硅胶柱层析色谱基本知识汇总

硅胶柱色谱原理硅胶柱色谱是一种常用的色谱分离技术，它基于样品分子在固定相和流动相之间的分配行为，通过不同分子在这两种相中的分配系数的差异来实现分离。

在硅胶柱色谱中，硅胶作为固定相，流动相则是溶解有机物的有机溶剂。

下面我们将详细介绍硅胶柱色谱的原理。

首先，我们来看一下硅胶柱色谱的固定相——硅胶。

硅胶是一种多孔性的固体材料，具有较大的比表面积。

这种多孔性结构使得硅胶具有很强的吸附性能，能够与待分离物质发生吸附作用。

在色谱柱中填充硅胶后，待分离物质将会在硅胶表面上发生吸附和解吸现象，从而实现分离。

接下来，我们来介绍流动相的选择。

在硅胶柱色谱中，流动相通常是一种有机溶剂，如甲醇、乙腈等。

有机溶剂的选择要根据待分离物质的特性来确定，以保证待分离物质能够在固定相和流动相之间发生分配行为。

流动相的选择对色谱分离的效果有着重要的影响。

在实际的色谱分离过程中，样品溶液首先被注入色谱柱，待分离物质会在硅胶表面上发生吸附作用，然后随着流动相的不断流动，待分离物质会在固定相和流动相之间不断分配，最终实现分离。

在这个过程中，流动相的流速、硅胶的孔径大小、待分离物质的亲和性等因素都会对分离结果产生影响。

除了上述基本原理外，硅胶柱色谱还可以通过改变流动相的成分、流速、温度等条件来实现对待分离物质的更精确分离。

此外，硅胶柱色谱还可以与其他检测技术相结合，如紫外检测、荧光检测等，以实现对不同化合物的定量分析。

总的来说，硅胶柱色谱是一种简单、快速、高效的色谱分离技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。

通过对样品分子在固定相和流动相之间的分配行为进行精确控制，硅胶柱色谱能够实现对复杂混合物的分离和分析，为科研和生产提供了重要的技术支持。

希望本文的介绍能够帮助大家更好地理解硅胶柱色谱的原理和应用。

柱层析硅胶
1.原理
柱层析硅胶的原理是根据原理相同的物质在不同条件下移动速度不同的特性，将样品在填充于柱中的硅胶中进行分离。

硅胶作为非极性物质，能够吸附极性物质，不同的硅胶粒度对样品的分离效果均不同。

2.分类
柱层析硅胶根据不同的粒度、孔径及强度，可分为不同的类型。

常见的有：
①L类型：中等孔径（100-200Å），对大多数化合物有良好的分离效果；
3.性质
柱层析硅胶的性质主要包括吸附性、表面积、孔径和粒径等。

其中吸附性越好，分离效果越好，但是也容易出现过度吸附的问题。

硅胶的表面积、孔径和粒径越小，其表面积和孔径比就越大，样品与硅胶的接触面积越大，吸附能力也就越强。

4.注意事项
在柱层析实验中，应注意以下事项：
①硅胶的选择应根据样品的性质和对分离效果的要求来进行。

②实验前要进行柱层析硅胶表面修饰，保证硅胶的表面活性。

③样品在加入前应先进行前处理，如过滤、浓缩或化学修饰等，以保证样品质量。

④严格控制柱层析条件，如移相剂的类型和浓度、流速、温度等，以保证分离效果。

⑤在柱层析后，对分离得到的物质进行鉴定和分析，以判断分离效果。

在实验中，应注意操作安全，避免化学品泼洒和误吸等意外情况的发生。

5.总结。

硅胶柱层析[整理版]硅胶(Silicon dioxide)别名:硅橡胶是一种高活性吸附材料，属非晶态物质，其化学分子式为mSiO2?nH2O。

不溶于水和任何溶剂，无毒无味，化学性质稳定，除强碱、氢氟酸外不与任何物质发生反应。

各种型号的硅胶因其制造方法不同而形成不同的微孔结构。

硅胶的化学组份和物理结构，决定了它具有许多其他同类材料难以取代得特点:吸附性能高、热稳定性好、化学性质稳定、有较高的机械强度等。

硅胶根据其孔径的大小分为:大孔硅胶、粗孔硅胶、B型硅胶、细孔硅胶。

硅胶层析性状:该产品为白色均匀颗粒，主要成分为二氧化硅，由优质硅胶为原料加工制成。

其主要特点是能通过对混合物质中的不同成分吸附保留时间的差异，达到分离提纯的目的。

依其纯度又分为工业级粗孔柱层析硅胶、试剂级柱层析硅胶。

用途:主要用于石油产品的精制，脱除芳烃物质或用于中草药有效成分的分离提纯，高纯度物质的制备等。

规格:国际惯例:63-212μm(70-230目);38-63μm(230-400目)国内常规:150-250μm (60-100目);75-150μm (100-200目);45-75μm (200-300目)(也可按用户需求加工成其他规格 )薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上，形成薄层。

把欲分离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶剂展开，使混合物得以分离的方法。

由于层析在薄层上进行故而得名。

薄层层析是一种微量、快速的层析方法。

它不仅可以用于纯物质的鉴定，也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。

还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。

根据分离的原理不同，薄层层析可以分为两类:用吸附剂铺成的薄层所进行的层析为吸附薄层层析;用纤维素粉、硅胶、硅藻土为支持剂铺成的薄层，属于分配薄层层析。

薄层层析中以吸附薄层为多用，吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶。

吸附TLC?固定相为吸附剂?氧化铝、硅胶。

(较多用)TLC?, 分配TLC?固定相为液态(水)?固定相吸苷在支持剂上。

硅胶柱色谱原理
硅胶柱色谱是一种常用的分离和检测技术，它利用硅胶作为固定相，通过流动
相在柱中的分配和吸附作用来实现样品的分离。

硅胶柱色谱原理是基于不同化合物在硅胶上的吸附性能不同，从而实现它们在流动相中的分离。

在硅胶柱色谱中，流动相首先通过柱子，然后样品溶液被进样器送入柱中。

样
品中的化合物会在硅胶上发生吸附作用，不同化合物的吸附能力不同，因此它们会在柱中以不同速度迁移。

这样，就实现了化合物的分离。

随着流动相的不断通过，吸附在硅胶上的化合物会逐渐被洗脱出来，最终被检测器检测到。

硅胶柱色谱的分离原理是基于化合物在固定相上的吸附性能不同。

这种吸附性
能受到化合物分子结构的影响，通常来说，极性化合物在硅胶上的吸附能力较强，而非极性化合物的吸附能力较弱。

因此，当样品中含有不同极性的化合物时，它们会在硅胶柱中发生不同程度的吸附，从而实现分离。

除了吸附性能的差异，硅胶柱色谱的分离原理还受到流动相的影响。

流动相的
成分和性质会影响化合物在硅胶上的吸附和洗脱过程，从而影响分离效果。

因此，选择合适的流动相对于硅胶柱色谱的分离效果至关重要。

总的来说，硅胶柱色谱的原理是基于化合物在硅胶上的吸附性能不同而实现的。

通过合理选择流动相和固定相，可以实现对样品中化合物的高效分离和检测。

这种技术在化学、生物、环境等领域都有着广泛的应用，为科研和生产提供了重要的分析手段。

硅胶柱层析一、硅胶柱层析原理根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

二、硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸三、硅胶柱层析惯用方法1.称量200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。

干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。

2.搅成匀浆加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。

如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。

如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。

氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。

如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

3.装柱将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。

随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。

4.压实沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。

柱床约被压缩至9/10体积。

无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样干法湿法都可以。

海沙是没必要的。

上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。

然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

6.过柱和收集柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。

太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。

收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。

7.检测要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。

硅胶柱层析一、硅胶柱层析的原理利用吸附原理，即利用硅胶对中药混合物中各种成分吸附能力的差异，而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。

二、硅胶柱层析的操作方法及注意事项1、装柱操作要点：装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏。

有干法装柱和湿法装柱两种方法（1）干法装柱：将硅胶通过漏斗装入柱内，中间不应间断，形成一细流慢慢加入管内。

也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。

柱装好后，打开下端活塞，然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气，并保持一定液面。

（2）湿法装柱：将最初准备使用的洗脱剂装入柱内，打开下端活塞，使洗脱剂缓慢流出。

然后把硅胶慢慢连续不断地倒入柱内（或将硅胶与适量洗脱剂调成混悬液慢慢加入柱内，），硅胶依靠重力和洗脱剂的带动，在柱内自由沉降，此间要不断把流出的洗脱剂加回柱内保持一定的液面，直至把硅胶加完并在柱内沉降不再变动为止。

然后在硅胶上面加一小片滤纸或少许脱脂棉。

根据加样量控制洗脱剂液面至一定高度。

匀浆法：搅成匀浆。

加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。

如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。

如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。

氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。

如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

2、上样将欲分离的样品溶于少量装柱时用的洗脱剂中，制成体积小、浓度高的样品溶液，加入层析柱中硅胶面上。

如样品不溶于装柱时用的洗脱剂，则将样品溶于易挥发的溶剂中，并加入适量硅胶（不超过柱中硅胶全量的1/10）与其拌匀，除尽溶剂，将拌有样品的硅胶均匀加到柱顶（始终保持洗脱剂有一定的液面），再覆盖一层硅胶即可。

上样时注意沿着柱内壁慢慢加入，始终保持硅胶上端表面平整；上样量为硅胶的1/60~1/30。

3、洗脱洗脱剂的选用可通过薄层色谱筛选，一般TLC展开时Rf 值为0.2~0.3的溶剂系统是最佳的洗脱系统，采用梯度洗脱法洗脱。

色谱法是从混合物中分离组分的方法，能够分离物化性能差别很小的化合物。

并且兼具有分离和分析两种功能，能排除组分间的相互干扰，并能将组分逐一进行定性、定量分析，而且还可制备纯组分。

因此在成分复杂的样品分析等方面具有广泛的应用。

发展：1903年，俄国植物学家Michael Tswett 向填充碳酸钙的柱中注入植物色素的石油醚萃取物，然后用石油醚冲洗，发现柱中出现数条相互分离的色带，层析的研究由此展开。

但当时并未受到重视。

直到1931年，在氧化铝和碳酸钙柱体上以制备规模分离了αβ胡萝卜素，色谱技术才开始受到化学家的重视1938年出现液相色谱，使原来色谱法的适用范围已扩展至无色物质。

20世纪40年代，科学家利用硅胶进行液液分配色谱分离，进一步扩大色谱法的应用范围。

从而使色谱法逐步发展成为一种重要的分离分析手段。

在此基础上，又发展了纸色谱、薄层色谱以及各种类型的色谱方法。

20世纪50年代初，气相色谱开始应用于分析化学方面。

能够快速、高效的分离，并且采用高灵敏度的检测器以及自动记录等装置，是分析方法趋向自动化。

但气相色谱对难以气化和热不稳定的物质有局限性，因此应用受到一定限制，20世纪60年代末，出现了高效液相色谱，它兼有液相和气相色谱的优点。

特点：层析分离精度高、设备简单、操作方便。

根据各种原理进行分离的层析法普遍应用于物质成分的定量分析与检测。

广泛应用生物物质的制备分离和纯化，成为生物下游加工过程最重要的纯化技术之一。

处理量小，可以间歇操作。

分类：色谱法从不同的角度有不同的分类方法，通常可根据以下方式进行分类。

分子流动性：流动相是气体、液超临界流体是分别称为。

操作方法：分离机制操作压力硅胶柱色谱：硅胶柱色谱的原理是利用混合物中的各组分对固体吸附剂（也就是硅胶）的吸附能力不同而达到分离的层析方法。

操作流程主要有装柱、加样、洗脱三个方面。

装柱：其中装柱的方法通常有两种。

干法装柱和湿法装柱。

其中，干法装柱首先是要将吸附剂慢慢加入到柱中，必要的时候可以用吸耳球等软物轻轻敲打层析住，使填料压实，或者小心地用平物将其压紧。

硅胶柱层析硅胶柱层析是一种常用的化学分析技术，其实际应用范围十分广泛，从石油然、医药和食品行业到环境监测和地质探测等，均有较多的应用实例。

本文主要介绍硅胶柱层析的基本原理和工作原理，以及与传统柱层析相比，硅胶柱层析优势明显的方面。

硅胶柱层析是一种基于分子间相互作用实现分离的化学分析技术，是一种在柱芯内以非常小的有机聚合物分子、离子膜、金属离子和其它活性体等作为分子亲和层，实现被测物质分子与分离剂的作用而实现物质的分离的技术，属于无溶剂柱层析。

硅胶柱层析的分离原理是利用硅胶柱包覆的分子间的物质相互作用，利用不同的溶剂扩散和极性交互作用的强弱，实现物质的分离。

而柱芯分离机构，其正要运用的就是溶剂扩散和极性交互作用的强弱。

传统的柱层析方法，需要将分离剂和溶剂混合，由于分离剂本身具有一定的稳定性，使得其混合可以实现一定程度的分离，但是由于它们可以混合质量的不同，因此很难实现较高的分离精度，而且在实际操作中，因为溶剂渗透的存在，会大大增加实验的复杂性，准确性也会存在一定的问题。

与传统柱层析相比，硅胶柱层析有着许多明显的优势，其中首先要提到的是它不仅能够实现廉价易得的分离，而且还能够达到较好的精细程度，其效率和精确度能够明显提升。

另外，由于它可以大大减少添加溶剂，因此不仅仅能够提高实验效率，而且能够有效的降低实验的复杂性。

最后，当涉及到某些有毒物质的分离时，由于这种技术具有无溶剂的特性，因此可以大大减少对环境的影响，有效的保护实验环境的安全性。

综上所述，硅胶柱层析是一种利用分子间相互作用实现分离的无溶剂化学分析技术，与传统柱层析相比，它具有明显的优势，如廉价易得、效率高、精细程度高、不添加溶剂、减少对环境的影响等。

在某些特殊情况下，传统柱层析方法容易受到溶剂渗透的影响，而硅胶柱层析则能够很好的避免这种情况，因此今后由于硅胶柱层析的广泛应用，将会使得化学分析技术发挥更大的作用。

硅胶柱层析一、硅胶柱层析原理根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

二、硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸三、硅胶柱层析惯用方法1.称量200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。

干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。

2.搅成匀浆加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。

如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。

如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。

氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。

如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

3.装柱将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。

随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。

4.压实沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。

柱床约被压缩至9/10体积。

无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样干法湿法都可以。

海沙是没必要的。

上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。

然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

6.过柱和收集柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。

太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。

收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。

7.检测要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。

柱层层析硅胶、薄层色谱硅胶【结构式】mSiO2·nH2O 【物化性质】为白色状颗粒。

不溶于水和其他有机溶剂，在空气中能吸潮。

因具有对不同物质吸附保留时光上的差异，能使各种物质达到分别提纯的目的。

【质量标准】化工行业标准HG/T 2354-2010 【用途】用于石油产品精制脱除芳烃类物质及其他有机气体、液体的挑选性吸附分别；用作化学工业中的催化剂载体、色谱用载体；还可用于中草药中有效成分的分别、提纯及高纯物质的制备。

也是医药、农药、染料、橡胶等柱层分析中一种简易、迅速、敏捷的分析试剂。

【制法】浸渍法：将粗孔硅胶粉碎至40～200目后，筛选，用盐酸浸渍20h，用水洗涤后，举行烘干至含水量≤5％，制得柱层层析硅胶。

【平安性】无危急性。

用聚乙烯塑料瓶包装，每瓶净重250g。

贮运参见硅酸。

2.薄层色谱硅胶【英文名】silica gel, thin layer chromatographic 【结构式】mSiO2·nH2O 【物化性质】为白色、高纯并具有规定的孔容、比表面积和孔隙分布及一定粒度分布的试剂硅胶。

有H型、HF254型、G型、GH254型。

H型不含石膏和有机黏合剂，能汲取空气中的水分，溶于和热浓碱溶液，不溶于水或其他无机酸。

HF254型含有无机荧光粉，在紫外线波长254nm处显黄绿色荧光，易汲取空气中的水分。

G型含有13％石膏作黏合剂，略呈酸性，易汲取空气中的水分。

GH254型含有半水石膏和无机荧光粉，在紫外线波长254nm 处显示黄绿色荧光。

【质量标准】化工行业标准HG/T 2354-2010 要求：①外观为白色匀称粉末；②薄层色谱硅胶应符合表1要求；③柱层层析硅胶应符合表2要求。

表1薄层色谱硅胶要求注：1．活度指标中的“三色”指二甲基黄、苏丹红、靛酚蓝。

2.字母G表示硅胶中含有作黏合剂用的石膏，字母H表示不含有其他有机黏合剂，F254表示含有荧光指示剂，在用254nm波长的紫外光照耀时能显出荧光。

硅胶柱层析原理硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析惯用方法1.称量。

200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。

干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。

2.搅成匀浆。

加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。

如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。

如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。

氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。

如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

3.装柱。

将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。

随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。

4.压实。

沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。

柱床约被压缩至9/10体积。

无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样。

干法湿法都可以。

海沙是没必要的。

上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。

然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

6.过柱和收集。

柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。

太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。

收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml 收一馏分。

层析硅胶目
层析硅胶是用于柱层析的一种介质，通常有不同的粒度分布。

在柱层析中，硅胶的粒度对分离效果有重要影响。

以下是一些关于层析硅胶的基本信息：
1. 粒度分类：对于中低压柱层析，常用的硅胶粒度≤400目（即直径约≤38微米），而400-3000目的硅胶适用于高压柱层析。

2. 粒度合格率：粒度合格率会影响填料的分布均匀性，进而影响分离纯化过程。

合适的粒度分布可以使过柱和洗脱过程更加均匀，避免色带倾斜或过宽的现象发生。

3. 水分含量：层析硅胶的水分含量影响其极性，过高的水分含量会导致硅胶失去分离效果。

因此，根据实际需求对层析硅胶进行活化处理是必要的。

4. pH值：层析硅胶的pH值也是一个重要的参数，它会影响硅胶的表面性质和分离效果。

5. 应用领域：层析硅胶广泛应用于医药、化工、植物提取、生化等行业，用于分离和提纯混合物中的不同成分。

6. 选择依据：在选择层析硅胶时，除了考虑粒度，还需要考虑Rf值（迁移率）和所需的硅胶用量。

例如，在匀浆法中，通常会选择200—300目的硅胶，并根据上样量称取相应倍数的硅胶。

综上所述，层析硅胶的选择应根据具体的柱层析需求来确定，包括柱的压力范围、所需分离的物质特性以及分离纯化的目标。

正确选择层析硅胶的粒度和其他参数，对于实现有效分离至关重要。

吸附剂与洗脱剂（一）吸附剂与洗脱剂根据待分离组分的结构和性质选择合适的吸附剂和洗脱剂是分离成败的关键。

1．吸附剂的要求①对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应，在洗脱剂中也不会溶解。

②对待分离组分能够进行可逆的吸附，同时具有足够的吸附力，使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。

③颗粒形状均匀，大小适当，以保证洗脱剂能够以一定的流速（一般为1.5mL•min-1）通过色谱柱。

④材料易得，价格便宜而且是无色的，以便于观察。

2、常用吸附剂的种类：氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙（镁）、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。

3、几种常见吸附剂的特性（1）氧化铝：市售的层析用氧化铝有碱性、中性和酸性三种类型，粒度规格大多为100～150目。

碱性氧化铝（pH9—10）：适用于碱性物质（如胺、生物碱）和对酸敏感的样品（如缩醛、糖苷等），也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。

但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。

酯和内酯的水解、醇羟基的脱水、乙酰糖的去乙酰化、维生素A和K等的破坏等不良副反应。

所以，这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。

酸性氧化铝（pH3.5—4.5）：适用于酸性物质如有机酸、氨基酸等以及色素和醛类化合物的分离。

中性氧化铝（pH7—7.5）：适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离，也可以用来分离弱的有机酸和碱等。

（2）硅胶：硅胶是硅酸的部分脱水后的产物，其成分是SiO2•xH2O，又叫缩水硅酸。

柱色谱用硅胶一般不含粘合剂。

适用范围：非极性和极性化合物，适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、磷脂类、脂肪酸、氨基酸，以及一系列合成产品如有机金属化合物等。

（3）聚酰胺：色谱用聚酰胺主要又锦纶6（聚己内酰胺）和锦纶66（聚己二酰己二胺）两种，分子量一般在16000～20000，其亲水性和亲脂性均较好，因此既可分离水溶性成份，也可分离脂溶性成分。