液相色谱流动相的选择经验

简述高效液相色谱法中流动相的要求高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于分离、定量和分析化合物的分析技术。

其中流动相是HPLC中至关重要的组成部分，它对于保证分离效果和分析准确性起着重要的作用。

在使用HPLC进行分析时，流动相的要求有以下几个方面：1.纯度高：流动相的纯度是保证实验准确性的重要因素。

纯度高的流动相可以减少背景噪音和干扰，提高信号峰的清晰度和分辨率。

纯度要求也有助于减少一些物质的附着和积聚，保护HPLC设备的寿命。

2.溶解性好：流动相要有足够的溶解性，以溶解待分离样品中的化合物。

能够完全溶解的样品可以均匀地分布在流动相中，利于成分的迁移和分离。

如果溶解性不好，可能会导致分离效果不佳、峰形不对称和信号峰低。

3.无气泡：气泡在流动相中会造成流动相的剧烈波动，影响分离效果和信号峰的清晰度。

在流动相中可以通过采取适当措施来去除气泡，包括使用真空除泡器、在流动相中添加脱气剂或在流动相上施加超声波。

4.恒定性好：在HPLC分析过程中，流动相的流动速率和成分应该是恒定不变的，以确保分离的稳定性和重复性。

流速的变化可能会导致信号峰的宽度不一致和峰形变形，从而降低分离效果。

5.选择性好：流动相的选择性是指其与待分离样品之间的相互作用程度。

流动相选择性的好坏会直接影响分离效果和峰形。

根据样品的性质和需求，可以选择不同的流动相，如有机溶剂、水或缓冲盐溶液等。

6.可适应性广：流动相可以根据待分离样品的性质和需求进行选择和调整。

不同的样品可能需要不同的流动相组合和浓度梯度，以达到最佳的分离效果。

综上所述，高效液相色谱法中流动相的要求包括：纯度高、溶解性好、无气泡、恒定性好、选择性好和可适应性广。

这些要求的满足将有助于提高分析结果的准确性和可靠性，同时也可以保护HPLC设备的寿命。

液相色谱（Liquid Chromatography, LC）是一种常用的分离和分析方法，它使用液体作为流动相，在不同组分之间进行分配和分离。

在液相色谱分析中，流动相是至关重要的，它直接影响分离效果、分析速度和结果准确度。

合理选择液相色谱流动相并注意使用时的一些问题是非常重要的。

一、液相色谱流动相的选择依据1. 样品的性质液相色谱中流动相的选择应考虑样品的性质，包括溶解性、稳定性、挥发性等。

对于极性样品，常使用极性溶剂作为流动相；对于不容易溶解的非极性样品，可以选择非极性溶剂作为流动相。

2. 柱子的选择不同的柱子需要选择不同的流动相，以保证分离效果。

对于反相色谱柱，一般使用的是乙腈或甲醇和水的混合物作为流动相；对于正相色谱柱，则需要选用不同的极性溶剂作为流动相。

3. 分离效果流动相的选择应考虑到所需的分离效果。

对于需要高分离效果的分析，流动相的组成和流速需要进行精细调控；对于一些不需要高分离效果的分析，可以适当简化流动相的组成，提高分析效率。

4. 色谱柱的保护对于某些对色谱柱有损害的物质，可以考虑在流动相中添加一些保护剂，以延长柱子的使用寿命。

二、使用注意事项1. 流动相的配制在使用液相色谱分析时，需要注意流动相的配制。

流动相的配制应准确、稳定，避免在实验中因流动相的质量问题导致结果失真。

2. 流速的控制流速的控制对于分析结果的准确性和重现性有着重要影响。

在选择流速时，需要根据分离效果的要求以及柱子的性能来进行合理的设定。

3. 流动相的贮存流动相在储存和使用过程中需要注意避免受到污染和氧化。

定期更换和清洗流动相的储存容器，保持流动相的纯净度和稳定性。

4. 流动相的回收在实验结束后，应注意对流动相进行回收和处理，避免对环境造成污染。

总结回顾：液相色谱分析中流动相的选择和使用是至关重要的。

合理选择流动相，可以提高分析的准确性和重现性；注意使用时的一些问题，可以延长柱子的使用寿命并保护环境。

需要根据样品的性质、柱子的选择以及分离效果来综合考虑流动相的配制和使用。

高效液相色谱流动相高效液相色谱的流动相(Mobile Phase)液相色谱流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。

与气相色谱相比较，液相色谱流动相不仅可选择范围比较大，而且它是影响分离的一个非常重要的可调节因素。

在实际工作中，流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。

一、流动相溶剂的选择高效液相色谱中所选用的流动相溶剂必须能保证该色谱系统的分离过程可重复进行:溶剂的纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求;溶剂应当不干扰检测器的工作;在制备分离中, 溶剂应当易于除去, 不干扰对分离组分的回收。

从实用角度考虑，溶剂应当价格低廉，容易购得，使用安全，纯度要高。

对液相色谱溶剂的要求: 1)溶剂要有一定的化学稳定性, 不与固定相和样品组分起反应。

2)溶剂应与检测器匹配，不影响检测器正常工作。

3)溶剂对样品要有足够的溶解能力，以提高检测灵敏度。

4) 溶剂的粘度要小，保证合适的柱压降。

5) 溶剂的沸点低，有利于制备色谱的样品回收。

液相色谱流动相溶剂的选择步骤选择具有合适物理性质的溶剂，如沸点、粘度、紫外截止波长等选择合适洗脱强度的溶剂:简单样品，2 ? k'? 5;复杂样品，0.5 ? k'? 20 改变溶剂的选择性，使被分离组分具有较高的α值二、表征溶剂特性的重要参数 1)溶剂沸点、分子量、相对密度、介电常数、偶极距、折射指数、紫外吸收截止波长、与液相色谱分离密切相关的最重要的溶剂特性参数是溶剂强度参数?? ，溶解度参数?? ，极性参数P'和粘度η。

2) 溶剂洗脱强度溶剂洗脱强度指流动相中溶剂的洗脱能力。

在吸附色谱中, "溶剂洗脱强度"与溶剂极性成正比;而在反相色谱中，溶剂极性越大, 洗脱能力越小。

在液相色谱常用混合溶剂作流动相。

混合溶剂的P'具有加和性: P'ab= ??aP'a，?? bP'b , ??为某一溶剂的体积分数。

关于高效液相色谱仪流动相的选择如何呢高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于生命科学、化学、医药、环境等多个领域。

其中，流动相的选择对于色谱分离性能和分析结果的准确性有着重要的影响。

一、流动相的组成流动相是指用于在高效液相色谱仪中运载样品溶液，推动样品通过固定相柱的溶剂体系。

一般情况下，流动相由溶剂和缓冲剂组成。

溶剂用于将样品带入色谱柱，而缓冲剂则用于调整流动相的pH值。

在选择流动相的溶剂时，主要要考虑以下因素：1.溶剂极性：色谱柱的固定相特性和待分析的样品特性决定了所需的溶剂极性。

一般来说，溶剂可以选择非极性溶剂、极性溶剂或者两者的混合物，以适应不同的分析要求。

2.溶剂选择：常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等有机溶剂，以及水。

甲醇和乙腈是最常用的有机溶剂，由于它们的极性较低，因此溶解性广泛。

水是最常用的极性溶剂，可以提供更好的分离效果。

3.透过性：一些样品需要在其中一种溶剂中分离，因此选择适当的溶剂对于分析结果的准确性至关重要。

在选择缓冲剂时，需要考虑以下因素：1.pH值的调整：一些分析需要在特定的pH值下进行，需选择合适的缓冲剂，以维持所需的pH值。

2.缓冲能力：缓冲剂应具有良好的缓冲能力，以维持流动相的pH值的稳定性，避免pH值对分离效果的干扰。

3.溶解度：缓冲剂应具有较高的溶解度，以便在高浓度下使用，从而提供稳定的pH值。

二、常用的流动相系统1.等相流动相系统（Isocratic elution）：等相流动相系统是指流动相组成在整个分析过程中保持不变。

这种系统适用于分离度较差的样品，具有简单、稳定、易操作的特点。

2. 梯度流动相系统（Gradient elution）：梯度流动相系统是指在分析过程中，通过改变流动相组成来实现样品的分离。

这种系统适用于需要分离程度较高的样品，提供了更好的分离效果。

简述液相色谱中流动相的选择
液相色谱 (Liquid Chromatography, LC) 中的流动相，也叫做溶
剂或移动相，是指样品在色谱柱中流动的溶液。

液相色谱的分离效果受到流动相的选择和配比的影响，因此流动相的选择是液相色谱分离技术中十分重要的一环。

液相色谱中常用的流动相包括有机溶剂、水、酸、盐酸/氢氧
化钠、醋酸/乙酸盐以及缓冲液等。

不同类型的溶剂或混合溶
剂可以用来分离不同性质的化合物：
1. 极性化合物的分离一般采用水和一些极性有机溶剂（如甲醇、乙醇、乙腈等）的混合物作为流动相。

2. 非极性化合物的分离则需要使用非极性有机溶剂（如正己烷、甲苯、乙酸乙酯等）或者混合有机溶剂（如乙醚和正己烷的混合物）作为流动相。

3. 酸类化合物和有机酸类化合物的分离用含有少量酸的水溶液（如醋酸溶液等）作为流动相。

4. 离子性化合物的分离则需要使用缓冲液作为流动相。

如果需要可逆电渗析检测器，则流动相需要含有离子对。

需要注意的是，在选择流动相时，不仅要考虑其相容性、带电性、缓冲效应等因素，还要考虑其挥发性、毒性和成本等因素。

因此，流动相的选择应该根据需要的分离效果、性质、成本和实验条件等综合因素进行考虑和选择。

流动相的选择技巧
一、关于流动相的选择
1.1合适的流动相类型
(1)气体：气体液体混合体可用于多组份溶剂及中等温度、中等压力的重金属的测定。

(2)液体：液体可以用于溶解有机物、金属离子和微量的有机物，以及溶质有特殊极性的物质，液体还可以溶解重金属、有机污染物等物质。

(3)溶液：液相色谱常用溶液来作为流动相，其中常用的溶剂有水和甲醇等，也可以使用乙醚、氯仿等极性溶剂，也可以使用正己烷、乙腈等非极性溶剂。

(4)固体杂质：固体杂质是液相色谱的主要流动相，固体杂质可以形成可溶性的悬液，可以促进待测试样品的分离和层析。

(5)介质：介质可以用于空气、水、酸和碱以及金属溶液中的分析。

(6)表面活性剂：表面活性剂可以用于增强溶剂效果，并可以用于高精度的分析。

1.2合理的流动相组合
流动相的组合非常重要，在多组份溶剂中，各组分的浓度是否合理及其组合是否正确是影响液相色谱试验结果的关键。

有些溶剂可以共存，但其相容性可能不高。

液相色谱流动相的选择选择原则1 选择色谱醇的溶剂作为流动相不要随意加满溶剂瓶。

作为分析流动相，应避免不必要的浪费，防止污染环境，危害身体健康。

应该根据样哦数量，计算需要使用的溶剂体积，添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。

因为有些有机溶剂长期放置易变质，比如四氢呋喃在光照下就容易变质，甲醇或乙醇长期放置会生成酯类，乙腈水溶液会分解为醋酸与氨，在分析时导致基线抬高，对一些分析，特别是质谱分析造成影响。

2 配置某些酸或碱性流动相时要考虑色谱柱的使用pH范围有些酸并不适宜作为流动相，如盐酸、长期使用可能损坏泵及相关的钢制管线。

注意选择合适的截止波长的溶剂作为流动相。

紫外分析时，样品的检测波长至少应大于所用溶剂的截止波长20nm上。

3 配置的盐溶液一定用滤膜过滤常规液相用0.45µm滤膜过滤，高效液相色谱使用0.2µm滤膜过滤。

水或缓冲盐溶液好置于棕色瓶中，以防长菌，阻塞溶剂过滤器，降低泵的操作性能。

质谱分析不能使用不挥发性盐作为流动相。

使用挥发性盐作为流动相时，在保证分析的条件下，流动相中的盐尽量保持低浓度。

流动相的要求利用高效液相色谱法测定物质的含量时，流动相的选择至关重要。

对于流动相的要求一般有以下几点：1.作为流动相的溶剂，黏度要小。

2.与固定相不发生化学反应，不互溶。

3.对待测样品有适当的溶解度。

4.应与检测器匹配。

当然了，流动相的选择主要还是看具体的实验，但可以根据溶剂极性来选择。

常见溶剂极性大小为：水＞甲酰胺＞乙腈＞甲醇＞乙醇＞丙醇＞丙酮＞二氧六环＞四氢呋喃＞甲乙醇＞正丁醇＞乙酸乙酯＞乙醚＞异丙醇＞二氯甲烷＞氯仿＞溴乙烷＞苯＞氯丙烷＞甲苯＞四氯化碳＞二硫化碳＞环己烷＞己烷＞庚烷流动相的纯度对最后的测定结果有很大的影响，所以在检测中中一定要按照实验要求选择合适纯度的试剂进行配制。

液相色谱流动相梯度设置液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是分离和分析化合物的一种重要技术手段。

在液相色谱中，流动相梯度的设置对色谱分离的效果有着至关重要的影响。

本文将围绕液相色谱流动相梯度的设置展开讨论，从梯度方案的选择、梯度的优化和常见问题的解决等方面进行详细的阐述。

1.梯度方案的选择在液相色谱中，流动相的梯度可以分为线性梯度、等温梯度和非线性梯度等多种类型。

而选择合适的梯度方案是进行液相色谱分离的第一步。

在实际操作中，我们需要考虑到待分离物质的极性、样品的溶解度、色谱柱的选择等因素。

在这些因素的基础上，我们可以根据实验要求和样品特性来选择合适的梯度方案。

线性梯度是最为简单的一种梯度方案，它的斜率保持不变。

对于一些极性物质，线性梯度可以提供较好的分离效果。

而对于一些非极性物质，线性梯度可能会导致分离效果不佳。

在这种情况下，我们可以选择非线性梯度或者等温梯度来进行分离。

非线性梯度的斜率是不断改变的，可以根据分离的需要进行调整，因此适用于一些复杂的分离实验。

等温梯度则是将流动相的组成保持不变，通过改变色谱柱的温度来达到分离的目的。

这种方法对于极性物质和温度敏感的物质有着较好的适用性。

2.梯度的优化梯度方案选择好之后，还需要对梯度进行优化，以提高分离的效果和分析的准确性。

对梯度进行优化的关键在于找到合适的梯度时间和梯度斜率。

在优化梯度时，我们需要考虑以下几个方面：（1）梯度时间的选择：梯度时间的选择是液相色谱分离中至关重要的一环。

梯度时间过短会导致分离不完全，而梯度时间过长则会增加分析时间，影响实验效率。

因此，我们需要通过实验和数据分析来确定最佳的梯度时间。

（2）梯度斜率的调整：梯度斜率的选择直接影响着分离的速度和分辨率。

在进行梯度斜率的调整时，我们需要综合考虑样品的性质、色谱柱的特性以及流动相的选择。

通过不断地调整梯度斜率，找到最佳的分离条件。

（3）流动相组成的调节：在液相色谱分离中，流动相的组成对分离效果有着重要的影响。

标题：探讨hilic液相色谱流动相选择的一般原则在液相色谱技术中，hilic（Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography）作为一种重要的分离方法，它与传统的反相色谱有着不同的原理和应用。

hilic液相色谱主要是利用水溶液在与填料相互作用时的特殊性质，实现对极性化合物的有效分离。

在进行hilic液相色谱分析时，流动相的选择对分离效果起着至关重要的作用。

本文将探讨hilic液相色谱流动相选择的一般原则，以帮助读者更深入地理解和运用该技术。

1. 确定分析物的性质hilic液相色谱适用于极性化合物的分离，因此在选择流动相时，首先需要明确分析物的极性特征。

对于较强极性的化合物，通常选择较低极性的有机溶剂作为流动相，如甲醇、乙腈等；而对于相对较弱极性的化合物，则可选用含水的有机溶剂或水溶液作为流动相。

2. 考虑填料的亲水性填料的亲水性也是影响流动相选择的重要因素之一。

一般来说，如果填料具有较高的亲水性，建议选择含水的有机溶剂作为流动相，以保持填料的活性。

相反，如果填料的亲水性较低，则可选择含少量水的有机溶剂进行分离。

3. 优化流动相的成分在hilic液相色谱分析中，通常需要对流动相的成分进行优化，以获得最佳的分离效果。

可以适当调整有机溶剂和水的比例，或者添加缓冲剂等物质，以改善分离的选择性和分辨率。

也需要注意流动相的pH值对于某些离子化合物的分离效果的影响。

4. 考虑分离模式在实际应用中，hilic液相色谱可以采用正相模式、反相模式或离子交换模式进行分离。

因此在选择流动相时，需要根据具体的分离模式来确定最适合的流动相成分和条件。

还需要考虑填料的类型和性质对流动相的选择的影响。

总结回顾hilic液相色谱作为一种重要的分离技术，在分析极性化合物时具有独特的优势。

流动相的选择是影响分离效果的重要因素，需要根据分析物的性质、填料的亲水性、分离模式等因素来进行综合考虑和优化。

液相色谱流动相
液相色谱流动相的选择与配制是液相色谱分析的关键步骤。

液相色谱流动相的主要作用是帮助色谱柱中的组分分离，以实现有效的分离和分析。

流动相的选择和配制需要遵循一些基本原则。

首先，流动相应该具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。

常用的流动相包括水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液。

在流动相的配制过程中，需要注意以下几点：
1.流动相溶解度应达到要求，以保证进样对流动相的影响不会导致基线不稳；
2.流动相与样品不产生化学反应，以减少对色谱峰的影响；
3.流动相的黏度要尽量小，以获得好的分离效果并降低柱压降，延长泵的使
用寿命；
4.流动相的物化性质要与使用的检测器相适应，如使用UV检测器，最好使用
对紫外吸收较低的溶剂配制；
5.流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行；
6.在流动相配制好后，一定要进行脱气处理。

同时，针对不同的分离要求和样品特点，液相色谱流动相的选择和配制方法会有所不同。

例如，对于一些难以分离的复杂样品，可能需要采用特殊的流动相或添加助剂来提高分离效果。

总之，液相色谱流动相的选择和配制需要根据具体的实验条件和要求进行优化和调整。

液相色谱流动相基础知识-扫盲篇一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。

选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在SPME填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。

因此，k值是流动相组成的函数。

塔板数N一般与流动相的粘度成反比。

所以选择流动相时应考虑以下几个方面：①流动相应不改变填料的任何性质。

低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料会计考试有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。

碱性流动相不能用于硅胶柱系统。

酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。

②纯度。

色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。

③必须与检测器匹配。

使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收，或吸收很小。

当使用示差折光检测器时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相溶剂瓶，以提高灵敏度。

④粘度要低（应<2cp）。

高粘度溶剂溶剂瓶会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压降增加，使分离时间延长。

最好选择沸点在100℃以下的流动相。

二、液相色谱流动相的pH值采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。

对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸会计考试的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。

分析弱酸经济师样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。

注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互网上培训作用，减轻或消除峰拖尾现象。

流动相选择方法流动相选择方法1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。

2：三倍规则：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。

这是一个聪明而又省力的办法。

调整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。

3：粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂10%的改变量调整为5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变。

液相色谱分析条件选择的基本原则在液相色谱分析过程中，我们经常遇到的问题主要有二种，一种与液相色谱仪器本身因素有关，如液相色谱的阀门、混合器、检测器的光源以及其它的一些硬件设备。

出现这类问题后，如果能找出问题根源，解决起来一般很简单，而且这类问题可以通过对仪器的精心维护来避免；而另一类问题则是分析方法本身造成的问题，如出现色谱峰形状不好、峰与峰之间不能分开、基线飘移等等。

不幸的是，如果出现这类问题，看起来似乎很明显，但是要找出原因并解决这类问题却非常困难。

为了减少出现这一类型的问题，就必须在分析之前，仔细研究并选择一个好的分析方法，有了一个好的分析方法，就很容易获得理想的分离效果，而且在出现问题是也很便于找出原因。

要选择一个好的分析方法，就必须对液相色谱分析的一些基本原则要有一个很深的了解。

下面是我们实验室对色谱分析人员进行技能培训的一些基本知识。

一：分析方法选择的基本原则假如你想做一顿丰盛的晚餐，首先必须看一下食谱，然后检查一下你所需的东西是否齐全，如果少了配料还必须去商店购买，这样你才可能做出一顿可口的晚餐。

同样进行液相色谱分析时，也必须按照一定的程序进行，首先你必须要有专门的仪器和试剂，然后有目的地选择分析方法，这样你才可能得到好的分析结果，避免走一些弯路。

二：柱子的选择在液相色谱分析方法中最重要的就是色谱柱的选择，色谱分析人员面对几百种色谱柱，你从何入手呢？我采取的方法就是订阅LCGC亚太版中Ron Majors 的“色谱柱观察”这一专栏，自１９８４年第一期以来，Ron Majors 在这一专栏中介绍许多新柱子、色谱柱新技术、色谱柱使用方法等方面的信息。

关于高效液相色谱仪流动相的选择如何呢高效液相色谱仪（High-Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种将混合物分离成单一组分的有效工具。

为了实现这种分离，高效液相色谱需要两种相：固定相和流动相。

其中，流动相是高效液相色谱仪中至关重要的组成部分之一，因为它决定着分离效果和分离时间。

因此，选择正确的流动相对于分离的精度和效率来说非常重要。

流动相简介流动相是指在柱床中连续流动的溶液。

在高效液相色谱中，流动相主要由溶剂和缓冲液组成。

溶剂是用于将样品分离的液体，在高效液相色谱仪中通常采用多种溶剂的混合物，称为流动相溶剂或者移动相溶剂。

缓冲液是在溶剂中加入的一种化学物质来调节流动相的pH值，缓冲液的作用是保持样品成分的稳定性和防止封堵柱床。

流动相的选择取决于样品的特性、分离要求和分析环境的条件。

因此，选择合适的流动相是高效液相色谱仪分离分析的关键因素之一。

流动相的分类根据溶剂的极性，流动相可分为两种类型：有机相和水相。

具体分类如下：有机相有机相通常由疏水性的有机溶剂组成，这些有机溶剂的极性比水低。

主要有以下三类：•极性较小的有机溶剂：含有醚、酮或者类似于苯、四氢呋喃等非极性有机溶剂的混合物。

•极性中等的有机溶剂：含有乙腈、甲醇、乙醇等极性有机溶剂的混合物。

•极性较大的有机溶剂：如乙二醇、N-甲基吡咯烷酮等。

水相水相是由水和缓冲液组成的混合物。

水是极性溶剂，本身具有良好的溶解性和稳定性。

缓冲液是在水中加入的一种化学物质来调节流动相的pH值。

流动相的选择原则在选择流动相时，需要考虑分析的目标和样品的特性。

下面列举几种常见的流动相选择原则：根据分析目标选择流动相首先，需要根据分析目标选择流动相。

如果需要分离极性物质，则应选择相对极性较强的水相，如果需要分离非极性物质，则应选择相对极性较弱的有机相。

如果需要同时分离多种溶质，则可以选择相组合。

根据样品的特性选择流动相如果样品是非极性的，则应选择相对极性较弱的有机相，例如乙酸乙酯-甲醇体系。

HPLC方法开发——流动相的选择高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于各个领域的分析和质量控制。

在HPLC方法开发中，流动相的选择是非常重要的一步，它直接关系到分析物的分离和检测的灵敏度。

在选择流动相时，需要考虑以下几个因素：1.溶解性：流动相应具有较好的溶解性，以溶解待测样品，保证样品能够均匀地进入和流出色谱柱，并使分离柱表面保持通透性。

2.酸碱性：流动相的pH值对于分离和保护色谱柱都有一定的影响。

如果待测物具有弱酸或弱碱性，应选择酸性或碱性流动相，以提供足够的离子态物质，促进待测物与色谱柱的相互作用。

3.性能物质：流动相中的性能物质可分为有机和无机两类。

有机性能物质通常用作有机试剂，如甲醇、乙酸乙酯等。

无机性能物质通常用作缓冲剂，如磷酸二氢钠、草酸钠等。

4.流动相比例：流动相比例指的是有机相和水相的比例。

比例的选择应该根据待测样品的特性、分析目的以及色谱柱的类型和性能来确定。

一般来说，比例的选择应该尽量保证样品在色谱柱中保持均匀分布。

5.流速：流动相的流速直接影响色谱柱的分离效果和分析时间。

一般来说，流速越快，分离效果可能越差，但分析时间会缩短。

因此，在流速选择时需要在分离效果和分析时间之间做一个权衡，使得两者达到一个较好的平衡。

在选择流动相时，还需要考虑其他可能的影响因素，如温度、压力等。

温度对于很多分析物的分离效果有重要影响，通常来说，提高温度可以加快分离速度，但也可能导致一些物质不稳定。

压力对于色谱柱的分离效果和寿命有一定影响，高压可以提高分离速度，但也可能损坏色谱柱。

综上所述，流动相的选择在HPLC方法开发中是非常重要的一步。

通过合理选择溶剂、酸碱性、性能物质、比例和流速，可以得到一个合适的流动相组合，以获得较好的分离效果和检测灵敏度。

在选择过程中还需要考虑其他可能的影响因素，以确保色谱分析的准确性和可靠性。

题目：HPLC流动相的选择来源：中国化学化工论坛主要内容：主要讲了在进行HPLC时，对流动相的选择及各流动相对样品处理的要求。

液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。

正相柱以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。

另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。

一、反相色谱柱的选择1．柱子的pH值使用范围反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。

但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的pH范围。

一般的C18柱pH值范围都在2-8，流动相的pH值小于2时，会导致键合相的水解；当pH值大于7时硅胶易溶解；经常使用缓冲液固定相要降解。

一旦发生上述情况，色谱柱入口处会塌陷。

同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。

如果流动相pH较高或经常使用缓冲液时，建议选择pH范围大的柱子，例如戴安公司的Acclaim柱pH 2-9或Zorbax的pH 2-11. 5的柱子。

2．填料的端基封尾（或称封口）把填料的残余硅羟基采用封口技术进行端基封尾，可改善对极性化合物的吸附或拖尾；含碳量增高了，有利于不易保留化合物的分离；填料稳定性好了，组分的保留时间重现性就好。

如果待分析的样品属酸性或碱性的化合物，最好选用填料经端基封尾的色谱柱。

3．戴安公司Acclaim柱子介绍—极性封尾C16固定相柱戴安公司有28种类型的柱子，Acclaim反相柱填料高纯，金属含量极低，完全封尾。

PH 2-9范围内兼容，低流失，高柱效。

尤其是2003年推出的Acclaim 极性封尾C16柱，是最先商品化的磺酰氨-O链接键的色谱柱，具极低的硅羟基活性，能在极性溶剂甚至100%水的条件下长期使用。

对酸性和碱性化合物有极为尖锐的好的色谱峰形，与现有的一流色谱柱相比有好的立体选择性。

二、液相色谱柱的使用色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。

液相色谱仪流动相的选择与优化液相色谱操作规程液相色谱是目前应用多的色谱分析方法，液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器构成，其整体构成仿佛于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。

液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。

它是影响分别的一个特别紧要因素。

在实际工作中，流动相的选择和优化是确定色谱分析的紧要工作。

选择方法1、由强到弱：一般先用90%的乙腈（或甲醇）/水（或缓冲溶液）进行试验，这样可以很快地得到分别结果，然后依据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。

2、三倍规定：每削减10%的有机溶剂（甲醇或乙腈）的量，保留因子约加添3倍，此为三倍规定。

这是一个聪慧而又省力的方法。

调整的过程中，注意察看各个峰的分别情况。

3、粗调转微调：当分别达到确定程度，应将有机溶剂10%的更改量调整为5%，并据此规定渐渐降低调整率，直至各组分的分别情况不再更改。

脱气方法1、吹氦脱气法利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性，在0.1MPa压力下，以约60mL/min流速通入流动相储液容器中10～15min，可以很有效地从流动相中排出溶解的空气，能排出接近80%的氧气。

接受一个分布式喷射流装置，一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排出。

这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。

这种脱气方法虽然好，但氦气价格较高，很少使用。

2、加热回流法此法的脱气效果较好。

在操作时要注意冷凝塔的冷却效率，否则溶剂会丢失，混合流动相的比例会有变化。

3、抽真空脱气法此法可使用真空泵，降压至0.05～0.07MPa，即可除去溶解的气体。

但是由于真空脱气会使混合溶剂构成发生变化，从而影响到试验的重现性，因此多用于单溶剂体系的简单分析。

4、超声波脱气法将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中，用超声波震荡10～20min。

此法的脱气效果差。

5、在线脱气法HPLC仪器均可配置专门的在线脱气机。