。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、蒸馏水2、研钵或匀浆器3、离心管或试管4、低温离心机5、水浴锅或恒温箱6、比色杯7、分光光度计操作步骤(仅供参考)：编号名称TE040350TStorage试剂(A):PAL Lysis buffer250ml4℃避光试剂(B):PAL Assay buffer30ml4℃避光试剂(C):PAL终止液5ml RT使用说明书1份1、准备样品：①植物样品：取植物组织或水果中层果肉，加入PAL Lysis buffer，冰浴情况下充分捣碎研磨或匀浆，离心，留取上清液，冻存，用于苯丙氨酸解氨酶的检测。

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，冻存，用于苯丙氨酸解氨酶的检测。

植物苯丙氨酸解氨酶研究进展摘要苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase，pal，e.c4.3.1.5)是催化苯丙烷代谢途径第一步反应的酶，也是这个途径的关键酶和限速酶，对植物具有非常重要的生理意义。

综述了苯丙氨酸解氨酶的存在与分布、基本特性、生理代谢意义、抗病以及基因表达与调控等，为pal在植物抗病的应用上提供基础数据。

关键词苯丙氨酸解氨酶；生理作用；抗逆境；基因表达与调控中图分类号s661.1文献标识码a文章编号1007-5739(2009)01-0030-04苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase，pal，e.c4.3.1.5)催化l-苯丙氨酸解氨生成反式肉桂酸，是连接初级代谢和苯丙烷类代谢、催化苯丙烷类代谢第一步反应的酶，也是苯丙氨酸代谢途径的关键酶和限速酶。

莽草酸途径产生的莽草酸通过分枝酸、预苯酸经转氨作用生成苯丙氨酸，从而进入苯丙烷类代谢途径，苯丙烷类代谢可生成反式肉桂酸、香豆酸、阿魏酸、芥子酸等中间产物，这些中间产物可进一步转化为香豆素、绿原酸，也可以形成coa酯，再进一步转化为木质素、黄酮、异黄酮、生物碱、苯甲酸酯糖苷等次生代谢产物[1，2]。

一切含苯丙烷骨架的物质都由该代谢途径直接或间接生成。

在生物次生物质代谢中具有防紫外线伤害、抵抗病原体的侵害、保持花粉生活力及形成植物花青素等多种重要作用。

该酶在不同组织中、不同的内外因素调节下，含量水平及其基因表达的时空方式均有所不同。

1pal的存在和分布1961年koukal和conn首次在绿色植物大麦幼苗中发现了pal，并进行了分离纯化[3]。

随着研究的深入，该酶已被固定化，用于工业化生产苯丙氨酸。

至今，pal已在所有绿色植物中发现，在真菌、细菌、藻类中也有存在。

不同植物中pal活性不同，在同一株植物的不同组织部位，pal活性也不同。

一般越嫩的部位pal活性越高，如杨树的幼叶、顶芽、幼茎中pal活性最高，而老茎和成熟叶中pal则较低[4]。

苯丙氨酸解氨酶摘要：本文从前言介绍了PAL基本特性（基本性质、酶学性质和分子结构）、苯丙氨酸解氨酶的研究意义（植物生理代谢上的意义和医疗上的意义）、PAL 研究现状（产PAL微生物的选育及其稳定性研究和植物PAL基因的克隆与表达）和PLA 发展趋势四个方面对苯丙氨酸解氨酶进行综述。

Abstract: The article of phenylalanine ammonia lyase were reviewed from the basic characte- ristics of PAL (the basic nature of the enzymatic properties and molecular structure), the signifi -cance of the phenylalanine ammonia-lyase (the meaning of Plant Physiology and metabolism, and medical significance), PAL Researching (producing PALBreeding and stability of microbial and plant PAL gene cloning and expression) and the development trends of PLA.关键词：苯丙氨酸解氨酶、PAL基本性质、PAL酶学性质、PAL分子结构、植物生理代谢作用、细胞分化和木质化、植物色素形成、根瘤、抗逆境、抗虫性和抗病性、PAL选育、活性和稳定性研究、基因的克隆与表达、苯丙烷类代谢Key words:Phenylalanine ammonia lyase, the basic nature of the PAL, PAL enzymatic properties, the PAL molecular structure, plant physiology and metabolism, cell differentiation and lignification, plant pigments formed nodules, stress resistance, insect resistance and disease resistance, PALbreeding, activity and stability of gene cloning and expression of phenylpropanoid metabolism .一、前言1.PAL的基本特性1.1 PAL的基本性质苯丙氨酸解氨酶( phenylalanine ammonia- lyase, PAL,EC4. 3. 1. 5)是连接初级代谢和苯丙烷类代谢、催化苯丙烷类代谢第一步反应的酶，是苯丙烷类代谢的关键酶和限速酶，也是苯丙烷类代谢途径中研究最多的酶。

2010年12月第33卷第4期湖南师范大学自然科学学报Journa l o f N atura l Sc ience ofH unan N o r m al U niversityV o.l33N o.4D ec.,2010水稻苯丙氨酸解氨酶的生物信息学分析康晓慧1*,雷桅2,张梅1(11西南科技大学生命科学与工程学院,中国绵阳621010;21中山大学生命科学学院,国家教育部食品与健康工程研究中心,中国广州510650)摘要苯丙氨酸解氨酶(PAL)是水稻防卫反应中的关键蛋白,采用生物信息学工具和方法对G enBank中的日本晴水稻p al基因的核苷酸序列及其相应氨基酸序列进行预测和分析,获得了其分子结构、理化性质、系统演化和生物学功能等重要参数.结果表明:水稻pal基因序列只有开放阅读框,其编码蛋白亲水性较强,无跨膜转运肽,且定位于细胞基质,二级结构以随机卷曲和A-螺旋为主要构件,三维建模成功,并明确了多个功能位点.关键词水稻;苯丙氨酸解氨酶;生物信息学;防卫基因;抗病性中图分类号Q946.5;S511.2+2文献标识码A文章编号1000-2537(2010)04-0089-06B i o i n f or m ati c Analysi s of Phenyl a l a nine Ammoni a-Lyase Gene i n O ryza S a ti vaKANG X iao-hui1,LE I W ei2,Z HANG M ei1(1.Co llege o f L ife Sc i ence and Eng i neering,Sout hw est U n i versity of Sc i ence and T echno logy,M ianyang621010,Chi na;2.F ood and H ea lth Eng i neering R esea rch Center of State Educa ti onM i n istry,College o f L ife Sc i ence,Sun Y at-sen U n i versity,G uangzhou510650,China)Abst ract Pheny lalan i n e a mm onia-lyase(PAL)p lays a cr ucia l ro l e in plan t defense m echanis m.The nucleo-ti d e and its corresponding a m ino ac i d sequence of pal gene fro m Oryza s ativa(japonica cu lti v ar-g r oup),reg istered i n GenBank,are analysis by the b i o i n f o r m atic m ethod,and subsequentl y so m e i m portant para m eters are ga i n ed i n-clud i n g m o lecu lar structure,physi o che m ica l properti e s,phy logenetic evolution and b iolog ical functi o n.The result is as f o llo w i n g:there is on ly ORF in O s pal fu l-l leng th sequence,and its coding prote i n has no trans m e m brane to-polog i e al str ucture,and located in cytoplas m,w ith A-heli x and rando m coil asm ai n co mponents in secondary struc-ture.The3D m odel is constr ucted,and so m e functionalm otifs are deter m i n ed.K ey w ords Or yza sativa;phenyla lanine a mm on ia-lyase;b i o i n fo r m atics;defense gene;resistance抗病性是植物与其病原生物在长期的协同进化过程中相互适应、相互选择所形成的一种可遗传特性.植物被病原物侵染后,会发生一系列生理变化和防卫反应,包括植保素和木质素等抗病物质的合成和积累,其中苯丙烷类代谢与植物的抗病性密切相关,苯丙氨酸解氨酶(pheny lalan i n e a mm onia-lyase,PAL)是该途径中的第一个关键酶,也是限速酶.它催化L-苯丙氨酸非氧化性脱氨生成反式肉桂酸(c i n na m ic aci d,C A),即是植保素、木质素、类黄酮和某些酚类等生物合成的通用前体.因此,该酶在植物病理学研究中有极重要的地位.P AL为多基因家族所编码,但遗传特性相当保守,目前已从马铃薯(Solanu m tuberos um)、水稻(Or yza sativa)、烟草(N ico tiana t a bacum)和黄瓜(Cucu m is sativus)等多种植物中克隆了pal基因,并将其作为植物抗病机制研究的重要内容.水稻是世界上最重要的粮食作物之一,而病害给水稻的产量和质量造成了巨大的损失,因此水稻抗病的分子机理和遗传改良成为一项重要的课题,而作为关键防卫基因的pal则有望成为理想的调控靶点.粳稻品种日本晴(N i p ponbare)是单子叶植物基因组学研究的模式植物,测序发现其pal基因家族包含9个成员.本文利用生物信息学的方法,选取其中一个成员基因,对其核苷酸及相应氨基酸序列的理化性质、结构特征、生¹收稿日期:2010-10-22基金项目:国家/十一五0科技支撑计划基金资助项目(2006BAD08A01)*通信作者,E-m a i:l xhu i k09@126.co m化功能和系统演化等进行了预测和分析,为今后深入研究PAL 蛋白的酶学特性和植物病害胁迫的分子机理提供一定的理论参考.1 材料与方法粳稻品种日本晴的苯丙氨酸解氨酶(PAL)核苷酸与氨基酸序列均来自于GenBank 中已登录的数据信息:水稻Oryza sativa (japonica cu ltivar -group)(A ccession :AY224546).利用Vector NT I Su it 8等序列分析软件和www .ncb.i nl m .nih .gov 、www .expasy .org 等网站提供的各种在线生物信息学工具进行预测和分析.核苷酸和氨基酸序列的分子结构和理化性质分析使用ProtPara m 工具和V ecto r NT I Su it 8软件完成[1];序列同源性比对使用Vector NTI Su it 8完成;分子系统发生树使用C lusta lX 软件比对后在M EGA3的Phy logeny 中以N eighbor -Jo i n i n g 方法构建[2];亚细胞定位情况的考察使用Tar getP 1.1Server 在线完成[3];跨膜结构域和疏水性分析分别使用TMHMM [4]和ProtSca l e [5]完成;m o tif 和蛋白质功能分别用Scanprosite [6]和Pr o tf u n [7]分析;蛋白质二级结构预测和三级建模分别使用GOR [6]和S W ISS -MODEL[8-9]完成,3D 模型在W ebLab V ie w er L ite 4.2软件中编辑.2结果与分析图1 水稻PAL 的核苷酸及其编码氨基酸序列2.1 水稻pal 基因的核酸及相应氨基酸序列的分子结构和理化性质分析水稻pal 基因的全长mRNA 序列及其推导的氨基酸序列如图1所示,利用Vector NT I Su it 8软件分析得到的Os p al 基因的核苷酸序列及其相应氨基酸序列的结构和性质数据,发现Os pal 基因全长为2136bp ,其中开放阅读框(ORF)长为2133bp ,起始密码子为ATG ,终止密码子为TGA ,3c 和5c 非编码区(UTR)均不存在.水稻Os pal 基因编码蛋白的分子式为C 3188H 5129N 891O 973S 24,相对分子质量为72273,等电点为6.12,摩尔消光系数为37590,肽链长为671aa ,其中含带电氨基酸27.72%,极性氨基酸23.85%,疏水性氨基酸38.15%,酸性和碱性氨基酸比例为11.33%和10.13%,而含量最丰富的4种氨基酸占比为A la :10.88%;Leu :10.13%;Va:l 8120%;G ly :7.90%.90 湖南师范大学自然科学学报 第33卷2.2 水稻pal 基因的氨基酸序列的比对分析选取水稻(japonica cu ltivar -group)等6条植物PAL 氨基酸序列,在Vector NT I 8软件中进行多重比对分析.分析结果用不同颜色显示(图2),颜色越深的表示同源性越高,最深的区域则表示可能存在的重要功能图2 水稻PAL 和其他植物PAL 的氨基酸序列多重比对注:一致位点显示为黑底白字,保守位点显示为灰底白字,其他显示为白底黑字.活性位点标注*,M I O 区用方框表示.S alvia m iltiorrh i za (GenPept accessi on N o .:ABR14606);Tri foli um p retense (GenPept accession No .:BAE71252);Dauc u s carota (GenPept accessi on No .:BAA23367);Ipo m oe a ba t a t a s (GenPept access i on No .:BAA11459);N ic otiana t a bac um (GenPept access i on N o .:BAA22947);O ryza sa tiv a (Gen-Pep t access i on No .:AAO72666).域.分析结果显示所选植物PAL 具有较高的同源性,一致性达到57.4%,可见PAL 编码区高度保守,但是在N 端也表现出较明显的长度和组成上的变异性.推测这可能是由于苯丙烷类途径是植物初生代谢转向次生代谢的重要通路,广泛存在于植物体中,而作为苯丙烷类化合物生物合成途径中的第一个关键酶P AL 必须保持足够的遗传稳定性和演化趋同性.此外,在保守的PAL 比对图谱中,发现水稻PAL 具有典型的苯丙氨酸91第4期 康晓慧等:水稻苯丙氨酸解氨酶的生物信息学分析和组氨酸解氨酶的标志性模式,该保守基序(GT I T ASGDLVPLSY I A G )被包埋在酶活性中心;此外,也存在已查明的M I O 域,它通过A la -Ser -G ly 三肽的自动环化合脱水生成,毗邻底物结合位点,并负责产物E -肉桂酸酯/氨的催化形成.2.3 水稻pal 基因的氨基酸序列的分子系统进化树分析将9条来自不同植物的P AL 氨基酸序列在C lustal X 软件中进行完全比对后,在MEGA3软件中按照N eighbor -Jo ining 方案进行分子进化树分析,获得PAL 氨基酸序列的分子进化树分析结果(如图3).进化树用M EGA3软件基于Ne i g hbor -Jo i n i n g 方法(重复1000次)构建.遗传距离显示在分支上.9种植物的P AL 氨基酸序列聚成3支:甘薯、番薯和烟草聚成第1支,它们的多酚类物质含量较高;粘毛黄芩、丹参、豌豆和胡萝卜聚成第2支,前二者是主产黄酮活性成分的草药,后二者是含有丰富的香豆素和花青素等的蔬菜;马蹄竹和水稻聚成第3支,这两种植物的木质素合成能力较强,且同属禾本科.该进化树除反映了这9种植物间的亲缘关系外,也反映了不同植物类群所含苯丙素类化合物的种类和含量差异,即说明该指标与植物的系统演化进程密切相关.苯丙烷类代谢作为植物次生代谢的起始途径,广泛存在于所有植物,其衍生途径随着生命进化而分化出黄酮类、木质素类、植保素类等某些植物的主流次生代谢通路,而PAL 作为苯丙烷类途径的第一个关键酶,显然在植物的功能分化和系统进化过程发挥着重要作用.因此,以PAL 序列分析作为分子指标进行的遗传聚类,对于系统分类和自然进化研究具有一定的参考价值,同时也反映出植物的抗病性与植物本身的种质特性和进化水平密切相关.图3 水稻PA L 家庭和其他植物PAL 的分子进化分析2.4 水稻pal 基因编码蛋白的亚细胞定位和功能结构域分析TargetP 1.1Server 在线工具分析结果显示,水稻PAL 定位于细胞质基质,且无转运肽,预测可靠性等级均为2.可见水稻P AL 在游离核糖体上起始合成后,不进行蛋白转运,而是继续保留在细胞质基质中,直接催化苯丙素类化合物的生成.PAL 的多个重要保守结构域在O sP AL 蛋白中也被找到,包括S 213、Y 120、L 148、N 269、Q 357、Y 360、R 363、F 409、Q 497和4-m ethy li d enei m idazo le -5-one(M I O),这些区域对于PAL 的底物结合、催化活性和M I O 形成都至关重要.这与欧芹的实验结果一致,表明水稻PAL 也属于PAL 蛋白家族.图4 水稻PAL 蛋白的跨膜结构域预测2.5 水稻pal 基因编码蛋白的跨膜结构域和疏水性预测和分析用T MHMM Server v .2.0对水稻PAL氨基酸序列的跨膜结构域进行预测,结果如图4所示,水稻P AL 整条肽链都位于细胞膜内,也即是水稻P AL 不存在跨膜结构域,结合上述转运肽的预测,可以推断,水稻PAL 在细胞质基质中合成后,不经蛋白转运,直接锚定于细胞质基质中的特定部位行使催化功能.这与上述亚细胞定位分析结果相一致.92 湖南师范大学自然科学学报 第33卷图5 水稻PA L 蛋白的疏水性预测由ProtSca le 进行水稻pal 基因编码蛋白的氨基酸序列的疏水性预测结果表明(图5),多肽链具有最低分值-2.778,亲水性最强;而最高分值为2.389疏水性最强.整条多肽链表现为亲水性,但没有明显的亲水区域.结合跨膜结构域的预测结果,可以推断,水稻PAL 不存在明显的疏水区域,与Os PAL 不存在跨膜结构域的特征相吻合.2.6 水稻pal 基因的氨基酸序列二级和三级结构预测和分析GOR4在线工具预测水稻PAL 氨基酸序列的二级结构,结果如图6所示,水稻PAL 多肽链中,随机卷曲占44.02%,A -螺旋占43.88%,延伸链占12.10%,即随机卷曲和A -螺旋是OsPAL 多肽链中的主要结构元件,延伸链散布于整个蛋白质中.图6 水稻PAL 蛋白的二级结构预测在PROST I E 中通过与已知物种PAL 功能位点的比对和计算,成功预测了水稻P AL 的M oti,f 发现OsPAL 含有5个重要的基序,分别是苯丙氨酸与组氨酸标记(Pheny lalan i n e and histi d i n e a mm on i a -l y ases signature)(153~168GT I T ASGDLVPLSY I A ,153~169GTI TASGDLVPLSY I A G),氨基化位点(183~186DGKK ),蛋白激酶C 磷酸化位点(Prote i n kinase C phosphory lation site)(16~18SLR,74~76SHR,172~174TGR,260~262T HK,452~454SAR ,513~515SAR,517~519SEK,648~650SER),酪氨酸激酶II 磷酸化位点(Case i n k-i nase II phosphory lation site)(335~338SVND,523~526TA I D,532~535SYAD,575~578TAFE ,635~638SPGE ),N-糖基化基序(N-g l y cosy lati o n m otif)(99~102NGSD )和N-肉豆蔻酰化位点(N-m yristoy lation site)(20~25GQVAAV,65~70GVTTGF ,95~100GI FGNG ).再将水稻PAL 氨基酸序列上传到S W ISS -MODEL 的建模服务器中进行PAL 结构的三维建模,通过同源搜索和比对,以殴芹(Petroselinum crispu)为模板初步构建了O sP AL 的三维模型,然后在V ie w er L ite 4.2软件中进行序列编辑和位点设置,获得OsPAL 的三级结构模型,相关功能位点见标示于图7.图7 水稻PA L 的三维建模及重要基序93第4期 康晓慧等:水稻苯丙氨酸解氨酶的生物信息学分析94湖南师范大学自然科学学报第33卷3结论与讨论苯丙氨酸解氨酶在木质素、植保素等植物抗病物质的代谢途径中起着重要作用,在水稻的抗病机制研究中也被公认为是重要的生理指标.生物信息学是后基因组时代,以计算机科学技术为平台,分析并挖掘生物学数据,从而为实验研究提供理论依据的新兴学科.本文利用生物信息学软件和方法,对日本晴水稻防卫基因pal的结构性质、生化功能和系统进化等进行了预测和分析,发现O s pal基因的核苷酸序列只包含ORF,缺少两端UTR,无跨膜结构域和质体转运肽,定位于细胞质基质.近年的研究也发现,细胞间质部分P AL活性最高,电镜技术显示PAL分散在细胞的基质中.这些实验结果也间接地验证了本定位预测的可能性.本项研究明确了P AL蛋白的二级结构以A-螺旋和随机卷曲为主,三维建模成功,并明确了多个功能基序.这些重要生物学参数的获得为进一步研究PAL的酶学性质和水稻的抗病机制奠定了理论基础.PAL作为抗病性指标蛋白的水稻生物学研究已有诸多报道,但大多是以PAL酶活变化表征抗病能力强弱的生化研究.本文解析了OsPAL蛋白的分子结构,并描述了其细胞学特性,将有助于深入阐述水稻病理生理与抗性获得机制;而对O s pal基因的序列和系统学演化分析结果,将为基于O s pal的基因操作和遗传工程提供重要的调控靶点.因此,本项研究对于水稻抗病性分子育种也有重要参考价值.参考文献:[1]LEIW,LUO K M,S HU I X R,et al.Co m pute si m ulati on to charac terize structure and functi on o f chalcone synt hase from scute-llaria ba ica lensis georg i[J].M o l ecular B i 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Ｎｏ．７．２００６ｔｒｅｈａｌｏｓｅ－６－ｐｈｏｓｐｈｏｎｔｅｓｓｙｎｔｈａｓｅ（ＴＰＳ１）ｇｅｎｅｆｒｏｍＳａｃ－ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ［Ｊ］．ＭｏｌＣｅｌｌｓ，２０００，１０（３）：２６３－２６８［１６］ＡｊａｙＫ．Ｇａｒｇ，ＪｕｋｏｎＫｉｍ，ＴｈｏｍａｓＧ，ｅｔａｌ．Ｔｒｅｈａｌｏｓｅａｃ－ｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎｒｉｃｅｐｌａｎｔｓｃｏｎｆｅｒｓｈｉｇｈｔｏｌｅｒａｎｃｅｌｅｖｅｌｓｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｂｉｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓｅｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｌｌＡｃａｄＳｃｉ，２００２，９９（２５）：１５８９８－１５９０３［１７］张树珍，郑学勤．基因枪介导甘蔗遗传转化研究初报［Ｊ］．热带作物学报，２００１，２２（１）：３５－４１［１８］王自章，张树珍，杨本鹏，等．甘蔗根癌农杆菌介导转化海藻糖合酶基因获得抗渗透胁迫能力增强植株［Ｊ］．中国农业科学，２００３，３６（２）：１４０－１４６［１９］赵恢武，陈杨坚，胡莺雷，等．干早诱导性启动子驱动的海藻糖－６－磷酸合酶基因载体的构建及转基因烟草的耐早性［Ｊ］．植物学报，２０００，４２（６）：６１６－６１９苯丙氨酸解氨酶（Ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅａｍｍｏｎｉａ－ｌｙａｓｅ，ＰＡＬ，ＥＣ．４．３．１．５）广泛存在于各种植物和少数微生物中，催化Ｌ－苯丙氨酸（Ｌ－ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ，Ｌ－Ｐｈｅ）脱氨生成肉桂酸和氨，是植物体内次生代谢的关键酶和限速酶。

在植物形成次生物质如木质素、植保素等中起重要作用，对植物生长发育、抵御病虫害、防紫外辐射及构成植物支撑系统等方面具有重要意义。

自Ｋｏｕｋｏｌ首次从绿色植物中发现并分离纯化出苯丙氨酸解氨酶的研究进展贺立红１，２，张进标３＊，宾金华３（１．仲恺农业技术学院生命科学学院，广州５１０２２５；２．华南农业大学园艺学院，广州５１０６４２；３．华南师范大学生命科学学院，广州５１０６３１）摘要：对苯丙氨酸解氨酶的分布、基本特性、分子结构、各种因子对其活性的影响和生理功能方面作了简要的概述，旨在为该酶的进一步研究提供参考。